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1.
蜗牛酶转化淫羊藿苷制备淫羊藿苷元的研究 总被引:1,自引:5,他引:1
目的:研究淫羊藿苷元(IT)的制备工艺。方法:采用蜗牛酶水解淫羊藿苷制备IT,以转化率为指标,通过单因素考察pH、温度、底物的浓度、酶用量、反应时间及金属离子对转化率的影响,正交试验优化制备工艺;采用MS,1H-NMR,13C-NMR鉴定水解产物。结果:酶解反应的最适条件为温度37℃、反应介质pH6.0醋酸-醋酸钠缓冲液,底物质量浓度为10 g.L-1,酶与底物比为1∶1,反应时间48 h,Na+,Ca2+,Mg2+和Zn2+对酶解反应无显著影响,Fe2+对酶解反应有抑制作用(P0.01);反应产物相对分子质量为368,核磁图谱证实产物为IT。结论:蜗牛酶水解淫羊藿苷制备IT反应条件温和,工艺简单可靠,适合工业化生产。 相似文献
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《中成药》2016,(9)
目的采用固定化蜗牛酶同时生物转化淫羊藿Epimedii Folium中4种黄酮苷,并对工艺进行优化。方法交联-包埋法制备固定化蜗牛酶,单因素试验优化生物转化工艺,HPLC法测定转化率,LC-MS/MS法鉴定转化产物。结果在最佳条件(p H值5,温度50℃,蜗牛酶与底物比例1∶1,底物质量浓度1.0 mg/m L,转化时间2 h)下,朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷可分别转化为箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ,以及宝藿苷Ⅰ和淫羊藿苷元(两者均为淫羊藿苷转化产物),平均转化率分别为73.69%、74.01%、73.46%、75.52%。结论该工艺稳定简单,重复性好,可用于淫羊藿中4种黄酮苷的高效转化。 相似文献
3.
目的制备交联纳米Si O2固定化蜗牛酶,并对其理化性质、酶解淫羊藿苷为宝藿苷I的最适酶解条件及酶学性能进行考察。方法采用共价偶联法将蜗牛酶固定在戊二醛交联纳米Si O2上,以相对酶活力为指标,对固定化条件进行优化;采用透射电镜(TEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)和元素分析法对固定化蜗牛酶的理化性质进行表征;并以淫羊藿苷为底物,以游离酶为对照,考察固定化蜗牛酶的最适酶解条件及酶解动力学参数、重复利用性、热稳定性等酶学性能。结果固定化蜗牛酶制备的最佳酶载比为1∶3,固定化时间为6 h;其转化淫羊藿苷的最适酶解条件为pH 5.0,转化温度60℃,酶与底物质量比1∶2,转化时间12 h。固定化蜗牛酶的酶解动力学参数最大反应速率(Vmax)为0.43μg/min,米氏常数(Km)为0.78 mmol/L,重复使用5次后的相对酶活仍能保持在70%以上。结论制备的交联纳米Si O2固定化蜗牛酶机械强度高、稳定性好,不但可重复使用,还可定向水解淫羊藿苷为活性更强的宝藿苷I,工艺简单易行,转化效率高,适宜于工业化生产。 相似文献
4.
该文旨在研究淫羊藿总黄酮在体外水解酶作用下的生物转化过程。主要采用蜗牛酶水解淫羊藿总黄酮,用HPLC测定总黄酮中主要黄酮的转化。数据结果显示已知主要黄酮成分淫羊藿苷,朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C都在1~2 h内分别完全转化为宝藿苷Ⅰ,箭藿苷A,箭藿苷B和鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ,随着水解时间的延长,各转化产物被继续水解。因此可得出结论,蜗牛酶在37 ℃,pH 6.0的Hank’s平衡盐溶液中,2 h内能将淫羊藿主要总黄酮转化为次级苷或苷元,且其酶解产物与肠道代谢产物相一致。 相似文献
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纤维素酶转化淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的研究 总被引:5,自引:1,他引:4
目的研究宝藿苷I的制备工艺。方法采用纤维素酶水解淫羊藿苷制备宝藿苷I,以转化率为指标,通过单因素考察pH值、温度、底物的浓度、酶用量、反应时间及金属离子对转化率的影响L9(34),正交试验优化制备工艺;采用MS,1H-NMR、13C-NMR鉴定水解产物。结果酶解反应的最适条件为温度50℃、反应介质pH 5.2醋酸-醋酸钠缓冲液,底物浓度为10 mg/mL,酶与底物质量比1∶1,反应时间48 h,钠离子、钙离子、镁离子、锌离子、对酶解反应无显著影响(P0.05),铁离子对酶解反应有抑制作用(P0.01);反应产物相对分子质量为514,核磁图谱证实产物为宝藿苷I。结论纤维素酶水解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,工艺简单可靠,反应条件温和,适合工业化生产。 相似文献
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淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺研究 总被引:5,自引:0,他引:5
目的研究淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺条件.方法采用HPLC法对不同提取工艺条件下淫羊藿苷含量进行测定,探讨不同提取溶媒、煎煮时间、浓缩时间及温度、药材粉碎度对淫羊藿苷含量的影响.结果不同提取方法对淫羊藿中淫羊藿苷的提取率影响较大.结论本研究可为工业大生产中合理地提取淫羊藿活性成分提供参考. 相似文献
8.
高效液相色谱法测定淫羊藿中淫羊藿定C和淫羊藿苷的含量 总被引:7,自引:3,他引:7
目的 :测定不同种和不同产地的淫羊藿中淫羊藿定C和淫羊藿苷的含量 ,探讨淫羊藿药材的质量控制方法。方法 :色谱柱为HypersilBDS C18(4mm×250mm ,5μm ) ,以乙腈 0.05%磷酸作为梯度洗脱流动相 ,G13 15A光电二极管阵列检测器 ,检测波长 272nm。结果 :淫羊藿定C和淫羊藿苷平均回收率分别为 99.7% ,102.5% ,RSD分别为 1.5% ,1.1%。结论 :本方法快速 ,重现性和稳定性好 ,可用于淫羊藿药材质量控制. 相似文献
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环淫羊藿苷元微乳的制备及肠吸收研究 总被引:3,自引:2,他引:3
目的:制备环淫羊藿苷元(CIT)微乳,考察其理化性质及大鼠在体肠吸收特性.方法:采用伪三元相图得到空白微乳的优化处方,制备CIT微乳;采用透射电镜及激光粒度分析仪考察CIT微乳的形态、粒径分布和Zeta电位;采用葡聚糖凝胶柱色谱法测定CIT微乳的包封率;通过大鼠在体肠灌流模型,采用高效液相色谱法测定灌流液中CIT的含量,分析其肠吸收特性.结果:CIT微乳的最佳处方为肉豆蔻酸异丙酯/丙三醇-水-油酸乙酯体系,其比例为3:3:4:2;透射电镜观察乳滴呈圆球形,大小均匀;平均粒径61.7 nm,Zeta电位-46.3 mV,平均包封率(92.1±1.74)%(n=3);CIT及其微乳在大鼠各肠段均有吸收,CIT微乳在各肠段的吸收较原料药显著增加(P<0.01).结论:CIT微乳的制备工艺可行,微乳能促进CIT在大鼠小肠的吸收. 相似文献
11.
目的采用微透析活体取样技术,考察淫羊藿苷巴布剂经皮药物动力学行为。方法以Wistar大鼠为实验模型动物,应用微透析在体取样技术,以质量浓差法测定探针的体外回收率,以反向渗析法测定探针在体回收率;HPLC法对透析液样品中淫羊藿苷质量浓度进行测定,绘制经皮药物质量浓度-时间曲线图,并计算药动学参数。结果在实验条件下,浓差法测得微渗析探针的体外回收率为(57.61±1.37)%,反向渗析法测得探针的在体回收率为(29.95±2.77)%;淫羊藿苷巴布剂经皮给药后,最大药物质量浓度为0.07 mg/L,AUC0-t为0.46 h.mg/L,表观透皮速率常数为2.37 ng/(cm2.h)。结论本研究提示反渗析法可作为淫羊藿苷微透析试验中回收率的测定方法;巴布剂中淫羊藿苷与对照相比经皮释药平稳,符合线性规律。 相似文献
12.
目的制备微球固定化蜗牛酶,并优选出微球固定化蜗牛酶转化人参皂苷Rb1(Rb1)制备人参稀有皂苷Compound K(CK)的最佳制备工艺。方法采用交联-包埋法制备微球固定化蜗牛酶,以酶活力回收率为考察指标,通过正交试验优选出最佳制备工艺;考察了最适反应温度、最适反应p H值、热稳定性、p H稳定性和储存稳定性等酶学性质,并通过单因素考察转化温度、底物浓度、转化时间和固定化蜗牛酶使用次数对转化率的影响,优化制备工艺。结果固定化蜗牛酶的最佳制备工艺:海藻酸钠质量浓度2%,Ca Cl2质量浓度2%,Si O2与蜗牛酶质量比1∶1,在此条件下固定化蜗牛酶的酶活回收率为81.94%;固定化蜗牛酶与游离蜗牛酶在热稳定性与p H值稳定性方面显示出不同的性质,其中固定化蜗牛酶的最适反应温度为60℃,最适反应p H值为5.0。固定化蜗牛酶在15℃环境下保存30 d后,酶活回收率为55.17%。固定化蜗牛酶转化Rb1制备人参稀有皂苷CK的转化条件:转化温度为55℃,底物质量浓度为1.0 mg/m L,转化时间为36 h,转化次数为5次,平均转化率为36.79%。结论蜗牛酶的固定化增强了其稳定性和使用寿命,且人参稀有皂苷CK的转化率提高,工艺简单,适合工业化生产。 相似文献
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[目的]建立益肾颗粒中淫羊藿苷含量的测定方法。[方法]采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为美国Waters公司C18柱(250 mm×4.6 mm,10μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(28∶72),流速为1 mL/min,检测波长为270 nm,柱温为室温。[结果]淫羊藿苷在0.048 5-0.970 0μg内与色谱峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率97.0%,RSD=0.7%(n=6)。[结论]该法简便、专属性、重复性好,可用于益肾颗粒中淫羊藿苷的含量测定。 相似文献
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目的:建立高效液相色谱法测定虫草片中淫羊藿苷和腺苷的含量.方法:色谱柱:MetaChem Polaris ODS C18-A(4.6mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水(梯度洗脱),检测波长:272 nm(淫羊藿苷),260 nm(腺苷),柱温:25℃,流速:1.0mL·min-1.结果:淫羊藿苷的线性范围为0.374~2.246μg,腺苷的线性范围为0.348~1.392μg.淫羊藿苷的加样回收率为99.43%,RSD为1.84%(n=6),腺苷的加样回收率为99.63%,RSD为1.29%(n=6).结论:该方法简便、快速、准确,可用于虫草片的质量控制. 相似文献
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高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中薯蓣皂苷和淫羊藿苷 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 测定穿龙骨刺片(穿山龙,淫羊藿,狗脊,川牛膝,熟地黄,枸杞子)中薯蓣皂苷、淫羊藿苷.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为C1s柱,以乙腈-水为流动相,检测波长为203 nm(薯蓣皂苷)、270 nm(淫羊藿苷).结果 薯蓣皂苷进样量、淫羊藿苷进样量分别在0.56~5.60μg、0.24~2.40 μg范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.999 9、0.999 8);平均回收率分别为98.23%、98.34%,RSD分别为0.88%(n=6)、0.62%(n=6).结论 HPLC法快速、准确,可用于该制剂的质量控制. 相似文献