丹参中丹酚酸B的提取工艺研究

丹参水溶性有效成分多具有酚酸性结构,主要由丹参素,丹酚酸A、B、C、D、E等含酚羟基的化合物构成,其中丹酚酸B的量最高,为3个分子丹参素与1个分子咖啡酸缩合而成,是丹参发挥疗效作用的主要物质之一。目前研究较多的有总丹酚酸(totalsalvianolic acid)、丹酚酸A(salvianolic acid A)和丹酚酸B(salvianolic acid B)[1]。本实验针对丹酚酸B对热的不稳定性,本实验比较了水提法、超声提取法和闪式破碎提取法处理丹参样品,为进一步优化丹酚酸B的提取条件提供参考。1仪器与试剂日本岛津LC—2010A高效液相色谱仪,KQ—300VDE超声提取器(昆山…     

丹参酚酸类成分研究进展

丹参药用历史悠久,资源丰富,为临床常用中药之一。现代研究表明酚酸类成分是丹参中的主要药效物质,具有保护心脑血管、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗纤维化等作用,已被广泛应用于心脑血管等多种疾病治疗。该文对丹参酚酸类化学成分和近十年国内外药理研究进行全面总结,分析其研究和开发前景,以期为丹参酚酸类成分的深入研究和开发利用提供科学依据。     

微波法提取丹参中丹酚酸B的研究

目的采用微波提取技术提取丹参。方法以丹酚酸B为指标，采用单因素方法考察了影响其收率的因素：提取溶剂体积分数、微波辐照时间、加热温度、微波输出功率、液固比、预浸泡时间及丹参粒径和提取次数。结果最佳工艺为30％乙醇为提取溶剂，按10：1的液固比，微波输出功率650W，70℃，辐照7min，预浸泡90min，提取3次，丹酚酸B收率可达到7．92％。该微波法提取5min比热回流法提取5h的丹酚酸B收率还高。结论微波提取技术提取丹参不仅缩短了提取时间而且节省了生产成本。     

萃取与工业色谱相结合批量制备丹参中丹酚酸B

中药丹参是唇形科鼠尾草属多年生草本植物丹参的干燥根及根茎[1],作为一种传统中药在我国沿用已久,具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦的功效[2]。现代药理研究证明:水溶性丹酚酸类化合物是丹参主要有效成分[3]。其中丹酚酸B含量最高,约占总丹酚酸的70%,且活性最高,具有强烈的清除自由基和抗氧化作用[4]。丹酚酸B是2分子丹参素与1分子紫草酸缩合而成的四聚咖啡酸类化合物,其化学性质很不稳定。已见报道的文献中,制备丹酚酸类化合物....     

丹参中酚酸类成分在不同工艺条件下转化关系

目的:研究提取时间、碱处理、转化时间等因素对丹参中酚酸类成分水解转化规律影响。方法:采用高效液相色谱法,分别考察了丹参饮片在不同加热时间、p H及反应时间下的丹参酚酸类成分峰面积变化规律。结果:在加热的6 h内,丹酚酸B在受热30 min峰面积最大,随后丹酚酸B开始发生降解,丹参素、原儿茶醛、丹酚酸A是终产物。丹酚酸A进一步在碱性条件下又发生降解,生成丹酚酸C和异丹酚酸C一对同分异体。结论:揭示了丹参在受热、p H条件下中丹酚酸类成分的转化规律,为丹参在中药制剂生产和临床应用中提供理论基础。     

丹参中丹酚酸B的提取与纯化工艺研究

目的研究丹参中丹酚酸B的提取与纯化工艺。方法选取丹参中药用价值较高的成分丹酚酸B作为研究对象,对其提取、分离、纯化工艺进行研究,同时选取了弱极性AB-8树脂及D101树脂进行优化实验。结果丹酚酸B纯度可以达到76%,同一洗脱条件D101树脂吸附丹酚酸B的效果明显优于AB-8效果。结论 100℃,7倍量的水,1h/次,提取3次为最佳提取工艺,提取率为77.88%。然后采用AB-8与D101树脂进行洗脱纯化发现,D101树脂明显优于AB-8树脂,洗脱转移率可达到90.2%。     

HPLC-MS法测定白花丹参叶中丹酚酸B的含量

目的:分析白花丹参叶中丹酚酸B的含量。方法:丹参叶样品水溶解,超声提取后分析。液相色谱柱为symmetry field RP18(2.1mm×150mm)column;流动相:甲醇-水梯度洗脱;质谱为waters micromass ZQ4000,离子模式为选择离子(SIR)。结果:丹酚酸B采用SIR定量得到了良好的线性关系(r=0.9998);精密度实验RSD为0.47%,加样回收率为96.26%。结论:白花丹参叶含有丰富的丹酚酸B,丹酚酸B含量大约为16.62mg/g。     

丹参中丹酚酸B的含量测定

建立反相高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸B的含量测定方法。色谱柱LichrospherC1 8(5 μm ,2 5 0mm×4 6mm) ,流动相 :甲醇 -乙腈 -水 -冰醋酸 (4 0 :1 0 :5 0 :1 ) ,流速 :1ml/min ,检测波长 :2 80nm ;丹酚酸B的线性范围为 1 2 8～ 8 0 0 μg ,r=0 9999;平均回收率为 1 0 1 1 1 % ,RSD为 1 84 % (n =5 )。说明本法操作简单 ,分析快速、准确、灵敏度高 ,重现性好 ,可用于丹参药材的质量控制     

不同炮制方法对丹参药材中丹酚酸B的影响

目的:考察丹参不同炮制品中丹酚酸B的含量差异.方法:采用高效液相色谱法对各种丹参炮制品中的丹酚酸B进行含量测定.结果:各炮制品中,酒丹参中丹酚酸B含量最高,醋丹参次之,其次是生丹参,米炒丹参和炒丹参中丹酚酸B的含量很少,丹参炭中丹酚酸B的含量最低.结论:丹酚酸B热稳定性差,乙醇和酸性添加剂可增加丹酚酸B的热稳定性.     

丹参鲜药材中丹酚酸B含量测定

目的:建立丹参鲜药材预处理方法并测定鲜药材中丹酚酸B的含量。方法:通过使用不同方式提取丹参鲜药材,比较各提取液图谱差异,对丹参鲜药材提取的方式、溶剂用量等进行考察,并测定6批鲜丹参的丹酚酸B的含量。结果:丹参鲜药材切段后回流提取或在特定溶媒中粉碎可提取出丹酚酸B;确定丹参鲜药材预处理方法为:药材切段,加入25倍甲醇,粉碎,超声30 min。结论:丹参鲜药材中含有丹酚酸B,在提取前不能直接粉碎,否则不能提取出丹酚酸B。     

大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸的工艺研究

目的:研究D101大孔树脂分离纯化丹参总酚酸的工艺条件及参数。方法:采用正交实验法,以大孔树脂柱上总酚酸的保留率作为考察指标,对影响总酚酸纯化效果的主要因素进行考察。结果:水洗液体积及上样液中总酚酸质量对树脂柱上总酚酸的保留率具有显著影响。采用大孔树脂分离纯化丹参粗提物中总酚酸,树脂柱上总酚酸的保留率可达87.52%,纯化后样品中总酚酸含量达到77.74%,总酚酸含量比粗提物中总酚酸含量提高了3.6倍。结论:采用大孔树脂分离纯化丹参总酚酸的方法是可行的,可应用于丹参总酚酸的工业化生产。     

丹参活性成分及相关分离分析方法研究进展

对丹参中活性成分及其分离分析方法进展进行文献整理和介绍,以方便大家更为清晰而全面的了解丹参,为其进一步开发利用提供有益参考.依据相关文献,总结丹参中主要成分的具体生物活性及其分离分析方法进展.现代研究表明,丹参中主要活性成分为酚酸和二萜醌类化合物,药理作用广泛,是其发挥活血祛瘀,通经止痛等传统功效的重要物质基础;此外,还出现了一些针对上述活性成分,较为高效、快速的分离分析方法.     

丹参及鼠尾草属植物的rDNA ITS序列分析

目的研究丹参ITS片段遗传多样性,分析该片段在丹参药材DNA分子鉴别和鼠尾草属植物系统学研究中的意义。方法用一对引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后用双脱氧终止法测序。结果获得核糖体DNA中ITS和5.8SrDNA完整序列,13个鼠尾草属植物ITS1与ITS2序列的长度分别为222～224bp、220～223bp。鼠尾草属植物种间ITS1序列差异百分率为0～12.16%,ITS2序列的差异百分率为0.5%～13.51%;丹参种内ITS1序列的差异百分率为0～0.9%,ITS2序列的差异百分率为0～0.5%;鼠尾草属各类群与外类群的差异百分率ITS1序列为16.07%～20.27%,ITS2序列为15.91%～20.27%。用邻接法(NJ)根据ITS1与ITS2序列数据建立系统发生树。结论两段序列在丹参种内保守,在属间有较大的差异,与外类群的差异最大,可作为中药丹参分子鉴定的标记,而鼠尾草属植物的系统发生关系尚须进一步研究。     

不同产地加工方法对山东丹参药材质量的影响

该文采用晒干、阴干、不同温度烘干及“发汗”处理加工丹参药材,并对切段样品和整体样品进行了晒干和阴干处理,通过测定药材中迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A的含量,考察不同加工干燥方法及不同形式药材干燥对丹参药材质量的影响。结果表明：晒干样品中隐丹参酮、丹参酮Ⅱ_A及迷迭香酸损失明显,但整体药材优于切段;烘干对丹参中水溶性成分影响较大,高温（80~100 ℃）易造成迷迭香酸和丹酚酸B的大量损失;丹参经“发汗”后,迷迭香酸含量降低,丹酚酸B无明显变化,而隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A含量显著升高;阴干及低温烘干（40~60 ℃）最有利于丹参中活性成分的保留,且阴干处理的切段样品与整体样品各成分含量无显著差异。因此,从各活性成分含量、节约生产成本等方面综合考虑,丹参药材的产地加工方法应以阴干或低温（40~60 ℃）烘干为宜。     

大生产中丹参提取物制备工艺优选

目的:对2010年版《中国药典》一部中丹参的2种提取物的制备工艺参数进行讨论,以便其更适应大生产的需要。方法:采用单因素试验法,以隐丹参酮、丹参酮Ⅱ_A的含量为指标,探讨丹参酮提取物原料的前处理方法;以固含物总量、丹酚酸B含量为指标考察丹参水提的最佳温度;以固含物总量、丹酚酸B含量、指纹图谱为指标确定丹参水提的原材料;运用指纹图谱技术确定丹参水提液的最佳浓缩温度。结果:丹参酮提取物原料的前处理方式可由粗粉变更为切成1~2 cm的小段;丹参总酚酸提取物的原材料可采用丹参酮提取物的药渣,提取温度可由80℃修订为100℃,浓缩温度可由60℃修订为80℃。结论:优选的工艺条件稳定可行,可为丹参提取物的大生产参数修订提供实验依据。     

大鼠尿样中马兜铃酸及马兜铃内酰胺的固相萃取方法

目的：研究大鼠尿样中多种马兜铃酸类(AAs)及马兜铃内酰胺类(ALs)化合物的固相萃取和富集的方法,为定量测定建立前处理方法。方法：以马兜铃酸-Ⅰ(AA-Ⅰ)、马兜铃酸-Ⅱ(AA-Ⅱ)、马兜铃内酰胺-Ⅰ(AL-Ⅰ)、马兜铃内酰胺-Ⅱ(AL-Ⅱ)和其他16个AAs及ALs化合物的高效液相色谱峰面积为指标,比较填料为C₁₈的Agilent C₁₈/100 mg,Alltech HC₁₈/100 mg,Alltech C₁₈/100 mg,Alltech C₁₈/300 mg和填料为苯基(Phenyl)的Agilent Phenyl/200 mg 5种固相萃取(SPE)小柱对目标成分的萃取保留作用的强弱；以AA-Ⅰ,AA-Ⅱ,AL-Ⅰ和AL-Ⅱ的萃取回收率为指标,比较水和1%醋酸-0.02%三乙胺水溶液2种淋洗溶剂,乙醚、丙酮、氯仿、醋酸乙酯、二氯甲烷、甲醇、乙腈7种洗脱溶剂对AAs及ALs化合物的萃取效果的影响；采用4因素3水平正交试验对影响固相萃取的条件包括活化体积、清洗体积、淋洗体积、洗脱体积等进行优化,以AA-Ⅰ,AA-Ⅱ,AL-Ⅰ,AL-Ⅱ和其他7个分离度好的AAs及ALs的色谱峰面积为指标,确定最佳的因素水平。结果：确定固相萃取的条件为采用200 mg的Phenyl柱作固相萃取小柱,用1.0 mL甲醇活化和1.0 mL水清洗后,上大鼠尿样1.0 mL,以1%醋酸-0.02%三乙胺水溶液0.8 mL淋洗,3.0 mL甲醇洗脱。结论：建立的尿样固相萃取方法萃取效率高、选择性好、简单、省时,可作为大鼠尿样中多种AAs及ALs化合物分析测定的尿样前处理方法。     

施肥种类对家种丹参成分丹参酮ⅡA含量的影响

目的：研究施肥种类对家种丹参成分丹参酮ⅡA含量的影响。方法：采用枯饼（种子经榨油后剩余的残渣，使成饼状），猪粪，鸡粪，鸭粪，人粪，草木灰，药渣（中药材经过提取后剩余的残渣），磷肥，复合肥等分别组合施肥，一年后采收，采用HPLC法测定家种丹参中主要成分丹参酮ⅡA的含量。结果：不同肥料种植的丹参所含丹参酮ⅡA的含量有较大差异。结论：草木灰，枯饼与复合肥适合丹参的种植，有利于丹参酮ⅡA的含量提高。     

丹参超细粉及丹参水煎液活血化瘀作用的比较研究

目的比较丹参超细粉与丹参水煎液对大鼠抗凝血和抑制体内血栓形成的作用强度。方法采用皮下注射肾上腺素-冰水法制备大鼠急性血瘀模型,测定丹参超细粉与丹参水煎液对模型大鼠的凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化部分的凝血酶时间（APTT）及血浆纤维蛋白原（FIB）含量。建立大鼠下腔静脉结扎模型,称静脉血栓的湿重和干重。结果与模型组比较,丹参超细粉或丹参水煎液高剂量组大鼠PT均明显延长（P〈0.05）;丹参超细粉低、高剂量组TT均明显延长（P〈0.01）;丹参水煎液高剂量组FIB含量显著减少（P〈0.01）。与模型组比较,丹参超细粉或丹参水煎液低、高剂量可明显减轻模型大鼠静脉血栓的湿重和干重（P〈0.05,P〈0.01）。结论丹参超细粉与丹参水煎液有抗凝血和抗血栓作用,等剂量比较作用强度相近。     

固相萃取快速测定黑果枸杞果汁中酚酸类化合物

目的:建立固相萃取-HPLC快速测定黑果枸杞果汁中6种酚酸(没食子酸、原儿茶素、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、丁香酸).方法:经过固相萃取后的黑果枸杞果汁在色谱条件为:C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸缓冲液,流速1 mL·min-1时进行梯度洗脱.结果:6种酚酸类化合物在一定的范围内有良好的线性关系,相关系数均为0.9999.平均回收率(n=5)分别为97.70%(RSD2.3%),99.64%(RSD1.8%),100.70%(RSD2.1%),99.98%(RSD2.6%),99.60%(RSD2.2%),99.04%(RSD2.4%).结论:通过固相萃取技术以及HPLC法测定6种酚酸类成分的含量,为黑果枸杞果汁的质量控制和资源开发提供了切实可行的方法.     

复合酶法提取丹参中丹参素的研究

目的研究酶在丹参提取过程中的作用,确定不同因素对酶解提取效果的影响。方法采用单因素实验方法与紫外检测分析方法,以丹参素提取率为评价指标,对原药粒度、酶用量、固液比、第一步酶解时间及第二步水提时间5个工艺参数分别进行实验,以确定酶法提取的最佳工艺条件。结果酶法提取丹参素的最佳工艺条件为:酶解温度50℃;pH=4.6;粒度为20～35目;酶底物质量比1∶200;第一步酶解时间为80 min,固液比为1∶15;第二步水提时间为40 min,固液比为1∶9。结论通过本工艺得到的丹参素提取率为84.61%,且工艺条件温和,对设备要求低,不仅可以降低能耗,还可以避免多糖类物质的糊化,并减小丹参素在提取过程中被氧化的可能。