龙胆碱的解热作用及机制研究

目的:比较龙胆水提液,龙胆碱及龙胆苦苷解热作用的差异,初步探讨龙胆碱的解热作用机制。方法:雄性SD大鼠,经筛选后随机分为空白对照组、发热模型组、龙胆碱组,龙胆苦苷组及龙胆水提组,采用干酵母皮下注射方法制备发热模型,于模型制备后6 h,分别ip龙胆碱溶液(100 mg.kg-1)、龙胆苦苷溶液(200 mg.kg-1)及ig龙胆水煎液(4 000 mg.kg-1)后分别于各个时间点监测直肠温度,比较三者作用的差异性;采用放射免疫法测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)及下丘脑内环磷酸腺苷(cAMP)、前列腺素E2(PGE2)含量。结果:龙胆碱、龙胆苦苷、龙胆水提液,均能降低发热模型大鼠体温,三者对体温指数(TRI9)的影响分别为:0.86±0.32,1.56±0.27,1.47±0.31,与模型组比较,其差异具有显著性(P≤0.05);放射免疫结果显示,给药组IL-6,PGE2含量分别为(42.46±3.84),(103.30±7.38)ng.L-1,含量明显低于模型组,其差异具有显著性(P<0.05)。结论:龙胆碱、龙胆苦苷及龙胆水提液均具有一定的解热作用,但龙胆碱的解热作用强于后者,龙胆碱可能是中药龙胆解热作用的更直接物质;龙胆碱的解热作用机制可能与降低血清中IL-6水平,进而影响下丘脑PGE2含量有关。     

家蝇幼虫乙醇提取物的抗炎解热作用及机制

目的:研究家蝇幼虫乙醇提取物(MDE)对酵母致炎发热大鼠的解热作用及机制。方法:利用干酵母致炎大鼠发热动物模型,设立生理盐水组:ig等体积生理盐水;模型组:ig等体积生理盐水+大鼠背部sc 15%干酵母20 mL.kg-1;阿司匹林组:ig阿司匹林0.3 g.kg-1;给药组:分别ig MDE(1,0.5,0.25 g.kg-1),qd,预防性连续给药7 d(n=10),观察MDE对发热大鼠直肠温度的影响,测定给药后不同时间的体温变化,并采用放免法测定下丘脑中前列腺素E2(PGE2)和环磷腺苷(cAMP)含量。结果:1,0.5,0.25 g.kg-1MDE具有不同程度的退热作用;并能减少致热大鼠下丘脑中PGE2及cAMP的含量,高剂量组(126.86±24.89)ng.g-1,(9.72±1.11)nmol.g-1;中剂量组(180.12±34.58)ng.g-1,(10.05±0.26)nmol.g-1;低剂量组(203.54±30.46)ng.g-1,(10.79±0.57)nmol.g-1;与模型组(253.70±43.96)ng.g-1,(12.15±3.11)nmol.g-1比较具有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。结论:MDE具有解热作用,其作用机制与降低下丘脑中PGE2以及cAMP有关。     

柴胡注射液对LPS发热大鼠解热机制的研究

目的:研究柴胡注射液对LPS发热模型大鼠血清中细胞因子和下丘脑中升温介质的影响。方法:腹腔注射LPS(100ug/kg)建立大鼠发热模型,监测不同时间点柴胡注射液对LPS发热模型大鼠体温影响;模型升温峰值时收集指标,ELISA法检测血清中细胞因子(TNF-α、IL-1β、cAMP、PGE2)、下丘脑中升温介质(cAMP、PGE2)含量变化。结果:柴胡注射液(5ml/kg、2.5ml/kg、1.25ml/kg)能显著降低LPS发热模型大鼠的体温,且量效关系较显著;柴胡注射液各剂量组能显著抑制发热模型大鼠血清中IL-1β、TNF-α、cAMP、PGE2增加和下丘脑中cAMP、PGE2的释放。结论:柴胡注射液对LPS发热模型大鼠有较好的解热作用,其解热效果可能与其抑制外周IL-1β、PGE2增加和下丘脑cAMP、PGE2释放有关。     

麻黄桂枝药对解热作用及其机制的实验研究

目的 探讨麻黄桂枝药对水煎液对干酵母致热大鼠的解热作用及其机制.方法 复制干酵母致大鼠发热动物模型,观察麻黄桂枝药对水煎液对发热大鼠直肠温度的影响,并采用放射免疫法测定下丘脑中前列腺素E2(PGE2)和环磷酸腺苷(cAMP)含量的变化.结果 给药3h后,与模型组比较,麻黄桂枝低、中、高三个剂量组均能显著降低干酵母致热大鼠的肛温(P＜0.05);与模型组比较,麻黄桂枝中、高剂量组能显著抑制下丘脑中PGE2和cAMP的含量升高(P＜0.05).结论 麻黄桂枝药对水煎液解热作用明显,推断麻黄桂枝药对的解热作用机制可能与抑制脑组织中PGE2、cAMP生成和释放有关.     

坚龙胆抗炎活性部位筛选及抗炎机制探讨

目的:筛选坚龙胆抗炎作用的活性部位,并研究其抗炎机制。方法:分别选用ICR小鼠180只,随机分为18组,分别为正常组,模型组,醋酸地塞米松组(5mg·kg-1),坚龙胆乙醇粗提物、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水各层低、中、高剂量组(6,3,1.5g·kg-1),除正常组外,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性模型,分别ig给予相应药物,正常组和模型组给予等体积的5%聚山梨酯-80,每天1次,连续7d,检测小鼠的耳肿胀度及小鼠腹腔毛细血管通透性。取180只SD大鼠,同上方式分组及给药,采用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀造模,进行抗炎活性筛选;另取大鼠50只,随机分为5组,分别为空白组,模型组,阳性药醋酸地塞米松组(5mg·kg-1),乙醇粗提物组(6g·kg-1),水部位组(6g·kg-1)。每日ig1次,连续7d,采用角叉菜胶致大鼠胸腔炎症造模,测定胸膜炎大鼠胸腔渗出液丙二醛(MDA),前列腺素E2(PGE2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及肺组织一氧化氮(NO),PGE2,TNF-α,IL-1β和MDA含量。结果:与模型组比较,各模型组小鼠耳廓肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性、大鼠足跖肿胀、大鼠胸腔及肺组织的炎症因子NO,PGE2,TNF-α,IL-1β,MDA均明显增高(P<0.01);与空白组比较,水部位高、中剂量(6,3g·kg-1)对二甲苯致小鼠耳廓肿胀,急性炎症导致的腹腔毛细血管通透性,角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀均有显著抑制作用(P<0.05,P<0.01),其余部位活性弱或基本无活性,坚龙胆水部位组(6g·kg-1)能抑制胸腔液MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高(P<0.01),坚龙胆水部位组(6g·kg-1)能抑制肺组织NO,MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高(P<0.01)。结论:坚龙胆水部位为抗炎活性部位,抗炎机制可能与影响炎症介质产生和抗氧化作用有关。     

新癀片对牛奶致家兔发热模型的解热作用机制研究

目的探讨新癀片对牛奶致家兔发热模型的解热作用机制。方法制备牛奶致家兔发热模型,测定给药后1、4 h体温,并取下丘脑测定与体温相关的白细胞介素1α(IL-1α)、IL-β、IL-6、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、精氨酸加压素(AVP)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)、Na+,K+-ATP等指标。结果新癀片给药1、4 h后均能显著降低家兔体温,显著降低家兔下丘脑IL-1α、IL-1β、IL-6、PGE2、TNF-α、cAMP水平及cAMP/c GMP值,降低Na+,K+-ATP活力;给药后4 h能显著升高AVP水平。与吲哚美辛比较,新癀片给药后4 h能进一步降低家兔下丘脑IL-1β、IL-6、cAMP水平及cAMP/c GMP值,差异显著(P0.05),进一步降低PGE2水平,给药后1 h能显著降低IL-1α水平。结论新癀片的解热作用机制与调节下丘脑中体温调控相关因子IL-1α、IL-1β、IL-6、PGE2、TNF-α、cAMP、cAMP/c GMP、Na+,K+-ATP、AVP有关;其中药成分与吲哚美辛发挥协同作用,从而延长吲哚美辛解热作用时间并且增强吲哚美辛的解热效果。     

补中益气汤退热作用及机制的探讨

目的:探讨补中益气汤退热作用机制.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、脾虚发热组、补中益气汤组共3组,每组10只.采用饮食失节+过度疲劳+注射LPS法复制脾虚发热模型.每周测体温1次.第18天开始补中益气汤组每天ig(6.83 g·kg-1),正常组和脾虚发热组给予同体积蒸馏水,每天1次,连续5d.第22天AM 8:00脾虚发热组和补中益气汤2组大鼠ip脂多糖(LPS,80μg·kg-1)诱导发热,正常组ip等体积生理盐水.测量各组大鼠ip LPS后30,60,120,180,220 min肛温及绘制体温曲线,测定下丘脑环磷酸腺苷(cAMP)、前列腺素E2(PGE2).结果:与正常对照组相比,脾虚发热组大鼠体温曲线明显上抬,各观察点体温均明显升高,下丘脑PGE2和cAMP明显升高(P＜0.05或P＜0.01).与脾虚发热组比较,补中益气汤组大鼠体温曲线明显下移,下丘脑PGE2和cAMP均明显下降(P＜0.05或P＜0.01).结论:补中益气汤对脾虚发热模型大鼠具有明显的退热效用,其退热作用可能与降低中枢发热介质PGE2和cAMP有关.     

清金注射液解热作用机制的探讨

目的：研究清金注射液(QJI)的解热作用机理。方法：用伤寒、副伤寒甲乙型三联疫苗致家兔发热与大肠杆茵茵液致大鼠发热模型．观察清金注射液对发热动物体温、家兔脑脊液(CSF)中环磷腺苷酸(cAMP)、大鼠血浆中cAMP及血清白介素-1(IL-1)含量的影响。结果：清金注射液对发热动物的体温升高有明显抑制作用．能明显抑制三联疫苗致发热家兔脑脊液中cAMP的升高；可明显抑制大肠杆菌致发热大鼠血浆中cAMP与血清中IL-1含量的升高。结论：清金注射液具有显著解热作用，其机制与抑制中枢发热介质cAMP与内生致热原IL-1的产生有关。     

羚羊角粉对酵母致热大鼠的解热作用研究

目的:探讨羚羊角粉对酵母致热大鼠的解热作用机制。方法:皮下注射酵母混悬液建立大鼠发热模型,造模后测定1、4、6、8、10 h肛温,应用酶联免疫法(ELISA)测定大鼠血清肿瘤坏死因α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)及下丘脑前列腺素E_2(PGE_2)、环磷酸腺苷(c AMP)含量。结果:模型组大鼠在造模后的10 h内体温均明显高于对照组(P0.05),表明成功建立大鼠发热模型;羚羊角粉组和阿司匹林组有明显的解热效果,且可降低大鼠血清中TNF-α、IL-6和下丘脑中PGE_2、cAMP含量。结论:羚羊角粉对酵母致发热大鼠有明显的退热作用,其作用可能与下调血清TNF-α、IL-6及下丘脑PGE_2、cAMP水平有关。     

白虎承气汤解热作用有效部位群的筛选

目的:初步筛选白虎承气汤解热作用的有效部位群.方法:筛选健康大鼠104只,随机分为13组,即A,B1,B2,C1,C2,D1,D2,E1,E2,F1,F2,G1,G2组,每组8只,其中A组为正常对照组.B1,C1,D1,E1,F1,G1组分别ip脂多糖(LPS)(20 μg· kg-1),诱发动物发热,造模后2h,ig给予,C1,D1,E1,F1,G1组大鼠分别用白虎承气汤挥发油部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位按20 mL·kg ig(折合生药为18.6 g·kg-1),B1组ig等容积的生理盐水,并于ip LPS后2,3,4,6,8h时测量体温.B2,C2,D2,E2,F2,G2组分别sc 20％干酵母混悬液(10 mL·kg-1),诱发动物发热,造模后3h,ig给予C2,D2,E2,F2,G2组大鼠分别用挥发油部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位按20 mL·kg-1灌胃(折合生药为18.4 g·kg-1),B2组ig等容积的生理盐水,并于注射酵母菌混悬液后3,4,5,7,9h时测量体温.并通过上述方法对5个不同提取部位进行药效学筛选.结果:白虎承气汤正丁醇部位和水部位对发热大鼠具有显著解热效果(P＜0.05),并能持续5h,而挥发油部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位对此作用不显著.结论:初步排除挥发油部位、石油醚部位和乙酸乙酯部位,并初步确定白虎承气汤解热作用的有效部位群为正丁醇部位和水部位.     

光叶娃儿藤解热抗炎作用实验研究

目的:观察光叶娃儿藤的解热和抗炎作用.方法:SD大鼠随机分为生理盐水对照组,阿司匹林组(0.1 g·kg-1),光叶娃儿藤低、中、高剂量组(6,12,24 g·kg-1).分别采用酵母混悬液复制大鼠发热模型和角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法,观察光叶娃儿藤的解热和抗炎作用,同时紫外分光光度法测定大鼠角叉菜胶致炎足渗出物中的前列腺素E2(PGE2)的含量.结果:与生理盐水组比较,光叶娃儿藤中、高剂量组(12,24 g·kg-1)能显著降低酵母菌致大鼠发热模型的体温(P＜0.05),并能显著抑制角叉菜胶致大鼠的足肿胀度(P＜0.05)和足组织中的前列腺素E2(PGE2)的合成(P＜0.05).结论:光叶娃儿藤具有明显的解热和抗炎作用,其机制可能与抑制PGE2等炎症介质合成有关.     

Effect of pediatric tuina on hypothalamic metabolites in young rabbits using liquid chromatography-mass spectrometry

ObjectiveTo investigate the changes in the hypothalamic metabolites of lipopolysaccharide (LPS) febrile young rabbits after the treatment with pediatric tuina.MethodsA total of 30 young rabbits were randomly assigned into three groups: the normal group, the model group, and the tuina group. Both the model group and the tuina group were injected intravenously with LPS. “Six antipyretic manipulations” (pushing Tianmen, pushing Kangong, kneading Taiyang, kneading Erhougaogu, clearing Tianheshui, and pushing Jizhu) were administered 1 h after the LPS injection in the tuina group. The rectal temperatures of the young rabbits were monitored during the experiment to explore the antipyretic effect. Three hours after the injection, the content of interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor (TNF)-α, and prostaglandin E₂ (PGE₂) in the serum was detected. In addition, liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) was used for the hypothalamus metabolomics.ResultsCompared with the model group, the rectal temperature of the tuina group was decreased at 2 h and 3 h after the LPS injection (P = .04, P = .03, respectively), and the content of IL-1β, TNF-α, and PGE₂ was decreased (P = .03, P = .003, and P = .008, respectively). The metabolomics results showed that there were 23 potential biomarkers after the tuina intervention, enriching 27 pathways. Lipid metabolites, especially glycerophospholipids, were a majority of the altered metabolites. The primary metabolic pathways affected by tuina included the arachidonic acid metabolism, the GABAergic synapse, d-glutamine and d-glutamate metabolism, and the glutamatergic synapse.ConclusionPediatric tuina reduced the temperature of the febrile rabbits and downregulated the expression of IL-1β, TNF-α, and PGE₂, and the antipyretic mechanism may be related to changes in metabolites and metabolic pathways in the hypothalamus.     

Antipyretic Effects of Eupatorium chinense and Its Mechanism

Objective To investigate the antipyretic effect of Eupatorium chinense and its mechanism. Methods The content of arginine vasopressin(AVP) in ventral septal area(VSA) and blood plasma, and cyclic adenosine monophosphate(cAMP) levels of hypothalamus and blood plasma were determined by enzyme linked immunosorbent assay. Results The body temperature(Tb) was decreased at 1 h after administration of E. chinense(3 and 6 g/kg) and Aspirin(0.3 g/kg) respectively, which was significantly different from the temperature of fever model group. The antipyretic effect of Aspirin and E. chinense lasted for longer time. Aspirin(0.3 g/kg) and E. chinense(3 and 6 g/kg) reduced the level of cAMP in hypothalamus of fever rats and increased AVP content in plasma. The changes in cAMP content in plasma of all drug treatment groups were not obvious. Conclusion E. chinense has strong antipyretic effect and may affect the production of AVP and cAMP in fever rats.     

乌蔹莓抗炎镇痛有效部位的筛选

目的探讨乌蔹莓抗炎镇痛作用的有效部位。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀2种急性炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,研究乌蔹莓不同提取部位ig给药对急慢性炎症的作用。采用热板法和醋酸扭体法致痛,研究乌蔹莓不同提取部位ig给药的镇痛作用。结果与模型组相比,乌蔹莓水部位和乌蔹莓水提液高、低剂量组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P0.05、0.01),明显抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀(P0.05、0.01),显著抑制大鼠棉球肉芽肿(P0.01)。乌蔹莓石油醚部位和乌蔹莓水提液高、低剂量组给药后明显延长热板所致小鼠的痛阈值,与模型组和自身给药前比较差异显著(P0.05、0.01);乌蔹莓石油醚部位和乌蔹莓水提液高、低剂量组明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数,与模型组比较差异极显著(P0.01)。结论乌蔹莓抗炎作用部位主要为水部位,而镇痛作用部位主要为石油醚部位。     

金樱根、茎提取物的抗炎、解热作用对比研究△

目的:研究金樱根、茎提取物的抗炎、解热作用。方法:通过小鼠足跖肿胀、腹腔毛细血管通透性和大鼠棉球肉芽肿实验观察金樱根、茎提取物的抗炎作用;通过干酵母制备大鼠发热模型,观察金樱根、茎提取物的解热作用。结果:金樱根、茎提取物可减轻小鼠足跖肿胀,降低小鼠腹腔毛细血管通透性,对大鼠棉球肉芽肿的生成具有显着的抑制作用;金樱根醇提物和金樱茎水提物对发热大鼠有显著降温作用。结论:金樱根、茎提取物对急、慢性炎症模型均有明显的对抗作用;金樱根醇提物和金樱茎水提物具有一定的解热作用。金樱茎在一定条件下可作为金樱根入药。     

维吾尔族药刺山柑果实抗炎活性部分的初步筛选

目的:初步确定维吾尔族药刺山柑果实抗炎活性最强的部分。方法:分别采用蒸馏水、80%乙醇和石油醚对刺山柑果实进行提取,制备不同极性提取物,并以此分组。SPF级昆明种小鼠240只,分别采用小鼠右后肢足趾中部ih 1%的角叉菜胶至小鼠足肿胀实验、二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验,两组实验均分为维吾尔族药刺山柑果实水提部位高、中、低剂量组(7.903,3.952,1.976 g·kg-1),维吾尔族药刺山柑果实石油醚部位高、中、低剂量组(2.935,1.468,0.734 g·kg-1),80%乙醇高、中、低剂量组(5.644,2.822,1.411 g·kg-1)及雷公藤多苷组(8.5 mg·kg-1),羧甲基纤维素纳(CMC-Na)组和食用油组,每组10只;每日给予相应药物1次,连续14 d,第14天在给药60 min后,两组实验分别给予造模剂。小鼠足肿胀实验注射角叉菜胶后30 min,1,2,4,6 h用足爪肿胀测量仪测定小鼠致炎右后足趾容积,同时将致炎足自踝关节以上1 cm剪下,测定前列腺素E2(PGE2)含量;小鼠耳廓肿胀实验小鼠右耳涂抹二甲苯20μL致炎,1 h后取左耳片和右耳片称重,计算耳肿胀度。结果:与食用油组和CMC-Na组比较,雷公藤多苷组和各提取部位组均能降低不同时间点的足肿胀,并能降低PGE2含量,尤其是水提部位高、中、低剂量组具有明显统计学差异(P<0.05);与食用油组和CMC-Na组比较,雷公藤多苷组和各提取部位组均能降低小鼠耳肿胀度,水提部位高、中、低剂量组具有明显统计学差异(P<0.05)。结论:动物实验结果提示刺山柑果实水提取物具有良好的抗急性炎症作用,可初步确定为维吾尔族药刺山柑果实抗炎活性部分。     

基于GC-MS代谢组学技术的狭叶柴胡解热作用研究

目的 采用GC-MS代谢组学技术研究狭叶柴胡的解热作用,并初步探讨其作用机制.方法 SD大鼠随机分为对照组,模型组,狭叶柴胡提取物高、中、低剂量(生药40、20、10 g/kg)组、阿司匹林(100 mg/kg)阳性对照组,干酵母诱导SD大鼠发热后分2次给药.造模后5～10 h每隔1h观察大鼠的体温变化;采集造模后10 h大鼠血浆,进行GC-MS代谢组学分析,并寻找发热的潜在生物标志物.结果 阿司匹林具有很好的解热效果,在给药2h后体温即与对照组无显著差异(P＞0.05).不同剂量的狭叶柴胡提取物使发热大鼠的体温有不同程度的降低,解热作用与剂量相关;高剂量组起效较快,在第1次给药后1h即与模型组有显著差异(P＜0.01);中剂量组在第2次给药后1h效果最好,体温与对照组相比无显著差异(P＞0.05);低剂量组大鼠体温在各个时间点与模型组相比均无显著差异,体温曲线波动较大,表明药物在该剂量虽可干预体温的升高,但未产生明显效果.通过代谢组学技术指认了与发热相关的17个潜在生物标志物,且不同剂量狭叶柴胡提取物均能调节这些标志物的改变.结论 狭叶柴胡具有良好的解热作用且与剂量相关,其可能从酶抑制、神经递质、糖脂代谢、氨基酸及能量代谢等多层面协同发挥作用,具有多靶点性.     

银黄颗粒中药材-中间体-成方制剂抑菌谱-效相关质量评价系统的建立

目的构建银黄颗粒中药材-中间体-成方制剂抑菌谱-效相关质量评价系统。方法首先采用最小二乘支持向量机(LS-SVM)方法,建立银黄颗粒体外抑菌谱-效相关质量评价系统;再采用有监督的偏最小二乘判别分析(PLS-DA)方法,对黄芩药材、金银花药材、黄芩提取物、金银花提取物、银黄颗粒谱-效相关抑菌药效评价结果进行评判。结果建立的银黄颗粒体外抑菌谱-效相关质量评价数学模型,预测结果平均相对误差在5%以下;黄芩药材、黄芩提取物、金银花药材、金银花提取物的抑菌率分别大于43%、5.5%、11%、37%,可以保证银黄颗粒87%的样品抑菌率大于11%(优质样品)。结论建立的银黄颗粒中药材-中间体-成方制剂抑菌谱-效相关质量评价系统,能够实现中成药生产投料关键环节的质量控制,评价结果更科学、全面、准确。     

忍冬藤提取物诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用及机制研究

目的研究忍冬藤Lonicerajaponica提取物对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)表征忍冬藤提取物的化学成分;采用MTT法检测忍冬藤提取物对人骨肉瘤细胞HOS、143B以及人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2存活率的影响;采用荧光显微镜观察忍冬藤提取物对HOS、143B细胞凋亡的影响;采用Annexin V/PI双染法检测忍冬藤提取物对HOS细胞凋亡的影响;采用JC-1染色法检测忍冬藤提取物对HOS细胞线粒体膜电位的影响;采用Westernblotting法检测忍冬藤提取物对HOS细胞B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(bcl-2associated X,Bax)、B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleavedpolyADP-ribosepolymerases,cleavedPARP)、cleavedCaspase-9和细胞色素C(cytochrome-c,Cyt-C)蛋白表达的影响。结果忍冬藤提取物中鉴定出有机酸类、三萜皂苷类、黄酮类、环烯醚萜类和氨基酸类5种类型的36种化学成分。忍冬藤提取物抑制HOS和143B细胞存活率,显著诱导HOS细胞凋亡(P0.01),Caspase-3抑制剂Z-VAD-FMK显著抑制忍冬藤提取物诱导的HOS细胞凋亡(P0.05、0.01);忍冬藤提取物显著提高HOS细胞Caspase-3活性(P0.01),显著改变HOS细胞线粒体膜电位(P0.05、0.01),显著上调HOS细胞Bax、cleaved Caspase-3、cleaved PARP、cleaved Caspase-9、Cyt-C和Bax/Bcl-2蛋白表达水平(P0.05、0.01),显著下调Bcl-2蛋白表达水平(P0.05、0.01)。结论忍冬藤提取物能够抑制骨肉瘤细胞增殖,并通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax、cleaved Caspase-3、cleaved PARP、cleaved Caspase-9和Cyt-C蛋白表达,激活Caspase级联反应有关。     

蓝萼香茶菜二萜类物质对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型大鼠的干预作用

目的:通过加热回流的方法提取蓝萼香茶菜中二萜类物质,测定其含量,研究二萜类物质对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型大鼠的干预作用及其作用机制。方法:雌性SD大鼠随机分层分组为正常组、枸橼酸他莫昔芬片组、模型组、蓝萼组。除正常组外其他各组均用二甲基苯蒽(DMBA)结合慢性不可预见应激行为制备乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型,造模结束后,观察记录各组大鼠的生物表征变化及病理变化验证模型。蓝萼组给予二萜类提取物水溶液5 mg·kg-1灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水10 m L·kg-1灌胃,各组均连续灌胃30 d。30 d后,记录各组大鼠肉眼可见肿瘤的发生情况;腹腔取血,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清中雌二醇(E2),孕激素(P)水平;采集乳腺织织,用苏木素-伊红(HE)染色观察乳腺组织病理学变化,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF),趋化因子受体4(CXCR4)mRNA及蛋白表达水平。结果:提取得干燥品质量2.162 g,干燥品中二萜类质量分数为26.35%。与模型组比较,蓝萼组血清中E2,P水平明显降低(P0.05),乳腺组织中VEGF,CXCR4蛋白及mRNA表达水平均明显降低(P0.05)。结论:蓝萼香茶菜二萜类物质有可能通过抑制VEGF,CXCR4蛋白及mRNA表达,抑制血管生成和趋化因子受体表达,调节大鼠激素水平,从而抑制大鼠乳腺癌癌前病变癌变的发生。