异基因外周血造血干细胞移植后血型基因型与抗原的转变

目的 探讨异基因外周血造血干细胞移植(Allo—PBSCT)后患者ABO、Rh血型的转变在血液病移植治疗中的意义。方法 选择2例非血源关系的供、受者作为研究对象，采用基因分型与血清学方法检测移植前后ABO、Rh血型的表达，追踪移植后患者血型基因型与抗原的转变。结果 2例患者分别在移植后第7天与第10天检测到供者的A、Rh(c)基因，第7天与第15天不同程度地表达供者的ABO、Rh血型抗原。结论 观察ABO与Rh血型的转变可作为植入证明的检测方法之一，且直观、迅速。     

ABO血型不合外周血造血干细胞移植10例

背景:ABO血型不合供受者之间进行外周血造血干细胞移植,面临受者血型的转变、移植后输血的选择等问题.目的:观察ABO血型不合外周血造血干细胞移植治疗血液病的临床疗效和近远期并发症.方法:回顾性分析了2005/2008武警总医院收治的10例ABO血型不合异基因外周血同胞供者造血干细胞移植患者的资料.总结植入效果,血型转变,移植物抗宿主病以及不良反应.结果与结论:9例患者恢复造血功能,血型转变为完全供者型,1例患者白细胞血小板恢复,但红细胞植入延迟.所有患者在输注移植物时未出现短暂的血红蛋白尿,无严重急性溶血和迟发型溶血的发生,1例出现严重的移植物抗宿主病.可见ABO血型不合外周血造血干细胞移植对移植疗效无明显影响,红细胞植入延迟的预防和处理十分重要.     

ABO血型不合外周血造血干细胞移植10例

背景：ABO血型不合供受者之间进行外周血造血干细胞移植,面临受者血型的转变、移植后输血的选择等问题.目的：观察ABO血型不合外周血造血干细胞移植治疗血液病的临床疗效和近远期并发症.方法：回顾性分析了2005/2008武警总医院收治的10例ABO血型不合异基因外周血同胞供者造血干细胞移植患者的资料.总结植入效果,血型转变,移植物抗宿主病以及不良反应.结果与结论：9例患者恢复造血功能,血型转变为完全供者型,1例患者白细胞血小板恢复,但红细胞植入延迟.所有患者在输注移植物时未出现短暂的血红蛋白尿,无严重急性溶血和迟发型溶血的发生,1例出现严重的移植物抗宿主病.可见ABO血型不合外周血造血干细胞移植对移植疗效无明显影响,红细胞植入延迟的预防和处理十分重要.     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植对红系造血恢复的影响

本研究探讨ABO血型不合异基因造血干细胞移植对红系造血的影响。对16例ABO血型不合的造血干移植患者的ABO血型,IgM和IgG抗体进行监测。结果显示,16例ABO血型不合的造血干细胞移植患者均恢复造血功能,与ABO血型相合组比较,ABO血型不合组在粒细胞植活时间、血小板植活时间无差异,但红系重建时间明显延长;ABO主侧不合与双侧不合受者抗供者凝集素消失时间与红系恢复时间有相关性。结论 :ABO血型不合的异基因造血干细胞移植会导致红系造血迟缓。移植前用供型血浆置换法或输注供者红细胞来中和受者体内抗供者红细胞的凝集素能缩短红细胞植入时间,减少红细胞的输注。     

异基因骨髓移植后嵌合状态的研究进展

骨髓移植是许多血液系统疾病和免疫缺陷性疾病的有效治疗措施，移植成功与否与供细胞在受体内的植入状况即嵌合状态的形成有关。由于造血干细胞输入量、供和受T细胞量、预处理方案以及移植时患病情等因素的影响，可以形成不同形式的嵌合状态。如果受的骨髓或外周血中完全是供的细胞，则形成完全的供嵌合状态（CC）；当检测到供和受两种细胞成分时，则为混合嵌合状态（MC）。不同形式的嵌合状态，以及嵌合状态形式的不同演变趋势，其临床意义各不相同。检测嵌合状态的方法有多种，包括微卫星检测、染色体核型分析、血型转换、红细胞抗原、限制性片段长度多态性、可变数目串联重复序列以及现在最常用的PCR法。本从上述几个方面对嵌合状态研究的进展进行了综述。     

ABO血型不合对异基因造血干细胞移植的影响

目的:研究表明ABO血型不合的异基因造血干细胞移植是安全的,但仍可能出现血液免疫学并发症.以同期ABO血型相合的受者作对照,分析ABO血型不合对异基因造血干细胞移植后红系重建的影响.方法:①对象:选取解放军总医院1985-04/2006-04进行的异基因干细胞移植患者155例,ABO血型相合患者83例,ABO血型不合72例,包括主要不合32例,次要不合33例,主、次要双向不合7例.骨髓移植30例,外周血干细胞移植124例,骨髓 外周血干细胞移植1例.供受者对治疗均签署知情同意书,ABO血型相合与不合患者年龄、性别、原发病、疾病的缓解程度及预处理方案等基线资料差异均无显著性意义(P > 0.05).②实验方法:行骨髓移植,ABO血型相合患者在全麻状态下采髓量1 010~1 430 mL,抗凝后当日回输;ABO血型主要和双向不合者用羟乙基淀粉沉降去除供者红细胞,次要不合者去除血浆,经静脉输注给受体.行外周血干细胞移植,供者使用重组人粒细胞集落刺激因子进行干细胞动员后,采集的干细胞悬液当日直接输注给患者.外周血中性粒细胞≥ 0.5×109 L-1时为植活时间;血红蛋白达100 g/L为红系恢复的标准;血小板恢复指血小板稳定于20×109 L-1以上.纯红细胞再生障碍性贫血的诊断标准是移植后网织红细胞数量< 1%的时间超过60 d,骨髓穿刺红系前体细胞缺失.③实验评估:分析细胞移植后造血重建、无病生存率及主要并发症发生率情况.结果:①造血重建:细胞移植后,共4例发生纯红细胞再生障碍性贫血,其中ABO血型主要不合患者3例,双向不合患者1例.与ABO血型相合患者比较,ABO血型主要不合患者的粒细胞植活时间、血小板输注数量无明显变化(P > 0.05),红细胞输注量显著增加(P < 0.05),红系重建时间明显延长(P < 0.05);ABO血型次要不合、双向不合患者上述4项指标的变化差异均无显著性意义(P > 0.05).②无病生存率与主要并发症发生率:与ABO血型相合患者比较,ABO血型主要不合、次要不合、双向不合患者在细胞移植后1,3,5年的无病生存率均基本相似(P > 0.05);急性移植物抗宿主病发生率、巨细胞病毒感染率均基本相似(P > 0.05).结论:ABO血型主要不合的异基因造血干细胞移植后可出现纯红细胞再生障碍性贫血,从而导致红系造血恢复迟缓及红细胞输注量增加,但对髓系和巨核系造血恢复无影响,与主要并发症的发生率和生存率无关.     

STR-PCR分析嵌合体在同种异基因造血干细胞移植中的应用

利用荧光标记的多重PCR扩增短串联重复序列（STR-PCR）结合毛细管电泳检测供者细胞嵌合率（DC）,以探讨该方法的连续检测对异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后转归的预警作用,采集27例清髓性外周血干细胞移植患者移植前、移植后不同时段的外周血或骨髓,DNA样本用Profiler Plus和Cofiler Plus商品化试剂盒扩增后,用ABI310遗传分析仪进行毛细管电泳,确定基因位点及峰面积,根据基因型的差异选择嵌合率计算公式。结果表明：两种试剂盒测得的DC嵌合率一致;在27对中能区别出供受差别的STR位点,Profiler Plus为6.3（4-9）个,Cofiler Plus为4.9（2-6）个。26例患者均在移植后28天出现供者细胞,1例患者未出现供者细胞。14例患者DC100%,均获得持久植入,至今仍无白血病生存;另有9例患者出现不稳定混合嵌合（MC）状态（DC为0%-90.2%）,其中5例为血液学复发。27例病人中有6例死亡。上述5例复发患者均在出现临床症状前发生DC量下降;供者细胞完全嵌合组移植物抗宿主病（GVHD）的发生率高于MC组。结论：动态检测DC可用于移植动力学研究,对移植物早期植入或被排斥、疾病复发以及GVHD的发生均有预警作用,对早期实施临床干预治疗有重要的指导意义。     

ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集

目的研究ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集方法,探讨不去除红细胞和/或血浆进行造血干细胞移植的安全性。方法 29例异基因外周血干细胞移植供者与受者HLA配型为全相合或1～3位点不合,其中ABO主要不合13例,次要不合7例,ABO血型相合9例。采用CS-3000Plus血细胞分离机的干细胞采集程序对ABO血型不合供者的外周血造血干细胞进行采集,不去除红细胞和/或血浆,直接回输给受者。结果 ABO血型主要不合、次要不合及血型相合的供者每次采集的外周血干细胞(PBSC)产品终体积为(59.11±1.19)ml,单个核细胞(MNC)采集物、MNC比例、CD34+细胞、RBC含量三组间的差异无统计学意义。结论应用CS-3000Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者外周血造血干细胞,不仅对供者安全,而且采集产品中造血干细胞浓度较高,血型不合的红细胞污染较少,不需要去除红细胞和血浆,可安全地用于ABO血型不合的受者。     

主要ABO血型不合异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍

20例主要ABO血型不合异基因造血干细胞移植（allo-HSCT)患中，6例发生纯红细胞再生障碍（PRCA）。PRCA对中性粒细胞和血小板植入以及Ⅱ-Ⅳ度aGVHD并无影响。6例PRCA患血型均为O型，而供血型5例为A型，1例B型，提示供／受血型A／O是主要ABO血型不合allo-HSCT后PRCA发生的高危因素。4例除给予RBC输注无其它特殊治疗，随着凝集素滴度降至＜8，红系造血自然恢复，而另2例尽管给予重组人红细胞生成素（rhEPO）治疗红系再障仍持续＞300天，经供型血浆置换而红系恢复造血。在本组病例，环孢菌素在PRCA发生中并无作用，而GVHD发生则可促进红系造血恢复。     

异体ABO配合的外周血祖细胞移植后，出现多种包括抗-Di^b的红细胞抗体[英]／Zupanska B…／／Transfusion

背景ABO相容造血干细胞移植(HPCT)后，出现红细胞同种抗体的资料缺乏。病例报道一例32岁患慢性髓性白血病的白人男性，从未输过血，以BuCy120作移植前准备，接受了和患者HLA一致的姊妹的粒细胞集落刺激因子动员的外周血干细胞，应用了环孢素-A和甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病(GVHD)。移植后病人呈完全的植入嵌合，并发生3级急性GVHD及随后广泛的慢性GVHD。他在移植后第13天和14天接受了2单位红细胞，没有出现溶血。     

通用O型全血的初步研究

目的探讨冰冻干燥红细胞膜的制备技术及通用O型去除血型抗体全血的可行性。方法将A型及B型红细胞膜经过冰冻干燥处理后，加入O型全血中，经反应后测定血浆中血型抗体效价，并检测红细胞结构及功能，检测血浆中凝血因子活性变化。结果经过冰冻干燥处理后，红细胞膜仍具有抗原性，可有效降低血浆中的血型抗体效价，而全血中红细胞的变形指数、ATP含量与反应前差异无显著性，反应前后均在正常参考范围内；全血血浆中各种凝血因子活性在吸附前后比较，差异无显著性。结论尽管红细胞膜在体内是否产生大量抗体及其清除过程等尚需进行动物实验确定，但使用冰冻干燥红细胞膜制备通用型血液过程简便易行，具有进一步的研究价值。     

ABO血型对异基因造血干细胞移植患者植入的影响探讨

目的探讨ABO同型及3种ABO血型不合对异基因造血干细胞移植患者各系植入的影响,为患者优化移植方案提供依据。方法回顾性分析本院2014年1月~2018年6月期间进行异基因造血干细胞移植患者70例,ABO同型18例,ABO血型不合52例,在确保对比组患者年龄;性别;供/受者亲缘关系;疾病诊断;移植前骨髓造血功能状况;HLA相合情况无差异的情况下,对比分析患者粒系、红系、巨核系植入时间,移植后3个月内红细胞及血小板输注量,ABO血型不合的血型开始转化时间、转化完成时间等指标。研究以上指标在ABO同型及3种ABO血型不合移植中有无差异。结果 70例患者中,ABO同型18例,粒系植入时间12.0(11.0~16.3)d,红系植入时间41.5(35.0~49.0)d,巨核系植入时间19.0(16.0~22.5)d。ABO血型不合52例,移植后血型开始转化时间28.0(22.5~44.0)d,转化完成时间105.5(85.0~141.8)d,粒系植入时间14.5(12.0~16.0)d,红系植入时间61.0(39.5~85.0)d,巨核系植入时间23.0(18.0~31.0)d。ABO同型相较ABO血型不合(主要/主次要双向不合)异基因造血干细胞移植红系植入时间缩短(P<0.05),红细胞及血小板输注量减少(P<0.05),粒系、巨核系植入时间无显著性差异(P>0.05)。ABO血型主要不相合、次要不相合、主次要双向不合异基因造血干细胞移植中的血型转化时间,粒系、红系、巨核系植入时间,红细胞、血小板输注量均无差异(P>0.05)。结论异基因造血干细胞移植优先选择ABO同型供者,在缺乏同型供者情况下,优先选择次要不相合,其次主要不相合、主次要双向不合供者。     

Hemotherapy in patients undergoing blood group incompatible bone marrow transplantation

The management of hemotherapy in 31 cases of ABO- or Rh-incompatible bone marrow transplantation is described. Our experience confirms that ABO or Rh incompatibility does not adversely affect engraftment, patient survival, or incidence of graft-versus-host disease. Eighteen recipients with ABO antibodies against the donors' red cells (major incompatibility) were managed by different combinations of plasma exchange, transfusion of incompatible donor type red cells, and removal of donor-type red cells from the bone marrow before transplant. The only serious complication was delayed hemolysis in seven of nine patients who received incompatible red cell transfusions before transplant. Thirteen patients received bone marrow containing ABO antibodies against their red cells (minor incompatibility). Five were managed by centrifuging the bone marrow to remove plasma and reduce the amount of antibody. This did not cause substantial loss of stem cell activity (60-100% of original marrow), and no patients had complications related to the marrow transfusion. In contrast, two of seven patients who received uncentrifuged bone experienced hemolysis. Two of four Rh positive recipients who received marrow from an Rh negative donor developed anti-D, possibly due to Rh positive blood components transfused after transplantation. None of eight Rh negative patients who received an Rh positive transplant has developed anti-D. Blood components should be selected to avoid transfusion of incompatible red cells and to avoid transfusion of a large amount of incompatible plasma. This may necessitate use of plasma components of a different ABO type than the red cell components.     

肾-骨髓联合移植诱导免疫耐受:能够促进移植后嵌合体的形成吗?

背景:特异性的供者骨髓造血干细胞输注促进了嵌合体的形成,可以诱导器官移植免疫耐受.然而为达到细胞嵌合进行骨髓移植的预处理毒性大,发生移植物抗宿主反应的风险较高,人们开始寻找一些毒性更小的方案,其中包括免疫抑制剂联合骨髓输注等,尽管动物实验中已有诱导成功的耐受模型,但临床实用的诱导耐受方法则难以突破.目的:以嵌合体理论为基础,分析肾-骨髓联合移植诱导嵌合体形成与免疫耐受的相关性及安全性. 设计、时间及地点:对比观察,于1998-01/2005-12在郑州市第三人民医院泌尿外科完成.对象:根据ABO/Rh血型相同及HLA配型原则,将同期等待肾移植的96例女性慢性肾功能衰竭患者分为2组,每组48例.联合移植组患者接受尸体肾、骨髓联合移植;同期接受上述同一供者另一肾脏的尿毒症患者作为对照组.供者为48例健康男性.方法:供者在取肾的同时,采集骨髓加入细胞冷冻保养液,经细胞程序降温至-198 ℃液氮罐保存.移植后应用大剂量抗人T淋巴细胞免疫球蛋白诱导治疗2周,于肾脏移植后2周实施骨髓细胞回输,输注的单个核细胞数为(0.9～2.5)×10~8/kg.采用聚合酶链反应方法检测人性别决定基因SRY.抽血检测CD3,CD4,CD8,CD25,以酶联免疫吸附法测定血白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子β等血细胞因子质量浓度.主要观察指标:移植后于不同时间点对受体进行嵌合体、淋巴细胞亚群及细胞因子检测.随访观察两组受者的临床移植效果及并发症发生情况.结果:联合移植组嵌合体阳性率显著高于对照组(P < 0.05).随访3年,嵌合体阳性受者和嵌合体阴性受者排斥发生率差异具有显著性意义(13%,35%,P < 0.05).联合移植组呈现免疫抑制状态,未见移植物抗宿主病发生.结论:肾-骨髓联合移植能促进移植后嵌合体的形成,显著降低排斥反应发生率,是一种安全有效的诱导免疫耐受的方法.     

甲基纤维素体外分离骨髓移植物中红细胞的效果

“ABO”血型不合的骨髓移植和一部分自体骨髓移植 ,需分离骨髓移植物中的红细胞。本研究观察了用甲基纤维素分离移植物中红细胞的效果。用生理盐水配制的 0 .5 %甲基纤维素 (MC)与采集的骨髓移植物按一定比例混匀 ,静置 ,然后沉降红细胞。对 1 8份骨髓移植物分离的结果显示 ,单个核细胞和CD34+ 细胞回收率分别达(83 .8± 5 .2 ) %和 (90 .3± 7.2 ) % ,CFU GM产率为 (60 .8± 2 2 .4) / 2× 1 0 5个单个核细胞 ;红细胞残留率仅为 (4.3±1 5) %。结论 :此方法可用于骨髓移植     

Delayed massive immune hemolysis mediated by minor ABO incompatibility after allogeneic peripheral blood progenitor cell transplantation

BACKGROUND: Bone marrow transplantation with minor ABO incompatibility may be followed by moderate delayed hemolysis of the recipient's red cells by donor-derived ABO antibodies. This reaction may be more severe after transplantation of peripheral blood progenitor cells (PBPCs). CASE REPORT: A 16-year-old boy underwent an allogeneic PBPC transplant from his HLA-mismatched mother as treatment for acute myeloblastic leukemia that had proved resistant to induction chemotherapy. Transfusion of the unmanipulated PBPCs proceeded without any complication, despite the difference in ABO blood group (donor, O Rh-positive; recipient, A Rh-positive). On Day 7, a rapid drop in hemoglobin to 4 g per dL was observed, which was attributed to a massive hemolysis. All the recipient's group A red cells were destroyed within 36 hours. This delayed and rapidly progressive hemolytic anemia was not associated with the transfusion of the donor's plasma. Rather, the anti-A titer increased in parallel with marrow recovery, which suggested an active synthesis of these antibodies by immunocompetent cells from the donor against the recipient's red cells. The mother's anti-A titer was retrospectively found to be 2048. Her unusually high titer is probably due to prior sensitization during pregnancies. On Day 12, the patient developed grade IV graft-versus-host disease, which proved resistant to all treatments instituted and led to his death on Day 35. CONCLUSION: PBPC transplantation with minor ABO incompatibility may be associated with significant risk of massive delayed hemolysis.     

血型血清学与电子交叉配血试验的比较研究

目的初步探讨电子交叉配血在临床输血中的应用价值。方法采用微孔板法检测4 126名献血者的ABO和Rh系统血型;用微柱凝胶法筛查意外抗体及鉴定抗体特异性;在此基础上建立献血者数据库。采用微柱凝胶法对10 685名住院患者作常规ABO和Rh(D)血型以及意外抗体筛查和鉴定,配血以血型血清学和电子交叉配血2种方式进行;对9 996名住院患者以ABO和Rh(D)血型相容作血清学交叉配血,并对其中2 920人作电子交叉配血;同时对689名住院患者作ABO和Rh系统血型鉴定和意外抗体筛查,对意外抗体筛选结果为阴性的患者作电子和血清学交叉配血。结果初步建立了可应用于电子交叉配血的献血者数据库,对2 920名经ABO和Rh(D)血型检测及无意外抗体的住院患者和657名经ABO和Rh血型检测及无意外抗体的住院患者,与4 113名献血者分别作了6 109次和1 227次电子交叉配血与血清学交叉配血试验,2种方法结果完全一致;电子交叉配血与血清学交叉试验配血时间分别为15和45 min。结论电子交叉配血的建立和临床应用是可行的,除了同样准确外,其最大的优势是比血清学交叉配血试验时间明显缩短。     

ABO mismatch may affect engraftment in multiple myeloma patients receiving nonmyeloablative conditioning

BACKGROUND: Blood group incompatibility does not appear to affect the overall outcome in patients undergoing myeloablative conditioning before allogeneic BMT. Data on ABO-mismatched transplantation in the nonmyeloablative setting are limited. STUDY DESIGN AND METHODS: A retrospective analysis of the effects of ABO mismatches in multiple myeloma patients who received a nonmyeloablative conditioning regimen was conducted. RESULTS: Three of 27 patients received a minor ABO-mismatched graft, all with evidence of hemolysis before converting to donor ABO group on Days 10, 15, and 6. Six patients received a major ABO-mismatched graft; of these, three developed GVHD of more than grade 2 and subsequently converted to the ABO blood group of the donor on Days 38, 33, and 43. Of the three patients without GVHD, one rejected the allograft and had autologous reconstitution. One remained a mixed chimera to Day 100 despite three donor lymphocyte infusions, and one developed pure RBC aplasia. None of the ABO-matched patients rejected the graft, whether they developed GVHD or not. RBC transfusions were significantly higher in the major and minor ABO-mismatched patients than in the ABO-matched patients, with medians of 12 units (range, 2-35), 13 units (range, 5-18), and 4 units (range, 2-15), respectively (p = 0.02). ABO-matched patients had a similar incidence of GVHD, with 5 of 9 ABO-mismatched patients (56%) having more than grade 2 versus 10 of 18 (56%). Four of 9 ABO-mismatched patients (44%) were mixed chimeras up to Day 100 versus 2 of 18 ABO-matched patients (11%), and the difference was significant (p = 0.01). CONCLUSION: Patients with ABO mismatch had problems with engraftment, including graft rejection, pure RBC aplasia, and mixed-lineage chimerism. RBC transfusions were significantly higher in the ABO-mismatched recipients. GVHD may play a role in engraftment, possibly by facilitating the disappearance of native ABO antibodies via graft-versus-plasma cell effect. A prospective study to evaluate the effects of ABO mismatch on engraftment in the nonmyeloablative setting is needed.     

ABO血型不合的非清髓异基因外周血干细胞移植

为了探讨ABO血型不合对HLA相合的非清髓异基因外周血干细胞移植(NAST)的影响,回顾分析了15例ABO血型主要不舍,9例次要不合的HLA相合的NAST的临床特点,并选用同期ABO血型相合的NAST作成组比较。结果显示：24例ABO血型不合的NAST受者在输入供者外周血千细胞悬液时无1例发生急性溶血,但有2例发生迟发性溶血。统计学分析表明,ABO血型不合对NAST骨髓植活、血小板恢复、GVHD、疾病复发及无病生存均无影响。在ABO血型主要不合组,红系开始恢复时间明显延迟,其中1例“0”型血受者发生纯红细胞再生障碍,持续5个月。结论：ABO血型不合不是NAST的障碍,仅在ABO血型主要不合时．红系恢复时间延迟。