人参皂苷Rh_2对胃癌细胞SGC7901/ADR耐药敏感性的影响

目的观察人参皂苷Rh_2(G-Rh_2)对人胃癌SGC7901/ADR耐药细胞增殖、细胞周期及化疗敏感性的影响。方法 MTT法检测G-Rh_2与阿霉素(ADR)联用对SGC7901/ADR细胞增殖的影响,并计算逆转倍数(RF);流式细胞术检测G-Rh_2对SGC7901/ADR细胞周期的影响;蛋白印迹法检测G-Rh_2对SGC7901/ADR细胞P-糖蛋白(P-gp)、Bcl-2蛋白表达水平的影响。结果与ADR单药处理后细胞的半数抑制浓度(IC50)值(54.52μmol/L)比较,G-Rh_2与ADR联用时SGC7901/ADR细胞IC50值(30.14μmol/L)明显下降,RF为1.81;G-Rh_2与ADR联用能够将SGC7901/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,与ADR单药处理比较,联用组细胞P-gp、Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论 G-Rh_2联合ADR能够提高SGC7901/ADR细胞的化疗敏感性,可能通过阻滞细胞周期、增加细胞凋亡进而抑制细胞增殖。     

丹参逆转胃癌耐药细胞的作用及其机制分析

目的探讨丹参对人胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR耐药性的逆转作用及其机制。方法以不同浓度的丹参(SAL)处理耐药系SGC7901/ADR及敏感系SGC7901细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测丹参对两种细胞系的毒性及半数抑制率(IC50),流式细胞仪(FCM)检测丹参对两种细胞内ADM浓度和细胞周期的影响,SP法免疫组化染色检测两种细胞P-糖蛋白(P-gp)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达。结果丹参的非细胞毒性药物剂量为500 mg/L以下;丹参可逆转SGC7901/ADR细胞对ADM的耐药性,逆转倍数为1.89(P<0.01);提高细胞内ADM浓度,ADM增加1.55倍(P<0.05);丹参使细胞周期阻滞于G1、G2期;对细胞膜P-gp的表达轻度下降、TopoⅡ的表达略有增加,但无显著性差异(P均>0.05)。结论丹参对SGC7901和SGC7901/ADR细胞无杀伤作用。其机制是丹参能增加耐药细胞内化疗药物浓度,使DNA合成期(S期)细胞含量下降。     

槐定碱调控B7-H1基因逆转人胃癌细胞多药耐药的研究

目的:探讨苦豆子提取物槐定碱(SR)I调控B7-H1基因对人胃癌细胞多药耐药的调节机制。方法:人胃癌细胞SGC7901和多药耐药细胞SGC7901/DDP常规培养,苦豆子提取物槐定碱干预48h后,MTT法检测SGC7901/DDP细胞对化疗药敏感性的影响,流式细胞仪分析细胞凋亡情况,流式细胞术检测B7-H1蛋白表达情况。结果:人胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP对DDP的敏感性明显低于SGC7901敏感细胞(P<0.01);槐定碱干预SGC7901/DDP细胞48h后,耐药细胞增殖受到抑制,凋亡率增加,B7-H1蛋白表达下调(P<0.05)。结论:槐定碱通过降低B7-H1基因表达,抑制细胞增殖,诱导其凋亡,逆转SGC7901/DDP细胞株的多药耐药性。     

乙氧基血根碱靶向CIP2A抑制SGC7901/DDP细胞增殖及活化自噬的作用机制研究

该文旨在探讨乙氧基血根碱(ethoxysanguinarine, Eth)对顺铂(cisplatin, DDP)耐药的人胃癌细胞的影响及其机制。选用SGC7901和DDP耐药的人胃癌细胞系SGC7901/DDP作为细胞模型;Western blot检测多药耐药相关蛋白在SGC7901和SGC7901/DDP细胞的表达水平;MTT实验检测DDP对SGC7901细胞和SGC7901/DDP细胞增殖的抑制作用;用增加浓度的Eth处理SGC7901和SGC7901/DDP细胞后,通过MTT实验检测Eth对SGC7901和SGC7901/DDP细胞增殖的影响;通过台盼蓝拒染实验、克隆形成实验和共聚焦高内涵成像分析系统检测Eth对SGC7901/DDP细胞增殖能力的影响;DAPI染色、Anne-xin V-FITC/PI染色流式细胞术检测Eth对SGC7901/DDP细胞凋亡的影响;GFP-LC3转染实验检测Eth对SGC7901/DDP细胞自噬的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-9、caspase-3和PARP的表达、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达、多药耐药蛋白P-gp...     

泽漆乙酸乙酯提取物对SGC7901/DDP多药耐药性的逆转及机制

目的探索泽漆乙酸乙酯提取物(EAE)对人胃癌耐药细胞SGC7901/DDP是否具有逆转作用,并探索其机制。方法实验共分4组,胃癌细胞SGC7901作为阴性对照组;胃癌耐药细胞SGC7901/DDP为空白对照组;耐药细胞SGC-7901/DDP加入终质量浓度为10μg/mL的EAE为EAE低剂量组,耐药细胞SGC-7901/DDP加入终质量浓度为20μg/mL的EAE为EAE高剂量组。MTT法分别检测4组细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂的敏感性;PCR和Western blot分别检测4组细胞耐药相关基因MDR1和LRP基因与对应蛋白P-gp和LRP蛋白的表达情况。结果 SGC-7901/DDP对5-FU和顺铂(DDP)表现出耐药性,其中对顺铂(DDP)耐药更为明显;阴性对照组中检测到耐药基因MDR1和LRP及对应蛋白P-gp和LRP蛋白的极低表达量,空白对照组表达量最高,与空白对照组相比较,EAE低剂、高剂量组细胞中的MDR1和LRP的基因与对应蛋白P-gp和LRP蛋白的表达均下降,且EAE高剂量组下降更为明显。结论 EAE可以逆转人胃癌耐药细胞SGC7901/DDP多药耐药,其机制可能与MDR1和LRP基因的下调有关。     

圣和散逆转胃癌SGC7901/VCR细胞多药耐药的研究

目的探讨中药圣和散逆转胃癌耐药细胞SGC7901/VCR多药耐药的机制。方法圣和散(浓度2.5、5和10mg/ml)处理胃癌耐药细胞SGC7901/VCR,用流式细胞技术检测P-糖蛋白(P-gp)表达,免疫组织化学SABC法及图像分析技术检测B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)。结果实验组SGC7901/VCR细胞Bcl-2表达A值(121.34±0.16)明显高于对照组(104.37±0.089)(P<0.05),Bcl-2表达减少,P-gp表达也明显降低。结论圣和散能逆转胃癌耐药细胞SGC7901/VCR多药耐药,其作用可能与调节Bcl-2和P-gp表达有关。     

葛根素对胃癌多药耐药的逆转实验研究

目的观察葛根素注射液对人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR的影响。方法采用MTT法进行药敏实验,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化、胞浆内药物浓度,荧光显微镜显示荧光强度,免疫细胞化学染色法显示耐药细胞中多药耐药相关蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的分布,观察化疗药(包括5-FU、VCR、DDP、ADM)和/或葛根素对胃癌裸鼠原位移植瘤的抑瘤率。结果葛根素注射液能够逆转SGC7901/ VCR对5-FU的耐药性,与SGC7901/VCR比较S期和G_2+M期增加,G_1期减少,细胞内的阿霉素荧光强度明显增强,MRP和P-gp的表达明显减弱,葛根素和5-FU联合应用对裸鼠胃癌的抑瘤率明显高于单纯应用5-FU组。结论葛根素注射液能够逆转SGC7901/VCR的多药耐药性,其机理可能是促使MRP和P-gp蛋白表达减少。     

粉防己碱对人胃癌耐药细胞锌指蛋白139、多药耐药基因表达的影响

目的探讨粉防己碱（tetrandrine,TET）对胃癌细胞及耐药细胞中锌指蛋白139（zincfingerprotein139,ZNFl39）及多药耐药（multidrugresistance,MDR）基因的影响。方法MTT法检测不同浓度（0．5、1．0、1．5、2．0、2．5闪,mL）TET对胃癌细胞SGC7901、SGC7901／ADR细胞株的抑制作用;通过RT-PCR法检测TET作用前后SGC7901／ADR细胞内ZNFl39、MRP-1、MDR1、GST-π表达情况,以Spearman相关分析检验ZNF139与各多药耐药因子之间关系并计算相关系数。结果MTT结果显示,2．0μg／mL及以下浓度TET对SGC7901、SGC7901／ADR两种细胞的抑制率均〈10％;在SGC7901／ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDRl、GST-πmRNA表达高于SGC7901细胞（均P〈0．05）;TET能抑制SGC7901／ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDR1、GST-πmRNA的水平（均P〈0．05）;TET作用前SGC7901／ADR细胞中ZNF139与MRP．1、MDR1存在相关关系,作用后这种相关性仍存在（均P〈0．05）。结论TET可能通过抑制ZNF139下调、MDR1、MRP1的表达从而逆转胃癌耐药细胞MDR表型。     

莪术油含药血清逆转胃癌SGC7901/CDDP多药耐药的研究

目的 探讨莪术油含药血清对胃癌耐药细胞株SGC7901/CDDP的耐药逆转作用.方法 血清药理法制备莪术油含药血清;MTT法检测莪术油含药血清对SGC7901/CDDP细胞的生长抑制作用;MTT法检测莪术油含药血清作用下化疗药对SGC7901/CDDP细胞生长抑制作用的变化,计算出莪术油含药血清的耐药逆转倍数.结果 莪术油高、中剂量含药血清均可逆转SGC7901/CDDP细胞的耐药性(P＜0.05),逆转倍数分别为6.06,2.61.结论 莪术油含药血清可逆转胃癌耐药细胞株SGC7901/CDDP的耐药性,高剂量组莪术油含药血清的耐药逆转效果明显高于中剂量组,提示制备动物含药血清时,加大动物给药剂量可以增加逆转效果.     

三物白散逆转胃癌细胞多药耐药效应机制研究

目的:研究三物白散对胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP多药耐药(MDR)的逆转作用,明确其耐药逆转机制。方法:分别以不同浓度的三物白散作用于体外培养的SGC7901和SGC7901/DDP细胞,以MTT法检测细胞增殖抑制率,确定三物白散的非毒性剂量;以不同浓度顺铂(DDP)作用上述细胞,确定没有三物白散干预时各组细胞生长抑制50%的DDP浓度(IC50)和SGC7901/DDP细胞的耐药指数(RF);采用非毒性剂量三物白散,分别与不同浓度顺铂(DDP)联合作用,检测各组细胞生长抑制50%的DDP浓度,计算RF和耐药逆转倍数(RI);利用流式细胞术检测三物白散联合DDP作用后SGC7901/DDP细胞内DDP的荧光强度、P-gp的表达和P-gp功能活性。结果:三物白散的非细胞毒性剂量为10-7g/mL;单独顺铂作用后SGC7901/DDP细胞的耐药指数(RF)为3.94;三物白散协同DDP作用后,SGC7901/DDP细胞的RF为3.75,RI为6.12;与三物白散未干预组比较,三物白散可显著增加DDP在SGC7901/DDP细胞内的蓄积(P0.05),SGC7901/DDP细胞的P-gp表达亦显著降低(P0.01),而P-gp功能显著抑制(P0.01)。结论:三物白散与DDP联合运用既有复合抗癌之效,又能逆转胃癌细胞SGC7901/DDP多药耐药。其主要机制可能是通过三物白散下调SGC7901/DDP细胞P-gp表达、抑制P-gp功能实现的。     

黄芪多糖体外对非接触共培养HUVECs细胞诱导SGC7901细胞转移的影响

目的探索黄芪多糖体外对人血管内皮细胞HUVECs诱导的胃癌细胞系SGC7901细胞EMT转化及其转移的影响。方法 MTT检测黄芪多糖对HUVECs、SGC7901细胞增殖抑制的影响。建立Transwell细胞共培养系统,并分为SGC7901组(单独培养SGC7901细胞)、HUVECs/SGC7901组(共培养HUVECs/SGC7901细胞)、黄芪多糖组(黄芪多糖干预共培养HUVECs/SGC7901细胞),Transwell实验检测各组SGC7901细胞侵袭能力,qRT-PCR检测各组细胞E-cadherin、Vimentin mRNA表达,免疫荧光检测各组细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达,Western blot检测各组细胞LOX、Snail1蛋白表达。结果与单独培养的SGC7901细胞相比,共培养的SGC7901细胞侵袭能力,MMP-2、MMP-9、LOX、Snail1蛋白及Vimentin mRNA表达均升高(P<0. 01),E-Cadherin mRNA表达下降(P<0. 05)。经黄芪多糖干预后,共培养的SGC7901细胞侵袭能力、MMP-2、MMP-9、LOX、Snail1蛋白及Vimentin mRNA表达下降(P<0. 01),ECadherin mRNA表达升高(P<0. 05)。结论与HUVECs细胞共培养可激活SGC7901细胞EMT转化,促进SGC7901细胞转移,但黄芪多糖可通过抑制EMT转化阻止非接触共培养人血管内皮细胞诱导的SGC7901转移。     

贝母素乙增强阿霉素对胃癌多药耐药裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制研究

目的 研究贝母素乙逆转胃癌细胞多药耐药性（MDR）,增强化疗药物对胃癌多药耐药裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其作用机制。方法 制备胃癌耐药SGC7901/VCR细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,随机分组后,ip给药,每2天给药1次,共给药6次。治疗期间观察裸鼠体质量,游标卡尺测量移植瘤体积。治疗结束后处死裸鼠,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;Western blotting检测药物治疗后移植瘤耐药相关蛋白P-糖蛋白（P-gp）、Cleaved Caspase-3表达水平。结果 治疗期间联合用药组移植瘤体积小于模型组,差异显著（P＜0.01）。治疗结束后处死裸鼠,称取移植瘤的质量,联合用药组移植瘤质量和抑瘤率显著低于模型组（P＜0.05）。Western blotting结果显示联合用药组P-gp表达水平较模型组降低,Cleaved Caspase-3表达升高。结论 贝母素乙可以增强胃癌耐药细胞移植瘤对阿霉素的敏感性,能够显著抑制胃癌耐药移植瘤的生长,其机制可能与降低肿瘤组织中P-gp表达和升高Cleaved Caspase-3的表达相关。     

补骨脂复方对胃癌细胞SGC7901生物行为学的影响

目的:观察补骨脂复方对胃癌细胞株SGC7901增殖、黏附、侵袭、凋亡的影响。方法:①采用MTT法、细胞黏附人工重组基底膜实验、聚碳酸酯膜细胞培养小室(Transwell小室)法,观察不同浓度的补骨脂复方对胃癌细胞株SGC7901增殖、黏附和侵袭的影响;②TUNEL法研究不同浓度补骨脂复方对胃癌细胞株SGC7901早期凋亡的诱导作用。结果:①补骨脂复方有很强的抑瘤作用(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性。②补骨脂复方高浓度组各时间段均有明显的抑制肿瘤黏附的作用(P<0.05),中浓度90min后有抑制肿瘤黏附的作用(P<0.05),低浓度组在120min时有抑制黏附作用(P<0.05)。③补骨脂复方高、中、低三种浓度药物对胃癌细胞株SGC7901细胞的侵袭抑制率分别为60.79%(P<0.01)、38.81%(P<0.01)、8.7%。④补骨脂复方高、中、低浓度组对胃癌细胞株SGC7901凋亡率分别为59.08%(P<0.01)、31.45%(P<0.01)、16.6%。结论:①补骨脂复方可明显降低胃癌细胞株SGC7901的增殖作用。②补骨脂复方可明显降低胃癌细胞株SGC7901的黏附能力和侵袭能力。③补骨脂复方有诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的作用。     

Silibinin Triggers Apoptosis and Cell‐Cycle Arrest of SGC7901 Cells

Silibinin, a flavonoid compound, has shown to be of chemopreventive potential against many cancers. However, its efficacy against gastric cancer has not been well elucidated. Here, we assessed the activity of Silibinin on apoptosis and cell‐cycle arrest in human gastric cells culture system using SGC‐7901 as the model. Silibinin treatment could inhibit the cell growth and cause a prominent G₂ phase arrest and apoptosis in dose‐ and time‐dependent manner. In mechanistic studies, Silibinin decreased the protein level of p34cdc2, which might be the possible molecular mechanism of Silibinin efficacy on the growth inhibition in SGC‐7901 cells. In addition, Silibinin caused an increase in p53 and p21 protein level as well as mRNA levels. Interestingly, Silibinin‐induced apoptosis in SGC‐7901 cells was independent of caspases activation. These results indicated that Silibinin is a cell‐cycle regulator and apoptosis inducer in human gastric carcinoma SGC‐7901 cells and might be used as a candidate chemopreventive agent for gastric carcinoma prevention and intervention. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

二氢丹参酮抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭迁移作用及机制研究

目的研究二氢丹参酮(DHT)对人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用的分子机制。方法利用不同浓度的DHT处理细胞后,MTT法检测DHT对细胞生长活力的影响,划痕实验观察DHT对细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究DHT对细胞迁移和侵袭的影响,q RT-PCR和Western blotting检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和Hedgehog通路调控基因Gli1和HHIP的m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,DHT可显著抑制SGC7901细胞的体外增殖及迁移能力,Transwell实验表明药物处理后穿膜细胞数明显低于对照组,并且呈剂量依赖性。Western blotting和q RT-PCR实验结果表明,DHT可显著抑制SGC7901细胞中MMP9的表达,降低Gli1基因的m RNA和蛋白表达,并提高HHIP基因的表达水平。结论 DHT能够抑制SGC7901细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与MMP9蛋白的表达降低和Hedgehog通路活性抑制有关。     

四藤方对SGC-7901胃癌Caspase-3、剪辑型PARP及Livin表达影响

目的：观察四藤方对人胃癌SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤Caspase-3、剪辑型PARP及Livin蛋白表达的影响。方法：人胃腺癌SGC-7901细胞BALB／C裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为3组,每组10只。对照组予生理盐水0．3mL灌胃,1次／d;四藤方组予四藤方煎剂0．3mL灌胃,1次／d;5-Fu组予5-Fu腹腔注射,1mg／次·周。免疫组织化学法检测胃癌组织Caspase-3、剪辑型PARP及Livin蛋白表达。结果：四藤方治疗后,SGC-7901裸小鼠移植瘤Caspase-3及剪辑型PARP蛋白表达升高（P〈0．05）;Livin蛋白表达降低（P〈0．01）。结论：四藤方可上调SGC-7901裸鼠移植瘤Caspase-3,促进PARP剪辑,下调Livin蛋白表达。