快速斑点免疫金染色法与二种免疫金银染色法检测抗囊尾蚴抗体的比较研究

目的 建立敏感性高，特异性强，方法简便和经济实用的快速诊断囊尾蚴病的免疫学检测方法。方法 将猪囊尾蚴液抗原点加于微孔滤膜，经预作用和封闭后，依次加入待检测血清和金标记二抗，建立快速斑点免疫金染色法（F-Dot-IGS)以检测囊尾蚴病患者血清抗体，同时用快速微量斑点免疫金银染色法（RMDot-IGSS)和斑点免疫金银染色法（Dot-IGSS)检测作为对照。结果 检测40例囊尾蚴病患者血清抗体，阳性率100%；检测40例健康人血清均为阴性；除包虫病患者外，10例肝吸虫病患者，10例血吸虫病患者和10例肺吸虫病患者血清未见交叉反应。结论 F-Dot-IGS敏感特异，快速简便，有较高的实用价值。适于囊尾蚴病的流行病学调查和临床快速诊断。     

微量快速斑点免疫金银染色法检测系统性红斑狼疮患者血清抗双链DNA抗体的研究

目的 :建立一种便捷的检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清抗双链DNA抗体的方法。方法 :在斑点免疫金银染色法 (dot-immungold -silverstaining ,Dot-IGSS)的基础上 ,缩短反应和洗涤时间 ,建立微量快速斑点免疫金银染色法 (Microvolume -Fast -Dot-IGSS ,MFDot-IGSS)并与Dot-IGSS进行比较。结果 :用MF Dot-IGSS和Dot-IGSS同步检测 70份SLE患者血清抗双链DNA抗体 (A -dsDNA) ,阳性率分别 6 4 .3%和6 5 .7% ;检测其他自身免疫性疾病患者血清 30份阳性率均为 3.3% ;检测健康献血员血清 5 0份 ,阳性率均为2 .0 %。二种方法的敏感性和特异性均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MFDot -IGSS检测SLE病人血清A-dsDNA的敏感性和特异性与Dot -IGSS相似 ,但便简快速 ,适用于门诊及基层医院。     

快速斑点免疫金染色法检测日本血吸虫病人血清抗体的初步研究

目的 :探索建立快速、简便、经济的免疫学诊断方法。方法 :将日本血吸虫可溶性虫卵抗原点加于混合纤维素酯微孔滤膜 ,检测日本血吸虫病患者血清抗体 ,经过优化条件 ,数分钟出现结果 ,建立快速斑点免疫金染色法 (F -Dot-IGS)并与斑点免疫金银染色法 (Dot -IGSS)比较。结果 :初步结果显示 ,F -Dot -IGS共检测4 5例日本血吸虫病急性患者血清抗体 ,均为阳性率 10 0 % ;检测 4 5例义务献血员血清均为阴性 ;5 0例肝吸虫病患者血清中 ,1例出现阳性反应 ,交叉反应率为 2 .0 % ;10例肺吸虫病人血清未见交叉反应。检测结果与Dot-IGSS比较无显著性差异。结论 :该法快速、简便、敏感性和特异性较好 ,适用于基层、流行病学调查和临床快速诊断。     

微量快速斑点免疫金银染色法检测囊尾蚴病患者血清抗体的 …

目的 建立一种便捷的囊尾蚴病免疫学诊断方法。方法 在斑点免疫金染色法的基础上，待检血甭标本原倍使用，缩短抗原抗体及金标二抗的作用时间，建立微量快速斑点免疫金银染色法。结果 ＲＭＤｏｔ－ＩＧＳＳ法检测囊尾蚴病患者血清９６份，阳性率为１００％；检测健康因员血清５０份，特异性为９６％；检测华支睾吸虫病患者、卫氏并殖吸虫病患者、日本血吸虫病患者血清各１０份均未出现变叉反应；但棘球蚴病患者血甭１０份有明显的     

斑点免疫金染色法与免疫金银染色法诊断日本血吸虫病的比较

目的建立快速、敏感、特异性强，操作简便和经济实用的诊断日本血吸虫病的免疫学检测方法一快速斑点免疫金染色法(R-Dot-IGS)。方法将日本血吸虫虫卵可溶性抗原点加于微孔滤膜，经预作用和封闭后，依次加入待检血清和金标记二抗，然后观察结果，并与快速微量斑点免疫金银染色法(RM-Dot-TGSS)和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)进行比较。结果用R-Dot-IGS、RM-Dot-IGSS和Dot-IGSS同步检测55份日本血吸虫病患者血清，三种方法的阳性率分别为98．18％(54／55)、98．18％(54／55)和100％；检测50例健康人血清均为阴性；检测10例肝吸虫病人和10例肺吸虫病人血清，仅有1份肝吸虫病人血清在RM-Dot-IGSS反应为阳性。结论R-Dot-IGS检测过程仅为15min不需银显影，具有敏感特异、快速简便实用的特点，适用于日本血吸虫病的现场流行病学调查和临床快速诊断。     

用双夹心斑点免疫金银染色法检测病人血中疟疾循环抗原

应用抗间日疟原虫和抗恶性疟原虫红内期抗原单克隆抗体建立了双夹心斑点免疫金银染色法和双夹心免疫酶斑点法并用于检测间日疟和恶性疟患者血清中循环抗原。共检测20份间日疟血清和15份恶性疟血清,双夹心斑点免疫金银染色法阳性率分别为90％和93％,可检出最低原虫密度为0.0009％;双夹心免疫酶斑点法阳性率分别为85％和87％,可检出最低原虫密度为0。0075％。与包虫病。弓形虫病和乙肝表面抗原阳性血清无交叉反应,检测60份健康献血员血清,两法分别有5％和8％假阳性。初步结果提示双夹心斑点免疫金银染色法检测疟疾循环抗原敏感度较高,若经过适当改进,有可能用于疟疾现场诊断和流行病学调查。     

双单抗夹心ELISA法检测脑囊尾蚴病血清特异性免疫复合物

目的 :建立双单抗夹心酶联免疫吸附试验法检测脑囊尾蚴病患者血清中特异性免疫复合物。方法 :用抗人IgG单抗包被 ,捕获血清中特异性IgG型免疫复合物 ,通过酶标抗囊尾蚴单抗结合物显色 ,测其OD值。结果 :用本方法测得患者特异性免疫复合物阳性率为 5 3.3 % ,明显高于正常对照组 (P <0 .0 0 5 ) ;循环抗原、抗体皆阴性患者 ,免疫复合物的阳性率为 5 0 % ,与各组相比差异有显著性 (P <0 .0 0 5 ) ;且免疫复合物的检出率明显高于循环抗原的检出率 (P <0 .0 0 5 )。结论 :本法对囊尾蚴病的诊断有重要的临床价值 ,尤其对抗原、抗体皆阴性患者意义更大     

免疫金银染色法用于检测系统红斑狼疮患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体

目的 探讨检测抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（A－dsDNA)对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断意义。方法 采用免疫金银染色法（IGSS）和用斑点免疫金银染色法（Dot-IGSS)，检测SLE病人血清中ANA和A－dsDNA。结果 113例活动期SLE患者血清ANA阳性率97．3％，A－dsDNA阳性率71．7％；35例非活动期SLE患者血清ANA阳性率74．3％，A－dsDNA阳性率14．3％。活动期ANA、A－dsDNA阳性率与非活动期比较均有显著性差异（P＜0．01）。活动期ANA平均滴度明显高于非活动期，A－dsDNA阳性组肾损害明显高于A－dsDNA阴性者（P＜0．01）。结论 IGSS和Dot-IGSS检测ANA、A－dsDNA有高度特异性、敏感性与稳定性，较高滴度A－dsDNA提示有肾损的可能。     

4种抗原用于斑点免疫金银染色试验诊断日本血吸虫病的比较

采用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)试验对4种日本血吸虫抗原的敏感性及特异性进行比较。结果显示粗提成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA)检测40例日本血吸虫病人血清抗体的敏感性均达100.0％,40例正常人血清的可疑阳性反应分别为2.5％、0、2.5％和0,40例肝吸虫病人血清的可疑交叉率分别为2.5％、0、2.5％和0,表明在高敏感的IGSS检测系统中,粗提成虫抗原的敏感性和特异性与部分纯化者和虫卵抗原无显著性差异(P>0.05)。     

2种方法检测抗角质蛋白抗体对类风湿性关节炎诊断价值比较

目的比较免疫金银染色法和免疫荧光法检测抗角质蛋白抗体（anti-keratin antibody,AKA）对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的诊断价值。方法收集临床上确诊为RA患者血清样本50份,同时收集系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者、强直性脊柱炎患者、健康者血清样本各20份作为对照,采用免疫金银染色法和间接免疫荧光法检测AKA,比较分析对RA诊断的敏感性、特异性、正确率、阳性预测值、阴性预测值等指标。结果免疫金银法和免疫荧光法检测AKA阳性率：RA组分别为72%和52%,SLE组分别为0和0,强直性脊柱炎组分别为0和10,健康组分别为0和0。2种方法检测AKA对RA诊断的特异性均很高,无统计学差异。而免疫金银染色法检测AKA对RA诊断的敏感性、正确率及Youden指数均较免疫荧光法高,且差异有统计学意义（P〈0.05）。结论免疫金银法检测AKA诊断RA具有高度的敏感性和特异性,临床检测采用免疫金银法检测AKA对RA的辅助诊断更有价值。     

斑点免疫金银染色试验与斑点ELISA诊断血吸虫病的比较

以日本血吸虫成虫抗原，应用斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断日本血吸虫病，５５例粪检阳性病人血清抗体检出率均为１００．０％，５０例正常人血清阴性符合率均为９８．０％，与５０例肝吸虫病人的交叉反应分别为２．０％和４．０％，两法未见显著性差异（Ｘ１１＝０．３４４Ｐ＞０．０５）。但进一步研究显示金标法的混合阳性血清最终滴度较酶法高４～５倍；使用抗原节省；２０份阳性血清抗体检出阳性终点也较酶法高２～４个滴度。     

单克隆抗体反向IHAT检测囊虫病循环抗原

应用抗猪囊虫抗原的单克隆抗体反向间接血凝试验（ＩＨＡＴ），对临床确诊的囊虫病患者进行了血清循环抗原（ＣＡｇ）的检测，阳性率为５１．１４％（６７／１３１）。对１９例脑型囊虫病患者同时测定了血清和脑脊液中的ＣＡｇ，阳性率分别为４７．３６％和７８．９４％，总阳性率为８４．２１％。对治疗０．５３后的１９例患者检测时，血清和脑脊液中ＣＡｇ均呈阴性反应，而检测抗体仍呈阳性反应。５０例正常人、４９例其它寄生虫病及５例其它脑部疾病患者脑脊液的ＣＡｇ均呈阴性反应。结果提示：测定ＣＡｇ对囊虫病活动性感染的诊断及疗效判定均具有一定的实用价值。     

不同组合快速双抗体夹心ELISA检测囊虫循环抗原的研究

用抗猪囊虫单克隆抗体和其特异性多克隆抗体的４种组合进行快速及抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测囊虫病人血清中的循环抗原。结果表明，双单抗法的检出率最高（６７．５％），其余依次为多抗－单抗法（５４．１７％）、单抗－多抗法（５０．８３％）和双多抗法（４９．１７％）。它们与包虫、弓形虫病人的交叉反应及正常人的假阳性反应无显著差异（Ｐ〉０．０５），但与肝吸虫病人的交叉反应有极显著的差异（Ｐ〈０．０１），以双单抗法最低     

班氏丝虫宿主循环抗原的检测

应用兔抗牛丝虫抗体ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测安徽流行区人体班氏丝虫循环抗原。微丝蚴血症者血清总阳性率９６％（２４／２５），尿液总阳性率为６０％（１５／２５），４份乳汁阳性率均为１００％。１５份尿液阳性和４份乳汁阳性者与血清阳性结果的符合率分别为１００％（１５／１５）和７５％（３／４）。检测江苏非流行区正常人血清、尿液、乳汁共４３份，全部阴性。１１份肠道线虫感染者尿液全为阴性，血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。１０份肺吸虫感染者血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。结果表明，班氏丝虫循环抗原不仅存在于血清而且存在于尿液和乳汁中。     

Determination of specific IgG4 for diagnosis and therapeutic evaluation of cer ebral cysticercosis

Objective To probe the significance of specific IgG4 in sera of patients with cerebral cys ticercosis for diagnosis and therapeutic evaluation. Methods Specific IgG4 in sera of patients with cerebral cysticercosis was assessed using colloidal goldlabeled mouseantihuman IgG4 McAb as probe. The results wer e compared with the CT image manifestation. Results The specific IgG4 positive rate in sera of patients with cerebral cysticercosis was 97.8%, whereas sera from patients with other kinds of parasitosis or centra l nerve system disease and the control group were all negative, except for a wea k crossreaction of sera from patients with hepatic echinococoosis. The determ ination of specific IgG4 in sera of patients with cerebral cysticercosis during different times of treatment showed that along with an increase in treatment tim e and improvement of clinical symptoms, specific IgG4 level gradually decreased . The positive rate and intensity of specific IgG4 in sera from patients with c erebral cysticercosis were consistent with the number of cysticercus parasites i n the brain and pathologic changes, such as survival, disintegration, death and calcification. Survival of cysticercus in the brain was objectively evaluated u sing this technique. Conclusions The determination of specific IgG4 in sera is a practical method for diagnosis a nd therapeutic evaluation of cerebral cysticercosis.     

Significance of western blot in diagnosis of cysticercosis cellulosae.

Sodium dodecyl sulphate (SDS) polyacrylamide gradient gel electrophoresis (PAGE) and immunoblot were used for the diagnosis of patients with cysticercosis cellulosae. 26 KD protein band of the whole Cysticercus antigen showed a high specificity to the sera from patients with cysticercosis cellulosae and had no cross reaction with sera from normal controls and other parasitic diseases including hydatidosis. The positive rate of Western blot with 26 KD band was 70% and the results showed no significant difference in comparison with those of CFT and ELISA.