差示聚合酶链式反应检测骨髓转移的神经母细胞瘤N－myc扩增及临床意义

测定骨髓转移神经母细胞瘤（ＮＢ）Ｎ－ｍｙｃ扩增情况及评价其与预后的关系。采用差示ＰＣＲ法检测１７例骨髓转移ＮＢ的Ｎ－ｍｙｃ拷贝数，并随访１年。结果，１２例（７０．５９％）证实有Ｎ－ｍｙｃ扩增。Ｎ－ｍｙｃ扩增与ＮＢ分期及患者预后均成显著相关（分别为Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。有Ｎ－ｍｙｃ扩增者预后差，且扩增倍数越高则预后越差。因此，Ｎ－ｍｙｃ扩增对于ＮＢ分期及预后评估均为有价值的指标，它可能与ｃ－ｍｙｃ协同调控ＮＢ的生物学特性。差示ＰＣＲ作为一种建立在内参照原理上的新方法可定量测定基因拷贝数，比Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交更简便、快速、灵敏、精确，适于临床应用。尤值一提的是，该法需样品量很少，且无同位素沾染。     

神经母细胞瘤眼部转移与N-myc癌基因扩增的临床意义

目的通过定量研究小儿神经母细胞瘤（ＮＢ）Ｎ－ｍｙｃ基因扩增倍数，观察ＮＢ眼部转移以及与预后的关系。方法选择２５例Ⅳ期ＮＢ患儿（有眼部转移１５例、无眼部转移１０例）做骨穿，有眼部转移者并取转移灶组织，用内参照差示聚合酶链反应（ＰＣＲ）的方法确定ＮＢ细胞的Ｎ－ｍｙｃ拷贝数。结果２５例中有２４例（９６％）出现Ｎ－ｍｙｃ扩增，眼部转移组平均拷贝数（５１．３±３２．４）显著高于无眼部转移组的平均拷贝数（４．３±２．８），Ｐ＜０．０５，且前者两年生存率明显低于后者。结论ＮＢ的疗效及预后与癌基因扩增倍数密切相关，扩增倍数高者预后差。应用差示ＰＣＲ方法可及时判断预后，且操作简便快速，适于临床推广应用。     

小儿神经母细胞瘤DNA含量,N—myc基因扩增与临床预后的关系

本文比较分析了１８例神经细胞瘤的ＤＮＡ含量，Ｎ－ｍｙｃ基因扩增、临床分期，原发部位等因素与预后的关系，结果表明，有Ｎ－ｍｙｃ基因扩增的死亡率（７／１０）明显高于无扩增的（１／８）；ＤＮＡ含量增高与肿瘤的恶性度成正比，临床分期与Ｎ－ｍｙｃ基因扩增情况相结合与病死率的关系极为密切。     

小儿神经母细胞瘤DNA含量、N－myc基因扩增与临床预后的关系

本文比较分析了１８例神经母细胞瘤的ＤＮＡ含量、Ｎ－ｍｙｃ基因扩增、临床分期、原发部位等因素与预后的关系。结果表明，有Ｎ－ｍｙｃ基因扩增的死亡率（７／１０）明显高于无扩增的（１／８）；ＤＮＡ、含量增高与肿瘤的恶性度成正比；临床分期与Ｎ－ｍｙｃ基因扩增情况相结合与病死率的关系极为密切。     

三、用差示聚合酶链式反应检测骨髓转移的神经母细胞瘤N-myc扩增

三、用差示聚合酶链式反应检测骨髓转移的神经母细胞瘤Ｎ－ｍｙｃ扩增张锦华，杨朝晖遗传教研室张学中国医科大学血液研究室，第二临床学院神经母细胞瘤（ＮＢ）是威胁儿童生命的主要肿瘤之一。该肿瘤恶性度极高，易发生骨髓等多部位转移，素有“小儿癌王”之称。由于肿瘤...     

差示PCR等方法诊断神经母细胞瘤的N－myc扩增

最近对神经母细胞瘤（ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＮＢ）的Ｎ－ｍｙｃ癌基固扩增研究较深入。Ｎ－ｍｙｃ扩增对ＮＢ的发生、预后有着很重要作用。常规使用的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析法较为复杂，随着分子生物学的发展，差示聚合酶链反应（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，Ｄ－ＰＣＲ）成为分析基因扩增的手段之一。它根据内参照原理使常规ＰＣＲ法克服了不能定量的局限性，并且具有简便、快速、灵敏和准确等优点，适于临床应用。     

神经母细胞瘤细胞周期调控基因p16和cyclin D1表达检测及意义

目的：探讨神经母细胞瘤（ＮＢ）发生发展机理。方法：应用原位杂交技术对２０例ＮＢ标本中细胞周期正、负调控基因ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１表达进行检测。结果：Ｓ一组标要玩１例有Ｐ１６表达阳性细胞。１７例可见ｃｙｃｌｉｎＤ１表达阳性细胞，表达指数４．３－５５．３％。年龄〈１岁和神经节神经母细胞瘤标本中ｃｙｃｌｉｎＤ１表示指数低于年龄〉１岁ＮＢ，但差异无显著性；Ⅲ－Ⅳ期、预后差型及肿瘤广泛浸润转移标中ｃｙｃｌ     

CD44在神经母细胞瘤预后评价中的意义

目的：探讨ＣＤ４４在神经母细胞瘤（ＮＢ）中的预后价值。方法：对３０例ＮＢ进行ＣＤ４４免疫组化研究，同时与其他预后因素，如年龄、分期、病理分型、核分裂核碎裂指数（ＭＫＩ）、ＮＳＥ、Ｓ－１００蛋白等作对比分析。结果：①Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ－Ｓ期二年生存率７６．７％，Ⅲ、Ⅳ期二年生存率３３．３％，（Ｐ＜０．０５）。②病理分型，生存率随着级别升高而降低，Ｐ＜０．０５。③ＭＫＩ测定结果与生存率无显著性差异，Ｐ＞０．０５。④２０例Ｓ－１００蛋白染色呈阳性，二年生存率（６０．０％）高于Ｓ－１００蛋白阴性组（２０．０％），Ｐ＜０．０５。⑤１４例ＣＤ４４染色阳性，其中≤１岁，Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ－Ｓ期，Ｓ－１００蛋白阳性，高分化型，低ＭＫＩＮＢ中ＣＤ４４阳性率显著增高。ＣＤ４４阳性ＮＢ生存率（６８．８％）高于ＣＤ４４阴性者（２１．４％），统计学处理差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结论：ＣＤ４４是ＮＢ的一个新的肿瘤标记物，ＣＤ４４阳性是ＮＢ更为可靠的预后良好的指标。     

差示PCR等方法诊断神经母细胞瘤的N—myc扩增

最近对神经母细胞瘤的Ｎ－ｍｙｃ癌基因扩增研究较深入。Ｎｍｙｃ扩增对ＮＢ的发生、预后有着很重要作用。常规使用的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂文分析法较为复杂，随着分析生物学的发展，差示聚合酶链反应成为分析基因扩增的手段之一。     

PCR－LOH检测神经母细胞瘤1号染色体短臂缺失

１号染色体短臂（１ｐ）缺失和Ｎ－ｍｙｃ基因扩增是神经母细胞瘤（ＮＢ）的特征性基因改变，特别是１ｐ缺失，Ⅲ、Ⅳ期的ＮＢ８０％～１００％有１ｐ缺失，是评估预后的重要基因标志物。既往的检测方法复杂，不能将１ｐ缺失作为评估预后的常规指标。我们利用ＰＣＲ－ＬＯＨ（聚合酶链反应－杂合性缺失）成功地检测了８例Ⅲ、Ⅳ期Ｎｂ，６例有１ｐ缺失。ＰＣＲ－ＬＯＨ具有简单、快速、特异等优点，为临床从分子水平评估ＮＢ的预后提供有效途径。     

神经母细胞瘤细胞增殖活性检测及意义

目的：探讨神经母细胞瘤（ＮＢ）细胞增殖活性在ＮＢ恶性程度和预后判断中的价值。方法：应用免疫组化法对２０例ＮＢ标本中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达进行检测。结果：ＰＣＡＮ表达指数（ＰＥＩ）与肿瘤重量、有丝分裂核碎裂指数（ＭＫＩ）呈正相关，分别为０．６６４和０．９０３；与术后生存时间呈负相关，＝－０．９１９；年龄〈１岁、临床早期（Ⅰ、Ⅱ期）及ⅣＳ期、神经节神经母细胞瘤（ＧＮＢ）、Ｓｈｉｍａｄａ病理     

低出生体重儿远期听力、视力与智力随访

目的 探讨低出生体重（ＬＢＷ）儿远期听力、视力及智力发育情况。方法 对４６例ＬＢＷ儿在４￣８．５ａ时进行随访，以４０例同龄正常出生体重（ＮＢＷ０儿作对照，检测吸力、视力与智商（ＩＱ）。结果 ＬＢＷ儿听力、视力及ＩＱ异常率均高于对照组（Ｐ均〈０．０５），平均听阈高于对照组（Ｐ〈０．０１），而平均视力与ＩＱ分别低于对照组（Ｐ均〈０．０１），ＬＢＷ儿出生体重分别与ＩＱ、双眼平均视力呈正相关（ｒ＝０．３９     

新生儿行为神经评价与高胆红素血症的关系

目的 探讨２０项新生儿行为神经测定（ＮＢＮＡ）与高胆红素血症的关系,了解高胆红素血症对新生儿行为神经的影响。方法 对６２例高胆红素血症患儿运用ＮＢＮＡ。结果 ①当血清胆红素水平≥２０５μｍｏｌ／Ｌ,对ＮＢＮＡ即有显著影响（Ｐ〈０．０１）,血清胆红素≥３４２ｕｍｏｌ／Ｌ,则与ＮＢＮＡ评分呈明显直线负相关关系（ｒ＝－０．８４１,Ｐ〈０．０１）;②溶血感染所致高胆红素血症ＮＢＮＡ评分均低于对照组,差异有     

HGFs联合对体外人脐血造血干细胞及SCID小鼠体内扩增作用的研究

本实验应用外源性重组人多种造血生长因子（ｒｈＨＧＦｓ）处理人ＨＳＣ／ＳＣＩＤ小鼠模型，以体外半固体培养法及ＦＣＡＳ检测ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ及ＣＤ３４＾＋细胞，从而评价ＨＧＦｓ对受鼠体内人造血干细胞的扩增作用。结果：人脐血及骨髓ＭＮＣ经孵育２４小时后ＣＤ３４＾＋细胞含量，ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ产率皆得到明显扩增（Ｐ〈０．０１）；且脐血组优于骨髓组（Ｐ〈０．０１）。输脐血ＭＮＣ＋ＨＧ     

G—CSF在白血病骨髓抑制期的应用

报告Ｇ－ＣＳＦ在小儿白血病骨髓抑制期的临床应用，共２３例（４３例次），并设对照组比较。在２３例急性白血病患儿，２０例为急性淋巴细胞白血病，３例为髓系白血病。结果：骨髓抑制期应用Ｇ－ＣＳＦ组与对照组比较，中性粒细胞绝对性（ＡＮＣ）恢复到ＡＮＣ〉１×１０＾９／Ｌ及血小板（ＰＬＴ）恢复到ＰＬＴ〉１００×１０＾９／Ｌ的时间明显缩短（Ｐ〈０．０５）及感染率明显降低（Ｐ〈０．０５），且副反应轻。此结果提示，Ｇ     

特发性血小板减少性紫癜与人细小病毒B19感染的关系

目的 研究人细小病毒Ｂ１９（ＨＰＶ Ｂ１９）感染与特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）的关系。方法 应用巢式聚合酶链反应技术检测８４例ＩＴＰ患儿存档骨髓涂片标本中ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ,并以２４例巨幼细胞性贫血（ＭＡ）患儿为对照。结果 ８４例ＩＴＰ骨髓中ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ阳性３６例,阳性率为４３％,２４例ＭＡ患儿骨髓中ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ阳性３例,阳性率为１２％,（χ＾２＝６．１９９,Ｐ〈０．０     

新生儿非感染性疾病免疫功能的研究

为探讨新生儿非感染性疾病免疫状态,本文测定了４５例新生儿非感染性疾病患儿多项免疫指标。结果显示：新生上患儿血ＩＬ－２水平、ＮＫ细胞活性明显低于对照组及其它患儿（Ｐ〈０．０１）,ＳＩＬ－２Ｒ水平及Ｔｓ抑制率则明显增高（Ｐ〈０．０１）,所有患儿血清Ｉｇ水平均无明显变化（Ｐ〉０．０５）。ＩＬ－２水平与ＮＫ细胞活性及Ｔｓ抑制率与ＳＩＬ－２Ｒ水平间均呈正相关（Ｐ〈０．０１）,ＩＬ－２水平与ＳＩＬ－２Ｒ水平、     

神经母细胞瘤分子生物学标记物与临床预后判定

神经母细胞瘤（ＮＢ）是儿童时期最为常见的恶性肿瘤之一。目前，对ＮＢ的分子生物学研究已经广泛开展。一批与神经母细胞瘤有关的分子生物学标记物已逐渐被人们所认识。Ｎ－ｍｙｃ癌基因扩增、染色体异常、细胞ＤＮＡ含量、端粒酶活性以及其他原癌基因等都被用来分析ＮＢ的生物学特性，本文综述如下，并对他们在ＮＢ临床预后判定上的应用意义加以总结。     

尿NAG测定在窒息新生儿中的应用价值

采用对硝基苯酚比色法测定１０９例窒息足月儿、早产儿和７４例正常足月儿尿Ｎ－乙酰－βＤ氨基葡萄苷酶（ＮＡＧ）活性。结果显示：窒息足月儿和窒息早产儿尿ＮＡＧ均明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）,窒息程度越重,肾功能损害越明显,恢复越慢;生后第３天、５天早产儿对照组ＮＡＧ明显高于足月儿对照组（Ｐ〈０．０５及〈０．０１）,早产儿肾功能比足月儿差。表明尿ＮＡＧ可作为早期监测窒息新生儿肾功能的方法。     

核因子-κB活性在大鼠脑水肿的变化及热休克反应对其影响的研究

目的　研究核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ） 在百日咳菌液致大鼠感染性脑水肿模型中的活性变化及热休克反应对其影响。方法　动物随机分为：①正常对照组（ＮＳ） ,②感染性脑水肿组（ＰＢ）,③热休克处理组（ＨＳ＋ ＰＢ）。取左大脑半球全层脑组织分别测定脑组织含水量,干脑组织钠、钾离子含量;采用电泳迁移率改变法检测各组神经细胞核内ＮＦ－κＢＤＮＡ－ 蛋白结合物活性的变化并做密度扫描定量分析。结果　ＨＳ＋ ＰＢ各组脑组织含水量明显低于ＰＢ组（ Ｐ＜０ ．０１）,ＨＳ＋ ＰＢ 各组Ｎａ＋ 含量明显低于ＰＢ组（Ｐ＜ ０．０１ 或Ｐ＜ ０．０５） ,Ｋ＋ 含量除２４ ｈ 之外,均明显高于ＰＢ组（ Ｐ＜０ ．０１） 。与正常对照组比较,２ ｈ 感染性脑水肿组ＮＦ－κＢ活性开始增加,并逐渐增高,以２４ ｈ 为最明显。热休克处理组各时相ＮＦ－ κＢ 活性均有不同程度减低。结论　大鼠感染性脑水肿时ＮＦ－ κＢ活性增加,热休克反应对大鼠感染性脑水肿的保护作用可能与抑制ＮＦ－κＢ的活性有关。