茶多酚诱导膀胱癌细胞凋亡及上调PTEN、E-Cadherin表达的研究

目的 :探讨茶多酚抑制膀胱癌细胞生长的可能分子机制。方法 :采用MTT法和流式细胞术 ,观察膀胱癌细胞系 (T2 4及SCaBER)经不同浓度的茶多酚处理后对细胞生长以及PTEN、E cadherin蛋白表达的影响。结果 :茶多酚以剂量依赖的方式抑制膀胱癌细胞的生长 ,加入 0、5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μg·ml-1茶多酚的T2 4细胞和SCaBER细胞抑制率分别为 0 %、11 2 %、33 4 %、36 9%、6 7 5 %和 0 %、16 5 %、19 1%、30 3%、31 4 %。流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰 ,癌细胞出现凋亡 ,凋亡率分别为 6 8%、2 5 1%、2 8 6 %、36 6 %、4 1 1%和 2 1 4、2 7 2 %、2 8 5 %、36 8%、4 7 7% ;同时 ,随茶多酚作用浓度的增加 ,出现G1/S阻滞细胞逐渐增多 ,细胞分裂增殖指数 (PI)降低 ;而细胞PTEN蛋白表达水平由 (37 6 6± 0 4 9)、(38 2 8± 0 6 1)逐渐增加至(16 3 92± 3 36 )、(177 36± 10 79) ,E cadherin蛋白表达水平由 (37 5 2± 1 14 )、(38 5 9± 4 2 4 )逐渐增加至 (12 1 86± 1 5 0 ,15 3 5 8± 2 5 1) (P <0 0 1,P <0 0 1)。结论 :茶多酚对T2 4及SCaBER细胞生长具有抑制作用 ,其机制可能是通过上调PTEN蛋白表达影响细胞周期和诱导细胞凋亡。PTEN、E cadherin蛋白表达水平的上调可能具有逆转细胞恶性生     

拓扑特肯诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用的研究

目的 :研究拓扑特肯 (Topotecan ,TPT)诱导体外培养的人肺癌SPC A 1细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法 :体外培养肺癌细胞 ,加以 2 0mg/L的TPT孵育 12、2 4和 4 8h ,用MTT法检测TPT对肺癌细胞增殖的作用 ;用TUNEL法和流式细胞仪技术检测TPT诱导肺癌细胞凋亡的发生情况及Cas pase 3特异性拮抗剂Ac DEVD CHO (5 0 μmol/L)对TPT诱导凋亡作用的影响。 结果 :TPT处理细胞12、2 4和 4 8h后 ,肺癌细胞的存活率分别为 (85 8± 9 7) %、(76 5± 6 5 ) %和 (6 4 6± 10 4 ) % ,未经TPT处理的对照组细胞存活率为 (97 1± 6 9) % ,各组间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;流式细胞仪检测其凋亡率分别为 (3 4± 1 5 ) %、(11 5± 2 8) %和 (31 2± 4 1) % ,各组间差异有显著性 (P <0 0 1) ;同时TUNEL法可检测到典型的肺癌细胞凋亡形态学特征 ;Ac EDVD CHO和TPT共孵育细胞 12、2 4和 4 8h后其凋亡率分别为 0、(5 .5± 1.6 ) %和 (18.6± 3.7) % ,较对应的未加Ac DEVD CHO组明显降低 (P <0 .0 1)。结论 :TPT可通过Caspase 3依赖的途径诱导体外培养的人SPC A 1肺癌细胞凋亡 ,且与作用时间呈正相关。     

叶绿酸f光动力体外杀伤膀胱癌疗效及机制研究

目的 光动力治疗是近年来新兴起的一种肿瘤治疗方式,光敏剂是光动力治疗的关键.本研究旨在明确叶绿酸f光动力学体外杀伤膀胱癌细胞的效果及其可能机制. 方法 体外培养膀胱癌5637和T24细胞,CCK-8法检测叶绿酸f结合650 nm激光对膀胱癌细胞的生长抑制作用.叶绿酸f和特异性线粒体荧光探针同细胞共孵育4 h后,激光共聚焦显微镜观察其亚细胞分布;DAPI染色PDT后12 h的癌细胞,荧光显微镜下观察细胞形态学改变;采用流式细胞仪分析凋亡率. 结果 4 J/cm2激光照射后,1、2和4 μg/mL的叶绿酸f对5637细胞生长抑制率分别为 33.92%、57.38%和 84.88%,在 2 J/cm2激光照射后分别为25.4%、51.21%和 70.09%;对T24 细胞,2.5、5和10 μg/mL浓度药物4 J/cm2生长抑制率分别为 34.03%、60.11%和86.51%,2 J/cm2 分别为31.79%、53.83%和 72.89%.激光共聚焦显微镜观察到叶绿酸f的红色荧光与线粒体探针的绿色荧光分布范围一致,都在细胞质中,细胞核中无分布.DAPI染色后荧光显微镜下可见处理组细胞均出现胞核边缘不规则,核固缩,核溶解、碎裂,核小体碎片增加等现象,空白对照组细胞则未见到此类凋亡表现.流式细胞术检测结果显示,4 μg/mL浓度结合4 J/cm2激光处理组5637细胞凋亡率为(50.61±1.66)%,对照组凋亡率为(4.05±0.12)%,差异有统计学意义,U=6.21,P=0.042;10 μg/mL浓度结合4 J/cm2组T24细胞凋亡率为(54.3±1.32)%,对照组凋亡率为(11.31±0.71)%.差异有显著性意义,U=7.35, P=0.030.结论 叶绿酸f结合650 nm激光,能够高效杀灭膀胱癌细胞,该杀灭效应随药物剂量及激光能量的增加明显升高.杀灭机制可能是药物进入癌细胞后定位于线粒体,诱导肿瘤细胞凋亡.     

维甲酸对胃癌细胞生长抑制及凋亡的诱导作用

目的:研究9-顺-维甲酸(9-cis-RA)对人胃低分化黏液腺癌细胞(MGC80-3)的作用。方法:MTT比色法观察9-cis-RA对MGC80-3细胞株的生长抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33342/PI双荧光染色和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:9-cis-RA可抑制MGC80-3细胞生长,半数抑制浓度(IC50)为8·07×10-6mol/L;显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;10-5mol/L浓度的9-cis-RA药物作用后96h可明显诱导MGC80-3细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测到DNA梯带;流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰,G0/G1期细胞百分率明显升高,由对照组的(61·5±2·2)%增加到(74·3±4·7)%,F=149·795,P=0·000;同时处于S期的细胞数减少,由对照组的(26·3±1·3)%减少到(17·2±1·4)%,F=143·936,P=0·000。细胞周期出现G1期阻滞。结论:9-cis-RA对MGC80-3细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。     

流式细胞仪检测非小细胞肺癌中CD44的表达及凋亡细胞峰

目的　研究粘附分子CD4 4在细胞凋亡中的作用 ,探讨CD4 4在非小细胞肺癌发生、发展及转移中的作用。方法　取新鲜NSCLC标本 2 8例 ,应用流式细胞术测定CD4 4 ,同时测定凋亡细胞峰 ,并与癌旁肺组织进行比较。结果　肿瘤组织和癌旁肺组织CD4 4的表达分别为 :5 7.3± 3.74 %和 7.14± 1.0 1%。两者比较差异极其显著 (P <0 .0 1)。凋亡细胞峰的测定 ,肿瘤组织为 14 .4 6± 2 .18% ,癌旁肺组织为 0 .75± 0 .1% (P <0 .0 1)。肺癌组及正常肺组织CD4 4和凋亡细胞峰的表达均具有相关性 (分别为Rs=0 .2 7,P <0 .0 5和Rs =0 .5 5 ,P <0 .0 1)。结论　CD4 4能抑制T细胞对凋亡的免疫调节功能 ,使癌细胞逃避机体免疫机制 ,促进肿瘤的生长和转移。当CD4 4的表达和功能异常时 ,影响细胞内凋亡相关基因 ,使得正常的细胞凋亡障碍 ,导致肺部恶性肿瘤的产生     

反义IGF-Ⅱ对人肝癌细胞株HepG2恶性表型的抑制

目的　探讨反义胰岛素样生长因子Ⅱ (反义IGF -Ⅱ )对人肝癌细胞株HepG2 恶性表型的抑制。方法　化学合成人IGF -Ⅱ 5’端部分cDNA片段 ,将其克隆于真核表达载体pcDNA3 ,通过脂质体介导转入体外培养的HepG2 人肝癌细胞 ,观察细胞生物学特性的改变。结果　将反义IGF -Ⅱ转导入HepG2 肝癌细胞后 ,细胞内IGF -Ⅱ表达量减少 (荧光强度由 19.9± 3.1降至 6 .2± 1.8,(P <0 .0 1) ,细胞增殖率下降、凋亡率增加 (由 4 .3%± 0 .5 0 %增加至 8.6 %± 0 .5 0 % ,(P <0 .0 1)、AFP分泌水平降低 (由5 .4 7μg/l± 0 .5 6 μg/l降至 1.95 μg/l± 0 .10 μg/l,(P <0 .0 1)。 结论　反义IGF -Ⅱ可显著抑制人肝癌细胞恶性表型 ,对于治疗原发性肝癌可能具有潜在应用价值。     

5-脱氧杂氮胞苷对人肺腺癌细胞系增殖的影响

目的:探讨DNA甲基化异常与肺腺癌间的相关性及5-脱氧杂氮胞苷对肺癌细胞株增殖的影响及其机制。方法:用5-脱氧杂氮胞苷处理肺腺癌细胞株SPC-A-1,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率,Western-blot检测Apaf-1蛋白表达的变化,RT-PCR法比较Apaf-1基因和甲基转移酶mRNA表达量的变化。结果:5-脱氧杂氮胞苷处理36h后Apaf-1蛋白和mRNA表达增加,而DNA甲基转移酶mR-NA表达明显降低;G0/G1期细胞比例增加到(80·2±2·88)%,S期细胞比例降低至(6·4±0·62)%,G2/M期细胞比例增加到(13·4±0·93)%,凋亡率增加到(13·5±0·97)%。结论:肺腺癌的发生与DNA甲基化异常有关,甲基化酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷可能通过抑制甲基转移酶抑制抑癌基因启动子区域的高甲基化,恢复其生长调控功能,从而使肺癌细胞株的恶性生物学行为发生逆转。     

舒林酸抑制肝癌HepG2细胞增殖的实验研究

目的:观察舒林酸对肝癌HepG2细胞增殖的影响,探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察舒林酸抑制肝癌HepG2细胞增殖;采用流式细胞仪检测舒林酸对HepG2细胞周期分布的影响,同时结合透射电子显微镜及DNA凝胶电泳观察舒林酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用。结果:舒林酸可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,其作用具有时间和浓度依赖性(n=24),r24h=0·914,P=0·037;r48h=0·921,P=0·041;r72h=0·907,P=0·028;诱导其凋亡,作用24h,对照组凋亡率为(1·5±0·3)%,3×10-4组凋亡率为(8·6±1·3)%,9×10-4组凋亡率为(27·0±1·7)%,P值分别为0·018和0·000;作用48h,对照组凋亡率为(2·8±0·7)%,3×10-4组凋亡率为(13·2±2·3)%,9×10-4组凋亡率为(37·1±2·9)%,P值分别为0·012和0·000。舒林酸改变细胞周期分布,使G0/G1期细胞比例增高,S期比例降低。作用24h与对照比较,3×10-4处理组P=0·048,9×10-4处理组P=0·037,两组间比较P=0·041;作用48h与对照比,3×10-4处理组P=0·040,9×10-4处理组P=0·032,两组间比较P=0·044。结论:舒林酸可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖。     

茶多酚诱导人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的凋亡及其作用机制

目的:研究茶多酚对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞生长及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:通过MTT法、瑞氏染色法和FCM法分别检测不同浓度的茶多酚对RPMI 8226细胞增殖和凋亡的影响;FCM法检测对细胞线粒体膜电位的影响;蛋白质印迹法检测△caspase-3片段和凋亡相关蛋白bc1-2的表达;ELISA法检测对RPMI 8226细胞分泌细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的影响.结果:与对照组相比,茶多酚浓度129.6和259.1 μmol/L处理RPMI 8226细胞1～3 d后均能明显抑制细胞的增殖,且呈时间-剂量相关性;统计显示,24 h时的半数细胞抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值为165.7μmol/L.茶多酚(129.6μmol/L)作用24 h后,RPMI 8226细胞出现典型的凋亡形态学改变;茶多酚(129.6和259.1 μmol/L)作用24 h后,RPMI 8226细胞凋亡率分别为(24.6±2.3)％和(43.5±3.9)％,与对照组比较差异均有统计学意义;细胞的线粒体膜电位降低,活性△caspase-3片段产生,bc1-2蛋白表达水平下降,IL-6分泌水平降低.结论:茶多酚能抑制RPMI 8226细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与产生活性△caspase-3片段,抑制bc1-2蛋白表达,降低细胞分泌IL-6水平相关.     

葡萄糖对卵巢癌细胞生长增殖影响体外研究

目的 葡萄糖是维持肿瘤细胞存活的重要能量来源,有关研究表明低糖与无糖条件有可能抑制肿瘤细胞生长,成为潜在的肿瘤治疗方式.本研究通过给予不同浓度葡萄糖刺激SKOV3与A2780卵巢癌细胞系,分析其细胞增殖、细胞周期与细胞凋亡的改变,探讨葡萄糖对卵巢癌细胞生长增殖的影响.方法 在体外配制含不同葡萄糖浓度(0、2.5、 5.5、 25.0 mmol/L)的培养基,分别模拟无糖、低血糖、正常血糖及高血糖水平的体内环境,观察不同葡萄糖浓度对卵巢癌细胞的增殖、凋亡与细胞周期的影响.结果 高糖促进卵巢癌细胞SKOV3和A2780的增殖,干预48 h后,增殖幅度约为无糖组的1.841~1.942倍;低糖与无糖条件诱导卵巢癌细胞发生G1期阻滞,与高糖组相比,SKOV3细胞G1期比例以(40.699±1.131)%增加至(58.619±2.643)%,A2780细胞以(46.348±2.150)%增加至(54.770±2.475)%;低糖与无糖条件亦诱导细胞凋亡,SKOV3与A2780细胞无糖组中凋亡细胞比例分别为(14.015±0.827)%和(12.930±1.127)%.结论 本研究通过探讨葡萄糖对卵巢癌细胞生长与增殖的影响,证明低糖与无糖条件诱导卵巢癌细胞发生G1期阻滞、细胞凋亡并抑制其生长增殖.若进一步给予相应葡萄糖抑制剂干预,可能为卵巢癌的临床治疗提供新思路.     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Management of intracranial metastases of differentiated carcinoma of thyroid

Summary Brain metastases in differentiated carinoma of the thyroid is a rare occurrence. We treated five documented cases of carcinoma of thyroid with brain metastases out of 400 cases of thyroid cancer treated between 1972 to 1993. 4 were females out of which one was pregnant during the appearance of brain metastases. All cases were treated with thyroidectomy, and radioiodine as primary therapy. Brain metastases developed 6 months to 11 years following treatment of the primary and were treated with radiotherapy and suppressive levothyroxine. We observed the beneficial effect of suppressive thyroxine and the poor prognosis associated with pregnancy and withdrawl of thyroid replacement therapy. 3 of the 5 patients are alive 12–23 months after treatment for brain metastases, while 2 patients died at 4 months and 7 years post brain metastases due to pulmonary and hepatic failure, respectively.     

Clinico-Pathological Study of 50 Cases of Tumours of Larynx

Otoacoustic emissions have been advocated in the management of otitis media with effusion. However, otoacoustic emissions cannot differentiate different types of hearing loss. This study was conducted to find factor that can differentiate otitis media with effusion from other common causes of hearing loss in children. Children were enrolled in the study and divided in four groups consisting of 25 ears each after pure tone and impedance audiometry: (1) Otitis media with effusion group, (2) Normal ear group, (3) Sensory-neural hearing loss group, (4) Chronic suppurative otitis media group. Otoacoustic emissions were recorded and results were analyzed statistically. The normal hearing group had significant difference from other groups but total band reproducibility of transient evoked otoacoustic emissions did not show any statistical difference in the cases groups. In distortion product otoacoustic emissions, group 1 showed significant difference from group 3 and group 1 had significant difference from all other groups at 4 kHz. The study did not find any factor that differentiates otitis media with effusion from other diseases. Although, distortion product otoacoustic emissions can indicate otitis media with effusion but impedance audiometry should be the main tool in the management of otitis media with effusion.     

乳腺叶状囊肉瘤320例诊治分析

目的探讨乳腺叶状囊肉瘤临床诊断和治疗方法。方法回顾分析经手术病理确诊为乳腺叶状囊肉瘤的320例患者的诊断和治疗情况。结果行乳腺X片检查121例,B超检查25例,近红外检查21例,针吸细胞学检查42例;15例(12.4%)乳腺X片检查及3例(14.3%)近红外检查诊断为乳腺叶状囊肉瘤。临床诊断正确率为17.5%(56/320),误诊率为82.5%(264/320)。随访253例患者,其中局部复发45例(17.8%),远处转移死亡13例(5.1%)。结论乳腺叶状囊肉瘤诊断需常规病理检查,治疗宜行局部广泛切除或全乳切除。     

胆囊腺瘤癌变的相关因素分析

目的:探讨胆囊腺瘤癌变与临床因素的相关性。方法:应用ROC曲线,计算胆囊腺瘤癌变的肿瘤大小临界值。应用χ2独立性检验,计算胆囊腺瘤癌变与临床因素的相关性、临床表现与肿瘤位置的相关性。结果:肿瘤良恶性临界值为2.27 cm。胆囊腺瘤癌变与患者的性别、年龄、是否合并结石无明显相关性（P＞0.05）,而与肿瘤大小、肿瘤数目、形态、超声下是否有血流(P＜0.05)等临床病理特征有明显相关性。临床症状与肿瘤是否位于胆囊颈部有明显相关性(P＜0.05)。结论:胆囊腺瘤在超声扫描下表现为单发、无蒂、有血流、直径大于2.27 cm,应高度怀疑已有恶变。肿瘤位于胆囊颈部可引起右上腹胀痛、疼痛向右背部放射、恶心呕吐等临床表现。