实验性内淋巴积水毛细胞缺失与血管纹萎缩的相关研究

利用有较长血管纹萎缩部的豚鼠，手术堵塞内淋巴管，产生内淋巴积水。术后三个月计数毛细胞缺失率和观察血管纹的光镜和电镜改变。结果发现实验性内淋巴积水时，外毛细胞缺失率与血管纹萎缩长度无显著相关；积水耳的健康纹血管部血管纹退变，而萎缩纹血管部血管纹无明显变化。认为积水对毛细胞和血管纹的损害是同步的。     

1年龄豚鼠耳蜗外毛细胞缺失

在所观察的1年龄健康豚鼠中,依血管纹血管萎缩的范围,将耳蜗分为两组分别计算各回外毛细胞平均缺失率;经统计学处理,血管纹血管萎缩长的一组耳蜗第3回外毛细胞缺失多,表明第3回外毛细胞缺失增加与血管纹血管萎缩有关。这一结果可作为实验动物的选择与观察提供依据,对耳聋病因、发病机制的研究有参考价值。     

庆大霉素内耳毒性的超微结构病理学研究

庆大霉素为一种临床广泛应用的氨基甙类抗生素,具有耳、肾毒性。应用透射电子显微镜对庆大霉素中毒后耳蜗感觉细胞超微结构病理改变的研究在我国尚未见报道。本实验应用透射电子显微镜对豚鼠庆大霉素中毒耳蜗感觉毛细胞超微结构病理改变进行观察。观察显示,庆大霉素中毒后,耳蜗外毛细胞的病变主要表现在皮板下区及核下区,于该部位可观察     

庆大霉素中毒后雏鸡耳蜗毛细胞再生和表皮生长因子的促再生作用

目的:观察雏鸡庆大霉素(GM)中毒后耳蜗毛细胞的再生及表皮生长因子(EGF)对其再生的影响.方法:给雏鸡注射GM10d,其后再注射EGF5d,分别用光镜、扫描电镜及透射电镜观察耳蜗基底乳头(BP)形态学变化;用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色观察BP细胞增殖.结果:停用GM后1d,BP毛细胞损失平均约51%,毛细胞形态不规则,线粒体和表皮板肿胀,细胞自溶破坏.停用GM后5d,支持细胞表面增宽,中间出现小的表皮板和短的听毛,此为新的毛细胞.14d新生毛细胞形态规则,21d发育成熟,BP形态接近正常.PCNA阳性细胞主要是支持细胞和透明细胞.EGF组毛细胞再生活跃,PCNA阳性细胞核明显增多.停用GM后10d,毛细胞数明显比GM组多,14dBP形态接近正常.结论:GM耳中毒的雏鸡耳蜗毛细胞可以再生;再生的毛细胞可能来源于支持细胞和透明细胞;EGF可促进这一过程.     

脑细胞生长肽对豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶的影响

目的：观察脑细胞生长肽（Cerebrai cell growth peptide,CCGP)对庆大霉素（Gentamicin,GM)引起的耳中毒豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶（Acid phosphatase,ACP)的影响。方法：分别用脑干听觉诱发电位（Brainstem auditory evoked potential,BAEP)和组织化学方法检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞溶酶体的变化。结果：CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度，能保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性，减轻了毛细胞的损伤。结论：CCGP能降低GM的耳毒性。保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性，降低溶酶体水解酶逸出引起的毛细胞自溶性损伤，可能是CCGP防治GM耳毒性的机制之一。     

血管纹萎缩与利尿酸中毒性聋

本文用光镜观察健康豚鼠正常耳蜗血管纹12耳,利尿酸中毒者8耳,用扫描电镜观察正常耳蜗血管纹与利尿酸中毒者各6耳.铺片观察血管纹萎缩部自尖回顶部扩展范围与利尿酸中毒性聋的关系106耳.结果:(1)血管纹多变异.(2)豚鼠常有范围较广的血管纹萎缩部,观察了血管纹的萎缩部、健康部和两者之间的过渡区及利尿酸耳蜗中毒     

丹参对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗NF-kB活性的影响

目的 研究丹参(salvia miltiorrhiza,SM)对庆大霉素(gentamicin,GM)耳中毒豚鼠耳蜗核因子-kB(nucleal factor-kappa B,NF-kB)活性的影响,探讨SM对GM耳毒性损伤的防护作用及其分子机制.方法 豚鼠随机分成正常对照组、GM组、GM+SM组和SM组,应用免疫组织化学SP法检测耳蜗组织中NF-kBP65和P50的活性;同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试,观察用药前后豚鼠听阈的变化.结果 GM组ABR阈值比用药前明显提高,与正常对照组比较,差异有显著性,并且高于GM+SM组.各组NF-kB P65阳性免疫反应仅见于耳蜗螺旋韧带,而其他部位均呈阴性.GM组、GM+SM组及SM组耳蜗P65阳性免疫反应的分布和正常对照组相同,反应活性与正常对照组比较差异无显著性.各组NF-kB p50阳性免疫反应见于耳蜗螺旋神经节、神经纤维、螺旋韧带、血管纹、骨螺旋板缘及螺旋器.GM组耳蜗螺旋韧带和血管纹的NF-kB P50活性较正常对照组明显增强;而同时给予SM的豚鼠,其耳蜗螺旋韧带和血管纹的NF-kB P50活性较GM组则明显减弱.正常对照组和SM组耳蜗外毛细胞胞浆可见P50阳性染色,胞核则未见染色.给予GM后,耳蜗外毛细胞胞核可见P50阳性染色,而联合应用SM后,外毛细胞核染色消失,在阴性对照切片上未见NF-kB P50阳性染色.通过直线相关检验证明豚鼠耳蜗螺旋韧带和血管纹NF-kB P50免疫反应的平均灰度值和ABK阈值二者呈负相关.结论 正常豚鼠耳蜗中有NF-kB P65和P50的表达.注射GM后,NF-kB被诱导激活,进而造成听力损害.SM通过显著抑制GM所致NF-kB的高活性,从而有效拮抗GM的耳毒性,这可能是丹参发挥防护作用的分子机制之一.     

盐酸椒苯酮胺通过降低caspase-3表达减轻庆大霉素豚鼠耳蜗损伤

目的研究盐酸椒苯酮胺（PPTA）对庆大霉素耳蜗损伤的保护作用及抗凋亡机制。方法听力正常豚鼠分3组：正常组、GM
组和PPTA组。采用庆大霉素致豚鼠耳蜗损伤模型,PPTA腹腔注射,ABR 分析听力变化,Western blot 检测耳蜗组织中
caspase-3蛋白表达,TUNEL染色、扫描电镜和透射电镜观察形态学改变。结果ABR反应阈：GM组、PPTA组显著高于正常对
照组（P<0.05）,PPTA组显著低于GM组;Western blot测caspase-3的表达：结果表明用药后GM组豚鼠caspase-3表达显著增加
（P<0.001）,PPTA组显著高于正常组但显著低于GM组（P<0.001）;TUNEL、扫描和透射电镜观察见：GM组毛细胞损伤严重,耳
蜗螺旋器、血管纹和螺旋神经节存在大量凋亡细胞形态;而PPTA组耳蜗组织损伤较GM组明显减轻。结论PPTA可以通过降
低caspase-3蛋白表达抑制凋亡,对庆大霉素豚鼠耳蜗损伤起到保护作用。
     

豚鼠内耳结构的死后变化

应用透射电镜观察了１５只窒息致死豚鼠的内耳各终及血管纹，发现窒息５ｍｉｎ时，仅壶腹嵴毛细胞和血管纹上皮细胞开始发生形态改变，窒息１０ｍｉｎ豚鼠心跳停止时，外毛细胞和椭圆囊斑Ｉ型毛细胞亦开始发生改变，３０ｍｉｎ时内毛细胞和球囊斑毛细胞才开始发生形态变化，提示内耳各终器死后变化开始发生的时间与程度的均有所不同。     

庆大霉素耳中毒后不同时间耳蜗血管纹HSP70表达与ABR的关系

目的：观察庆大霉素（GM）耳中毒后不同时间豚鼠耳蜗血管纹热休克蛋白70（HSP70）表达与ABR的关系。方法：选用健康白色红目豚鼠100只,体重200-250g,随机分为：生理盐水组、GM组,各组皆连续用药10d。各组动物混合饲养,每日测量体重调整药量。在用药前和停药后1、3、7、14、30d分别检测ABR阈值,停药处死后应用SABC免疫组化技术,观察GM中毒后不同时间豚鼠耳蜗血管纹HSP70表达情况。结果：GM组停药3d时耳蜗血管纹HSP70阳性反应产物表达最多,ABR阈值最高。以后随着停药时间延长,染色逐渐变浅,ABR阈值逐渐降低,停药30d时染色接近正常,但ABR阈值仍明显高于正常,它们与正常对照组相比差异均有显著意义（P〈0.01）。结论：耳蜗血管纹HSP70阳性反应产物灰度值与ABR之间呈线性关系,可以作为细胞受到应激刺激后细胞恢复程度的一个指标。     

速尿对豚鼠内耳血管纹影响的实验观察及其耳毒性机制的探讨

正常豚鼠７０只，实验组由颈静脉给予速水８０ｍｇ／ｋｇ，观察给药后２分钟、１０分钟、２０分钟、３０分钟、６０分钟、１２０分钟的血管纹微循环情况，ＥＰ及ＡＰ变化情况，并结合血这纹和Ｃｏｒｔｉｓ器透射电镜观察。结果显示经后血管纹毛细胞血管发生迅速的缺血改变，并在２小时左右恢复，同时ＥＰ及ＣＡＰ均有明显改变，相关分析结果：给一ＥＰ的改变与血管纹毛细胞血管内红细胞数有相关性。ＣＡＰ相对振幅的改变与ＥＰ有非常     

银杏叶提取物对庆大霉素耳毒性保护作用的实验研究

目的:研究银杏叶提取物(Egb)对庆大霉素(GM)所致耳毒性的拮抗作用,探讨庆大霉素耳毒性作用机制。方法:健康豚鼠15只,随机分为3组,I组为生理盐水组;II组为庆大霉素(GM)组,造成损伤模型;III组为银杏叶提取物(Egb)和庆大霉素(Egb GM)组,观测3组豚鼠不同时期畸变产物耳声发射(DPOAE)的改变,TUNEL法检测3组豚鼠毛细胞凋亡。结果:Egb可以减轻耳蜗外毛细胞的损伤率(P<0.05),较少凋亡,降低庆大霉素所致的耳毒性。结论:Egh对庆大霉素所致的耳毒性具有拮抗作用。     

脑细胞生长肽对耳蜗琥珀酸脱氢酶的影响

目的：观察脑细胞生长肽（CCGP）对庆大霉素（GM）引起的耳蜗内琥珀酸脱氢酶（SDH）的影响。方法：分别用脑干听觉诱发电位（BAEP）和组织化学方法检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞线粒体内SDH活性变化。结果：CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度和耳蜗毛细胞SDH活性；CCGP能保护耳蜗毛细胞SDH的活性，减轻了毛细胞的损伤。结论：CCGP能保护SDH的活性。保护耳蜗毛细胞SDH的活性，维持毛细胞的能量代谢，减轻毛细胞的损伤，可能是CCGP防治GM耳毒性的机制之一。     

丹参注射液拮抗庆大霉素耳蜗毒性的实验研究

目的：探讨丹参注射液对庆大霉素（GM）耳蜗毒性的防护作用。方法：选择白色豚鼠40只，随机分成4组（n=10）：正常对照组、GM组、GM＋丹参组和丹参组。GM组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg/kg/d，丹参组腹腔注射丹参注射液6g/kg/d，GM＋丹参组同时注射硫酸庆大霉素和丹参注射液，正常对照组注射等量生理盐水，连续用药10d后观察耳蜗的功能与形态。结果：GM＋丹参组豚鼠听功能受损明显轻于GM组，听脑干反应ABR阈值两组比较有显著性差异（P＜0．01），且形态学改变与听阈变化相一致。结论：丹参注射液可有效拮抗GM对豚鼠的耳蜗毒性，这种拮抗作用可能是通过对耳蜗血管纹边缘细胞和毛细胞内线体的保护来实现的。     

来比林对抗庆大霉素耳毒性的实验

目的 :观察来比林对抗庆大霉素耳毒性的作用 .方法 :将豚鼠随机分为庆大霉素 (gentamicin ,GM )组、来比林组 (lysisinaspirin ,LAP)、GM +LAP组及对照组 ,采用听性脑干反应 (ABR)、耳蜗铺片及透射电镜技术、观察用药前后听阈及耳蜗毛细胞形态学改变 ,并检测血清尿素氮、肌苷以及庆大霉素血药浓度 .结果 :GM组 8kHzABR 4wk平均阈移达 5 0dB ,GM +LAP组平均阈移为 30dB ,差异显著 (P <0 .0 5 ) .形态学改变与听力变化一致 .GM +LAP组血液中丙二醛较GM组明显减少 (P <0 .0 5 ) .GM +LAP组超氧化物歧化酶活性明显高于GM组 (P <0 .0 5 ) .LAP对庆大霉素血药浓度没有影响 .结论 :LAP能有效减轻GM的耳毒性作用 ,水杨酸盐连接有其他基团并不影响拮抗耳毒性的作用 .并且更加安全 ,有效 ,方便临床使用     

白藜芦醇在豚鼠耳蜗中的抗自由基作用

目的:观察白藜芦醇(Res)的抗自由基作用.方法:将豚鼠随机分为3组:庆大霉素组(GM组);Res GM组;空白对照组,每组动物10只.测定听性脑干反应(ABR)、耳蜗铺片、动物血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量及GM血药浓度,观察Res对自由基的影响.结果:GM Res组血液中MDA较GM组明显减少(P＜0.05);GM Res组SOD活性明显高于GM组(P＜0.05).Res对GM的血药浓度无影响.耳蜗铺片结果显示空白对照组毛细胞排列整齐,无损伤;GM组底圈毛细胞损伤严重,向上逐渐减轻,与听阈升高的程度相平行.而GM Res组的毛细胞部分消失,与GM组比较损伤较轻.结论:Res能对豚鼠体内自由基含量产生很明显的影响,对GM引起的耳毒性有保护作用.     

针刺防治GE对豚鼠内耳损害的实验研究

目的 观察针刺对庆大霉素（ＧＥ）耳中毒豚鼠的防治作用。方法 用脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）和组织化学方法,检测动物耳聋程度及听神经功能的变化和耳蜗毛细胞酶活性的改变。结果 电针能降低ＧＥ引起的ＢＡＥＰ反应阈的上升幅度,降低ＢＡＥＰ波峰潜伏期及波间期的延长;能保护毛细胞线粒体呼吸酶的活性,维持毛细胞溶酶体的完整性。结论 针刺能降低ＧＥ的耳毒性。保护毛细胞线粒体酶的活性,维持溶酶体的完整性,保证毛细胞     

庆大霉素对豚鼠耳蜗ACP的影响

目的观察庆大霉素对豚鼠耳蜗ＡＣＰ的影响。方法以耳廓反射及酸性磷酸酶（ＡＣＰ）为指标、观察正常及庆大霉素耳中毒豚鼠的耳蜗组织。结果正常豚鼠耳蜗内ＡＣＰ主要集中在耳蜗的毛细胞内，并显示出毛细胞的排列形式；庆大霉素耳中毒的豚鼠耳蜗毛细胞内ＡＣＰ出现位移、显色变淡或消失。耳廓反射阈值增加越明显者，ＡＣＰ变化越显著。结论实验表明庆大霉素引起的耳蜗毛细胞的损坏与耳蜗毛细胞内溶酶体膜破裂释放出的ＡＣＰ等水解酶的自溶性损坏有关。     

几种不同氨基甙类抗生素对豚鼠听力损害的比较与儿科临床

为了比较核糖霉素，庆大霉素，卡那霉素为耳毒性，我们用豚鼠４０只分成４组，予以腹腔注射豚鼠致聋后处死（未聋者４周处死），在光显微镜下观察病理改变，其损害程度为：卡那霉素〉庆大霉素〉核糖霉素。病理改变沩内耳柯替氏器内外毛细胞结构破坏及细胞不同程度坏死，临床观察儿童及婴幼儿易引起中毒，故不宜应用。     

国产丁胺卡那霉素对耳蜗影响的组织化学研究

用组织化学方法观察丁胺卡那霉素对耳蜗Ｃｏｒｔｉｓ器毛细胞及血管纹细胞琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）的影响，并以对照组生理盐水及卡那霉素与之对比。结果表明耳蜗毛细胞及血管纹细胞的ＳＤＨ活性下降。部分全耳蜗铺片以锇酸染色后进行坏死毛细胞计数，证明丁胺卡那霉素对耳蜗有损害作用，但小于卡那霉素。