荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎HBV—DNA的临床应用

目的探讨血清HBV-DNA检测在慢性乙型肝炎病程中的临床价值及重叠HCV感染时的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测89例慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含量及与血清乙肝标志物的检测结果相比较。结果89例慢性HBV感染者中最高为3.65×108cop ies/m l,6例阴性。全部病例若按<105、105~107、>107等将病毒量分为低、中、高三度,则低滴度占16.87%、中滴度占56.63%和高滴度占26.50%。HBeAg阳性的慢性肝炎及ASC病毒血症水平较高,抗-HBe阳性的慢性肝炎及肝硬化病人血清HBV-DNA水平较低;重叠HCV感染者血清HBV-DNA水平显著低于单纯HBV感染者。结论HBV-DNA定量可作为估计肝脏炎症程度的间接指标并指导抗病毒治疗时机的选择。     

3种HBV DNA荧光定量PCR试剂检测结果比较

目的 比较及评价3种HBV-DNA荧光定量PCR试剂检测结果的差异.方法 同时用3种HBV-DNA荧光定量PCR试剂对已知结果的质控血清、标准品及本院79份HBsAg阳性的临床标本进行检测,并对检测结果进行比较分析.结果 试剂A、B、C检测阳性率分别为41.77%(33例)、45.57%(36例)和41.77%(33例).3种方法结果一致者66例,总符合率83.54%.试剂A、B与试剂C检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05),试剂A与B检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05).试剂A与C的灵敏度、特异性均为77.78%、88.37%;试剂B灵敏度为89.66%、特异性80.00%.结论 试剂A与B总体性能优于试剂C,适于临床检测与筛查.实验室必须选择质量好且符合自己实验室要求、与本实验室仪器相匹配的试剂以保证检验质量.     

荧光定量PCR检测HBV DNA与乙型肝炎病毒标志物的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）的检出情况及与乙型肝炎病毒标志物的关系。方法：采用荧光定量－聚合酶链反应（FQ－PCR）技术检测273例患者血清中HBV DNA含量，同时用ELISA法检测乙型肝炎病毒五项标志物。结果：273例患者血清中，BHV DNA的阳性率与乙型肝炎病毒标志物不同组合之间有差异，HBsAg /HBeAg HBcAb 和HBsAg /HBeAg 组的阳性率明显高于其它组，分别达97．52％（118／121）和100％（9／9）；HBsAg /HBeAb /HBcAb 组的阳性率为61．33％（46／75）；HBsAg /HBcAb 组的阳性率为66．67％（20／30）；其它组也有HBV DNA检出，其中HBsAb 组的阳性率达15．38％（2／13）。结论：用ELISA法检测乙型肝炎病毒五项标志物来判断肝脏中HBV是否复制及有无传染性是浼铁，容易造成漏诊，应同时用荧光定量PCR检测HBV DNA才能更准确地反映体内HBV复制的情况。     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的临床意义

目的 探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA在乙型肝炎的诊断、治疗及判断病情、预防 等方面的临床应用价值。方法 运用荧光定量PCR和ELISA法同时检测了180例乙型肝炎患者和56 例正常献血员血清中HBV-DNA的含量及其免疫标志物,并对结果进行了对比分析。结果 乙肝大 三阳患者HBV-DNA阳性率达100％(95／95),显著高于其他各组(P<0．01),HBV-DNA含量平均 为4．8×10~7copy／ml;小三阳患者HBV-DNA阳性率低于大三阳组(P<0．01),但平均病毒含量与大 三阳组无差异(P>0．05),高达2．1×10~7copy／ml;单独HBsAg阳性和单独HBsAb阳性组HBV- DNA阳性率分别为54％、33％,平均病毒含量分别为5．6×10~5copy／ml、3．8×10~4copy／ml;56例献血员 血清仍有3例HBV-DNA阳性,其病毒含量低于其他组。结论 荧光定量PCR检测HBV-DNA含 量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,这对临床上抗病毒药 物的选择和判断疾病的预后意义重大。     

乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测的乙型病毒DNA与乙肝病毒标志物之间的关系。方法 362例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的检测,按照不同的乙肝病毒标志阳性情况分级后,进行乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物的分析研究。结果 乙肝病毒标志物HBsAg HBeAg HBcAb阳性组HBV DNA阳性率97.7%,拷贝数在10^4-10^8之间;HBsAg HBeAb HBcAb阳性组阳性率56％,拷贝数在10^2－10^7之间;HBsAg HBcAb阳性组阳性率54％,拷贝数在10^2－10^7之间;HBsAg HBeAg组阳性率100％,拷贝数在10^7之间;HBeAb HBcAb组3例,有1例阳性,拷贝数10^2;HBsAb组阳性率14.3%,拷贝数在10^3－10^7之间;189例全阴性有2例阳性（1.06%）,拷贝数在10^4－10^5之间。结论 HBV DNA在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大,从1.06%－100％;HBV DNA乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV DNA阳性率及拷贝数较高;HBsAg及其抗体阳性者仍可检出HBV DNA,说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断病人是否具有传染性是不够的。     

实时荧光定量PCR检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果的关系

目的:探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果的关系.方法:采用实时FQ-PCR和ELISA方法分别对240例乙肝患者进行HBV DNA定量测定和HBV M检测.结果:240例HBsAg阳性血清中HBV DNA阳性率为74.58%.HbsAg、HbeAg、HBcAb和HbsAg、HbeAg阳性组的HBVDNA含量及HBV DNA阳性率均明显高于HbsAg、HbeAb、HBcAb和HbsAg、HBcAb组(P＜0.05,P＜0.01).122例HBeAg阳性的血清中97.54%的HBV DNA阳性;118例HBBeAg阴性的血清中有50.85%HBV DNA阳性.结论:实时FQ-PCR检测HBV DNA准确灵敏,是HBV感染及复制的直接证据.HBV M和HBV DNA的检测各有其独特的临床检测意义,在乙型肝炎的诊断治疗中均具有重要的临床价值.     

荧光定量PCR与普通PCR检测HBV DNA的对照分析

目的 比较普通PCR（CommonPCR）和实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测人血清HBVDNA结果之间的相互关系,为临床提供最有效的诊断方法。方法 对117例份清标本用两种方法同时进行检测,分析其相关性,比较其差异。结果 荧光定量CPR不仅能几乎100％检测出普通PCR阳性的标本,还能在其阴性的76份标本中检测出36份阳性,其拷贝数均在较低水平。在不同的血清标志物模式下,定量方法的阳性率均明显高于定性方法。结论 荧光定量PCR具有一定优势,尤其适合于使用抗病毒药物的病人的疗效观察和病情预测。     

乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR检测的临床应用

乙型肝炎病毒 (HBV)DNA是反应HBV复制的最直接、最可靠指标。在评价治疗乙型肝炎药物的疗效与预后判定方面 ,HBVDNA的检测具有至关重要的作用[1] 。目前定量核酸检测方法可以对病毒核酸进行相对的定量检测 ,但检测方法有很多。近年来发展起来的荧光定量聚合酶链反应 (Fluo rescencequantitativePCR ,FQ -PCR) [2 ] 不仅可以避免常规PCR扩增产物易污染而导致的假阳性 ,简化操作 ,还可以给出HBVDNA体内复制的定量结果 ,为临床正确诊断和及时采取恰当的治疗措施提供依据[3 ] 。为此我们采用FQ -PCR对 337例肝炎患者进行HBVDN…     

荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制

目的研究讨论荧光定量PCR对乙肝DNA检测分析前的质量控制,总结分析其质量控制方式。方法对乙肝DNA试剂进行荧光定量PCR检测,通过标本溶血、抗凝剂种类、实验污染、实验设施和机器设施的应用等方面,研究讨论在分析前实施质量控制会不会对荧光定量PCR检测乙肝DNA带来影响。结果溶血40例乙肝DNA阳性标本之后,溶血之前和溶血之后乙肝DNA结果的对数在进行配对技术资料Kappa的检测,Kappa的数值为1.958,P<0.05;对22例乙肝DNA阳性患者实施血清组分别与肝素抗凝血浆组以及EDTA-K,对抗凝血浆组做出对比与分析,分别得出Kappa的数值为4.679(P<0.01)和0.719(P>0.05)。结论要使荧光定量PCR对乙肝DNA的检测得到良好的结果,必须预防互相污染与环境污染,对校准所使用的仪器加强管理。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床价值

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的临床价值.方法用FQ-PCR检测860份血清标本中HBV-DNA含量,同时用ELISA法检测乙肝血清学指标,即两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb).结果HBsAg( )HBeAg( )HBcAb( )组(大三阳),HBV-DNA阳性率为97.00%,HBV-DNA平均含量为7.34±0.73;HBsAg( )HBeAb( )HBcAb( )组(小三阳),HBV-DNA阳性率37.93%,HBV-DNA平均含量为4.36±1.34;HBsAg( )HBcAb( )组,HBV-DNA阳性率为61.11%,HBV-DNA平均含量为4.82±1.47;HBsAg( )HBeAg( )组,HBV-DNA阳性率为100%,HBV-DNA平均含量为7.03±0.83;HBsAb( )HBeAb( )HBc( )模式HBV-DNA也有低水平复制.结论荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及抗病毒治疗效果方面具有较大的价值.     

荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义

目的：分析386例以荧光定量PCR法检测的HBV-DNA结果,以探讨其临床价值。方法：血清标本同时以酶免法检测乙肝两对半,以荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果：大三阳模式中HBV-DNA定量阳性率为95.5%,拷贝数为（4.32±1.63）×10^6/ml;小三阳模式中HBV-DNA定量阳性率为55.5%,拷贝数为（2.45±2.23）×10^5/ml;HBsAg、HBcAb阳性模式中HBV-DNA定量阳性率为35.7%,拷贝数为（6.74±1.18）×10^4/ml;HBsAg、HBeAg阴性模式中HBV-DNA定量阳性率为3.84%,拷贝数为（2.14±1.11）×10^4/ml。结论：荧光定量PCR法检测HBV-DNA可以直接反映体内乙肝病毒（HBV）感染状态及病毒载量情况,有利于判断疾病的严重程度和传染性,更有利于临床治疗的药物选择和疗效观察。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒

聚合酶链反应 (PCR)是目前检测血清中 HBV- DNA的最敏感方法 ,但 PCR只能定性分析 ,无法给出临床需要的定量结果 ,其最终产物需用电泳法检测 ,易引起 PCR产物的交叉污染 ,且操作繁琐 ,不利于进行大规模样品分析。本文采用实时荧光定量 PCR方法 (PCR,FQ- PCR) [1 ] 测试了 2 0 1份血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)进行对照 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　标本来源 :收集本院病房及门诊确诊或怀疑乙肝患者血清 171份 ,健康献血员血清 30份。1.2　仪器 :PE770 0自动荧光 PCR仪 (美国 Perkin Elmer公司 )和日立…     

血清乙肝DNA荧光定量PCR测定的临床应用

目的　了解乙型肝炎患者血清标志物 (即两对半 )与乙型肝炎病毒核酸定量之间的关系。方法　用ELISA法检测 45 1例乙型肝炎患者两对半同时荧光定量聚合酶链反应〔FQ -PCR〕检测技术HBVDNAL浓度 ,并对其结果进行分析比较。结果　多种两对半结果模式均检测到HBVDNA ,其中乙型肝炎大三阳患者血清HBVDNA检出率为 97.5 % ,平均拷贝数为 3 .0 6× 10 4 copies/L ;小三阳患者血清HBVDNA检出率为 63 .3 % ,平均拷贝数为 7.0 1× 10 3copies/L。结论　传统的两对半检测并不能正确反映乙肝患者的病情发展状况 ,同时进行乙型肝炎血清标志物的检测及HBVDNA的定量PCR检测 ,更有利于临床对HBV感染的诊断、对治疗方案的选择及疗效判定     

ALT、两对半与荧光定量检测HBV-DNA的相关性研究

目的探讨ALT、乙肝两对半、荧光定量检测HBV-DNA之间的关系及临床意义。方法对598份血清标本同时作HBV-DNA、两对半、ALT的检测,对结果加以相关性分析。结果228例乙肝大三阳患者血清HBV-DNA阳性率为96%,ALT异常率为46.1%;200例乙肝小三阳患者血清HBV-DNA阳性率为35%,ALT异常率为18%;除22例单纯抗-HB s（＋）者HBV-DNA为阴性外的其余各组HBV-DNA均有不同程度的阳性率;大三阳组ALT异常率高于小三阳组（χ^2=37.95,P=0.000）。但大三阳、小三阳与HBV-DNA的阳性显示有一致性。结论两对半只能在一定程度上反映患者有无HBV病毒复制及传染性,单纯性抗-HB s（＋）者不必作HBV-DNA检验,两对半的其余四项中的任意一项或几项阳性均应采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA才能反映患者体内HBV的复制情况。ALT反映的是肝脏功能的损害,ALT、两对半、HBV-DNA反映疾病的不同方面,对于乙肝患者来讲三者都应检查,对诊断、治疗及疗效判断则更具有价值。     

荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌DNA的应用价值

目的:评价荧光定量PCR技术在痰结核分枝杆菌DNA检测中的应用价值,为临床检测提供依据。方法:对2011年7月-2013年8月在我院住院治疗的78例结核病患者,采取荧光定量PCR、抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养三种方法对患者的同一份痰标本进行检测,比较分析检测差异。结果:荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌的效果明显优于抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养检测,荧光定量PCR检测的阳性率最高,为73.1%。结论:应用荧光定量PCR技术检测痰结核分枝杆菌DNA操作简单、诊断快捷、灵敏度较高,可作为结核病的常规诊断方法,值得在临床推广应用。     

荧光定量PCR在乙肝检测中的应用

目的 :探讨 5‘ -核酸酶法荧光定量技术在乙肝检测中应用状况。方法 :采用荧光定量PCR方法 ,检测2 0份阳性对照考核批内及批间变异 ;采用 5 0份HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAg(+)的血清 ,结合肝功能及HBeAg滴度考核阳性率、病毒含量范围以反映病毒复制状况 ;对 5份本法检测阳性的标本 ,4℃保存 ,并隔日检测 ,确定最佳检测时间。结果 :批内CV为 4 1 % ,批间CV为 4 0 %。阳性标本为 4 6份 (92 % ) ,其中 4份肝功能正常 ;阴性标本为 4份 (8% ) ,其中 1份肝功能异常。病毒量有较大的变化范围 ,从 0 .1 1× 1 0 4～ 5 .1× 1 0 4CID/ml。阳性标本所测病毒量与HBeAg滴度相关系数为 0 .77。在 1 5d内隔日所测病毒量相近。结论 :本法应用于乙肝检测 ,有较好的特异性 ;定量结果能够反映病毒在体内的复制状况 ;病毒含量因患者而异 ;在严格操作条件下 ,本法有一定的重复性 ;正确保存标本时 ,在半月内均可以检测病毒     

荧光定量PCR检测220例乙肝病毒DNA结果分析

目前,临床常用ELISA方法进行HBV-M的检测和PCR方法进行HBV-DNA的定性检测来判断HBV的感染或疗效。而传统的定性PCR由于它的易污染、假阳性高、操作者要接触强致癌物等缺点,正逐渐地被荧光定量聚合酶链反应(FQ-DNA)替代。我们采用FQ-DNA法和ELISA法对照检查了220例标本,以研究两     

荧光定量PCR及斑点杂交检测HBV DNA与血清HBV标志物的关系

目的　比较荧光定量PCR和斑点杂交检测血清HBVDNA与血清HBV标志物 (HBVM )的相互关系。方法　采用荧光定量PCR(FQ -PCR)、斑点杂交和酶联免疫吸附法 (ELISA)同时检测 2 13份肝炎患者血清 ,并对结果进行分析比较。结果　 2 13份肝炎患者血清中FQ -PCR及斑点杂交法检测HBVDNA阳性数分别为 12 5例、80例 ,阳性检出率分别为 58.7%和 3 7.6% ,2种方法阳性检出率有显著性差异 (P <0 .0 5)。除HBsAg、HBeAg阳性组和HBsAb阳性组FQ -PCR和斑点杂交HBVDNA阳性检出率相同外 ,其余各组FQ -PCRHBVDNA检出率明显高于斑点杂交 (P <0 .0 5) ,HBeAg阳性 2组的 2种方法HBVDNA检出率明显高于HBeAg阴性各组 (P <0 .0 5)。随着FQ -PCR检测HBVDNA拷贝数的增加 ,斑点杂交法阳性检出率也明显增加。结论　FQ -PCR和斑点杂交法检测HBVDNA均可直接反映乙肝患者HBV感染、复制及病程变化 ,而FQ -PCR能真实地反映病毒的负荷量 ,对乙肝临床诊断及抗病毒治疗疗效观察较斑点杂交与HBVM更具有指导意义     

荧光定量检测HBV DNA与乙肝两对半结果对比分析研究

目的为了对乙肝患者体内HBV复制及传染性有更直接地了解,亦更有利于对临床HBV感染的诊断、治疗方案的选择及疗效判定.方法运用荧光定量PCR(FQ-PCR)和ELISA两种方法同时检测了310份肝炎患者血清,并对结果进行了对比分析.结果乙肝大三阳患者血清HBV DNA检出率为92.5%(74/80),平均拷贝数为4.10×1010/ml;小三阳患者血清HBV DNA检出率为32.35%(22/68),平均拷贝数为1.31×109/ml;HBsAg(+)、HBcAb(+)组血清HBV DNA检出率为45.71%(32/70),平均考贝数为4.08×108ml;HBV-M全阴性组血清HBV DNA检出率仍达6.67%(2/32),平均拷贝数仍达1.54×108/ml.结论HBV-M阴性患者仍有HBV DNA阳性者,因此对临床HBV感染、复制及传染性的判断以及指导治疗,除乙肝二对半标志物ELISA检测外,加做HBV DNA FQ-PCR检测同样具有重要意义.