用增强化学发光法检测β-地中海贫血的基因突变

使用生物素-14-dATP于3＇末端标记等位基因特异性寡核苷酸(ASO)探针,结合增强化学发光法(ECL)检测β-地中海贫血的基因突变。经过对已知突变类型的15例β-地贫杂合子,1例双重突变杂合子DNA的检测,证明本法具有良好的敏感性和特异性,能准确区分上述样品的4种基因型,与放射性同位素~(32)p标记ASO探针的分析结果相一致。将本法应用于15例临床新病例的基因分析,其中鉴定出4例为CDs41-42(-TCTT)突变,7例为IVS-Ⅰ-654(C→T)突变。本法操作简便,结果可靠,不依赖同位素,适用于临床实验室开展β-地贫的基因诊断和大样本人群的基因调查。     

β地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C→T)的基因鉴定

目的：总结新疆１６例β地中海贫血ＩＶＳⅡ６５４（Ｃ→Ｔ）的基因分析结果。方法：应用聚合酶链式反应和寡核苷酸探针杂交。结果：对新疆１６例β地中海贫血先证者进行基因分析，鉴定为ＩＶＳⅡ６５４（Ｃ→Ｔ）基因突变，均为杂合子，其中汉族１１例，回族４例，维吾尔族１例。回族中这种突变类型属首次报道。结论：本文结果对了解这一突变类型在我国的分布特点提供了有意义的资料     

以粒细胞肉瘤伴β-地中海贫血为首发症状慢性粒细胞白血病1例

病人,男,30岁。1个月前患者无明显诱因出现右下肢股骨骨折,于当地医院行右侧股骨骨折手术复位、闭合钉内固定术,术中取病理活检,结果提示“粒细胞肉瘤”,当时查血常规WBC15×109/L。查体:中度贫血貌,颈部、腹股沟可触及数个黄豆大小、质中等无压痛的淋巴结,胸骨无压痛,肝脾不大,右下肢腓肠肌侧可见一肿块约4cm×3.5cm质中等,无粘连、压痛。行骨髓穿刺检查:原始粒细胞占7%,早幼粒细胞占9%。FISH法查BCR/ABL融合基因100%,免疫分型病态细胞主群RI占8.84%,表面表达CD34,CD33,CD17,CD13,CD71,CD4,HLA DR,R4占54%,表达CD13,CD10,…     

陕、甘、新地区β地中海贫血的突变基因分析

分析了丝绸之路沿线陕、甘、新三省区８５例β地中海贫血（β地贫）患者的基因突变。检出率最高的前４种突变为ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）、ＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）、－２８位（Ａ→Ｇ）和ＣＤｓ４１／４２（－ＴＴＣＴ），占总检出率的７８．７％，是该地区主要的β地贫突变类型。此外还检出了ＣＤ８（－ＡＡ）、〔－２８（Ａ→Ｇ）ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）／Ｎ〕、ＣＤｓ８／９（＋Ｇ）、ＣＤｓ２７／２８（＋Ｃ）等共１２种β地贫的基因突变型。其中〔－２８（Ａ→Ｇ）ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）／Ｎ〕为同一染色体上的双重基因突变，未见文献报道；ＣＤ８（－ＡＡ）和ＣＤｓ８／９（＋Ｇ）为在中国人中首次发现；ＣＤｓ２７／２８（＋Ｃ）在我国也甚为罕见。研究表明，丝绸之路地区β地贫的类型及频率既与我国其他地区乃至东南亚各国不完全相同，又与邻近的中亚各地有一定差异，具有明显的地理特点     

新疆1例汉族家系β地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C→T)的基因分析

应用聚合酶链反应结合等位基因特异的寡核苷酸探针斑点杂交技术(PCR/ASO),对新疆首例β地小海贫血(β地贫)家系进行基因分析,从12名家系成员中检出7例β地贫基因突变(IVS-Ⅱ-654,CT)的杂合子。结合家系调查、临床症状及血液学检查结果,证实先证者的致病基因来源于父方。     

新疆一例汉族家系β地中海贫血ⅣS-Ⅱ-654(C→T)的基因分析

本文报道应用聚合酶链反应(PCR)结合等位基因特异的寡核苷酸(ASO)探针斑点杂交技术,对新疆首例p地中海贫血(p地贫)家系进行基因分析,从12名家系成员中检测出7例p地贫基因突变(ⅣS-Ⅱ-654,C→T)的杂合子。结合家系调查、临床表现及血液学检查结果,证明先证者的致病基因来源于父方。该研究对了解新疆地区p地贫基因突变类型和频率以及开展产前诊断具有重要意义。     

微小RNA对β-地中海贫血中γ-珠蛋白基因的调控机制研究进展

β-地中海贫血（β-地贫）是β-珠蛋白基因发生突变导致β-珠蛋白合成减少或缺如,以溶血性贫血为主要临床特征的一类单基因遗传病。目前暂无治疗该病的特效药。研究已证实,一些转录因子通过调控γ-珠蛋白基因增加胎儿血红蛋白表达,从而缓解无效造血,改善β-地贫患者的临床症状,降低对输血依赖性。随着表观遗传学研究的不断深入,发现微小RNA（microRNA,miRNA）不仅在β-地贫患者中存在表达失衡,也参与γ-珠蛋白基因的转录调控。全面了解miRNA对γ-珠蛋白基因的调控作用能够为阐明β-地贫的致病机制并对该病的精准治疗提供新的思路和方向。     

新疆11例β地中海贫血CDs41／42（—TTCT）的基因分析

应用ＰＣＲ／ＡＳＯ技术对新疆的１１例β地中海贫血（地贫）进行基因分析。现已鉴定为ＣＤｓ４１／４２（－ＴＴＣＴ）基因突变，其中汉族８例维吾尔族２例，瑶族１例，均为杂合体。维吾尔族中的这种突变型系首次报道。这些先证者都有地贫症状，伴有程度不同的贫血和ＨｂＡ２增高（３．３９％￣６．６７％），分散在新疆的广大地区。本文为了解这种突变类型在我国的分布情况提供了新的资料。     

α-地中海贫血基因型与红细胞参数相关性探讨

目的 探讨α-地中海贫血患者的基因型中的红细胞(RBC)参数变化及其在α-地中海贫血初筛中的临床价值.方法 采用已建立的技术和方法测定665例患者的基因型,其中426例为α-地中海贫血组(包括SEA 272例、静止型95例和HbH 59例),239例正常组.测量其相对应的红细胞参数(RBC计数、HGB、MCV、MCH、RDW).采用统计软件SPSS11.0进行统计分析.结果 (1)与正常对照组比较,男性静止组的RBC计数和RDW均P＞0.05差异不明显,HBH组有RBC计数P＞0.05差异不明显;女性只有静止组的RDW P＞0.05差异不明显,其余比较均P＜0.05差异显著;(2)随着贫血加重,RBC的各项参数差异越明显.结论 表型红细胞参数可以做为α-地中海贫血的初筛,有助于基层医院开展地贫筛查.     

在我国首次发现四例维吾尔族β地中海贫血CD8(-AA)突变型

作者在新疆喀什市进行地中海贫血调查时,应用聚合酶链反应结合等位基因特异的寡核苷酸探针杂交技术(PCR/ASO),在4例无亲缘关系的维吾尔族学生中检出β地中海贫血CD8(—AA)杂合子,这种突变型在我国人中系首次发现,而在维吾尔族中的频率较高。本文报告先证者的临床血液学资料和基因分析结果,并对它的分布特点和意义进行初步讨论。     

东莞地区孕龄人群地中海贫血基因检测结果分析

目的了解东莞地区孕龄人群地中海贫血(简称地贫)基因检测结果,为地贫防控工作提供依据。方法以参加东莞市免费婚前健康和孕前优生联合检查的孕龄男女为研究对象,将MCV≤80 fl和或MCH≤27 pg作为血筛查阳性指标,筛查阳性者进行地贫基因检测。结果 74 098例孕龄人群中,地贫初筛阳性11 012例,初筛阳性率为14.86%。检出地贫基因携带者7 214例,检出率9.74%;其中α-地贫基因携带者5 002例,检出率6.75%;β-地贫基因携带者1 973例,检出率2.66%;α-地贫复合β-地贫基因携带者239例,检出率0.32%;发现117对夫妇有妊娠重型地中海贫血胎儿的可能,产前诊断的需求率为65.73%。结论东莞地区育龄人群地贫基因携带高,产前诊断需求率高,医疗卫生部门应重视地贫防控,加强对孕龄人群进行地贫筛查。     

PCR结合寡核苷酸分子杂交技术在基因诊断中的应用——附一例β地贫(IVS—Ⅰ—5G→C)杂合子的报告

本文报告采用~(32)P标记的寡核苷酸探针与聚合酶链式反应(PCR)扩增的β珠蛋白基因的特异DNA片段进行分子杂交,鉴定β地中海贫血(地贫)的基因突变,检出1例病人为地贫基因突变(IVS-1-5G→C)的杂合子,为临床开展其它遗传病及病毒、肿瘤等疾病的基因诊断提供了实用、有效的途径.     

血红蛋白电泳对地中海贫血诊断的准确性评价

地中海贫血又称合成珠蛋白障碍贫血,是最常见的遗传性疾病之一,发病原因是障碍性合成珠蛋白肽链的一种或多种导致溶血而贫血,在我国南方地区有较高的发生率。地中海贫血常见的有仅一地中海贫血,发病原理为α链减少使β链与δ链异常结合导致HbA：减少;β-地中海贫血,     

银染PCR—SSCP法检测横纹肌肉瘤p53基因点突变

应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法和免疫组织化学ＡＢＣ法，检测３０例横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中ｐ５３基因突变及其蛋白表达。结果显示：３０例ＲＭＳ中，７例ＳＳＣＰ阳性（２３．３％）。表明这些病例相应ＤＮＡ片段中发生了点突变，其中第５、６、７、８外显子ＳＳＣＰ阳性出现的例次分别为０、０、５、４次。ｐ５３蛋白表达率６６．７％（二者符合率５６．７％）。ｐ５３基因突变及蛋白表达与年龄、性别、肿瘤组织类型无关。而与肿瘤     

新生儿脐血Hb Bart''s水平作为α-地中海贫血携带者早期筛查指标临床应用评价

目的将新生儿脐血Hb Bart'水平作为α-地中海贫血携带者或患儿早期筛查指标进行临床应用评价.方法对1006份新生儿脐血标本同时采取琼脂糖碱性血红蛋白电泳和分子筛查技术分别进行Hb Bart'定量和α-地中海贫血基因分析.结果在上述标本中,检出Hb Bart'阳性样品64份,阳性率为6.36%.此外,还检出异常Hb 6例,在这些阳性样品中,检出2类5种α-地中海贫血基因共64份,其余的906份阴性样品中尚检出α-地中海贫血基因阳性38份,故该市户籍人群中总的α-地中海贫血基因携带率为10.44%.Hb Bart'水平筛查法对正常基因型和α-地中海贫血基因阳性样品的诊断符合率分别为99.8%和62.1%,假阳性率为3.1%;而对静止型α-地中海贫血的漏检率高达36.2%.结论Hb Bart'水平筛查法具有简便、快速且经济,并能对各型α-地中海贫血作出临床早期诊断,但对静止型α-地中海贫血则例外.     

β-重型地中海贫血MR定量心脏铁沉积与血清铁蛋白、肝铁浓度相关性研究

目的 使用MR定量重型地中海贫血患者心脏铁沉积,探讨其与血清铁蛋白(SF)、肝铁浓度(LIC)的相关性.方法 对58例10岁以上长期接受输血治疗的β-重型地中海贫血患者行心脏MR检查并测量T2*值,采用Spearman相关分析探讨心脏T2*值和SF、LIC之间关系.分别以SF＞2500μg/L和LIC＞ 15 mg/g干重为界值将患者分组.用完全随机设计两样本秩和检验比较2组患者的心脏T2*值.以T2*＜20 ms为诊断心脏铁沉积参考标准,计算以SF＞ 2500 μg/L或LIC＞ 15 mg/g干重预测心脏铁沉积的敏感度、特异度,分别绘制用SF和LIC预测心脏铁沉积的ROC曲线.结果 58例患者的心脏T2*值范围4.7～51.1 ms,中位数14.o ms; SF范围1345 ～23 640 μg/L,中位数5741 μg/L; LIC范围9.0～ ＞43.0 mg/g干重,中位数41.4 mg/g干重.所有患者的心脏T2*值与SF尚不能认为有线性相关关系(r=-0.240,P =0.070);心脏T2*值和LIC之间呈低度负相关(r=-0.402,P=0.002).SF≤2500 μg/L组7例,心脏T2*值范围6.1 ～47.6 ms,中位数23.7 ms; SF＞2500 μg/L组51例,心脏T2*值范围4.7 ～51.1 ms,中位数13.5 ms,2组心脏T2*值之间差异无统计学意义(Z=-0.489,P=0.625).LIC≤15 mg/g干重组5例,心脏T2*值范围24.4 ～51.1 ms,中位数44.8 ms;LIC＞ 15 mg/g干重组53例,心脏T2 *值范围4.7～45.5ms,中位数13.2 ms,2组心脏T2*值之间差异有统计学意义(Z=-2.895,P =0.004).以SF＞ 2500 μg/L和LIC＞ 15 mg/g干重预测心脏铁沉积的敏感度分别为90.9％(30/33)、100.0％(33/33),特异度分别为16.0％ (4/25) 、20.0％(5/25).以SF和LIC预测心脏铁沉积的ROC曲线下面积分别为0.652、0.775.结论 MRI-T2*可以直接定量重型地中海贫血患者心脏铁沉积,心脏铁浓度与SF无相关,与LIC低度相关.临床用SF或LIC预测心脏铁沉积不可靠,对诊断及治疗提供参考价值不大.     

α-地中海贫血胎儿的超声表现

1临床资料 本研究回顾分析2007年1月～2008年6月行超声诊断拟诊地中海贫血并经羊水穿刺或脐静脉穿刺行染色体检查及地中海贫血基因检查证实为α-地中海贫血的胎儿33例．胎儿除外心脏畸形、颈部水囊瘤、染色体异常、宫内感染等。孕妇年龄21—38岁，妊娠周数16～24周，均为单胎妊娠。使用仪器为飞利浦-IU22、西门子Sequoia512彩色超声诊断仪，频率为4．0MHz、6．0MHz。