早期乳腺癌血清VEGF水平与骨髓微转移的相关性及临床意义

目的：检测早期乳腺癌患者血清中VEGF及骨髓标本中CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义。方法：应用ELISA法分别检测6例乳腺纤维腺瘤及64例乳腺癌患者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的骨髓血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测标本中CK-19的表达水平,并进行相关性分析。结果：VEGF在乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤患者,二者差异显著（P=0.012）;在HER2阳性患者中,血清VEGF水平明显高于HER2阴性患者（P=0.016）。CK19在乳腺纤维腺瘤患者骨髓标本中未见表达,在乳腺癌患者骨髓血中,阳性表达24例（37.5%）,而骨髓中CK19阳性的乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者（110.46±90.65 vs 70.88±77.13,P=0.038）,且二者的表达呈正相关。结论：早期乳腺癌患者血清VEGF水平与骨髓微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为早期乳腺癌微转移的血清学指标。     

男性乳腺癌血清VEGF水平与外周血循环肿瘤细胞的相关性及临床意义

目的:检测男性乳腺癌患者血清中VEGF及外周血CK19的表达水平,探讨二者的相互关系及临床意义.方法:应用ELISA法分别检测18例男性乳腺癌患者及8例健康男性志愿者血清中VEGF的水平,同时抽取相应的外周血标本,应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测标本中CK19的表达水平,并进行相关性分析.结果:VEGF在男性乳腺癌患者血清中的表达水平明显高于正常健康男性,二者差异显著(P=0.015);亚组分析表明,在腋淋巴结阳性的患者中,血清VEGF水平明显高于淋巴结阴性患者(P=0.026).CK19在健康男性外周血标本中未见表达,在男性乳腺癌患者外周血中,阳性表达5例(27.8％),而外周血中CK19阳性的男性乳腺癌患者血清VEGF水平显著高于CK19阴性的患者(130.34 ±77.18pg/ml vs58.01 ±52.43pg/ml,P=0.038).结论:男性乳腺癌患者血清VEGF水平与外周血微转移密切相关,提示VEGF可能参与了肿瘤细胞的侵袭和播散,可作为男性乳腺癌早期血行播散的血清学指标.     

曲妥珠单抗对HER-2阳性早期乳腺癌骨髓微转移的影响

目的：检测HER-2阳性的早期乳腺癌患者应用曲妥珠单抗（Trastuzumab）治疗前后骨髓微转移的改变,探讨HER-2基因及Herceptin对骨髓微转移的影响。方法：应用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测15例HER-2阳性乳腺癌及18例HER-2阴性乳腺癌患者术前及化疗后骨髓CK19的表达水平,其中10例HER-2阳性乳腺癌患者在化疗结束后,继续应用Herceptin治疗,3月后再次抽取骨髓标本,qRT-PCR检测CK19的表达水平。结果：手术前,14例HER-2阳性乳腺癌患者骨髓CK19表达阳性（93.3%）,而HER-2阴性患者8例CK19表达阳性（44.4%）,二者差异显著（P=0.000）。化疗后,12例HER-2阳性乳腺癌患者CK19表达阳性（80.0%）,而HER-2阴性患者3例表达阳性（16.7%）,二者差异显著（P=0.000）。10例HER-2阳性乳腺癌患者化疗后继续应用Herceptin治疗3月后,骨髓CK19的表达明显下降（102.78±98.24 vs 66.92±49.18,P=0.036）。结论：HER-2基因的表达与早期乳腺癌患者骨髓微转移密切相关,而Herceptin可以降低骨髓微转移病灶,提示骨髓微转移情况可以作为Herceptin治疗疗效的早期预测指标。     

乳腺癌组织中PSA mRNA和VEGF mRNA的表达及其关系

目的探讨前列腺特异抗原(PSA)mRNA和血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测35例乳腺癌、12例癌旁乳腺组织和10例乳腺纤维腺瘤组织中的表达,免疫组化检测35例乳腺癌组织中ER、PR的表达,分析PSA mRNA和VEGFmRNA表达之间的关系。结果PSA mRNA在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织,差异有显著性(P值均=0.00)。VEGF 121、165mRNA在乳腺癌中的表达水平明显高于癌旁乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织的表达(P值均=0.00)。ER、PR阳性表达的乳腺癌组织中PSA mRNA表达高于ER、PR阴性者,差异有显著性(P=0.001和0.004)。PSA mRNA表达阳性者VEGF 121、165mRNA表达水平明显低于PSA mRNA表达阴性者(P=0.034、0.026)。结论PSA mRNA在乳腺癌组织中的表达下调,但其表达受ER、PR的调控,而且其可能具有抑制乳腺肿瘤血管生成的作用。     

乳腺癌患者血清HER2的检测及其临床意义

目的：探讨乳腺癌患者血清HER2水平与组织HER2水平和临床病理特征的关系,分析其对患者治疗药物选择和预后预测的意义。方法：选择福建省肿瘤医院2008年1月至10月经病理证实的乳腺癌患者67例,乳腺良性肿瘤患者20例,另选择体检健康女性20例。应用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织HER2的表达,ELISA法检测血清HER2的表达水平。结果：乳腺癌患者血清HER2水平及阳性率均高于健康女性及乳腺良性肿瘤患者（P<0.05）;组织HER2阳性乳腺癌患者血清HER2水平及阳性率均高于组织HER2阴性乳腺癌患者（P<0.05）,且血清HER2阳性率与组织HER2表达状态正相关,血清学检测方法与组织学检测方法一致性较好;部分组织HER2阴性乳腺癌发生复发转移后血清HER2增高,复发转移性Ⅳ期患者血清HER2阳性率高于Ⅰ〖DK〗～Ⅲ期患者（P<0.05）。结论：乳腺癌患者中血清HER2水平增高,其阳性率与组织HER2表达状态及临床分期相关,该检测对乳腺癌的诊断、评价HER2状态及判断预后有一定意义。     

检测乳腺癌患者骨髓中CK19的表达及其临床意义

背景与目的:乳腺癌早期即可发生播散和转移,远处转移尤其骨转移是影响患者预后的主要因素之一,而骨髓微转移用常规方法又难以检测出来。本研究旨在探讨检测乳腺癌患者骨髓中CK19mRNA的表达及其临床意义。方法:应用RT鄄PCR技术,同时对照检测65例乳腺癌患者、15例乳腺良性病变患者和8例健康人骨髓中的CK19mRNA表达,并分析CK19mRNA表达与临床病理因素的关系。结果:65例乳腺癌患者中,22例CK19mRNA阳性,阳性率为33.8%;乳腺良性病变患者和健康人骨髓中未检测到CK19mRNA表达。CK19mRNA表达与乳腺癌肿瘤大小和分期有关(P<0.05),与年龄和淋巴结转移状况无显著性相关(P>0.05);与外周血中CEA异常增高呈正相关(r=0.372,P=0.002)。结论:CK19mRNA可作为检测乳腺癌患者骨髓微转移的分子指标之一,可为乳腺癌患者的治疗和预后判断提供帮助。     

乳腺癌组织中P27蛋白和血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨乳腺癌组织中P27蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)的表达意义,及其与乳腺癌病理类型的相关性。方法分析2010年5月至2013年9月接受手术治疗的60例乳腺癌患者(乳腺癌组织)的临床资料和病理标本,另选取30例正常乳腺组织标本作为对照(正常乳腺组织)。比较乳腺癌组织和正常乳腺组织中P27蛋白和VEGF的阳性表达率,以及P27蛋白和VEGF表达水平与病理类型的相关性。结果乳腺癌组织中VEGF的阳性表达率高于正常乳腺组织(P<0.01),而P27蛋白的阳性表达率明显低于正常乳腺组织(P<0.01)。不同病理类型标本中P27蛋白(P=0.76)和VEGF的阳性表达率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论乳腺癌组织中VEGF水平显著高于正常乳腺组织,P27蛋白表达水平显著下降,且P27蛋白和VEGF的表达与乳腺癌病理分型无关。     

CK19联合hMAM检测乳腺癌循环肿瘤细胞的临床价值

目的:探讨细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)和人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)在检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)中的临床价值。方法:应用实时荧光定量PCR法联合2种生物标志物CK19和hMAM检测乳腺癌循环肿瘤细胞的阳性率,并分析它们与患者临床病理特征的相关性。结果:乳腺癌患者CK19、hMAM及二者联合检测的阳性率分别为45.5%(20/44)、38.6%(17/44)和56.8%(25/44)。CK19联合hMAM检测的阳性率与患者的淋巴结转移状态相关(P=0.031)。治疗前乳腺癌患者CK19、hMAM及二者联合检测的阳性率均显著高于健康对照组(P=0.000 3、P=0.000 1和P=0.000 1);两个化疗周期后,联合检测结果由阳性转为阴性的患者在TNMⅢ期和Ⅳ期中分别为5例和4例,转阴率差异有统计学意义(P=0.025 3和P=0.045 5);但在TNMⅠ和Ⅱ期患者中,CK19、hMAM或二者联合检测的阳性患者经化疗后其数量均下降,且联合检测的阳性患者数量仍高于单检测的阳性患者数量,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CK19联合hMAM可作为诊断乳腺癌患者循环肿瘤细胞的生物标志物,对于指导乳腺癌患者的早期微转移、治疗和预后判断具有重要意义。     

乳腺癌组织中Ang-2及VEGF的表达及意义

目的研究乳腺癌组织中血管生成素(Ang-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SABC法,检测85例乳腺癌及42例乳腺纤维腺瘤组织中Ang-2及VEGF的表达情况,并评价两指标与乳腺癌临床病理学因素之间的关系。结果乳腺癌组织中Ang-2阳性率(68.24%,58/85)明显高于乳腺纤维腺瘤(7.14%,3/42)(P<0.0001),乳腺癌组织中VEGF阳性率(57.65%,49/85)也明显高于乳腺纤维腺瘤(4.76%,2/42)(P<0.0001)。Ang-2和VEGF表达与患者年龄及肿瘤大小无明显关系(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌和淋巴结转移阳性组的VEGF表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌和淋巴结转移阴性组(P<0.0001)。Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌组的Ang-2表达阳性率高于Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌组(P=0.015)。淋巴结转移阳性组的Ang-2阳性率明显高于淋巴结转移阴性组(P<0.0001)。Ang-2和VEGF两指标的表达具有相关性(P<0.05)。结论乳腺癌组织中Ang-2及VEGF有异常表达,与乳腺癌的预后有关。     

曲妥珠单抗对HER-2阳性早期乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的影响

目的:检测HER-2阳性的早期乳腺癌患者应用曲妥珠单抗治疗前后外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的变化,探讨HER-2基因及曲妥珠单抗对CTCs的影响。方法:应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测15例HER-2阳性乳腺癌及18例HER-2阴性乳腺癌患者术前及化疗后外周血CK19的表达水平,其中10例HER-2阳性乳腺癌患者在化疗结束后,继续应用曲妥珠单抗治疗,3月后再次抽取外周血,qRT-PCR检测CK-19的表达水平。结果:手术前,HER-2阳性乳腺癌患者外周血CK19表达均为阳性,而HER-2阴性患者6例CK19表达阳性(33.3%),二者差异显著。化疗后,14例HER-2阳性乳腺癌患者CK19表达阳性(93.3%),而HER-2阴性患者仅2例表达阳性,二者差异显著。10例HER-2阳性乳腺癌患者化疗后继续应用曲妥珠单抗治疗3月后,外周血CK19的表达明显下降(81.66±68.65 vs 23.35±19.27,P=0.025)。结论:HER-2基因的表达与早期乳腺癌患者外周血CTCs密切相关,而曲妥珠单抗可以降低CTCs的数量,提示CTCs可以作为曲妥珠单抗治疗疗效的早期预测指标。     

乳腺癌骨髓微转移状况与ER PR VEGF 及Cath-D等因子的关系

目的:检测乳腺癌骨髓组织CK19 mRNA的表达,判断骨髓微转移状况,探讨其与各因子的关系.方法:采用RT-PCR法(一步法)检测骨髓组织中CK19 mRNA表达;用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中ER、PR、Cath-D、C-erbB-2及VEGF的表达.结果:102例乳腺癌患者骨髓组织CK19 mRNA表达阳性率56.9%.骨髓CK19 mRNA表达随乳腺癌组织中ER及PR蛋白表达增强而降低(P＜0.05,P＜0.01);随Cath-D、VEGF蛋白表达增强而呈增高趋势(P＜0.005,P＜0.05);但与C-erbB-2表达状况无关.结论:乳腺癌骨髓微转移与癌组织中某些生物学因子表达有关;这些因子决定癌细胞的生物学行为.     

hMAM mRNA和CK19 mRNA联合检测乳腺癌骨髓微转移

目的：检测乳腺癌患者骨髓中的human mamglobin（hMAM）mRNA和CK19 mRNA表达,探讨乳腺癌患者早期骨髓微转移与临床病理学因素的关系.方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR一步法）法检测骨髓组织中hMAM mRNA和CK19 mRNA的表达.结果：102例乳腺癌患者骨髓hMAM mRNA、CK19 mRNA表达阳性者分别为37.3%和56.9%,均高于良性乳腺疾病患者骨髓组织中的表达（P=0.043,P=0.002）.两者的阳性表达率与肿瘤大小、临床分期和组织学分级呈显著相关,P值分别为0.000、0.001、0.020、0.003、0.031和0.001;与淋巴结转移状况、年龄和月经状况无关,P值分别为0.101、0.255、0.111、0.110、0.492和0.187.结论：乳腺癌微转移与肿瘤大小、临床分期和组织学分级有关,hMAM mRNA和CK19 mRNA均可作为检测乳腺癌骨髓微转移标志,且两者间存在一致性.     

乳腺癌患者骨髓GalNAcT mRNA的检测及其临床意义

目的：研究乳腺癌患者骨髓β1，4-N-乙酰半乳糖胺转移酶（GalNAcT）mRNA的表达，探讨其作为乳腺癌骨髓微转移检测指标对临床的应用价值。方法：对40例乳腺癌患者的骨髓及外周血采用巢式RT—PCR方法检测GalNAcT mRNA表达，同时以免疫组化的方法检测骨髓标本中细胞角蛋白（cytokeratin，CK）的表达。结果：40例患者骨髓中GalNAcT mRNA阳性表达17例（42．5％），外周血阳性表达7例（17．5％）；10例血液系统良性疾病患者骨髓和15例健康志愿者外周血中GaINAcT mRNA均为阴性。免疫组化结果显示：40例乳腺癌骨髓中有11例（27．5％）CK阳性，其GalNAcT mRNA都阳性；有6例（15．0％）CK阴性而GalNAcT mRNA阳性。结论：RT—PCR和免疫组化都是检测乳腺癌患者骨髓微转移的可靠的方法，但前者的敏感性高于后者。GalNAcT mRNA可作为一种新的肿瘤标志物来检测乳腺癌患者骨髓微转移。     

骨髓微转移在胃癌中的意义及其与VEGF关系的初步探讨

目的:探讨骨髓微转移在胃癌中的意义,探讨骨髓微转移与VEGF之间的关系.方法:采用免疫组化SABC方法检测骨髓中的肿瘤细胞,ELISA方法检测血清VEGF表达.结果:骨髓微转移阳性胃癌患者较阴性患者肿瘤浸润深,腹腔播散及肝脏转移发生率高(P＜0.05).骨髓微转移阳性和阴性患者VEGF阳性率分别为77.8%(2l/27),43.4%(23/53)(P＜0.05).结论:骨髓微转移与胃癌临床生物学行为关系密切,与VEGF表达水平相关,对胃癌的治疗和预后有着指导性的意义.     

检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的临床意义

目的探讨检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的特异性、敏感性及临床意义。方法应用巢式RT-PCR技术,检测59例肺癌患者、11例肺部良性病变患者和20例健康人外周血、骨髓中CK19 mRNA表达。结果巢式RT-PCR检测技术的敏感性达到10-6。59例肺癌患者中,20例检测出外周血微转移,13例检测出骨髓微转移,其阳性检出率分别为33.9％(20/59)和22.0％(13/59),二者有显著正相关(P<0.05)。肺癌患者外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺良性病变患者、健康人外周血和骨髓中均未检测出CK19 mRNA表达。结论肺癌患者外周血和骨髓中均存在用常规方法检测不出的微转移;应用巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血和骨髓中CK19 mRNA表达,对肺癌微转移的分子诊断具有重要的理论意义和临床应用前景。     

Detection of breast cancer micrometastases in bone marrow using reverse-transcriptase chain reaction and southern hybridization

Thirty-flveto40%ofallpatientswithbreastcarcinoma,includingupt024%ofpatientswithn0evidence0fmetastasesatthetimeofdiagnosis,willrelapseafterprimarytherapy.l"']Themostreliableprognosticindicesofaxillarylymphnodestatusandsizeofprimarytumorcannotpredictinwh0mthediseasewillrecur.Bonemarrowisafrequentandreadilyaccessiblesiteofmetastases.Inup8O%ofpatients,therelaPsedevelopsstariingfrombonemarrowmetastasesats0mepointinthepr0cessoftheirillness.l3]Currentmethodstodetectboneinvolvement,suchasX-rayandbon…