金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的相关性研究

目的研究携带TSST-1和PVL基因的金黄色葡萄球菌耐药特点、分布特征及与致病性的关系。方法临床收集74株金黄色葡萄球菌,采用PCR法检测TSST-1、PVL和mecA基因,纸片扩散法进行17种抗菌剂的耐药性检测。结果 74株金黄色葡萄球菌中mecA基因检出率为55.4%,其中22株检出PVL基因(30.3%),PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为15株(36.6%),甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)为7株(21.2%),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。5株金黄色葡萄球菌中检出TSST-1基因(6.3%),均为MRSA。MRSA耐药性严重,并呈多重耐药性,携带基因PVL和TSST-1的MRSA除对万古霉素敏感外,对其他抗菌剂均耐药。结论携带基因TSST-1和PVL的金黄色葡萄球菌耐药性及致病力更强,增加了临床抗感染治疗的难度。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的 研究金黄色葡萄球菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)基因和杀白细胞毒素 (PVL) 基因的分布特征及致病性.方法 收集临床分离的80株金黄色葡萄球菌,PCR法检测毒素基因TSST-1,PVL和 mecA耐药基因.结果 80株金黄色葡萄球菌经PCR法,mecA基因检出率为56.3%(45/80),其中2006年为65.8%(25/38),2007年为47.6%(20/42),2007年的mecA基因检出率低于2006年.PVL+菌株的分离率为30.3%,PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为13株(13/45,28.9%),金黄色葡萄球菌(MSSA)为11株(11/35,31.4%),差异无统计学意义(P>0.05).TSST-1基因检出率为6.3%(5/80),MSSA中未检出TSST-1基因.结论 产PVL和TSST-1的MRSA致病力更强,增加了临床治疗的难度,对MRSA引起的感染应加强控制,防止其在医院播散流行.     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec(SCCmec)基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应(PCR)进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素(PVL)基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%(39/102)。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌（SA）的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec（SCCmec）基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应（PCR）进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素（PVL）基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%（39/102）。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

MRSA杀白细胞素基因检测和SCCmec分子流行病学调查

目的 了解我院临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec基因盒(staphyloccoccal cassette chromosome mec,SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)基因的携带状况.方法 收集我院2005年10月-2006年6月从临床标本中分离的30株MRSA(mecA基因阳性).运用多重PCR检测SCCmec的基因型和亚型;PCR扩增PVL基因;纸片扩散法检测MRSA对10种抗菌药物的耐药性.结果 30株MRSA中,SCCmecⅡ型6株(20.0%);SCCmecⅢ型15株(50.0%);SCCmecⅣa型1株和SCCmecⅤ型2株.6株MecA基因阳性菌株未能分型.PVL总阳性率36.7%(11/30),其中SCCmecⅡ1株、SCCmecⅢ5株、SCCmecⅣa 1株,SCCmecⅤ2株、未分型2株.SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他抗菌药物呈现多重耐药.SCCmecaⅣa和SCCmecⅤ型的菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他类抗菌药物均敏感.结论 我院临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ和SCCmecⅡ为主;PVL基因的阳性率较高;携带SCCmecⅡ和SCCmecⅢ的MRSA对抗菌药物呈现多重耐药现象.     

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系.方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 mecA 和致病毒素基因中毒休克综合征毒素‐1(TSST‐1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做 D‐试验.结果74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%. MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05). PVL 基因阳性的 MRSA 耐药性与 PVL 基因阴性的 MRSA 比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05). PVL 基因阳性的 MSSA 耐药性比不携带 PVL 基因的 MSSA 强,两者间差异有统计学意义(P<0.05).携带 TSST‐1基因的 MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药. D‐试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%.只有1株 PVL 基因阳性的 MRSA D‐试验阳性.结论MRSA 的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL 和 TSST‐1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及 MSSA 的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度.     

鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型

目的探讨鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特点,明确本地区MRSA基因型别及其分布规律。方法收集2009年1月至2011年8月临床分离的MRSA菌株54株。应用多重聚合酶链反应(PCR)对MRSA菌株进行葡萄球菌染色体mec(SCCmec)基因分型、杀白细胞毒素(PVL)毒力基因(pvl)和多位点序列分型(MLST)检测。结果 MRSA菌株的SCCmecⅠ~Ⅴ基因分型分别占0.00%、50.00%、46.30%、1.85%和1.85%;检测出1株pvl基因阳性;24株MRSA菌株MLST分型显示,ST239 13株(54.17%),ST59株(37.50%),ST5 9和ST7各1株(4.17%)。结论鄂尔多斯地区蒙古族人群MRSA菌株以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主。     

应用多重聚合酶链反应对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行SCCmec基因分型

目的应用多重聚合酶链反应（PCR）对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及亚型进行分型。方法收集本院2005年2月至7月临床分离的112株金黄色葡萄球菌，应用PCR扩增mecA基因检测MRSA，用多重PCR检测MRSA的SCCmec的基因型及亚型。用全自动微生物分析仪进行药敏试验。结果72株金黄色葡萄球菌的mecA基因阳性，确定为MRSA，阳性率为64．3％（72／112）。SCCmecⅢ和SCCmecⅢA的阳性率分别为68．1％（49／72）和20．8％（15／72），H16和H56为SCCmecⅡ，H19为SCCmecⅣ，5株MRSA没有被分型。携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ或SCCmecⅢA的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ的菌株除对B内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌素敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ和SCCmecⅢA为主。多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型结果可靠，适合临床实验室。携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ或SCCmecⅢA的临床分离株耐药性严重。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型的研究

目的 应用多重聚合酶链反应(PCR)对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的金黄色葡萄球菌染色体mec基因盒(Staphylococcal chromosomal cassette mec,SCCmec)基因型及亚型进行分型。方法 收集该院2012年1~9月临床分离的30株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,用多重PCR检测MRSA的SCCmec的基因型及亚型。结果 检出SCCmecⅠ型菌株1株(3.3%),SCCmecⅠA型菌株1株(3.3%),SCCmecⅡ型菌株4株(13.3%),SCCmecⅢ型菌株23株(76.7%),SCCmecⅣ型菌株1株(3.3%)。结论 该院分离的MRSA以携带SCCmecⅢ为主。多重PCR可用于临床实验室MRSA的SCCmec基因分型。     

金黄色葡萄球菌致病毒素基因分布特性及与致病性的相关性

目的研究金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)致病毒素基因的分布特性及与致病性的关系。方法对临床收集的80株金葡菌,采用头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA),多重聚合酶链反应法检测致病毒素基因中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)、杀白细胞毒素(PVL),分析TSST-1、PVL基因阳性金葡菌的临床分布特性及与致病性的相关性。结果 80株金葡菌中MRSA总检出率为58.8%,PVL基因阳性金葡菌在医院的分布范围较广,主要引起呼吸系统感染、化脓性感染,也可引起其他感染性疾病,严重的可导致败血症;TSST-1基因阳性的MRSA均PVL基因阳性,均取自重症监护室肺部感染和化脓性感染的患者。结论 MRSA已成为医院感染的重要致病菌,携带致病毒素基因TSST-1、PVL的金葡菌也占有一定的比例,在医院的分布范围较广,致病毒素基因TSST-1、PVL可增强MRSA的致病力,这增加了临床治疗难度。     

宁夏地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的调查临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的染色体m ec基因盒（SCCm ec）分型及杀白细胞素（PVL）的pvl基因携带率,初步了解宁夏地区MRSA分子流行病学特点。方法对2005年9月至2008年1月从临床标本中分离的MRSA菌株进行pvl基因检测,并应用多重聚合酶链反应（PCR）对MRSA菌株进行SCCm ec分型。结果 88株MRSA菌株中pvl基因阳性菌株8株（9.1%）,SCCm ec分型结果为Ⅲ型86株（97.7%）、Ⅱ型2株（2.3%）。结论宁夏地区分离的MRSA菌株SCCm ec分型以Ⅲ型为主,SCCm ec分型是探索MRSA多重耐药性有效的分子生物学手段。     

Molecular characterization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus bloodstream isolates from Croatia

OBJECTIVES: The objectives of this study were (i) to investigate the genetic background of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) bloodstream isolates from Croatia and (ii) to monitor the prevalence of Panton-Valentine leucocidin (PVL) and toxic shock syndrome toxin-1 (TSST-1) among these isolates. METHODS: Eighty-two hospital-acquired MRSA bloodstream isolates, collected in 2001 and 2002 in Croatia, were characterized by PFGE, staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) typing and multilocus sequence typing (MLST). The presence of genes encoding PVL and TSST-1 was investigated by real-time PCR. RESULTS: All strains were multiresistant and were distributed among 16 different similarity groups as determined by PFGE. Two of the groups, groups H and K, harboured the majority of the MRSA strains with 52 and 12%, respectively. The predominant SCCmec type found among the isolates was type I (89%). Eleven per cent of the strains harboured a modified SCCmec type III, which contained, in contrast to the regular type III, an additional dcs region. One strain harboured a novel SCCmec type, containing the ccrC gene in combination with the mecI gene, the dcs region, the locus between pI258 and Tn554 (locus E) and the locus between Tn554 and orfX (locus F). MLST showed the presence of ST111-MRSA-I and ST247-MRSA-I among Croatian MRSA isolates. All isolates were negative for both PVL and TSST-1. CONCLUSIONS: These results indicate the emergence of ST111-MRSA-I and ST247-MRSA-I in Croatia among MRSA bloodstream isolates. The virulence factors PVL and TSST-1 were not present among these isolates.     

我国各地区18所教学医院金葡菌临床分离株杀白细胞毒素基因检测及分子流行病学调查

目的研究我国多所医院临床分离金葡菌中杀白细胞毒素（PVL）分布特征及与临床疾病的关系。方法对18所教学医院临床分离809株金葡菌进行PCR检测PVL基因，PVL阳性菌株经纸片扩散法检测MRSA表型，mecA～femB双重PCR确证MRSA基因型，并对PVI，阳性的MRSA进行SCCmec分型，脉冲场凝胶电泳（PFGE）法对PVL阳性的MRSA进行同源性分析。结果809株金葡菌中58株（58／809，7．2％）携带PVL基因。沈阳检出率较高，其次为武汉，与其他医院差异有统计学意义（P〈0．05）；PVL阳性的MRSA15株（15／407，3．5％），MSSA43株（43／402，11．1％），差异无统计学意义（P〉0．05）；PVL阳性的门诊菌株7．9％（5／63），住院6．9％（53／746／，差异无统计学意义（P〉0．05）。PVL阳性的MRSA经SCC—mec分型，Ⅱ型3．8Voo（2／53），Ⅲ型4．7％（12／258），未分型1．0%（1／104），差异无统计学意义（P〉0．05）。PVL阳性的MRSA经PFGE后，A克隆株73．3％（11／15）；B克隆株13．3%（2／15）；C克隆株6．7％（1／15）；D克隆株6．7％（1／15），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PVL可以引起严重感染，及时进行检测并做同源性分析，采取有效的措施控制医院感染的暴发。     

杀白细胞毒素基因阳性MRSA的临床和实验研究

目的了解2003-2006年我院MRSA临床分离株中杀白细胞毒素（PVL）基因的分布、SCCmec分型、药物敏感性及其临床特征。方法对2003年1月至2006年12月我院1366株MRSA临床分离菌株，用PCR方法筛选PVL基因阳性菌株，用多重PCR方法进行SCCmec分型；并进行回顾性研究，分析PVL基因阳性及阴性株所致感染的临床特点及相关危险因素；用琼脂稀释法测定其对临床常用抗菌药的敏感性（MIC）。结果在1366株MRSA菌株中共筛出5株PVL基因阳性菌株，阳性率为0．37％。50株MRSA临床分离菌株中，SCCmecI型1株，占2％（1／50）；SCCmecⅡ型26株，占52％（26／50）；SCCmecⅢ型16株（其中包括SCCmecⅢA1株），占32％（16／50）；SCCmecⅣ型1株，占2％（1／50）；SCCmecⅤ型2株，占4％（2／50）；4株（8％）未能分型。5株PVL基因阳性株中SCCmec11型1株，SCCmecIV型1株，SCCmecⅤ型2株，未分型1株。MIC结果显示PVL基因阳性株较阴性株对多种非β内酰胺类抗生素更为敏感，未发现万古霉素不敏感菌株。该5株PVL阳性菌株所致感染分别为皮肤软组织感染2例、肺部感染2例和尿路感染1例。结论PVL基因阳性MRSA已在我院检出，应加强医院感染控制防治其播散流行。     

多重PCR检测MRSA的SCCmec基因分型

目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA，应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒（staphylococcal cassette chromosomeSCCmec）分型及杀白细胞毒素（PVI。）基因检测，应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性，其中SCCmecII型1株，SCCmecⅢ型120株，SCCmecⅣ型3株，未分型1株；未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主，发现SCCmecIV型CA-MRSA，但不携带PVL基因；携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SPA基因分型研究与耐药性分析

目的 探讨鄂尔多斯地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株杀白细胞毒素(PVL)基因分布特点及药物敏感性。方法 收集2012年6月～2014年12月临床分离的SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株66株,应用聚合酶链反应对菌株进行PVL基因型检测,用琼脂稀释法测定PVL阳性菌株对常用抗菌药物的敏感性。结果 66例MRSA有6例PVL阳性,阳性率9.09%,其中Ⅱ型4株,Ⅲ型2株; 6株PVL阳性菌均对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和对多种非β内酞胺类抗菌药敏感,对β内酞胺类、大环内酯类和克林霉素高度耐药。结论 在鄂尔多斯地区MRSA菌株中PVL阳性菌株较低,4株为CA-MRSA,2株为HA-MRSA,若以PVL阳性作为区分MRSA类型的标志有待进一步研究。