长春花生物碱类衍生物及靶向前药研究进展

[摘要]长春花生物碱作为一类抗有丝分裂药物,能够抑制微管聚合并诱导聚合的微管蛋白解聚。目前主要从两方面对长春碱类药物进行结构修饰：一是依据长春花生物碱类药物的构效关系,对其活性中心进行修饰,合成一系列长春碱类衍生物,以期寻找到具有更高药理活性、更低毒性和更广抗肿瘤谱的长春花生物碱类药物;二是在保证药理活性的前提下,在一些非活性位点引入靶向基团(特异性寡肽、单克隆抗体及叶酸等),合成一系列长春花生物碱类衍生物靶向前药,以期降低长春碱类药物的毒副作用,提高其治疗指数。文中综述了长春花生物碱类衍生物和长春花生物碱类药物靶向前药的研究进展。     

具有促微管聚合活性的抗肿瘤天然化合物

微管和微管蛋白的相互作用是靶向性筛选抗肿瘤化合物的重要模型之一。化合物与微管蛋白的作用导致两种结果:抑制微管聚合(促解聚)和抑制微管解聚(促聚合)。有许多化合物能与微管蛋白发生作用,其中大多数是降低微管结构稳定性的,如生物碱类的长春碱(ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ)、秋水仙碱(ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ)、喜树碱(ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ)、ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ,脂类的ｃｕｒａｃｉｎＡ,大环多醚类的ｈａｌｉｃｈｏｎｄｒｉｎＢ,肽类ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ10、ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ15、ｈｅｍｉａｓｔｅｒｌｉｎ等;而目前临床…     

微管蛋白的分离鉴定及其在抗癌药物筛选中的应用

用两个循环聚合——解聚的方法,从猪脑分离到部分纯化的微管蛋白,在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上显示两个主峰带,即。微管蛋白(M:W.58,000)和β微管蛋白(M.W.54,000)。在ATP或GTP存在的MES缓冲液中37℃保温b微管蛋白迅速聚合为微管,A 350呈典型S形聚合曲线。在电子显微镜下显示网状微管结构。抗癌药物筛选实验表明:秋水仙碱明显抑制微管聚合;长春新碱低浓度(0.75-6μM)抑制微管蛋白聚合,高浓度(>6μM)时导致微管蛋白聚集(Aggregation),且在低温下不解聚。三尖杉酯类生物碱对微管蛋白的聚合及解聚未显示明显的影响。     

35例异长春花碱治疗恶性肿瘤的护理

异长春花碱(NaveLbine，NVB)系一种新的长春花属生物碱，为淡黄色透明液体，它通过阻滞微管蛋白聚合形成微管和诱导微管的解聚，使细胞分裂停止于有丝分裂中期。由于毒副作用低于该属其它生物碱，对多种肿瘤，特别是肺肿瘤和乳腺肿瘤疗效显著，故广泛应用于临床肿瘤治疗。我科从1997～1999年使用NVB联合治疗晚期肺癌、乳腺癌和淋巴瘤，取得了较为满意的近期疗效，对相关护理有一定体会，现介绍如下：     

与紫杉醇作用机理相同的新型微管稳定剂epothilones

微管蛋白聚合成微管的数量增减是一个动态平衡过程，这对许多细胞过程是不可缺少的。抗肿瘤药物紫杉醇可稳定已聚合的微管，从而导致正在增殖细胞的有丝分裂停止和细胞毒作用。作者用一种敏感的过滤测热分析法检测微管的集结活性，已证实ePothilonesA与ePothilonesB在体外及在培养细胞中具有紫杉醇的所有生物学活性。此类ePothilones是等效的；它们在体外微管蛋白聚合成微管以及在细胞培养中增加微管的稳定性和成束作用方面显示的动力学性质类似于紫杉醇。此外，这些16元的大环内酯类是‘H一紫杉醇结合的竞争性抑制剂；在竞争性取代分析…     

紫杉醇周围神经毒性临床观察

紫杉醇（paclitaxel，taxol），又名泰素、紫素、特素，是紫杉类植物中分离出的天然产品，是一种新型抗微管药物，作用机制是唯一能促进微管聚合的药物，结合位点在聚合状态微管上，可促进微管蛋白聚合成团块和成束并使其稳定，从而抑制微管网的正常重组。紫彬醇属广谱抗肿瘤药物，并具显著放射增敏作用。经临床研究证实，对卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌疗效较突出，目前也广泛用于头颈癌、     

华蟾毒精靶向KATNB1抑制肿瘤细胞微管形成和有丝分裂

华蟾素是临床广泛应用的抗肿瘤中药,但其抗肿瘤分子机制尚未完全清楚。本研究旨在阐明华蟾素活性成分华蟾毒精(cinobufagin, CBG)抑制肿瘤细胞有丝分裂的靶标及分子机制。应用碘化丙啶(PI) DNA染色法分析CBG对肿瘤细胞周期的作用;通过胸苷同步化细胞至有丝分裂时期,微管及中心粒染色法表征CBG对肿瘤细胞有丝分裂的影响;采用体外微管聚合实验、微管单体/聚体分离实验及微管α-tubulin荧光标记法从分子和细胞水平评价CBG对微管聚合的作用;通过基因编辑技术CRISPR/Cas9建立微管切割蛋白Katanin调节亚基B1 (KATNB1)敲除的肿瘤细胞, CCK-8法考察CBG对野生型和敲除细胞抑制作用的差异;利用化学生物学的技术方法研究CBG和KATNB1的结合;采用Western blot及实时定量PCR检测CBG对KATNB1蛋白和mRNA的调控。结果发现, CBG阻滞结肠癌HCT116细胞周期于G2/M期;诱导中心粒异常增生,抑制肿瘤细胞的有丝分裂;体内外的微管形成实验表明CBG显著抑制微管蛋白聚合; KATNB1敲除后缓解了CBG对HCT116细胞的抑制作用,表明KAT...     

新的半合成植物抗癌药—VP16

<正> 几个世纪以来,传统医学就把北美鬼臼(Podophyllum Peltalum)根的提取物用作导泻、催吐及驱虫,1820年美国的第一部药典中对它已有记载。有效成份鬼臼毒素(Podophyllotoxin)的作用机理与长春花生物碱相似,是一个有丝分裂抑制剂。它竞争性地与微管蛋白结合,干扰微管聚合,使细胞停滞在分裂中期。     

土贝母皂苷对人低分化上皮样鼻咽癌细胞(CNE-2Z)微管的作用

目的：探讨土贝母皂苷(皂苷)对人低分化上皮样鼻咽癌细胞株(CNE-2Z)微管的影响：方法：采用细胞免疫荧光法观察皂苷处理的CNE-2Z细胞微管的变化，蛋白免疫印迹法分析皂苷处理的CNE-2Z细胞中聚合和未聚合微管蛋白含量的变化。结果：免疫荧光图像结果表明，皂苷作用的CNE-2Z细胞丧失正常的微管网络，蛋白免疫印迹结果证实皂苷使CNE-2Z细胞未聚合的微管蛋白比例增加，而且这一作用与剂量和时间呈正相关。结论：皂苷能抑制CNE-2Z细胞内微管的聚合，提示皂苷是一种有效的抗微管剂、     

紫杉醇联合化疗治疗晚期乳腺癌及卵巢癌近期疗效观察

紫杉醇系植物类抗癌药，其抗癌机理在于它能够促使微管聚合，形成稳定的不具活性的微管聚合物，从而影响肿瘤细胞的有丝分裂，造成细胞死亡。目前已证明紫杉醇对乳腺癌、卵巢癌、头颈部肿瘤及非小细胞肺癌(NSCLC)具有较高的疗效。我院自1997年1月至2000年8月对20例晚期或复发的乳腺癌及卵巢癌患者进行以紫杉醇为主的联合化疗。现报告如下。     

丹酚酸C诱导肝癌HepG2细胞有丝分裂阻滞及凋亡的研究

目的研究丹酚酸C(salvianolic acid C,SalC)的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测Sal C对人肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡,Giemsa染色进行细胞有丝分裂的形态学观察,微管蛋白聚合实验检测Sal C对微管蛋白聚合活性的影响,比色法检测细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹酚酸C能抑制多种人肿瘤细胞增殖,其中对HepG2细胞的抑制作用较明显。流式细胞术分析发现Sal C使HepG2细胞阻滞于G2/M期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰,细胞中Caspase-3和Caspase-6的活性升高。Gi-emsa染色提示HepG2细胞发生有丝分裂阻滞。Sal C能明显抑制微管蛋白的聚合。结论 Sal C具有抗肿瘤细胞增殖活性,通过抑制微管蛋白聚合诱导细胞有丝分裂阻滞从而诱导凋亡。     

与紫杉醇作用机理相似的小分子合成化合物GS-164

GS-164是一新型小分子化合物,它通过与紫杉醇相似的作用机理,刺激微管蛋白的聚合。在体外微管聚合分析发现GS-164具有以下作用特点:(1)在无三磷酸鸟苷(GTP)情况下,GS-164导致的微管聚合具有剂量依赖关系;(2)由此药刺激形成的微管能抵抗由钙和低温导致的分离;(3)鬼臼毒素对由GS-164导致的微管聚合有拮抗作用。细胞水平的分析实验表明,GS-164增加了HeLa细胞中微管的数量,但对肌丝无影响。此外,GS-164诱导微管成束,阻断在G2/M阶段的HeLa细胞的细胞循环,导致细胞死亡,所有这些活性均与紫杉醇相同。构象分析发现,GS-164的两个苯环中的…     

半边旗提取物5F体外对猪脑微管蛋白聚合的影响

目的　研究半边旗提取物5F对微管蛋白聚合的影响。方法　在离体条件下,将受试化合物加入到微管蛋白聚合解聚反应体系中,于37℃、350nm下检测反应体系吸光值的变化。结果　5F能抑制反应体系吸光值升高,提示它对微管蛋白聚合具有抑制作用并能抑制其解聚。结论　5F能抑制体外微管蛋白聚合,从而可能是影响细胞的细胞周期及诱导凋亡途径之一。     

紫杉醇治疗HIV引起的卡波济肉瘤

紫杉醇治疗卵巢癌、乳癌、肺癌及头颈部癌有效，该药可诱导微管不可逆性聚合，因此其细胞靶标与长春花属生物碱相似，由于长春花属生物碱对卡波济（KaPosi）肉瘤有效，因此考虑使用紫杉醇治疗此病。此外，紫杉醇可抑制卡波济肉瘤的梭形细胞生长及在体外有抗血管生成活性，因而于1993年9月开始对HIV引起的卡波济肉瘤用紫杉醇治疗进行I期临床试验。受试对象为适于系统治疗经活检证实为卡波济肉瘤患者，其体力状况及器官功能较好。紫杉醇开始用量为135mg·m’，3h静脉输注，每21dl次。每一疗程后剂量增加ZOmg’m－’，如粒细胞计数绝对值＞…     

微管抑制剂诱导肿瘤细胞有丝分裂灾难研究进展

微管抑制剂一直是抗肿瘤药物研究的热点。微管抑制剂通过促进或抑制微管的聚合来破坏微管的动态平衡,阻碍肿瘤细胞纺锤体形成,阻滞细胞分裂进程从而发挥抗肿瘤作用。有丝分裂灾难是发生在细胞有丝分裂期,由细胞分裂异常和纺锤体结构的损伤而造成的细胞死亡现象。近年来,微管抑制剂能够诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难已被临床证实,并越来越受到人们关注。现对微管抑制剂的最新研究进展进行综述,并探讨其诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难死亡的分子机制。     

紫杉醇周围神经毒性临床观察

紫杉醇（paclitaxel，taxol）又名泰素、紫素、特素，是紫杉类植物中分离出的天然产品，是一种新型抗微管药物，作用机制是促进微管聚合，结合位点在聚合状态微管上，可促进微管蛋白聚合成团块和成束并使其稳定，从而抑制微管网的正常重组，属广谱抗肿瘤药物，并具显著放射增敏作用。经临床研究证实，其对卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌疗效较突出，目前也广泛用于头颈癌、食管癌、胃癌、精原细胞瘤等。主要不良反应为过敏反应、周围神经毒性、心血管毒性、血液学毒性和胃肠道毒性。我院自2006年9月至2007年11月应用国产紫杉醇（湘北威尔曼制药有限公司生产）联合化疗，治疗乳腺癌12例，卵巢癌10例，非小细胞肺癌10例，食管癌3例，胃癌2例，头颈癌2例。紫杉醇周围神经毒性报告如下。     

药物发现的一种新途径[英]／Ewan SG／／Drug／Discou Today

发动蛋白(dynamin-2)是一个通过自身单体聚合形成的聚合GTP酶。人们发现，在细胞内，发动蛋白通常与细胞膜有关，并且发动蛋白与其他一些相似的蛋白质一样，也与细胞的信号转导途径有关。美国研究者发现发动蛋白也埋藏在细胞质中。发动蛋白在细胞的中心小体中与γ-微管蛋白相连接。微管蛋白形成了微管，微管在细胞分裂的染色体分裂阶段形成有丝分裂的纺锤体。该研究成果表明，     

多西紫杉醇联合化疗方案治疗转移性乳腺癌40例临床分析

<正>多西紫杉醇是一种半合成的紫杉醇类药,作用靶点是微管,可促进微管蛋白聚合和阻止微管蛋白解聚的作用,从而抑制细胞的有丝分裂和增殖,起抗肿瘤作用,对转移性乳腺癌有较高疗效。我科从2007年1月至2008年3月采用以多西紫杉醇为主的联合化疗方案治疗转移性乳腺癌,取得较好     

以微管蛋白为靶的高通量药物筛选方法的建立与应用

目的：以微管蛋白为靶建立高通量筛选（HTS）模型，以便有效地发现抗肿瘤化合物。方法：细胞培养与免疫荧光技术。结果：以常规的免疫组化（玻片）方法为基础优化实验条件，在96孔板上建立了以微管蛋白为靶点的高通量药物筛选模型；抗肿瘤药物紫杉醇和秋水仙碱作用于人肝癌HepG2细胞后，细胞的免疫荧光强度发生了明显的可检测的变化，间接反映药物对细胞徽管蛋白聚合／解聚作用的影响，与理论预测结果一致。结论：基于人肿瘤细胞的以徽管蛋白为靶点的高通量筛选方法可用于抗肿瘤化合物的筛选。     

去甲斑蝥素对体外微管蛋白聚合的抑制作用

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对微管蛋白聚合-解聚过程的影响。方法采用蛋白凝胶电泳鉴定从猪脑中提取的微管蛋白,并用Bradford法测定微管蛋白含量。在经过秋水仙碱和紫杉醇验证稳定的37℃和4℃平衡体系内加入NCTD 10,20和30μmol.L-1观察微管蛋白聚合-解聚活性。人卵巢癌SK-OV-3细胞加入NCTD 60μmol.L-1作用8 h,取上清和沉淀,Western印迹法检测微管蛋白含量。结果与空白对照组相比,在37℃聚合反应中,NCTD 10,20和30μmol.L-1组对微管蛋白聚合的抑制率分别为(5.5±2.7)%,(7.1±1.2)%和(27.5±0.4)%,在此浓度范围内NCTD随浓度的升高抑制作用增强(P<0.05),但对微管蛋白在4℃的解聚影响不显著。NCTD 60μmol.L-1作用人卵巢癌细胞后,细胞中游离微管蛋白增加了(91.5±8.5)%,聚合微管蛋白量减少了(51.8±3.8)%,说明NCTD抑制了人卵巢癌细胞SK-OV-3中微管蛋白的聚合。结论 NCTD对体外微管蛋白的聚合具有一定的抑制作用。