3种药物诱导肝小静脉闭塞病小鼠模型的比较

肝小静脉闭塞病(hepatic veno-occlusive disease,HVOD)发病机制尚不明确,HVOD模型建立对研究疾病的发生机制极其重要.DeLeve等[1]用野百合碱给小鼠灌胃(160 mg/kg),建立急性静脉闭塞性疾病(VOD)模型,一定程度上避免了野百合碱肺毒性所产生的偏倚[2-3].高新生等[4]利用土三七生物碱成分予小鼠隔日灌胃,成功建立慢性VOD模型,但未对模型进行病理学评分.目前鲜见用土三七进一步改善造模方法的报道,本实验通过多种药物诱导HVOD发生,比较各种模型的优缺点,为HVOD研究提供稳定、可靠的动物模型.     

土三七水煎剂所致肝小静脉闭塞病大鼠模型的建立

目的通过观察不同浓度土三七水煎剂所致的大鼠肝脏病理学变化,建立一种模拟临床患者服药所致肝小静脉闭塞病（HVOD）的动物模型。方法土三七2100g水煎制成浓度为1．5g/ml土三七生药煎剂,SD大鼠76只随机分为A、B、C、D四组,A、B、C组每组20只,分别以土三七水煎剂高（15g·kg^-1·d^-1）、中（7．5g·kg^-1·d^-1）、低（3．75g·kg^-1·d^-1）浓度灌胃,D组16只以温开水灌胃作为对照,各组大鼠雌、雄各半。每日测量大鼠体重并记录异常表现,灌胃1周和2周后各组大鼠分别处死各半,肝脏标本行病理检查,HE及Masson染色,光镜下参照Deleve评分标准判定病变及严重程度。结果土三七高、中、低浓度组分别有83．3％（15／18）、75．0％（15／20）、40．0％（5／20）出现了肝小静脉闭塞病病理表现;相同剂量下雌性较雄性更易发病,雌、雄鼠造模成功率分别为79．3％（23／29）和41．3％（12／29）（P=0．003）。结论土三七水煎剂灌胃可以成功建立HVOD大鼠模型,剂量和大鼠性别与造模成功率直接相关。     

土三七所致肝小静脉闭塞病102例临床分析

目的总结分析土三七所致肝小静脉闭塞病（HVOD）的临床特点,提高对本病的认识。方法对1980年1月至2009年12月国内报道的土三七所致HVOD病例102例进行综合分析,并对国内外相关文献进行复习。结果患者土三七使用量150～5000 g（中位数500 g）,服药时间4 d～1年（中位时间30 d）,临床主要表现为腹胀（99.0%）、腹痛（69.6%）、肝大（93.5%）、腹水（97.7%）、黄疸（63.5%）,有不同程度的肝功能受损。B超检查见肝静脉显示不清,肝段下腔静脉外形变细,但无明显栓塞物,彩色多普勒提示门脉血流减慢或逆向,增强CT示肝脏呈＂地图状＂强化不均匀。病理学表现为肝窦淤血、扩张,流出道受阻,肝细胞不同程度变性、坏死,小叶中央静脉内皮水肿或纤维增生。经内科治疗好转69.7%（62/89）,未愈或死亡30.3%（27/89）,另13例转归不详。使用抗凝或活血化瘀者有效率为81.0%,较未用者（47.8%）,疗效差异有统计学意义（P=0.002）。结论土三七是导致HVOD的一个重要原因,影像和病理检查具有特征性,早期诊断及使用抗凝、活血治疗对改善预后有一定作用。     

菊叶三七致肝小静脉闭塞病4例

一、临床资料例1,女,68岁,农民,因上腹胀痛、恶心呕吐8 d于2005年7月13日入院。3个月前因股骨颈骨折服土三七治疗2个月(总剂量5000g以上,煎服2次/d)。入院查体:巩膜微黄,无蜘蛛痣,颈静脉无怒张,心无杂音,腹稍隆,无浅表静脉曲张,无压痛,肝脾触诊不满意,腹水征阳性,下肢轻微凹陷性浮肿。腹水常规:黄清色,李凡他试验阴性,白细胞0.04×109/L,红细胞( );腹水生化:蛋白21.3g/L,乳酸     

土三七致肝小静脉闭塞病1例

1 病例 患者,女,46岁,于2004年12月31日因腹胀1月余入院.患者自40 d前无明显诱因开始逐渐出现腹胀,伴食欲不振,起初未予处理;2周后自觉腹胀加重,伴活动后气短,无明显心慌,胸闷,到当地医院就诊,给予输液治疗(具体不详),症状无明显好转,并出现小便明显减少,色深黄,服用利尿剂后有所好转.于当年12月24日行磁共振检查,提示肝脏肿大伴少量腹水,门静脉周围肿胀,考虑淋巴回流受阻.给予利尿等治疗后,症状缓解不明显,于12月31日转入该院.     

中草药致肝小静脉闭塞病11例临床分析

目的评估各种常规临床检测方法对中草药所致肝小静脉闭塞病（HVOD）的诊断价值,并探寻评价疾病转归及预后的方法。方法采用回顾性研究方法,分析我院近3年间服用中草药所致11例HVOD的临床表现、生化指标和影像学特点。结果所有患者均有明确用药史,7例患者服用土三七,2例患者服用雷公藤,2例患者服用不明中草药,CT对HVOD的诊断有重要意义,死亡4例患者均为重型患者。结论我国肝小静脉闭塞病的诊断应重视患者用药史,HVOD患者的疾病分型对病情评估有重要意义。     

土三七致肝小静脉闭塞病1例

<正>肝小静脉闭塞病(veno-occlusive disease of the liver,VOD)是指由某种原因导致肝小静脉闭塞后肝肿大、腹水等为主要临床表现的疾病[1]。其病理特征为肝小叶内直径300μm的中央静脉和小叶下静脉内皮损伤、内膜肿胀、增生增厚和结缔组织增生纤维化[2]。主要见于骨髓移植、肝移植、放化疗患者,而国内报道较少[3-6],主要见于误服中草药土三七。现将我们收治的1例服用土三七致VOD报道如下。     

肝小静脉闭塞病3例

<正> 肝小静脉闭塞病(hepatic veno-occlusive disease,HVOD)是由某种原因引起肝小叶中央静脉和肝小静脉支内皮肿胀、纤维化,导致管腔狭窄甚至闭塞而产生的肝内窦后性门静脉高压症。该病临床上较少见,本文对我院近期收治的3例HVOD作一报道。病例1:患者男,56岁,因"腹胀20余天"入院。20 d前患者无明显诱因出现腹胀、纳差,不伴腹痛、腹泻,无咳嗽、咳痰、胸痛,无午后潮热、盗汗、消瘦,无肝区疼痛。活动后稍     

肝小静脉闭塞病28例临床分析

目的:探讨肝小静脉闭塞病(HVOD)的临床特点与诊治经验。方法:回顾性分析28例HVOD患者的病因、临床表现、实验室检查、彩超、CT、病理特征,治疗及转归。结果:28例HVOD多由服用土三七引起(20例,占71.4%),临床表现以腹胀、黄疸、肝肿大、腹水为其主要特征,超声造影检查显示肝实质持续不规则低灌注,呈"荒芜"症;CT增强扫描表现为全肝弥漫性密度不均匀改变,静脉期表现为特征性的"地图状"、斑片状强化和低密度区,肝静脉显示不清或未显示;病理提示中央静脉周围肝窦高度扩张淤血,肝细胞变性、坏死,中央静脉周围轻度纤维化,未见明确炎症。28例患者治疗后好转15例(53.6%),其余均因病情加重自动出院或死亡。结论:对有中药"土三七"服用史或长期服用中药泡酒者,出现腹胀、腹水、黄疸,要高度怀疑HVOD,影像学检查有助于诊断,病理学检查是诊断的金标准。HVOD病死率较高,早期诊断和及时治疗尤为重要。     

土三七致肝小静脉闭塞病诊断及治疗体会

目的 探讨肝小静脉闭塞病(hepatic veno-occlusive disesse,HVOD)的诊断及治疗效果.方法 回顾性分析我院3例土三七致HVOD患者的临床和病理特征.结果 所有患者以腹胀、腹水和肝肿大为主要表现.2例患者的组织病理学表现为肝窦扩张、瘀血、肝索挤压、萎缩、肝细胞变性坏死.结论 土三七所致肝小静脉闭塞病临床表现无特殊性,肝穿是重要的诊断方法.     

游离脂肪酸诱导肝细胞脂肪变模型中锌指蛋白A20的表达及其作用机制

背景:肝内脂肪酸蓄积是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生的基础,炎症是促其发展的关键。锌指蛋白A20可通过抑制NF-κB信号通路而发挥抗炎功能,但其对NAFLD作用的研究未见。姜黄素具有明确的抗炎作用。目的:探讨游离脂肪酸(FFAs)诱导的肝细胞脂肪变模型中A20的表达及其对NAFLD的作用机制。方法:以不同浓度混合FFAs(油酸:软脂酸=2:1)诱导HepG2细胞脂肪变模型,MTS法测定细胞活力,行油红O染色鉴定,筛选出最佳造模浓度。蛋白质印迹法检测A20表达。以不同浓度姜黄素干预肝细胞脂肪变性模型,采用蛋白质印迹法检测A20表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量。结果:成功建立HepG2肝细胞脂肪变模型,选择0.25 mmol/L FFAs作为最佳造模浓度。随着FFAs浓度增高,A20表达在6 h呈增加趋势,而12 h、24 h时A20表达呈先减少后增加的趋势,0.5 mmol/L是分界点。与0.25 mmol/L FFAs组相比,20μmol/L姜黄素干预可显著抑制A20表达,细胞上清中TNF-α、IL-1β含量显著减少(P<0.05)。结论:锌指蛋白A20可能通过抑制NF-κB信号通路激活来抑制炎症的发生,从而发挥保护肝细胞的作用,为防治NAFLD提供了可能的有效作用靶点。     

β-防御素-2在小鼠噁唑酮结肠炎黏膜中的表达及其意义

背景：炎症性肠病（IBD）的病因和发病机制尚不完全清楚。最近研究发现其可能与天然免疫效应分子防御素异常有关。目的：探讨结肠炎黏膜中β-防御素-2的表达与促炎细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-β-表达的关系。方法：建立BALB／c小鼠噁唑酮结肠炎模型，并将其分为正常对照组和噁唑酮结肠炎组，行大体和组织学评分，免疫组化、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测结肠黏膜中β-防御素-2和促炎细胞因子TNF-α、IL-1β-蛋白及其mRNA的表达。结果：噁唑酮结肠炎组结肠黏膜可见明显的肉眼和组织学炎症，β-防御素-2的表达显著高于正常对照组，与结肠炎症程度呈正相关。β-防御素-2蛋白及其mRNA表达与TNF-α和IL-1β蛋白及其mRNA的表达呈正相关。结论：β-防御素-2的表达与促炎细胞因子表达密切相关，两者相加可能是结肠炎症反应放大、持续迁延的原因之一。     

Association of Tumor Necrosis Factor-alpha Polymorphisms and Risk of Coronary Artery Disease in Patients With Non-alcoholic Fatty Liver Disease

Background:

Cardiovascular events account for the main cause of death in patients with non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), and are largely influenced by genetic factors. Although multiple studies showed that tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) polymorphisms are risk factors in the progression of NAFLD, few papers on the association of the polymorphisms and the developing coronary artery disease (CAD) in NAFLD patients have been reported.

Objectives:

The present study was designed to evaluate the association of TNF-α polymorphisms at residues -238 and -308, with the risk of developing CAD in Chinese patients with NAFLD.

Patients and Methods:

The TNF-α polymorphisms at residues 238 and 308 were genotyped in B-type ultrasonography proven NAFLD patients with (n = 246), without (n = 247) CAD and healthy controls (n = 304), using polymerase chain reaction (PCR). Serum lipid profiles were determined using biochemical methods. Statistical analyses were performed using SPSS statistical software, version 20.0 for Mac.

Results:

We found a significant association between TNF-α-238 guanine to alanine (GA) polymorphism and carriers of variant allele A between NAFLD patients with and without CAD (P < 0.05). Carriers of the A allele of TNF-α-238 had higher serum triglycerides (TG) and low density lipoprotein (LDL) levels in NAFLD patients with CAD (P = 0.025 and 0.001, respectively) and a higher TG level in NAFLD patients without CAD (P = 0.017), than their non-carrier counterparts.

Conclusions:

In the Chinese Han population that we studied, NAFLD patients who carry the TNF-α-238 GA polymorphism have an increased risk of developing CAD. Mechanisms underlying this potentially important association require further investigation.     

英夫利昔单抗治疗炎症性肠病的研究进展

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）是一种促炎细胞因子,在炎症性肠病（IBD）的发病过程中起重要作用。英夫利昔,单抗（infliximab）是一种人-鼠嵌合型TNF-αIgGl单克隆抗体,与体内多种形式的TNF-α有较强结合能力。美国食品药品管理局（FDA）于1998年批准该制剂用于治疗传统药物治疗无效的中重度或合并瘘管的克罗恩病（CD）,试验显示其对难治性活动性溃疡性结肠炎（UC）亦有一定疗效。英夫利昔单抗的使用已积累了10年的经验,本文对其作用机制、疗效、安全性方面的研究进展作一综述。     

提高对“土三七”致肝小静脉闭塞病的认识

我国肝小静脉闭塞病（HVOD）的病因多见于长期或过量服用土三七。土三七内舍有吡咯烷生物碱成分,可造成肝窦和肝小静脉的内皮细胞损伤．导致肝小静脉阻塞。HVOD所致的血流阻力部位为肝内,引起窦后性门静脉高压。肝大、右上腹痛、腹水和黄疸是其主要临床表现。诊断依据：有长期服用或过量服用土三七史;有上述临床表现;血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、1-谷氨酰转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、胆红素（BiL）均增高;B超可见腹水、肝肿大、肝区呈“斑片状”低回声区,肝静脉显示不清或不显示;CT检查可见肝肿大、腹水,增强CT动脉期显示全肝密度不均匀,呈现“斑片状”或“地图状”改变。肝活检早期可见肝小静脉管腔狭窄,肝小静脉周围血管阻塞．肝细胞不同程度液化坏死．晚期可见纤维化。早期诊断和及时治疗有较好的预后。临床医师应提高对HVOD的认识．且要提醒人们不要滥用土三七。     

阿达木单抗对克罗恩病的疗效和安全性评估

背景：国外一系列随机对照试验（RCT）比较了阿达木单抗和安慰剂治疗成人中重度克罗恩病（CD）的疗效和安全性,但目前尚无统一结论。目的：对阿达木单抗治疗成人CD的疗效和安全性行荟萃分析。方法：联机检索PubMed、EMBASE和CochraneLbrary．纳入比较阿达木单抗与安慰剂治疗成人中重度CD的RCT和相关文献．应用RevMan4．2软件行荟萃分析。结果：共4篇文献纳入本荟萃分析。阿达木单抗对成人CD的诱导缓解率（OR=2．98,95％CI：1．78-4．99,P〈0．0001）和维持缓解率（0R=4．79,95％CI：2．96-7．73,P〈0．00001）均明显高于安慰剂组,差异有统计学意义;诱导治疗的整体不良反应发生率低于安慰剂组,差异有统计学意义（OR=0．60,95％CI：0．42～0．87,P=0．007）：维持治疗的整体不良反应发生率与安慰剂组相比无明显差异（OR=1．09,95％CI：0．72-1．65,P=0．68）,严重不良反应发生率低于安慰剂组。差异有统计学意义（OR=0．51,95％CI：0．33-0．80,P=0．003）。结论：阿达木单抗治疗成人CD有效且安全性较高．可作为英夫利昔单抗治疗无效或不耐受者的选择．但仍需进一步行大样本临床试验加以验证。     

内毒素刺激Kupffer细胞对肝星状细胞前胶原基因表达的影响

背景：肠源性内毒素血症对肝纤维化具有启动作用,肝星状细胞（HSC）活化是肝纤维化发生、发展的中心环节。目的：探讨内毒素刺激Kupffer细胞对HSC前胶原基因表达的影响及其可能机制。方法：改良链酶蛋白酶、胶原酶原位灌流和密度梯度离心分离大鼠肝脏Kupffer细胞和HSC。以RNA斑点杂交检测脂多糖（LPS）、Kupffer细胞、LPS与Kupffer细胞共培养和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对HSC前胶原mRNA表达的影响,放射免疫法检测LPS对Kupffer细胞和HSC产生TNF-α的影响,RNA印迹法检测LPS和TNF-α对Kupffer细胞和HSC转化生长因子-β（TGF-β）mRNA表达的影响结果：经低浓度（0.5、1、5μg/ml）LPS处理的Kupffer细胞培养上清可增加HSCⅠ、Ⅲ、Ⅳ型前胶原mRNA表达,经高浓度（10、15、20μg/ml）LPS处理的Kupffer细胞培养上清、单独LPS、未经处理的Kupffer细胞培养上清、单独TN-α均无此作用。Kupffer细胞培养上清中的TNF-α含量随LPS浓度梯度的增加而递增,HSC培养上清中的TNF-α含量则无明显变化。TNF-α不能增加HSC TGF-βmRNA表达,但能增加Kupffer细胞TGF-βmRNA表达;经LPS或TNF-α处理的Kupffer细胞培养上清能增加HSC TGF-βmRNA表达。结论：低浓度内毒素能上调HSC前胶原基因表达,该作用有赖于内毒素激活Kupffer细胞所产生的活性介质的参与。     

脂质体法转染人肿瘤坏死因子-α基因对裸鼠人肝癌移植瘤的抑制效应及其机制

背景：外源性肿瘤坏死因子（TNF）-α联合化疗药物对肿瘤的疗效较单独应用更佳,为肿瘤治疗提供了新的方向。目的：对裸鼠人肝癌移植瘤模型行脂质体介导的TNF-α基因瘤内转染,研究肝癌移植瘤的生长抑制情况及其机制。方法：经脂质体介导,以真核表达质粒pSVK3-TNF-α分别转染人肝癌细胞株SMMC-7721和裸鼠皮下SMMC-7721细胞移植瘤。测定SMMC-7721细胞的TNF-α浓度,甲基噻唑基四唑（MTT）法测定细胞杀伤率,流式细胞仪和原位末端标记（TUNEL）法检测细胞周期和凋亡情况。结果：TNF-α转基因治疗裸鼠人肝癌移植瘤结束第5d,移植瘤体积为（75.28±35.35）mm^3,显著低于对照组的（326.45±103.64）mm^3（P〈0.05）。TNF-α基因体外转染SMMC-7721细胞24、48、72h后,基因转染组每106个细胞的TNF-α表达量分别为（1680±187）pg、（1702±205）pg和（1650±164）pg,细胞杀伤率分别为（37.1±2.4）%、（79.4±4.3）%和（84.2±4.6）%。基因转染72h后,SMMC-7721细胞增殖指数为（30.5±3.2）%,显著低于对照组的（46.1±3.9）%（P〈0.05）;凋亡指数为（10.0±2.1）%,显著高于对照组的（2.7±0.4）%（P〈0.01）。结论：脂质体介导的TNF-α基因转染裸鼠人肝癌移植瘤可明显抑制肿瘤生长,其机制可能为影响肿瘤细胞生长周期以及诱导肿瘤细胞凋亡。     

调节性树突状细胞对白细胞介素-10缺陷小鼠结肠炎模型的治疗作用

背景：目前认为克罗恩病（CD）的主要病理机制是黏膜反应性T细胞过度增生和活化。调节性树突状细胞（DCreg）对CD4^＋T细胞增殖具有强烈抑制作用。目的：探讨DCreg对病理改变与人类CD类似的白细胞介素（IL）-10缺陷小鼠结肠炎模型的治疗作用。方法：以小鼠内皮型脾脏基质细胞诱导CD117阳性骨髓来源造血前体细胞分化为DCreg，通过观察其对CD4^＋T细胞增殖的抑制作用进行质控。予IL-10基因敲除小鼠腹腔注射DCreg2×10^6／只．每周采集血清测定IL-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平，第8周取肠组织行组织病理学检查和IL-6、TNF-α水平测定。结果：经DCreg治疗后，62．5％（5／8）的小鼠结肠黏膜腺体轻度增生，未见明显免疫细胞浸润，37．5％（3／8）肠道黏膜组织结构接近正常；对照组小鼠结肠黏膜腺体增生明显，伴免疫细胞浸润和成纤维细胞增生。治疗组小鼠血清和结肠黏膜组织培养上清IL-6和TNF-α水平较对照组显著降低。结论：DCreg过继回输对缓解IL-10缺陷小鼠结肠炎具有明显疗效。