外源性神经生长因子对背根神经节中TrKA及其mRNA表达的影响

目的探讨靶肌肉注射外源性神经生长因子对背根神经节中TrKA及TrNA表达的作用.方法 大鼠坐骨神经损伤后采用硅管桥接,在靶肌肉内注射外源性NGF200μ/天,术后 3、7、14及28天进行背根神经节中TrKA的免疫组织化学检查,术后7天组进行TrKA mRNA原位杂交检查.对照组采用相同的动物模型,以生理盐水进行靶肌肉注射.结果 应用NGF靶肌肉注射后,背根神经节中TrKA的表达明显增加,与对照组相比具有显著性差异(P<0.01).结论 靶肌肉注射NGF能逆转神经损伤所造成的TrKA表达下调,表明靶肌肉注射可作为NGF的有效给药途径.     

坐骨神经切断致脊髓背根神经节损伤的实验研究

坐骨神经切断致脊髓背根神经节损伤的实验研究△庞清江罗永湘＊毛宾尧＊＊李保文目前，修复周围神经损伤的显微外科技术已相当精湛，但神经损伤后的恢复效果仍不尽人意。究其原因，虽然与周围神经损伤的部位、程度、修复时间及方法等诸多因素有关，但周围神经损伤后导致该...     

糖尿病大鼠治疗后膀胱和腰骶背根神经节中神经生长因子的表达及超微结构研究

目的通过动物实验研究糖尿病大鼠治疗后膀胱和腰骶背根神经节中神经生长因子（NGF）的表达和超微结构变化及意义。方法参照Schmeichel等方法制备糖尿病大鼠模型,造模成功后4周应用NGF和胰岛素治疗4周,然后应用免疫组织化学方法检测大鼠膀胱和背根神经节中NGF的表达情况,利用透射电镜观察膀胱和腰骶背根神经节的超微结构变化。结果糖尿病大鼠经NGF和胰岛素治疗后膀胱和腰骶背根神经节中NGF的含量明显增加,差异有统计学意义（P〈0.05）,并且其形态学明显改善。结论 NGF的异常在糖尿病膀胱病变（DC）的发病中可能具有重要作用,给予外源性NGF可能有助于DC病变减轻和功能改善。     

神经生长因子保护脊髓背根神经节的实验研究

坐骨神经损伤后，在相应节段脊髓神经元可出现变性。为了观察外源性神经生长因子（ＮＧＦ）的保护作用而设计了本实验。方法是切断ＳＤ大鼠单侧坐骨神经，损伤局部给予外源性ＮＧＦ。借助酶组织化学及图像分析检测坐骨神经切断及应用ＮＧＦ后所引起的脊髓内抗氟化物酸性磷酸酶（ＦＲＡＰ）的活性变化，以探讨ＮＧＦ对脊髓背根神经节的保护作用。结果发现：坐骨神经切断可导致脊髓内ＦＲＡＰ含量降低，从而提示坐骨神经损伤可损害背根神经节；应用ＮＧＦ可显著减少这一酶含量的降低，从而首次从体内酶学水平证实ＮＧＦ对脊髓背根神经节有明显的保护作用。     

Foxo3a和p27kip1在大鼠坐骨神经损伤后背根神经节中的表达

目的 探讨坐骨神经夹伤后Foxo3a和p27kip1在腰段背根神经节(DRG)中表达变化及其意义.方法 将成年SD大鼠随机分为正常对照组和实验组.对实验组实行坐骨神经夹伤术.运用蛋白质印迹、免疫荧光双标,研究大鼠坐骨神经夹伤后,腰段DRG中Foxo3a和p27kip1的表达、分布以及细胞增殖和轴突再生情况.结果 Foxo3a在坐骨神经夹伤后1 d表达值(7.0±3.5)开始明显下降,2 d表达值(6.0±3.8)达到最低值,随之逐渐升高,p27kip1在坐骨神经夹伤后2 d表达值(29.0±3.5)表达开始明显下降,7 d表达值(21.0±3.0)达到最低值,随之逐渐升高;Foxo3a和p27kip1分布于神经元和神经胶质细胞内且在坐骨神经夹伤后2d DRG中,Foxo3a和p27kip1在神经元细胞[(37.8±5.7)%、(43.3±4.3)%]和神经胶质细胞[(22.4±3.9)%、(13.8±3.2)%]中表达较在正常组神经元细胞[(73.6±2.5)%、(84.1±3.7)%]和神经胶质细胞[(61.3±4.4)%、(68.7±5.6)%]减少;细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和神经元生长相关蛋白(GAP-43)在坐骨神经夹伤后2 d DRG中表达值[12±2.6,15±1.9]均开始上调,PCNA在7 d表达值(25.0±3.2)达到最高点,GAP-43则保持较高水平;此外,PCNA与神经胶质细胞共定位明显,与神经元细胞几乎无共定位.结论 大鼠坐骨神经损伤后,Foxo3a和p27kip1在腰段DRG中的表达减少与神经胶质细胞增殖和轴突再生密切相关.     

坐骨神经压迫性损伤大鼠背根神经节SNS/PN3钠通道表达的变化

目的 通过观察背根神经节（DRG）电压门控钠通道SNS／PN3在大鼠坐骨神经压迫性损伤（CCI）的变化，以探讨慢性神经痛的发生机制。方法 对大鼠建立慢性神经痛模型，14d后，将神经痛模型大鼠18只，均分为6组，每组3只，组内同侧（CCI）与对侧自体对照（Control)，在深麻醉下快速断头，分别取L4和L5 DRG，用Trizol试剂提取DRG总RNA。以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）半定量分析CCI后大鼠背根神经节钠通道SNS／PN3转录物的变化，以及全细胞膜片钳技术记录CCI对急性分离大鼠背根神经节TTX－R钠电流的影响。结果 CCI术后14d，感觉神经元特异性的TTX－R钠通道转录物SNS／PN3下调，与对照组相比，下降了大约60％，TTX－R钠电流密度明显减弱，但不影响其激活与稳态失活。结论 钠通道SNS／PN3与慢性神经痛后初级感觉神经元过度兴奋有关。     

Foxo3a和p27kip1在大鼠坐骨神经损伤后背根神经节中的表达

Objective To investigate the expression of Foxo3a and p27kip1 in lumbar dorsal root ganglia (DRG) after injury of sciatic nerve in rats. Methods Adult rats were randomly divided into control group and experimental group. The rats in experimental group were subjected to sciatic nerve clamp.Expression and distribution of Foxo3a and p27kip1 and cellular proliferation and axon regeneration in DRG was detected by western blot and immunohistochemistry. Results Foxo3a protein levels begined to reduce at 1 day (7.0 ± 3.5), reached valley at 2 day (6.0 ± 3.8) after injury, and following Foxo3a downregulation, p27kip1 protein levels begined to decrease at 2 day (29.0 ± 3.5), reached valley at 7 day (21.0± 3.0) after injury. Down-regulation of Foxo3a and p27kip1 was expressed predominantly in neurons and glial cells by double immunolabelling. Foxo3a and p27kip1 were expressed in neurons [(37.8 ± 5.7)%, (43.3 ±4.3)%] and glial [(22.4 ± 3.9)%, (13.8 ± 3.2)%] cells in sections of DRG at 2 day after injury less than neurons [(73.6 ± 2.5)%, (84.1 ± 3.7)%] and glial [(61.3 ± 4.4)%, (68.7 ± 5.6)%] cells in sections of normal DRG. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and GAP-43 were up-regulation from 2 day, and PCNA reached peak at 7 day after injury.The glial cells were the main type of cellular proliferation.Conclusion Down-regulation of Foxo3a and p27kip1 in lumbar DRG is correlated with the proliferation of glial cells and axonal regeneration after sciatic nerve injury.     

坐骨神经结扎大鼠脊髓背根神经节GDNF和NCAM表达的变化

目的 观察坐骨神经结扎大鼠脊髓背根神经节(隙G)胶质细胞源性神经营养因子(GD-NF)和神经细胞黏附分子(NCAM)表达的变化.方法 成年SD大鼠42只,随机均分为疼痛组(CCI组)和对照组(C组).CCI组行左侧坐骨神经结扎术,建立慢性限制性损伤模型;C组行假手术.分别于术前1d和术后1、3、5、7、14、21 d测机械痛阈(MWT)和热痛阈(TWL).采用免疫组织化学染色和适时PCR技术检测DRG中GDNF和NCAM的表达.结果 CCI组术后3、5、7、14 d MWT明显低于、TWL短于C组(P<0.01),而GDNF和NCAM表达明显高于C组(P<0.05或P<0.01).结论 坐骨神经结扎大鼠术后可出现痛阈下降,同时伴有DRG中GDNF和NCAM的表达增高.     

Foxo3a和p27kip1在大鼠坐骨神经损伤后背根神经节中的表达

Objective To investigate the expression of Foxo3a and p27kip1 in lumbar dorsal root ganglia (DRG) after injury of sciatic nerve in rats. Methods Adult rats were randomly divided into control group and experimental group. The rats in experimental group were subjected to sciatic nerve clamp.Expression and distribution of Foxo3a and p27kip1 and cellular proliferation and axon regeneration in DRG was detected by western blot and immunohistochemistry. Results Foxo3a protein levels begined to reduce at 1 day (7.0 ± 3.5), reached valley at 2 day (6.0 ± 3.8) after injury, and following Foxo3a downregulation, p27kip1 protein levels begined to decrease at 2 day (29.0 ± 3.5), reached valley at 7 day (21.0± 3.0) after injury. Down-regulation of Foxo3a and p27kip1 was expressed predominantly in neurons and glial cells by double immunolabelling. Foxo3a and p27kip1 were expressed in neurons [(37.8 ± 5.7)%, (43.3 ±4.3)%] and glial [(22.4 ± 3.9)%, (13.8 ± 3.2)%] cells in sections of DRG at 2 day after injury less than neurons [(73.6 ± 2.5)%, (84.1 ± 3.7)%] and glial [(61.3 ± 4.4)%, (68.7 ± 5.6)%] cells in sections of normal DRG. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and GAP-43 were up-regulation from 2 day, and PCNA reached peak at 7 day after injury.The glial cells were the main type of cellular proliferation.Conclusion Down-regulation of Foxo3a and p27kip1 in lumbar DRG is correlated with the proliferation of glial cells and axonal regeneration after sciatic nerve injury.     

坐骨神经损伤对背根节细胞凋亡及细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的：观察大鼠坐骨神经条件性损伤后对背根节细胞凋亡及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法：将45只成年Wistar大鼠,按手术的不同随机分为3组;正常对照组（A组,n=5）;坐骨神经压榨伤组（B组,n=20);坐骨神经切断组（C组,n=20)。B、C两组又按术后3d,2周,1个月和2个月取材时间分为4个时间组,每组5只大鼠。各时间组取鼠的L5背根神经节后,以TUNEL法检测细胞的凋亡数,以免疫组化技术检测Bcl-2和Bax的表达。结果：正常组及B、C两组伤后3d时未检出凋亡细胞;B、C两组的细胞凋亡率在伤后2周达到高峰,以后随时间的推移而逐渐降低。C组的细胞凋亡率明显高于B组。背根节细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达,伤后2周达到高峰。B组中Bcl-2和Bax的表达呈现从低到高而后逐渐恢复正常的规律;而C组的表达始终保持在高水平。结论：细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax参与外周神经损伤后背根节细胞凋亡的调节。外周神经的不同损伤方式对背根节细胞凋亡及细胞凋亡相关蛋白的表达影响不同。     

大鼠坐骨神经损伤后感觉神经元死亡数量的研究

目的 研究周围神经损伤后,脊神经节感觉神经元的死亡数量。方法 先计算正常SD大鼠两侧的脊神经节感觉神经元胞体数量是否对称,再切断并原位吻合右侧大鼠坐骨神经,左侧不作任何处理,于术后不同时间取L4-L6脊神经节作苏木素-伊红(HE)染色,计算脊神经节感觉神经元胞体数量的变化。结果 正常SD大鼠两侧的脊神经节感觉神经元胞体数量呈对称分布;右侧坐骨神经损伤后,其脊神经节感觉神经元胞体数量较左侧减少:30 d后,脊神经节细胞的死亡比率达30％,神经元死亡高峰在神经损伤后的第2周内。结论大鼠坐骨神经损伤后,脊神经节感觉神经元的胞体有死亡,其死亡具有一定的特征。     

Altered expression of sodium channel distribution in the dorsal root ganglion after gradual elongation of rat sciatic nerves

To elucidate the pathophysiological mechanisms underlying chronic nerve‐stretch injury, we gradually lengthened rat femurs by 15 mm at the rate of 0.5 mm/day (group L, n = 13). The control groups comprised sham‐operated (group S, n = 10) and naive (group N, n = 8) rats. Immediately after the lengthening, we performed a conduction study on their sciatic nerves and harvested samples. Electrophysiological and histological analyses showed mild conduction slowing and axonal degeneration of unmyelinated fibers in group L rats. Altered mRNA expression of the voltage‐gated sodium channels in the dorsal root ganglion was also observed. Tetrodotoxin‐resistant (TTX‐R) sodium‐channel Nav1.8 mRNA expression was significantly decreased and TTX‐R sodium‐channel Nav1.9 mRNA expression showed a tendency to decrease when compared with the mRNA expressions in the control groups. However, tetrodotoxin‐sensitive (TTX‐S) sodium‐channel Nav1.3 mRNA expression remained unaltered. The immunohistochemical alteration of Nav1.8 protein expression was parallel to the results of the mRNA expression. Previous studies involving neuropathic states have suggested that pain/paresthesia is modulated by a subset of sodium channels, including downregulation and/or upregulation of TTX‐R and TTX‐S sodium channels, respectively. Our findings indicate that Nav1.8 downregulation may be one of the pathophysiological mechanisms involved in limb lengthening‐induced neuropathy. © 2009 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 28:481–486, 2010     

中药治疗对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子蛋白表达的影响

目的：研究党参、丹参、黄芪、生地等单味中药及复方神肌再生冲剂对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子（nerve growth factor,NGF)蛋白表达的影响。方法：雄性SD大鼠108只，按手术先后随机分成党参、丹参、黄芪、生地、复方神肌再生冲剂和对照组6组，每组18只。按取材时间分为术后2、4、8、周3个时间组（每组6只）。显露大鼠右侧坐骨神经，于坐骨结节远端0.8cm处造成坐骨神经挤压伤。根据分坐骨神经干，应用免疫组织化学和图像分析的方法研究神经组织中NGF的表达并进行定量分析。结果：术后4、8周组，丹参和复方神肌再生冲剂组，坐骨神经组织中的NGF蛋白高表达。结论：大鼠坐骨神经损伤后用中药丹参和复方神肌再生冲剂治疗，可促进坐骨神经组织NGF蛋白表达。     

脊髓电刺激对坐骨神经损伤大鼠背根神经节神经元和脊髓神经元的保护作用

目的 观察脊髓电刺激对大鼠坐骨神经切断后背根神经节(DRG)神经元和脊髓神经元的影响.方法 建立大鼠坐骨神经损伤模型,随机分为实验组(n=15)和对照组(n=15);实验组行脊髓电刺激,对照组行假治疗.观察不同时期两组大鼠DRG神经元和脊髓神经元计数和超微结构;测定再生神经纤维髓鞘厚度及传导速度(NCV).结果 术后1、4、8周,实验组DRG神经元计数为15.74±1.47、14.17±1.20、13.33±0.47;对照组为10.99±1.38、10.33±0.78、9.20±0.56两者差异有统计学意义(P＜0.05).实验组脊髓神经元计数为17.16±0.50、15.86±1.27、11.55±0.95;对照组为12.16±0.92、10.27±0.44、9.24±0.78,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脊髓电刺激对周围神经损伤后DRG神经元和脊髓神经元具有保护作用.     

大鼠脊髓背根神经节神经元的纯化培养

目的：建立一种简单、稳定、高效的大鼠脊髓背根神经节神经元原代纯化培养方法。方法：取新生SD大鼠的脊髓背根神经节，采用胰蛋白酶消化法，制成单细胞悬液，加入阿糖胞苷以纯化细胞，培养于含10％胎牛血清与重组人胶质细胞源性神经营养因子的DFI2培养基中，观察神经元生长状况，用细胞计数和神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染色测定细胞纯度。结果：培养的脊髓背根神经节神经元生长状态正常，有神经突起生长和标记蛋白的表达，可达到90％左有的纯度。结论：本培养方法简单、稳定、高效，为对神经元进一步的深入研究提供了实验模型．     

Etanercept attenuates pain-related behavior following compression of the dorsal root ganglion in the rat

Purpose  

TNFα is an inflammatory mediator related to neuropathic pain including sciatica. Much basic research suggests that anti-TNFα therapy may be useful for the treatment of sciatica. The purpose of this study was to clarify the effects of etanercept in a dorsal root ganglion (DRG) compression model.     

神经病理性疼痛大鼠背根神经节神经元中小白蛋白的分布特征及表达变化

目的 观察神经病理性疼痛大鼠背根神经节(DRG)神经元中小白蛋白(PV)的分布特征及表达变化.方法 成年雄性SD大鼠42只,随机分为空白对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、CCI术后1、3、5、7、14 d组,6只/组.所有动物隔日进行热、机械痛觉过敏痛觉阈值测定,行为学测试完成后取出术侧L5 DRG作冰冻切片,用免疫荧光双标技术经PV单克隆抗体和MAP-2多克隆抗体检测PV神经元的分布特征和表达变化规律.结果 (1)与Control组和Sham组比较,CCI组大鼠分别于术后1、3 d出现明显的机械、热痛觉过敏(P＜0.05),术后7 d 50%机械缩爪阈值(50%PWT)和热缩爪潜伏期(PWL)均降至最低(P＜0.01),术后14 d有所恢复,但仍低于术前水平.(2)在正常大鼠L5DRG中仅有少量PV阳性神经元,多以大型、中型神经元为主,少数为小型神经元.PV阳性神经纤维交织成网环绕在PV阴性神经元的胞体周围.(3)手术侧PV阳性神经元数目在CCI 1、3 d未见明显改变.在术后5、7 d明显减少(P＜0.05),术后14 d恢复至正常水平(P＞0.05).结论 CCI模型大鼠DRG中PV的表达水平呈时间依赖性改变,这种改变与疼痛行为学变化在时相上基本保持一致,因此推测外周感觉神经元中PV表达下降可能参与神经病理性疼痛的发展过程.