3-硝基丙酸对沙土鼠海马CA1区锥体细胞超微结构的影响

目的观察小剂量3-硝基丙酸(≤20mg/kg)对沙土鼠海马CA1区锥体细胞超微结构的影响.方法将沙土鼠腹腔注射不同剂量3-硝基丙酸或双蒸水后3d,取海马CA1 区用戊二醛和锇酸固定,电镜下观察CA1区锥体细胞层神经元细胞核和细胞器超微结构形态变化,用体视学方法计算每张照片线粒体和粗面内质网体面积变化.结果实验组与对照组比较细胞核无明显变化,线粒体和粗面内质网轻度肿胀,体密度高于对照组.结论小剂量3-硝基丙酸可引起神经元缺氧代偿性反应,无致死性损害.     

赛拉嗪对麻醉大鼠海马CA1区乙酰胆碱含量的影响

应用乙酰胆碱选择性微电极技术,观察到小剂量赛拉嗪(2.0和6.0mg·kg^-1)可显著增加大鼠海马CA1区ACh的含量,而大剂量赛拉嗪(10.0mg·kg^-1)及咪唑克生(0.6mg·kg^-1)则作用相反。咪唑克生虽可明显拮抗赛拉嗪的作用,但海马CA₁区ACh的含量仍显著低于正常水平。在去兰斑核的大鼠上,赛拉嗪(2.0和6.0mg·kg^-1)及咪唑克生(0.6mg·kg^-1)分别对海马CA₁区ACh的含量具有减少和增加作用,且咪唑克生拮抗赛拉嗪的作用后,海马CA₁区ACh的含量基本恢复至正常水平。结果提示,赛拉嗪对麻醉大鼠海马CA₁区ACh含量呈双相性影响,咪唑可生虽能显著拮抗赛拉嗪的作用,但海马CA₁区ACh的含量仍明显低于正常水平,可能分别与赛拉嗪和咪唑克生降低或提高中枢NE能系统的功能有关。     

3-硝基丙酸预处理诱导沙土鼠脑缺血耐受与海马星形胶质细胞的激活

目的：探讨海马区星形胶质细胞的激活与3－硝基丙酸（3－NPA）预处理诱导脑缺血耐受的关系。方法：阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型，通过HE染色和免疫组化观察海马锥体细胞死亡和星形胶质细胞的反应。结果：对照组海马CA1区已失去正常结构，锥体细胞大部分丧失，存活神经元计数显低于假手术组。3－NPA预处理组存活神经元减少，但高于对照组，假手术组海马CA1区仅见少量胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞，染色较弱，突起不明显，对照组海马CA1区GFAP阳性细胞增多，多为弱阳性。3－NPA预处理组海马CA1区GFAP阳性细胞数目明显增多，染色较深，突起增粗。结论：星形胶质细胞形态和机能的改变可能与3－硝基丙酸预处理诱导脑缺血耐受有关。     

中药复方脑还丹对快速老化鼠SAM-P/8海马CA1区超微结构的影响

目的探讨中药复方脑还丹对快速老化鼠海马CAl区超微结构的影响。方法3月龄雄性SAM/P 8小鼠30只,随机分成对照组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组,分别给予生理盐水及不同剂量中药复方脑还丹灌胃治疗4月,取海马制作电镜标本,透射电镜观察海马CAl区神经元超微结构。结果对照组脂褐素增多,溶酶体数目增多且空化,粗面内质网偶有扩张或膜结构断裂,核糖体数目明显减少,线粒体数目减少,线粒体肿胀、核膜增厚,嵴断裂或萎缩成中空状,细胞核核膜模糊, 核周池不清,染色质呈凝聚样改变,核周空泡明显。脑还丹组上述变化明显减轻。结论脑还丹能够减轻神经元退行性变化。     

APP17肽对D-半乳糖脑老化模型小鼠海马超微结构的影响

目的　观察APP17肽 (App17p)对D 半乳糖 (D gal)脑老化模型小鼠海马超微结构的影响。方法　用D gal制造小鼠脑老化模型 ,并皮下注射APP17p ,8wk后取小鼠海马CA1区进行电镜观察。结果　①D gal组小鼠海马神经元轴索微管结构出现明显溶解 ;线粒体数量多于APP17p +D组 ,但差异无显著性 ;线粒体肿胀并有空泡变性 ,电子密度增高 ;核糖体及粗面内质网明显减少 ;神经毡中突触明显减少 ,与APP17p +D组相比 (P <0 0 5 ) ;海马神经元的结构未发现异常变化。②APP17p +D组小鼠海马神经元轴索中微管结构正常 ,微丝清晰 ;线粒体膜及结构正常 ,线粒体脊清晰 ;粗面内质网、核糖体丰富 ;神经毡中突触增多 ,突触内可见大量清亮突触小泡。结论　D gal能引起小鼠海马超微结构异常 ;APP17p对此有防治作用     

中药复方脑还丹对快速老化鼠SAM-P／8海马CAl区超微结构的影响

目的 探讨中药复方脑还丹对快速老化鼠海马CAl区超微结构的影响。方法3月龄雄性SAM／P18小鼠30只，随机分成对照组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组，分别给予生理盐水及不同剂量中药复方脑还丹灌胃治疗4月，取海马制作电镜标本，透射电镜观察海马CAl区神经元超微结构。结果对照组脂褐素增多，溶酶体数目增多且空化，粗面内质网偶有扩张或膜结构断裂，核糖体数目明显减少，线粒体数目减少，线粒体肿胀、核膜增厚，嵴断裂或萎缩成中空状，细胞核核膜模糊，核周池不清，染色质呈凝聚样改变，核周空泡明显。脑还丹组上述变化明显减轻。结论脑还丹能够减轻神经元退行性变化。     

亚硒酸钠对沙土鼠海马CA1区神经元缺血/再灌注损伤的影响

目的探讨亚硒酸钠对沙土鼠海马CA1区神经元缺血/再灌注损伤的影响。方法采用夹闭双侧颈动脉法制备沙土鼠前脑缺血/再灌注模型,双重染色,电镜下观察各组海马CA1区神经元的超微结构变化。TUNEL染色光镜下观察和计数凋亡神经元,计算凋亡密度。结果硒处理组沙土鼠脑缺血/再灌注后,神经元超微结构的病理形态损伤减轻,凋亡细胞减少,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血/再灌注损伤的海马CA1区神经元超微结构及凋亡细胞具有保护作用。     

低浓度七氟烷对SD大鼠胎鼠海马的影响

摘 要 目的：探讨慢性低浓度吸入七氟烷对雌性小鼠胎鼠海马的影响。方法: 选用9周龄雌性SD大鼠60只,体质量240～260 g,随机分为对照组和30,100,300 mg·L^-1七氟烷组,每组15只。七氟烷组每天吸入对应浓度七氟烷6h,对照组吸入等量空气,连续吸入2周。然后将各组大鼠交配受孕成功后吸入同样浓度七氟烷或空气至受孕19 d处死,取胎鼠大脑一半制备石蜡标本,免疫组化法检测海马CA₁区凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax;另一半剥离海马制备成10％匀浆,测定超氧化物歧化酶（SOD）活性水平和丙二醛（MDA）含量。 结果: 300 mg·L^-1七氟烷组雌鼠胎鼠海马CA₁区Bcl-2明显低于对照组,Bax则明显高于对照组,SOD明显低于对照组,MDA明显高于对照组（P<0.05）。30 mg·L^-1组和100 mg·L^-1七氟烷组与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:低浓度吸入高于300 mg·L^-1的七氟烷可能通过增加SD大鼠胚胎大脑的氧化应激反应,产生过多的MDA,SOD减少,从而增加海马的细胞凋亡。     

四逆散对创伤后应激障碍所致睡眠障碍大鼠海马超微结构的影响

目的研究中药复方四逆散对创伤后应激障碍大鼠海马超微结构的影响。方法按照随机数表法将SD雄性大鼠随机分为5组,每组10只:空白对照组、模型组、阴性对照组、阳性对照组、实验组。除空白对照组外,其余4组动物均复制应激模型。模型组和空白对照组的大鼠饮食正常。于造模前1 h,阴性对照组的大鼠灌胃0.9%Na Cl;阳性对照组的大鼠灌胃盐酸帕罗西汀溶液4.2mg·kg^-1;实验组的大鼠灌胃四逆散水煎液2.41 g·kg^-1。灌胃容积10m L·kg^-1,每日灌胃1次,连续给药7 d。造模结束后,各组大鼠立即进行心脏灌注,采集海马组织,于30000倍电镜下观察并比较各组大鼠海马CA1、CA3区超微结构的差异性。结果空白对照组的海马CA1和CA3区的神经元细胞器丰富,线粒体圆形或长杆状,线粒体嵴结构清晰,粗面内质网呈条索样分布,核糖体丰富,高尔基复合体常见。模型组与空白对照组比较,细胞器明显损伤,细胞质结构空旷,线粒体肿胀,线粒体膜及嵴结构消失,粗面内质网池样扩张,提示幽闭电击对大鼠海马区神经元内细胞器产生明显损伤。阴性对照组与模型组比较,变化与其相似,提示0.9%Na Cl灌胃对大鼠没有明显的应激影响;而阳性对照组和实验组的海马区神经元细胞质内细胞器结构明显恢复,2组结构基本相似,提示盐酸帕罗西汀和四逆散均能明显改善PTSD大鼠海马区神经元细胞器结构。结论四逆散可以明显改善创伤后应激障碍大鼠海马CA1和CA3区神经元细胞器结构。     

人参皂苷Rb1可能通过CDK5途径减轻Aβ25-35诱导的胎鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化

观察人参皂苷Rb1对Aβ_25-35诱导的海马神经元tau蛋白过度磷酸化的影响，并探讨其对周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase 5，CDK5)及激动亚基p25/p35的可能作用。通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测胎鼠海马神经元tau蛋白在Thr²⁰⁵、Ser³⁹⁶和Ser⁴⁰⁴位点的磷酸化水平，及CDK5的两个亚基cdk5和p25/p35的蛋白水平。20 μmol·L^-1凝聚态Aβ_25-35作用于海马神经元12 h，可使海马神经元tau蛋白在Thr²⁰⁵、Ser³⁹⁶和Ser⁴⁰⁴位点的磷酸化水平增高，p25的数量增多，但并不影响cdk5亚基的表达。人参皂苷Rb1可减轻凝聚态Aβ_25-35诱导的海马神经元tau蛋白的过度磷酸化，抑制p35的降解并减少海马神经元p25的生成。人参皂苷Rb1可能通过CDK5途径减轻Aβ_25-35诱导的胎鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化。     

联合应用巴曲酶和依达拉奉对沙土鼠缺血再灌注后神经元凋亡的影响

探讨联合应用巴曲酶和依达拉奉对沙土鼠缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡的影响。以阻断沙土鼠双侧颈总动脉5min造成前脑完全缺血再灌注模型,并将其随机分为假手术组、对照组、巴曲酶组、联合治疗组。在不同时间点分别腹腔注射生理盐水、巴曲酶、巴曲酶和依达拉奉后,用原位末端标记法染色以及电镜下观察沙土鼠海马CA1区凋亡细胞,并在光镜下计算海马CA1区的神经元凋亡率。联合使用巴曲酶和依达拉奉后海马CAl区细胞凋亡率明显减少,与对照组及巴曲酶组比较P<0.05;海马CAl区细胞凋亡率在巴曲酶组0～24h时间点之间比较P>0.05,在0～24h时间点与48～72h时间点比较P<0.05;海马CAl区细胞凋亡率在联合治疗组0～48h时间点之间比较P>0.05;在0～48h时间点与72h时间点比较P<0.05。电镜下显示对照组海马CA1区锥体细胞的线粒体肿胀,胞核固缩,核形态异常。巴曲酶组的海马锥体细胞病变较对照组轻。联合治疗组海马锥体细胞病变较巴曲酶组更轻。联合应用巴曲酶和依达拉奉较单独使用巴曲酶可明显减少脑缺血再灌注后神经元细胞的凋亡。而且在48h内仍有较好的脑保护作用。     

转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤

目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。     

葛根素对D-半乳糖致衰老小鼠记忆行为和海马突触结构的影响

目的探讨葛根素对D-半乳糖致衰老小鼠记忆行为的影响及其脑内突触机制。方法用开场行为和Y-迷宫分辨学习记忆行为分别检测ip不同剂量葛根素后衰老模型小鼠自发活动和学习记忆行为的变化,然后用电镜和计算机图象分析仪观测小鼠海马CA₃区Gray I型突触界面结构参数的变化。结果葛根素60 mg·kg^-1可显著增加D-半乳糖致衰老小鼠在新异环境中的自发活动和探究行为,显著提高其学习记忆能力；同时使衰老小鼠海马突触后致密物质(PSD)厚度显著增加,突触间隙宽度显著减小。结论葛根素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用可能与其改变海马突触界面结构有关。     

左旋千金藤啶碱抑制Tau蛋白过度磷酸化改善帕金森病认知症状的相关机制研究

目的 探讨左旋千金藤啶碱改善帕金森病（Parkinson disease,PD）认知症状的功能与Tau蛋白磷酸化程度之间的关系。方法 将150只大鼠随机分为空白对照组、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine hydrochloride,MPTP）组及给药组,每组50只。用MPTP建立PD大鼠模型。先测定各组大鼠的体质量,然后通过水迷宫对大鼠的逃避潜伏期、游泳时间百分比以及海马锥体细胞顶树突分支数目和直径进行比较。对大鼠海马神经元进行采集,通过酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法对Tau蛋白的磷酸化程度进行计算。最后对大鼠的海马组织进行采集,利用流式细胞仪对大鼠海马神经元的凋亡率进行测定。结果 与对照组相比,MPTP组的体质量、游泳时间百分比、锥体细胞顶树突分支数目、海马P-Tau蛋白表达明显降低（P<0.05）,逃避潜伏期明显延长（P<0.05）,脑外伤海马神经元细胞的凋亡率明显升高（P<0.05）;与MPTP组相比,给药组体质量、游泳时间百分比、锥体细胞顶树突分支数目、海马P-Tau蛋白表达明显升高（P<0.05）,逃避潜伏期、脑外伤海马神经元细胞的凋亡率明显降低（P<0.05）。结论 左旋千金藤啶碱对PD模型大鼠具有保护作用,抑制Tau蛋白的过度磷酸化是左旋千金藤啶碱保护神经元的可能机制。     

慢性孵育β淀粉样肽25-35对培养大鼠海马神经元电压依赖性外向钾通道亚型mRNA表达的影响

目的研究慢性孵育β淀粉样肽_25-35(β-AP_25-35)对海马神经元电压依赖性外向钾通道亚型mRNA表达的影响。方法用RT-PCR方法检测mRNA的表达,用光密度扫描法半定量测定表达变化。结果在正常培养的海马神经元上延迟整流(Kv2.1,Kv1.5),瞬间外向(A型)(Kv4.2,Kv1.4),钙激活的大电导(rSlo)钾通道亚型均有表达。β-AP_25-35 3 μmol·L^-1孵育细胞24 h后,Kv2.1 mRNA的表达明显上调,其它亚型则无显著性变化;β-AP_25-35上调Kv2.1 mRNA的作用主要发生在β-AP_25-35应用后48 h内;60 h后Kv2.1 mRNA表达水平显著下调。结论Kv2.1转录水平的上调可能参与β-AP_25-35选择性地增加海马神经元上延迟整流钾电流(I_K)的作用。     

雌激素对Kv2.1钾电流及大鼠海马神经元延迟整流钾电流的影响

目的研究17β-雌二醇对Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流的作用。方法采用HEK293-Kv2.1细胞培养、大鼠海马神经元原代培养和膜片钳全细胞记录技术。结果17β-雌二醇浓度依赖地抑制Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流(I_K)。17β-雌二醇抑制Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流的IC₅₀分别为2.4和4.0 μmol·L^-1。通道动力学研究发现，17β-雌二醇(3 μmol·L^-1)显著左移Kv2.1钾电流的稳态激活和失活曲线，但只显著左移海马神经元延迟整流钾电流稳态激活曲线，而不影响该电流的稳态失活曲线。结论17β-雌二醇抑制Kv2.1钾电流与抑制I_K的程度相近，17β-雌二醇抑制I_K的作用可能部分通过阻断Kv2.1钾电流而实现。     

氟哌啶醇对大鼠离体海马脑片和原代神经元缺糖/缺氧和N-甲基-D-天冬氨酸损伤的保护作用

目的观察氟哌啶醇对大鼠离体海马脑片和原代神经元的缺糖/缺氧(OGD)和N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)损伤的潜在保护作用及其机制。方法海马脑片OGD以无葡萄糖的人工脑脊液中通95% N₂+5% CO₂诱导。通过测定TTC染色后形成的红色产物来分析脑片活性。结果氟哌啶醇(1和10 μmol·L^-1)抑制OGD损伤,抑制率分别为17.7%和25%,而D₂多巴胺受体拮抗剂多潘立酮无此作用。NMDA也能显著降低海马脑片及原代神经元的活性,而氟哌啶醇可抑制这一损伤作用。结论氟哌啶醇对大鼠离体海马脑片OGD和原代神经元NMDA损伤有保护作用。     

他克林对培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流和瞬间外向钾电流的影响

目的研究他克林对培养大鼠海马神经元上延迟整流钾电流(I_K)和瞬间外向钾电流(I_A)的影响。方法 大鼠海马神经元原代培养,全细胞膜片钳记录培养大鼠海马神经元上电压依赖性外向钾电流和瞬间外向钾电流变化。结果他克林明显抑制海马神经元延迟整流钾电流和瞬间外向钾电流,呈浓度依赖性,对延迟整流钾电流的敏感性高于瞬间外向钾电流。30 μmol·L^-1他克林显著影响I_K和I_A稳态激活曲线,使所有电流的V_1/2左移。结论他克林明显抑制延迟整流钾电流和瞬间外向钾电流,对延迟整流钾电流的敏感性高于瞬间外向钾电流。     

清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染细胞超微结构改变影响的实验研究

目的观察清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒（RSV）感染后细胞超微结构改变的影响。方法制备清肺口服液含药血清,应用细胞培养技术,将培养的人胚肺成纤维细胞（Hep-2）分组,利用电镜观察呼吸道合胞病毒攻击后各组人胚肺成纤维细胞超微结构的变化。结果病毒攻击组细胞核增大,核质比增加,核仁凝聚,核膜凹陷成夹层,包涵体形成,线粒体凝聚,粗面内质网扩张,溶酶体增多,核染色质浓缩,细胞外可见病毒颗粒。含药血清感染时给药组细胞核大小基本正常,有的轻度增大,无核仁凝聚,无包涵体形成,粗面内质网形态正常,线粒体基本正常,偶有凝聚现象,细胞间很少找到病毒颗粒。含药血清感染后给药组细胞核增大,核仁凝聚,粗面内质网扩张,线粒体凝聚,但程度较轻。结论RSV感染人胚肺成纤维细胞后,细胞可出现超微结构的改变,清肺口服液含药血清可以减轻这种改变。感染时给药比感染后给药作用更明显。     

锌对染铅大鼠海马神经元亚细胞结构及突触参数的保护作用

目的　探讨铅对海马CA1 区亚细胞结构的损伤及锌的拮抗作用。方法　给Wistar大鼠饮用6 15mmol L醋酸铅(染铅组)及含3 10mmol L硫酸锌的上述溶液(铅锌组) ,喂养40d ,采用原子吸收法检测各组动物血铅和海马铅含量;电镜下观察各组动物海马CA1 区神经元及其突触的亚细胞结构变化;对照组饮用蒸馏水。每组10只动物。结果　与对照组和铅锌组相比,染铅组大鼠血铅和海马铅含量明显升高(P <0 0 5 ) ;染铅大鼠海马CA1 区神经元内的含粗面内质网、线粒体减少,有些已发生空泡化;染铅大鼠海马CA1 区放射层的含5 0个以上突触囊泡的突触结构明显减少(P <0 0 1)。而含10个以下囊泡的突触结构则明显增加(P <0 0 1)。突触前后膜面积均明显减小(P <0 0 1)。但铅锌组和对照组之间无明显差别。结论　锌对铅引起的大鼠海马CA1 区神经元亚细胞结构变化有拮抗作用。