乙型肝炎病毒X蛋白在肝细胞癌发生中的作用

乙型肝炎病毒是引起包括肝细胞癌在内的慢性肝脏疾病的重要致病因素,但HCC的发病机制仍不清楚.最近研究发现,乙型肝炎病毒x基因(HBx)是HBV复制和扩散所必需的基因,在乙肝慢性化和肝细胞癌的发生中具有重要作用.HBx基因是HBVDNA中最小的一个基因,全长465 bp,表达产物为17 kDa的X蛋白.X蛋白具有多种功能:可对多种病毒和细胞的启动子、增强子成分发挥反式激活作用;可与P53蛋白结合;可参与多条信号转导通路;具有抑制DNA切除修复的作用;参与细胞周期调控和细胞凋亡;具有蛋白激酶和蛋白酶抑制剂功能;可与胰岛素样生长因子Ⅱ相互作用.在乙肝慢性化和HCC的发生中,X蛋白参与了多条途径,本文将就X蛋白在肝细胞癌发生中的几种可能作用机制作一综述.     

肝细胞癌中乙型肝炎病毒变异

基因变异是生物适应生存环境和进化的重要手段。乙型肝炎病毒基因变异改变了其致病性及对组织的亲嗜性,导致持续感染,逃避疫苗诱导或自然产生免疫,产生抗药性等,给乙肝治疗带来了新的问题,乙型肝炎病毒是引起肝细胞癌的主要原因之一,肝细胞癌中的乙型肝炎病毒变异可能在该病的发病机理中起重要作用。     

乙型肝炎病毒X基因与肝癌p53突变蛋白的表达

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）对２３例肝癌和癌旁组织中ｐ５３突变蛋白进行检测，同时对其中ＨＢＶＸｍＲＮＡ进行原位杂交（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测。结果发现，９例肝癌及其癌旁组织中ｐ５３突变蛋白和ＨＢＶＸｍＲＮＡ均为阳性，１１例均为阴性，另３例仅ＨＢＶＸｍＲＮＡ阳性，χ２检验显示ｐ５３突变蛋白与ＨＢＶＸｍＲＮＡ之间有明显相关关系（Ｐ＝０．０００２７），提示ｐ５３基因突变与ＨＢＶＸ基因整合表达有关，ｐ５３基因突变可能是ＨＢＶ致肝癌作用机制之一。     

乙型肝炎病毒e抗原系统与肝细胞癌

HBsAg与HCC的关系有众多的报道,然而有关e抗原系统与HCC的关系报道较少。本文观察161例HCC与68例慢性肝病患者的血清e抗原系统的情况,并对此作一探讨。     

原发性肝细胞癌患者的乙型肝炎病毒基因分型研究

目的：研究原发性肝细胞癌（HCC）患者乙型肝炎病毒（HBV）基因型分布及其特点。方法：采用聚合酶链式反应结合TaqmanMGB探针技术对70例HCC患者和57例慢性乙型肝炎（CHB）患者进行HBV基因分型。结果：HCC患者中C基因型占74.29%,B型占24.29%%,BC型占5.71%,未发现A、D、E、F、G基因型。HCC患者中C型所占比例明显高于CHB患者（P〈0.05）,B型所占比例明显低于CHB患者（P〈0.05）。B基因型HCC患者的年龄、性别、血清e抗原阳性率、e抗体阳性率、e系统阴性（HBeAg-、HBeAb-）率及HBVDNA水平与C基因型比较差异均无显著性（P均〉0.05）。结论：C型为南京地区HCC的主要基因型。HCC患者的年龄、性别、e抗原表达状态以及HBVDNA复制水平与基因型之间均无明显相关性。     

肝细胞癌组织中乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒的检测

目的检测肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）组织中乙型病毒性肝炎（virus hepatitis type B）表面抗原（HB—sAg）和丙型病毒性肝炎（virus hepatitis type C）核心抗原（HCVAg）的表达。方法应用免疫组织化学法检测78例HCC及癌旁肝组织HBsAg和HCVAg的表达。同时比较患者的HBsAg和HCVAg血清学检测结果。结果HCC及癌旁肝组织中HBsAg和HCVAg阳性及HBsAg和HCVAg双重阳性表达率分别为9.1％、6．4％、2．6％和80．8％、44．9％、29．5％。HCC与癌旁肝组织HBsAg和HCVAg阳性及HBsAg和HCVAg双阳性表达率相互比较有非常显著性差异（P〈0．01）。合并肝硬化组和无肝硬HCC组中HCC与癌旁肝组织HBsAg和HCVAg阳性、HBsAg及HCVAg双阳性表达率相互比较也有非常显著性差异（P〈0．01）。HCC的HBsAg和HCVAg血清学检测的结果与手术标本HBsAg和HCVAg免疫组织化学检测的结果相吻合。结论HCC的发生与HBV和HCV的感染密切相关。     

重症肝炎,慢性乙型肝炎和肝细胞癌患者血清中HBeAg和HBV DNA的检测及分析

重症肝炎、慢性乙型肝炎和肝细胞癌患者血清中ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ的检测及分析张惠忠１唐漾波关键词肝细胞癌慢性乙型肝炎重症肝炎ＨＢｅＡｇＨＢＶＤＮＡ中图号Ｒ７３５．７以往认为，乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染的患者血清中存在ＨＢｅＡｇ是病毒活跃复制的指标，...     

乙型肝炎病毒感染与肝细胞癌发生的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）的可能致癌机理，方法：采用免疫组化和原位分子杂交方法，对慢性乙型肝炎，肝硬化，癌旁肝硬化，肝细胞癌和正常肝组织中的乙型肝炎表面抗原（HBsAg)，核心抗原（HBcAg),HBV,DNA和甲胎蛋白（AFP）水平进行检测。结果：HBsAg,HBcAg和HBV DNA的阳性率在慢性乙型肝炎组中分别为61．9％（13／21），42．9％（9／21），75．0％（12／16），在肝硬化组中分别为64．0％（16／25），36．0（9／25），83．3％（15／18），在癌旁肝硬化组中分别为72．7％（16／22），61．1％（11／18），85．7％（12／14），在肝细胞癌组中分别为45．2％（14／31），50．0％（14／28），64．3％（9／14），慢性乙型肝炎，肝硬化和癌旁肝硬化组中HBV DNA阳性信号较肝细胞癌多而,AFP主在癌旁肝硬化（33．3％，9／27）和肝细胞癌（43．6％，17／39）组中表达，而在慢性肝炎和肝硬化组中不表达，癌旁肝硬化与不伴肝癌的肝硬化有非常显著性差异（P＜0．01），结论：大多数肝细胞癌的发生与HBV感染所致的慢性乙型肝炎和肝硬化密切相关，癌旁肝硬化可能是癌前肝硬化在癌周的残留。     

乙型肝炎病毒X蛋白氨基端变异与肝癌发生的相关性分析

目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein, HBx)氨基端1～90位氨基酸(amino acid, AA)变异与肝细胞癌发生之间的关系.方法:采用PCR扩增产物直接测序的方法,对48例肝癌组织、159例肝癌和144例慢性肝炎患者血清中HBV X基因进行序列分析.通过病例-对照研究HBx变异与肝癌发生之间的关系.结果: 肝癌组织中HBx氨基端变异集中于1～49 AA区域,突变率为4.1%; 50～90 AA为保守区,突变率仅为0.46%. 血清检测结果显示,HBx氨基端突变在肝癌患者中的发生率显著高于肝炎患者(2.2% vs 1.8%,P<0.05); HBx第36位Ala/Thr/Pro→Ser的突变,在肝癌患者中的发生率为10.1%,显著高于肝炎患者中的2.1%[P<0.01,比数比(odds ratio,OR)=5.259, 95%可信区间为1.499～18.444)].A/T/P36S突变仅发生于C基因型病毒.结论:HBx 氨基端突变的累积可能与肝癌的发生有关.HBx A/T/P36S突变能增加C基因型HBV感染者发生肝癌的危险度.     

抗病毒治疗与病毒相关性肝细胞癌

随着医疗技术的进步,使肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的治疗得到较快发展,患者的总生存期和无瘤生存期明显延长,但复发率仍然较高。慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）和丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV）感染被认为与HCC发生、发展及复发的关系密切,可能参与第二次致癌过程。目前抗病毒治疗在HCC的治疗中已取得一些进展,本文就此作一综述。     

广西肝癌高发区原发性肝细胞癌 HBV X 基因的整合及影响因素分析

目的 了解广西肝癌高发区乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）X区基因在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）染色体中的整合及影响因素。方法 以30例与HBV相关的原发性肝细胞癌患者为研究对象。提取HCC组织及癌旁组织标本DNA作为模板,以HBV X基因上游序列和人类基因组Alu重复序列为引物,应用重复序列-多聚酶链反应（Alu-PCR）扩增整合的HBV X片段及两侧的人类基因组DNA片段。扩增产物进行测序,计算目的片段整合率并分析相关的影响因素。结果 18例HCC组织检测到HBV X基因的整合片段,整合率为60.00%（18/30）;26例癌旁组织检测到HBV X基因的整合片段,整合率为86.67%（26/30）。癌旁组织HBV病毒整合率高于HCC组织,差异有统计学意义（χ²=5.445,P=0.020）。不同性别、年龄、HBeAg、HBV DNA、ALT、AST的HCC癌组织及其癌旁组织HBV X基因整合率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 广西肝癌高发区癌旁组织比HCC组织HBV整合率高,说明HBV整合发生在感染早期。HBV X基因整合与HCC患者性别、年龄、HBeAg、HBV DNA、ALT、AST无明显关系。     

肝癌患者乙型肝炎病毒全基因组结构分析

目的 研究肝细胞癌患者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)全基因组的结构及特点。方法 PCR扩增并克隆乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性肝癌患者血清中HBV全基因组DNA,测序并进行基因结构分析。结果 获得不同肝癌患者来源的22株HBV全基因组DNA,均属于C或B基因型和adr或adw2血清型。与标准株相比,肝癌患者来源的HBV在表面抗原、核心抗原的B／T细胞表位、X蛋白的反式激活区及增强子Ⅱ、核心启动子区发生了一些有意义的共有变异。结论 HBV的基因型与基因变异可能与HBV相关性肝癌的发生发展有关。     

乙型肝炎病毒X蛋白与肝癌研究进展

X蛋白(HBx)被认为是乙型肝炎病毒(HBV)致原发性肝癌(HCC)的重要物质,具体机制不明,己成为研究的热点之一。近年来对HBx致肝癌机制的研究显示,HBx是一种多功能的病毒蛋白,有转录调控作用,对肝细胞内许多癌基因和/或抑癌基因的表达有直接或间接影响,可影响细胞的生存、增殖和凋亡,调节转录因子活性,促进细胞的侵袭和转移等,在肝癌形成中起重要作用。     

乙肝病毒X蛋白促进肝细胞癌侵袭转移相关分子的作用机制

乙肝病毒X蛋白(HBx)是乙型肝炎病毒编码的病毒蛋白,在介导肝细胞癌(HCC)转移中起重要作用.新近研究发现,HBx可通过介导肿瘤转移相关分子,如基质金属蛋白酶(MMP)、血管内皮生长因子(VEGF)及尿激酶纤溶酶原激活因子(uPA)等表达,进而活化转移相关信号传导通路,促进HCC转移.     

乙肝病毒X蛋白上调肝癌细胞缺氧诱导因子-1α的作用和机制研究

背景与目的：乙肝病毒X蛋白(hepatitis B v i r u s X protein,HBx)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在肝癌发生、发展过程中起重要作用。有研究显示,两者在肝癌组织中的表达呈正相关,但相关机制尚不明确。本研究拟进一步在细胞水平上探讨HBx对HIF-1α的调控作用及机制。方法：用Lipofectemine^TM 2000包裹HBx表达质粒转染到肝癌Huh7细胞。蛋白［质］印迹法(Western blot)检测Huh7细胞中HIF-1α和HIF-1β蛋白的表达;特异性试剂盒检测HIF-1α转录活性;实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)mRNA表达变化;免疫共沉淀法检测HIF-1α、HBx和希佩尔林道病肿瘤抑制蛋白(protein von Hippel-Lindau,pVHL)间的相互作用。结果：转染HBx质粒后,Huh7细胞中HIF-1α蛋白表达、转录活性及其靶基因VEGF和MDR1的mRNA表达水平明显上调(P<0.05),然而HBx对HIF-1α mRNA表达水平没有明显影响(P>0.05)。同时,HBx显著削弱pVHL介导的泛素化水解蛋白酶降解HIF-1α的活性。免疫共沉淀法检测进一步提示,HBx可直接结合pVHL,而对HIF-1α没有结合作用。结论：HBx可能通过直接结合pVHL,抑制其与HIF-1α的相互作用,从而增强HIF-1α蛋白的稳定性及转录活性。     

Nomograms for survival prediction in patients undergoing liver resection for hepatitis B virus related early stage hepatocellular carcinoma

BackgroundThe long-term outcomes of patients who underwent liver resection (LR) for early-stage hepatitis B virus (HBV)-related hepatocellular carcinomas (HCCs) are difficult to predict. This study aimed to develop two nomograms to predict postoperative disease-free survival (DFS) and overall survival (OS), respectively.MethodsData on a primary cohort of 1328 patients who underwent LR for HBV-related HCCs within Milan criteria at the Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital (EHBH) from 2000 to 2006 were used to develop the nomograms by the Cox regression analyses. An internal validation cohort of 442 patients operated from 2006 to 2011 at the EHBH and an external validation cohort of 474 patients operated from 2007 to 2009 at the Zhongshan Hospital were used for validation studies. Discrimination and calibration were measured using concordance index (C-index), calibration plots and Kaplan–Meier curves.ResultsThe independent predictors of DFS or OS which included tumour stage factors, biomarker and HBV–DNA level were respectively incorporated into the two nomograms. In the primary cohort, the C-indexes of the models in predicting DFS and OS were 0.76 (95% confidence interval: 0.75–0.78) and 0.79 (0.77–0.81), respectively. The calibration curves fitted well. Both nomograms accurately stratify patients into four distinct incremental prognostic subgroups. The C-indexes of the nomogram for OS prediction was significantly higher than those of the six conventional staging systems (0.65–0.71, all P < 0.001). These results were verified by the internal and external validations.ConclusionThe proposed nomograms showed good prognostication for patients with early HBV-related HCCs after hepatectomy.