改良铅苏木紫染色法与电镜对照在直肠类癌上的应用(摘要)

方法:(一)试剂配制:(1)1.5％硝酸铝蒸馏水溶液加等量醋酸铵饱和水溶液混合之。每100毫升上述混合液加2毫升40％甲醛,过滤后保存于室温中备用,几星期内有效。(2)0.2克苏木紫溶于1.5毫升95％酒精,用时须新鲜配制。取(1)混合液10毫升加(2)苏木紫液1.2毫升后,再加蒸馏水10毫升,总量共为21.2毫升,不停摇荡30分钟,得呈淡紫色沉淀后过滤,滤液光呈白色,后为淡兰红色,加蒸馏水至70毫升,即为应用液。(二)染色:福尔马林固定,石蜡增片5μ,常规脱蜡至水入应用液,70℃45分钟至1小时或在37℃水温箱     

消化道

吖叮橙染色法萤光显微镜检术对诊断胃癌的临床应用。赵实邦等(山东医学院附属医院内科教研组)。中华医学杂志51:311,1965。 5例胃肿瘤部涂片用Schiffer氏法在纯甲醇和Carnoy氏液中顺序固定3分钟,于后80％乙醇浸5秒,70％乙醇5秒,50％乙醇5分,蒸馏水轻盪10秒,1％醋酸5秒,蒸馏水2分钟,再轻盪10秒,缓冲液5分钟,0.01％吖叮橙浸冲液2分钟,缓冲液3分钟,再轻盪4分钟,缓冲液4分钟。镜检时加Mellvan氏缓冲液(pH6.4)1滴封盖。5例癌细胞为圆形或椭圆形,胞浆呈桔红色,萤光均匀。胞核较大,约占细胞的l/2—2/3,呈黄白色萤光,核内含有1—2个桔红色核     

子宫颈癌局部涂色简易快速诊断法

作者根据“表面染色法”的原理设计了一种简易快速局部涂色子宫颈癌的诊断法。使用的诊断液系一种核染色液,称为铁苏木素液,这是由二种溶液(甲液与乙液)于使用前等量混合而成。甲液系1％苏木素精纯酒精溶液(配制后放置四周备用);乙液含有4毫升29％氯化高铁(FeCl_3),1毫升浓     

人类乳腺癌动情素受体细胞化学的研究

检测肿瘤组织匀浆胞液蛋白内的动情素受体,近年来已证明对晚期乳癌病人激素治疗的病例选择是有帮助的。本文探讨一种细胞化学方法,用于动情素的检测。材料和方法: 荧光异硫氰酸盐(FITC)小牛血清白蛋白(BSA)复合物的制备:除了用高比例的FITC∶BSA外,按过去的标准法进行。一克BSSA溶于10毫升0.5 M pH9.5碳酸盐——重碳酸盐缓冲液,再加上一克FITC10%硅藻土制剂,室温搅拌四小时,离心后除去硅藻土,FITC-BSA复合物过葡聚糖G 25凝胶柱,该柱予先用pH 7.8、0.05 M磷酸缓冲液(PB)平衡,用同样PB透析48小时,保证除去结合不牢的FITC,蛋白含量用双缩脲法检测,FITC/蛋白质平均克分子比     

用甲醛——蒸馏水作为细胞混悬液的溶血剂

在血性细胞混悬液中,诊断成分(如瘤细胞——译者)的形态结构常被多量红细胞所隐蔽。作者研究出用低渗性甲醛水溶液溶解混悬液中红细胞的方法,效果较好。试液配制:作为溶血用的5%甲醛水溶液是以蒸馏水稀释含量为37%的甲醛液制成的,加碳酸锂粉使其pH升至7.4。通过测定降低的冰点,可知此液的渗透压为1667 mOsm/L。用作常规固定的5%盐水     

一种骨组织快速脱钙方法

骨组织是一种坚硬的结缔组织 ,骨基质中有机成分凝胶和无机成分骨盐两种成分紧密结合 ,使骨组织十分坚硬。为制作切片带来许多困难 ,而传统的骨组织脱钙法因为时间长、步骤繁琐而不能适应常规工作的需要。笔者在实践中对15 0例骨组织脱钙进行了实验与改进 ,选择出较为理想的一种快速脱钙方法 ,介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　本科室近 5年来送检的骨组织标本。试剂配制 :甲液 :蒸馏水 70ｍｌ,磷酸氢二钠 6ｇ ,磷酸二氢钠 1ｇ ,浓盐酸 ( 3 6%～ 3 8% ) 8ｍｌ,甲酸 99% 7ｍｌ混合待用。乙液 :戊二醛 2 5 % 15ｍｌ。1 2　方法　甲液加乙液…     

两种冲洗液在宫颈癌治疗中的观察对照

1　药物配制1号妇科冲洗液药物配方及配制方法 :取 75 %乙醇 10 0ｍＬ ,加入麝香草酚 5 0ｍＬ ,再加入薄荷油 10 0ｍＬ ,冬青油 2 0ｍＬ搅匀 ,加灭菌蒸馏水 10 0 0ｍＬ搅匀。取上液 2 0 0ｍＬ ,加入2 0 0 0 0ｍＬ温开水稀释 ,最终浓度 1:10 0 ,温度为 2 1～ 36℃。冲洗次数视病情而易 ,一般每日 1次 ,病情较重者每日 2次。Ⅱ号冲洗液即 1∶10 0 0的新洁尔灭溶液。2　操作方法采取随机抽样分组法 ,将 12 8例宫颈癌患者分为观察组和对照组 ,每组各 64例 ,首先每日将冲洗液配制好 ,将容器放置于距地面约 1.5ｍ高处 ,患者取膀胱截石位。操作者右…     

通关液疗效观察(附1200例报告)

我院自制通关液自1984～1989年应用于临床,对1200例中晚期食管、贲门癌治疗,症状有明显缓解。现总结如下。通关液成份为:盐酸麻黄素50mg,654-210mg,地塞米松磷酸钠5mg,盐酸普鲁卡因1g,硫酸庆大霉素20万u,加适量矫味剂、防腐剂、粘合剂,再加蒸馏水配制成100ml水剂口服,每次于饭前半小时服10ml。临床效果:应用通关液治疗1200例中晚期食管、贲门癌,梗阻症状均有不同程度的缓解,有效率可达90％以上。其中食管癌800例(包括放疗300例,有效     

人肠癌细胞系SIC-8101的建立及其生物学特征的初步观察

本细胞系SIC-8101是从1例人肠癌手术组织培养而建成的。培养液RPMI-1640内含40％小牛血清及适量抗菌素、胰岛素和葡萄糖。小牛血清最好选用无溶血配制培养液,Hank氏液及其他试剂所用水均为三蒸馏水。培液pH维持在7.0～71.2。细胞形态为多边形细胞。细胞传代后,培养3～4天,细胞的总分裂指数约50％左右,其中异常分裂指数在20％以上。染色体数目的众数为60～64占总数的77％。细胞的异种移杭长瘤率高。皮下肿块经切片检查均证实为恶性肿瘤、细胞呈典型巢状排列伴腺管并侵入肌层。上述本系细胞特征与手术切除标本十分相似。     

ELISA夹心法检测rhGM-CSF/IL-3融合蛋白

以往我们对在大肠杆菌中表达的rhGM-CSF/IL-3融合蛋白进行了中试纯化,同时研究还表明rhGMCSF/IL-3体外能促进造血祖细胞的生长发育(另文发表)。为进一步研究其在体内的药效,测定药代动力学,我们建立了ELISA夹心法定量检测rhGMCSF/IL-3,现报告如下。 材料与方法 1.1 主要试剂 鼠抗rhGM-CSF单克隆抗体(rhGM-CSF McAb)为自制;鼠抗rhGM-CSF多克隆抗体(rhGM-CSF PcAb)、兔抗rhIL-3多克隆抗体(rhIL-3 PcAb)、酶标记羊抗兔IgG(均购自Amersham);LPS、HRP、BSA(SIGMA);G-CSF、rhIL-3、EPO(Amgen);IL-2(Cetus);rhGM-CSF、IFN-α(均购自Schering-Plough公司)。 1.2 ELISA夹心法测定rhGM-CSF/IL-3融合蛋白 用25mmol/L磷酸盐缓冲液(PBS pH8.0)按适当比例稀释的rhGM-CSF McAb 100μl包被微孔板,20℃16小时,将含(A液)0.1％Tween-20的PBS洗板至少3次,200μl 1％BSA-PBS溶液20℃封闭6小时,A液洗板,甩干,-20℃保存备用。使用时解冻,每孔加样150μl,4℃16小时;A液洗板5次,加B液(0.1％Tween-20,0.1％BSA in 50mmol/LPBS, pH7.3)适当稀释的rhIL-3 PcAb 100μl,20℃ 3小时;A液洗板5次,加100μl HRP-羊抗兔IgG,37℃1小时;A液     

对病理切片HE染色中伊红沉淀物原因的探讨

近几年来,HE染色的切片中常有一种不整形、无结构的红染物质,时而影响诊断,为克服此种现象,我们进行了认真的探讨。材料和方法:国产伊红(曙红)3g、蒸馏水600ml,混合后,充分缓慢地搅拌2分钟,然后再加入10％醋酸水溶液3ml,再充分缓慢地搅拌2分钟,测定pH值为4时,用滤纸进行过滤后备用。     

聚乙二醇测定肿瘤患者血清免疫复合物的初步报道

本文报道应用聚乙二醇比浊法,测定各种恶性肿瘤患者血清免疫复合物(IC)395例,良性瘤36例,正常人123例,其结果及对部份病例IC的动态变化,现报道如下。 方法步骤 本法采用 Hasyova法,并略加修改,其步骤如下:(1)每例使用2支试管,甲管内加入3mlpH8.4的0.1M硼酸缓冲液;乙管内加入3ml上述硼酸缓冲液配制的PEG(分子量 6,000)溶液,浓     

低渗液加局麻药防治乳腺癌手术冲洗痛

本文通过温热低渗液加局麻药用于防治乳腺癌根治术中冲洗痛及术后疼痛的临床观察,旨在选择合理镇痛方法。 1 资料与方法 选择择期乳腺癌根治手术病人80例,ASAⅠ～Ⅱ级,年龄36～62岁,体重51～76kg。随机将病人分为两组:试验组(n=40)用温热低渗液配伍2％利多卡因冲洗创面;对照组(n=40)术中仅用温热低渗液冲洗。选择T_(2、3)间隙进行硬膜外穿刺,分次注入1％利多卡因,术中按需追加。两组病人均采用文献建议的43℃蒸馏水冲洗,观察冲洗手术创面时病人有无痛感。术后疼痛评定采用视觉模拟评分法(VAS),所得数据均输入SPSS(8.0)软件包,采用t检验,P<0.05时有显著性差异。     

定量比较不同抗原修复条件对免疫组化阳性表达的影响

目的探讨抗原修复时抗原修复液pH值、修复温度和修复时间对免疫组化检测结果的影响。方法取扩张性心肌病人的心肌标本,经10％中性缓冲甲醛固定液固定,采用免疫组化二步法对心肌组织中结蛋白的表达进行染色。实验中对同一蜡块进行连续切片,微波修复时分别使用枸橼酸缓冲液、PBS、EDTA3种不同pH的缓冲液进行抗原修复：枸橼酸缓冲液（pH6．0）、PBS（pH7．0）和EDTA（pH9．0）;每一种抗原修复液又分别采用1000C、97℃、80℃、70℃4个不同的修复温度;应用图像分析仪对比不同条件下心肌组织中结蛋白的表达情况。结果在EDTA缓冲液中修复100℃持续15min,阳性信号得到充分表达,抗原表达由强到弱依次为EDTA组、枸橼酸缓冲液组、PBS组。结论进行免疫组化检测时采用高pH值的EDTA进行抗原修复效果较理想。     

农家肥料污染水源诱发鸡咽食管癌胃癌和肝癌

目的　探讨农家肥料污染水源诱发鸡咽食管癌、胃癌和肝癌的病因。方法　将 2 80只鸡分为 4组 ,实验组 (农肥水 +亚硝酸钠 ) 10 0只 ;3个对照组 (农肥水组、亚硝酸钠组、饮用水组 ) ,每组6 0只。使用玉米和水稻的秸秆、青草和人畜粪尿快速堆肥 ,取其肥料水亚硝化和酸化。实验组 :农肥水 75 0ml加亚硝酸钠 3g,再加硫氰酸钠 0 .2g。对照组 :(1)农肥水组 :农肥水 4 5 0ml加硫氰酸钠 0 .12g ;(2 )亚硝酸钠组 :亚硝酸钠 1.8g加水至 4 5 0ml,再加硫氰酸钠 0 .12g;(3)饮用水组 :饮用水 4 5 0ml加硫氰酸钠 0 .12g。实验组和各对照组分别使用 1mol/L盐酸调节pH为 1至 2 ,分别给鸡胃管注入 ,每周2次 ,每次 5～ 7.5ml。各组按照各自配方分别配制一份溶液加水 3～ 5L ,使用 1mol/L盐酸调节pH为3至 4 ,给相应各组鸡自由饮水 ,每周 1次。结果　实验组 10 0只鸡中 ,第 1阶段自然死亡 2只 ;第 2～ 4阶段诱发咽食管癌 16例 (16 /98,16 .3% ,P <0 .0 1) ,第 4阶段出现腺胃癌 5例 (5 /48,10 .4 % ,P <0 .0 1) ,肝癌 3例 (3/48,6 .3% ,P <0 .0 5 ) ;3个对照组无一例癌变。结论　模拟高发区现场 ,模拟鸡胃液诱发出鸡咽食管癌、胃癌和肝癌 ,以进一步为人类食管癌及其他癌症寻找病因。     

采用细胞毒性试验对23个药用包装材料进行生物安全性评价

目的：用体外细胞毒性试验对23个药用包装材料进行生物安全性评价,探讨样品浸提液制备方法对检测结果的影响。方法：设定样品质量/浸提液体积比值为0.2 g/mL,药用包装材料分别用MEM培养基(37℃、24 h)、氯化钠注射液和去离子水(121℃、1 h)制备浸提液。小鼠成纤维细胞L929培养于96孔板中,每孔加入样品浸提液100μL培养48 h后,用酶标仪测定吸光度值,根据细胞的相对增殖度(RGR)进行细胞毒性反应分级,≤1级为阴性,2级为可疑阳性,≥3级为阳性。结果：23个受试样品的MEM培养基浸提液均为0～1级;氯化钠注射液浸提液检出9个受试样品为2级以上,其中3个为3级以上;用去离子水浸提液复核9个受试样品可疑阳性结果,仅3个为2级以上,其中1个为3级。结论：体外试验在排除渗透压、pH值等的干扰,用最大溶出度浸提液作为溶剂配制培养基进行试验,能够明显增加药用包装材料毒性反应阳性结果的检出率。     

经皮注射醋酸治疗小肝细胞癌的预后研究

本文报告采用在超声引导下经皮注射醋酸(PAI)治疗小于3cm、少于4个的小肝癌作为多种治疗的一部分,分析91例病人的预后。 治疗组分为5组,醋酸浓度分别为15％,20％,30％,40％,50％。其中男性64例,女性27例,年龄43～85岁(平均61岁)。Child A级62例,Child B级5例,Child C级24例。每次醋酸注射量肝癌直径1～3cm者为1～2ml,2～3cm者为2～5ml,PAI治疗每周2次,     

天花粉治疗肝癌的实验研究

天花粉是用于人工流产的中药,我们发现天花粉在引产中有增强孕妇机体免疫功能作用,从而设想用于肿瘤治疗。我们进行了一系列动物实验,证实天花粉有治疗作用。现将资料简述如下:称重18～22克昆明种小白鼠,腹腔注射腹水型肝癌细胞总液(原倍或1:1稀释)0.2毫升/只,24小时后称重     

血瘀型恶性肿瘤病人红细胞膜流动性及血液流变性的观察

活血化瘀是治疗恶性肿瘤的有效方法之一。本文观察了血瘀型恶性肿瘤病人的红细胞膜流动性、微粘度及血液流变性等七项指标,对血瘀型恶性肿瘤的本质作了初步探讨。 材料与方法 一、红细胞膜流动性测定 红细胞悬液的制备:取静脉血2ml,肝素抗凝,离心后用磷酸缓冲液(PBS)洗三次,以高倍显微镜下找不到血小板为度。配成10~(10)个红细胞/ml的悬液备用。使用时用pH7.4的PBS稀释成2×10~(-6)mol/L中的DPH。荧光偏振度测量:于3ml×10~(-6)mol/L的DPH液中加     

石蜡包埋肺癌组织DNA提取方法的改进

目的 :探讨从保存肺癌标本中提取基因组DNA的改良方法。方法 :石蜡包埋肺癌组织在二甲苯脱蜡后 ,先用PBS缓冲液 (设立pH值梯度 ) 60℃温浴处理 4～ 8h ,接着用不同梯度乙醇处理 ,最后再用PBS缓冲液常温处理 4～ 8h。结果 :用PBS缓冲液预处理比直接用乙醇梯度处理所获得的DNA质量要高 ,且pH值在 7 5～ 8 5时最佳 ,PCR扩增产物长度可达 675bp左右。结论 :保存时间较长的标本用偏碱性 (pH值 7 5～ 8 5 )PBS缓冲液预处理 ,能提高其DNA质量