化学致癌剂诱发大鼠肝癌过程中凝集素受体的表达

目的 探讨卵圆细胞及其分化的过渡细胞与肝癌组织发生之间的关系。方法 用亲和组织化学的方法对化学致癌剂诱发Ｆ３４４大鼠肝癌过程中花生凝集素（ＰＮＡ），菜豆凝集素（ＰＨＡ），荆豆凝集素（ＵＥＡ）及大豆凝集素（ＳＢＡ）受体的表达进行检测。结果 部分卵圆细胞，过渡细胞之ＰＮＡ，ＰＨＡ，ＵＥＡ阳性，正常肝细胞，增生灶，增生结节之ＰＮＡ，ＰＨＡ，ＵＥＡ，ＳＢＡ为阴性，肝癌组织中ＰＮＡ，ＰＨＡ，ＵＥＡ，ＳＢＡ均     

肝癌及癌旁组织中凝集素受体的表达

（１）目的：探讨癌旁肝组织与肝癌组织发生之间的关系。（２）方法：用亲和组织化学的方法检测人肝癌及癌旁组织中６种凝集素受体的表达。（３）结果肝癌组织菜豆凝集素（ＰＨＡ），花生凝集素（ＰＮＡ），双花藕豆凝集素（ＤＢＡ），荆豆凝集素（ＵＥＡ－１）受体的阳性率明显高于癌旁组织（Ｘ＾２＝４．１６～５３．８６，Ｐ均〈０．０１或０．０５）；肝癌组织西非单叶豆凝集素（ＢＳＬ）大豆凝集素（ＳＢＡ）受体的阳性率与癌旁     

小鼠肝癌高低转移细胞株质膜凝集素结合特征分析

利用生物素标记凝集素，观察了不同淋巴管转移能力的两株瘤细胞质膜凝集素受体分布特征，两株细胞均对刀豆素（ＣｏｎＡ）麦胚素（ＷＧＡ），扁豆素（ＬＣＡ）呈强阳性反应，蓖麻素（ＲＣＡ－１），大豆素（ＳＢＡ），荆豆素（ＵＥＡ－１）花生素（ＰＮＡ）双花扁豆素（ＤＢＡ）为阳性，细胞经神经氨酸酯处理后，ＳＢＡ，ＤＢＡ，ＰＮＡ的染色均转为强阳性，说明这些凝集素受体因唾液酸化而掩盖。     

卵圆细胞在实验性肝癌发生中的作用

目的：观察诱癌过程中ｃＨａｒａｓ、ｐ２１蛋白、ＡＦＰ及ＰＣＮＡ在肝细胞及肝卵圆细胞中的表达变化。方法：用化学致癌剂３′甲基４二甲基氨偶氮苯（３′ｍｅｔｈｙ１４ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ,３′ＭｅＤＡＢ）诱发ＳＤ大鼠肝癌,通过免疫组化、原位杂交等方法检测各相关因子在肝细胞及肝卵圆细胞内的表达。结果：诱癌４周,大鼠肝内出现大量的卵圆细胞,呈ＰＣＮＡ强阳性。６～８周,部分增生的卵圆细胞ｐ２１ｒａｓ及ＡＦＰ阳性反应。原位杂交显示,诱癌的第４～８周,ｃＨａｒａｓ的阳性表达细胞呈逐渐增多趋势;１４周时,ｃＨａｒａｓｍＲＮＡ阳性表达细胞减少;至１７周,所有癌组织内显示ｃＨａｒａｓ基因表达阴性,而癌旁组织内则可见ｒａｓ基因的大量表达。结论：卵圆细胞是宿主受化学致癌剂作用后发生肝癌的始动细胞,与肝癌的发生有着密切的联系。     

原发性肺癌凝集素受体的观察

应用６种生物素化的凝集素对１００例原发性肺癌进行了受体检测。结果表明，西非单叶豆受体（ＢＳＬ－Ｒ）和花生凝集素受体（ＰＮＡ－Ｒ）对肺癌有相对特异性，荆豆凝集素受体（ＵＥＡ１－Ｒ）对肺鳞癌有相对特异性，蓖麻素受体（ＲＣＡ１－Ｒ）对肺癌的特异性不明显；６种凝集素受体在肺癌中表现出不同的阳性率；肺癌细胞内６种凝集素受体的分布与肺癌的组织学类型有关，鳞癌的质膜阳性率高于胞浆，而腺癌则是胞浆阳性率高于质膜。提示ＢＳＬ－Ｒ和ＰＮＡ－Ｒ的检测可能有助于肺癌的诊断。     

鼻咽部恶性淋巴瘤的诊断与免疫组化

应用免疫组化方法对１１例鼻咽部恶性淋巴瘤，１０例鼻咽部低分化癌、８例鼻咽部反应性淋巴组织增生进行了上皮性标记（Ｉｅｒａｔｉｎ．ＥＭＡ）、淋巴组织标记（ＬＣＡ、Ｌ２６、ＵＣＨＬ１）及免疫球蛋白（）Ｋ轻链、λ轻链）标记。结果发现：（１）恶性淋巴瘤ＬＣＡ９１％阳性，Ｋｅｒａｔｉｎ，ＥＭＡ阴性；低分化癌ＬＣＡ阴性，Ｋｅｒａｔｉｎ，ＥＭＡ阳性；（２）Ｂ细胞性淋巴瘤Ｋ轻链阳性或λ轻链均阳性，呈多克隆表型；（３     

凝集素受体在正常食管上皮及食管鳞状细胞癌中分布的研究

应用花生凝集素（ＰＮＡ）、豌豆凝集素（ＰＳＡ）和双花扁豆凝集素（ＤＢＡ）对４例非肿瘤死亡的尸体解剖食管上皮和３０例食管鳞状细胞癌及其周围的食管粘膜进行免疫标记，以分析在发生癌变时食管粘膜上皮细胞表面的糖基变化，结果表明：４例尸解食管上皮对ＰＮＡ、ＰＳＡ标记呈阴性，而对ＤＢＡ标记呈阳性，在食管粘膜上皮发生癌变时ＰＮＡ及ＰＳＡ标记转为阳性，阳性表达率与肿瘤分化程度有关，相反，在食管上皮癌变时ＤＢＡ标记的阳性率下降甚至全部消失。说明细胞在发生癌变时会导致细胞表面的糖链结构发生变化。另外，食管癌周围形态学正常的粘膜上皮对ＰＮＡ及ＰＳＡ标记也有１６％和１２％的阳性表达，推测可能在粘膜上皮细胞尚未发生形态学改变时其细胞表面的糖基链就已经发生了变化。     

3种凝集素受体的表达与肺癌组织学分级关系的探讨

应用亲合组织化学的方法研究３种凝集素受体的表达与肺癌组织学分级的关系。结果表明，西非单叶豆（ＢＳＬ）、花生素（ＰＮＡ）和荆豆素（ＵＥＡ１）的质膜阳性率在鳞癌的各组织学分级之间有显著性差异（Ｐ＜０．０２５，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１），且随分级的增加而减少（Ⅰ级与Ⅲ级Ｐ＜０．０５）；ＰＮＡ，ＵＥＡ１的阴性率亦在鳞癌的不同组织学分级之间有显著性差异（Ｐ＜０．０２５，Ｐ＜０．０１），随分级的增加而增加（Ⅰ级与Ⅱ级Ｐ＜０．０５）；ＰＮＡ在腺癌腔膜型的阳性率及阴性反应与腺癌组织学分级的关系有显著性差异（Ｐ＜０．０２５，Ｐ＜０．０５）。提示ＰＮＡ受体的检测有助于临床上对肺鳞癌及腺癌的分级诊断，ＢＳＬ和ＵＥＡ１受体的检测则有助于对肺鳞癌的分级诊断。     

食管鳞癌组织中ICE蛋白的表达及其意义

采用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，对３９例管鳞癌手术标本的ＩＣＥ（Ｐ２０）蛋白进行标记。结果发现：随着食管正常上皮向不典型增生上皮转变，ＩＣＥ弥漫性细胞阳性逐渐减少以至消失，４例不典型增生上皮出现散在细胞阳性；７４．３６％（２９／３９）的癌组织中有ＩＣＥ散在表达，且随着癌细胞分化程度的降低，ＩＣＥ的表达率也逐渐减少。提示：细胞的凋亡程度与癌细胞的分化有关，癌组织分化越好，其凋亡的发生率也越高；ＩＣＥ蛋     

纤维粘连蛋白和凝集素受体在高温致神经管畸形中作用的研究

采用免疫组织化学方法探讨了高温致神经管畸形的分子机理。雌性金黄地鼠交配后将实验组给予高温处理，并与对照组一起在相应时间取材，做石蜡切片。各组部分切片用ＡＢＣ法显示纤维粘连蛋白（ＦＮ）；其余切片用刀豆凝集素（ＣｏｎＡ）、花生凝集素（ＰＮＡ）、麦胚凝集素（ＷＧＡ）和荆豆凝集素（ＵＥＡ）作为分子探针，用亲合细胞化学染色，对神经上皮及基膜、脊索和周围间充质的基质粘着分子（ＦＮ）和相应糖基即凝集素受体进行定性、定位观察。结果显示：１．实验组各组胚胎的ＦＮ染色均有不同程度的减弱。２．ＰＮＡ和ＣｏｎＡ染色比对照组显著增强，ＷＧＡ和ＵＥＡ染色差异无显著性。提示在神经管发育过程中，高温可使神经上皮及其基膜和周围间充质的ＦＮ降低，同时增加了神经上皮细胞表面的ＰＮＡ和ＣｏｎＡ的受体糖蛋白数量，破坏了细胞粘着和基质粘着之间的协调关系，从而干扰了神经上皮细胞的正常增殖、迁移和粘着过程，导致了神经管畸形的发生     

肝癌及癌旁组织中凝集素受体的表达

①目的 探讨癌旁肝组织与肝癌组织发生之间的关系。②方法 用亲和组织化学的方法检测人肝癌及癌旁组织中6种凝集素受体的表达。③结果肝癌组织菜豆凝集素(PHA)、花生凝集素(PNA)、双花藕豆凝集素(DBA)、荆豆凝集素(UEA—1)受体的阳性率明显高于癌旁组织(x~2＝4.16~53.86,p均<0.01或0.05);肝癌组织西非单叶豆凝集素(BSL)、大豆凝集素(SBA)受体的阳性率与癌旁组织无明显区别(x~2=0.03,0.04,p均>0.05);散在的嗜酸性毛玻璃样肝细胞、嗜酸性细胞结节BSL,SBA受体阳性。④结论嗜酸性毛玻璃样肝细胞、嗜酸性细胞结节与肝癌细胞具有某些相同的糖结合蛋白,嗜酸性细胞结节是肝癌的癌前期病变;BSL,SBA可作为癌前病变的检测指标。     

四种凝集素在肝癌及癌旁组织的表达

应用ABC免疫亲和组化方法检测了西非单叶豆(BSL)、花生凝集素(PNA)、双花扁豆凝集素(DBA)和荆豆凝集素(UEA)在肝癌及癌旁组织中的表达。结果显示四种凝集素在肝癌及癌旁组织中表现出不同的阳性率;肝癌PNA阳性表达率>BSL和DBA>UEA(P<0.05),而癌旁组织中的BSL阳性表达率显著高于其他三种(P<0.05);PNA和DBA在癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织。且各种凝集素在肝癌及癌旁组织阳性定位亦不同,表明细胞发生癌变时细胞表面的糖链结构发生了变化。     

大鼠肝组织中增生卵圆细胞移植裸鼠后的形态观察

将化学诱癌早期产生的大量卵圆细胞增生肝组织,移植于裸鼠皮下,结合G-6-P酶和γ-GT酶组织化学(简称组化)、AFP免疫组化、~3H-dT放射自显影及超微结构形态学方法,动态地观察卵圆细胞的演变过程。实验结果表明,卵圆细胞显示未分化细胞特征,移植后卵圆细胞仍增生活跃,进一步向过渡细胞、小肝细胞及胆管细胞分化。我们认为卵圆细胞代表肝组织中的一种原始的干细胞,在致癌剂的作用下,由于分化异常,可成为肝细胞癌的组织来源之一。     

大鼠肝癌发生过程中卵圆细胞分化的双染色研究

用r`谷氨酰转肽酶-甲胎蛋白(GGT-AFP)双染色法,对F_344大鼠肝癌发生过程中卵圆细胞的分化进行研究.结果表明,与免疫酶双标记法相比,此法具有特异性高、简便、精确、易于观察、经济、易推广等优点。卵圆细胞GGT 阳性,AFP 阴性;过渡细胞GGT,AFP 双表达;小肝细胞AFP 阳性,胆管细胞GGT 阳性。提示卵圆细胞是一种具有分化潜能的干细胞,过渡细胞双表达是处于双向分化状态,表达AFP 可以分化成小肝细胞,表达GGT 可以分化成胆管细胞。     

鼻咽癌凝集素受体的检测和分析

应用ABC亲合细胞化学方法,以生物素化凝集素UEA,SBA,PNA,PSA标记94例鼻咽癌和23例慢性鼻咽炎组织切片。结果显示。鼻咽癌UEA,SBA受体阳性率(26.6%,8.5%)显著低于正常上皮(96.5%,85.2%),并随着癌瘤分化程度降低而递减。表明鼻咽上皮癌变后UEA,SBA受体明显丢失,反映了细胞分化水平,说明癌细胞糖蛋白合成障碍,糖链结构发生变化,导致肿瘤生物学特性发生改变。本结果指出,应用PNA作标记对于认识鼻咽低分化腺癌可能有所裨益。     

涎腺腺样囊性癌的凝集素免疫组织化学分析

应用7种凝集素探针,观察了33例涎腺腺样囊性癌中的凝集素受体分布,并与正常涎腺组织进行比较。癌变组织中的PNA受体比正常组织明显增加,但UEA_1受体却较正常组织减少。     

乳腺癌凝集素定位与某些病理特征的关系

运用凝集素亲合组化对100例乳腺癌进行了定位研究,结果表明:蓖麻素(RCA)在8例乳腺导管内癌7例阳性,而在其它类型乳腺癌阳性率均低(P<0.05)。荆豆素(UEA_1)在分化好的乳腺癌类型阳性率高于分化差的类型(P<0.05)。花生素(PNA)、Bandeiraea simplicifolia (BSL)和UEA_1在乳腺癌的定位有助于认识乳腺癌的分化特性。此外,作者认为PNA亲和组化对淋巴结微小转移灶的检出有一定的帮助。     

大鼠化学诱发肝癌过程中GGT和AFP的表达

用γ-谷氨酰转肽酶—甲胎蛋白(GGT-AFP)双染色法对F_(344)大鼠化学诱发肝癌过程中GGT与AFP的表达进行研究.结果表明,肝细胞癌梁状型以AFP阳性为主,腺管型以GGT阳性为主;胆管细胞癌以GGT阳性为主.提示在形态学上,肝细胞癌可以同时表达GGT与AFP;增生结节GGT和AFP的表达与肝癌的细胞类型相关.对肝癌发生的可能途径进行了讨论.     

DEN诱发大鼠肝癌变的病理形态与细胞增殖活性的定量研究

目的：探讨大鼠肝癌变的形态演变和细胞增殖活性的关系。方法：通过DEN诱发启动模型和肝癌模型,采用图像分析技术,对病变细胞的形态进行测量,以PCNA和BrdU免疫组化结果反映细胞增殖活性。结果：形态测量证实卵圆细胞是一大小仅为正常肝细胞的1／8、核浆比却大6倍、形态不规则的增生小细胞;增生灶／结节嗜碱性肝细胞形态参数与肝癌细胞相似;PCNA和BrdU阳性细胞主要位于癌前增生灶及肝癌组织中;并且病变形态与细胞增殖活性有较好的一致性。结论：大鼠肝癌变的形态演变与细胞增殖活性密切相关。