钩藤碱微透析探针回收率测定及影响因素研究

目的:考察体内外微透析探针回收率的稳定性和重现性,为进一步的体内微透析试验提供依据。方法:采用增量法和减量法考察浓度、流速对探针回收率的影响。结果:微透析探针回收率受流速影响较大,基本不受浓度影响,且体内回收率稳定性良好。结论:微透析技术可用于钩藤碱的体内药代动力学研究,反透析法可作为体内研究钩藤碱探针回收率的测定方法。     

提高微透析探针回收率方法的研究进展

微透析是将灌流取样和透析技术结合起来的研究物质动态变化的一种新型采样技术,适合于深部组织和重要器官的活体研究。微透析探针的回收率是影响微透析结果准确性的重要因素之一。微透析探针对物质的回收率通常较低,需结合灵敏的检测方法才能实现物质的定量分析,因此限制了微透析技术在科研中的应用及发展。如何提高微透析探针的回收率是亟待解决的问题,本文综述了国内外研究中提高微透析探针对物质回收率的方法,为探针回收率的提高提供一些参考。     

葛根素微透析线性探针相对回收率影响因素的研究

目的考察影响葛根素微透析相对回收率相关影响因素,探索提高微透探针相对回收率的方法。方法采用高效液相色谱法考察不同pH值（5.1、6.0、7.4、8.1）,不同浓度丙二醇（1%、5%、10%、20%、30%）,不同浓度羟丙基-β-环糊精（1%、5%、10%、20%）的灌注液对葛根素微透析线性探针相对回收率的影响。结果微透析灌注液pH值5.1,羟丙基-β-环糊精含量5%时,葛根素相对回收率提高至（90.07±1.24）%。灌流液中丙二醇会对微透析线性探针的传递率产生负影响,降低相对回收率,在以葛根素为模型药物的微透析实验灌流液中不建议添加。结论本实验方法灌流液中添加增溶剂羟丙基-β-环糊精,可使葛根素经过半透膜时流失量减少,显著提高葛根素微透析线性探针相对回收率。     

头孢拉定微透析体外回收率及影响因素的研究

目的 测定头孢拉定微透析体外回收率及影响因素。方法 采用微透析浓度差法（减量法、增量法）和液质联用技术（LC-MS/MS）测定头孢拉定的体外回收率,并考察流速、浓度对回收率的影响,以探讨微透析技术用于头孢拉定体内药动学研究的可行性。结果 所建立的方法在要求范围内线性关系良好,方法灵敏可靠。增、减量法测得的回收率无显著性差异。相同条件下,探针体外回收率随流速增大而减小,不受探针周围药物浓度的影响。结论 微透析技术可用于头孢拉定药动学研究,减量法可用于头孢拉定微透析体内回收率和药动学参数的测定。     

灌流液改性剂对环维黄杨星D微透析探针回收率的影响研究

目的考察灌流改性剂对环维黄杨星D微透析探针回收率的影响,验证使用改性灌流液条件下微透析探针体外相对回收率与相对损失率的一致性,为体内微透析研究提供实验依据。方法采用高效液相色谱法测定灌流液中环维黄杨星D含量,计算不同改性灌流液条件下微透析探针的体外相对回收率,优选合适的改性剂种类与用量,再分别采用增量法与减量法计算不同药物浓度水平下探针体外相对回收率与相对损失率,比较两者结果的一致性。结果常规灌流条件下,乙醇作为灌流液改性剂对环维黄杨星D相对回收率提高较多,优选灌流液配比为30%乙醇-林格氏液。在2.53~10.12μg·mL~(-1)内环维黄杨星D体外相对回收率和相对损失率具有高度的一致性。结论选择合适的灌流液改性剂可显著提高微透析探针相对回收率水平,对于同一根微透析探针环维黄杨星D体外相对回收率与外周液药物浓度无关,探针回收率可通过药物透过半透膜时的流失量来间接计算,结果较好地证明反透析法适合于环维黄杨星D微透析采样。     

京尼平苷体内外微透析回收率的研究

目的 探究京尼平苷在自制线性微透析探针上的体内外回收率与灌流速度、药物浓度、透析膜长之间的关系。方法 采用HPLC测定微透析样品浓度,考察不同灌流速度、不同药物浓度和不同透析膜长对体外正向和体外反向回收率、体内反向回收率的影响。结果 自制探针性质稳定;探针回收率与京尼平苷的药物浓度无关,与灌流速度成反比,随透析膜长增加而增加;体外的正向与反向探针回收率有显著性差异（P<0.01）,而体内反向回收率低于体外反向回收率,与体外正向回收率无显著性差异;新探针体内回收率大于使用过1次的探针体内回收率（P<0.05）。结论 在京尼平苷的皮肤药动学研究中,宜采用体内反向回收率或体外正向回收率作为药物的探针回收率来校正。     

青藤碱微透析体外回收率研究

目的考察浓度、流速对回收率和损失率的影响,为体内青藤碱微透析实验提供参考依据。方法利用增量法和减量法测定回收率,采用超高效液相测定青藤碱含量。结果流速相同时,探针的回收率和损失率与周围药物浓度无关;探针的回收率随着流速的增加呈下降趋势,增量法和减量法测定的回收率与损失率在各流速下相近。结论微透析法可用于青藤碱体内药动学研究,反向透析法可用于青藤碱微透析体内回收率的测定。     

黄柏生物碱膝关节微透析探针回收率的测定

目的建立反相高效液相色谱法测定三妙丸中黄柏生物碱微透析探针体内外回收率,考察回收率影响因素及体内稳定性。方法采用增量法和减量法,用RP-HPLC法测定微透析样品中药根碱、巴马汀和小檗碱的质量浓度,考察流速及质量浓度对探针回收率的影响;探针分别植入颈静脉和膝关节,考察生物碱体内回收率稳定性。结果药根碱、巴马汀和小檗碱的质量浓度在0.04¹.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=7),本方法的专属性、精密度、准确度和稳定性等均符合微透析样品的分析要求。膝关节探针以1.0μL·min-1灌流,药根碱、巴马汀和小檗碱的相对回收率(RR)和损失率(RL)分别为(29.38±2.02)%和(31.80±1.88)%、(30.48±1.93)%和(30.93±2.09)%及(28.95±0.94)%和(30.53±1.74)%。在质量浓度为0.201.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=7),本方法的专属性、精密度、准确度和稳定性等均符合微透析样品的分析要求。膝关节探针以1.0μL·min-1灌流,药根碱、巴马汀和小檗碱的相对回收率(RR)和损失率(RL)分别为(29.38±2.02)%和(31.80±1.88)%、(30.48±1.93)%和(30.93±2.09)%及(28.95±0.94)%和(30.53±1.74)%。在质量浓度为0.20⁰.80 mg·L-1内,RR和RL一致,探针回收率与流速成反比,与质量浓度无关。体内回收率在5 h内保持稳定。结论反透析法校正大鼠血和膝关节的回收率时,所用的微透析方法可用于三妙丸中黄柏生物碱体内药动学研究。     

反向透析法用于体内经皮吸收微透析探针回收率的测定

目的考察反向透析法用于体内经皮吸收过程中微透析探针回收率校正的可行性.方法在体外试验中用零净流量法测定探针的回收率和传递率,在体内试验中用反向透析法测定探针的回收率;以小猪为试验动物,观察模型药雷公藤内酯醇软膏的体内经皮吸收过程.结果体外试验中,微透析探针的回收率为(64.29±2.34)%,回收率和传递率一致;体内经皮微透析实验中探针的回收率在实验前为(51.47±3.51)%,实验结束后为(51.96±4.97)%.雷公藤内酯醇软膏经皮吸收后,药物在皮内浓度很快达到稳态,去除药物后皮内药物浓度则迅速下降.结论反向透析法测定的探针回收率在实验过程中稳定,可以用于测定体内经皮吸收微透析探针回收率.     

克班宁血液和关节微透析探针体内外回收率研究

目的：考察克班宁血液和关节微透析探针的体内外回收率及其稳定性。方法：采用正微透析法和反微透析法,分别考察克班宁灌流速率、质量浓度对血液和关节探针体外回收率的影响,探讨正、反微透析法的回收率之间的关系;将血液和关节探针分别植入大鼠颈静脉和关节腔,考察探针在大鼠体内10 h反向回收率的稳定性。结果：克班宁血液和关节探针体外正向和反向微透析的回收率随着灌流速率（1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 μL·min^-1）的增大而降低;与克班宁质量浓度（4,8,16,40 μg·mL^-1）无关,正向回收率与反向回收率基本一致,说明可以用反微透析法的回收率代替正微透析法的回收率对药物实际浓度进行校正;克班宁血液和关节探针在大鼠体内10 h反向回收率保持相对稳定,血液和关节探针体内反向回收率分别为（65.57±1.11）%和（32.7±0.94）%。结论：建立的克班宁血液和关节微透析方法可用于克班宁大鼠血液和关节药动学研究。     

The development of multiple probe microdialysis sampling in the stomach

A multiple probe approach of implanting microdialysis probes into each separate tissue layer would better represent sampling from the stomach. Presently, microdialysis sampling experiments are performed with only a single probe in the submucosa to represent sampling from the stomach tissue. The focus of this research was to develop a four-probe microdialysis sampling design to simultaneously monitor the stomach lumen, mucosa, submucosa and in the blood of the rat. Due to the small outer diameter of the microdialysis probe (350mum), implantation into each separate layer was achieved with confirmation of probe location from histological examination. To assess the significance of sampling by this approach, multiple probe microdialysis sampling was used to monitor drug absorption in the stomach. Salicylic acid, caffeine and metoprolol were individually dosed to the ligated stomach. Analysis of the dialysate samples was performed by HPLC-UV and concentration-time curves and pharmacokinetics analysis were used to determine differences between the different probe locations.     

Enhancement of in vitro and in vivo microdialysis recovery of SB-265123 using Intralipid and Encapsin as perfusates

This study was conducted to compare the ability of two potential microdialysis perfusates to enhance the recovery of SB-265123, a lipophilic, highly protein-bound compound, both in vitro and in vivo. Initial in vitro experiments established that the recovery of SB-265123 by microdialysis using normal saline as a perfusate was poor (1.7%). Different concentrations of Intralipid and Encapsin also were evaluated in an identical in vitro setting, to determine enhancement of recovery. In vitro recovery was enhanced to approximately 24 and 65% with 5 and 20% Intralipid, and to approximately 59 and 62% with 5 and 20% Encapsin, respectively. A rat in vivo study was conducted with 20% Encapsin to confirm the in vitro observations. In the in vivo study, 75-80% recovery of free SB-265123 was achieved using 20% Encapsin as a perfusate. The results from this study indicate that for SB-265123, a lipophilic, highly protein-bound molecule, Encapsin is an efficient recovery enhancer in vitro. The results from this investigation further demonstrate that a recovery enhancer may be useful for in vivo applications, even with a compound that is highly bound to plasma protein.     

Validation of a new intraarterial microdialysis shunt probe for the estimation of pharmacokinetic parameters

The aim of our study was to compare pharmacokinetic parameters of a highly bound protein drug, irbesartan, obtained from microdialysis data (MD) of arterial blood and conventional blood samples (BS). A new vascular shunt microdialysis probe was inserted into the carotid artery and one femoral vein was cannulated for i.v. administration of irbesartan. Microdialysis samples were collected every 15 min. Blood samples were taken every 15 min. Levels of drug were measured by HPLC. Pharmacokinetic parameters were estimated using TOPFIT program. Corrected MD were compared with BS taken at same time to determine protein binding. The irbesartan protein binding did not change during the experiment. The estimated Ke from MD and BS were similar (MD: 1.8+/-0.3 h(-1), n=5; BS: 1.7+/-0.2 h(-1), n=5). After protein binding correction for the MD, the estimated values of volume of distribution (Vd) (MD: 1.2+/-0.4 l, n=5; BS: 1.1+/-0.4 l, n=5), clearance (Cl) (MD: 32.3+/-7.3 ml min(-1), n=5; BS: 30.7+/-8.2 ml min(-1), n=5) and AUC (MD: 7.7+/-3.2 microg x ml(-1) h, n=5; BS: 8.8+/-3.4 microg x ml(-1) h, n=5) were similar between MD and BS. In conclusion, these results show that our new probe inserted in the carotid artery provides accurate MD to estimate pharmacokinetic parameters of a highly bound protein drug like irbesartan. On the other hand, MD were also useful to the in vivo study of drug protein binding and saturation in protein binding.     

微透析技术在皮肤药理学中的应用进展

微透析是一种活体的取样技术,在皮肤药理学的研究中应用广泛。微透析被用于外用制剂的生物等效性、制剂的透皮吸收、监测皮肤炎症介质、皮肤组织的内分泌、中药经皮代谢等相关研究。近年来,微透析向联用各种分析检测技术的方向发展,如联用超高效液相色谱、液质联用、酶标记免疫吸附测定等。然而,该技术本身也存在一些缺点,如油水分配系数较大药物的测定、低含量药物的测定、探针植入重现性等问题。文中综述了该技术的原理、优点、缺点及在皮肤药理学研究中的应用进展。     

芒柄花素、芍药苷血液和脑在体微透析方法的建立

目的:建立芒柄花素、芍药苷血液和脑局部在体微透析方法。方法:采用增量法考察流速对芒柄花素和芍药苷回收率的影响,结合实际操作,确定流速和取样间隔;利用浓度差法(增量法和减量法)研究流速、浓度、温度对微透析探针体外回收率和损失率的影响,探讨反透析法用于探针体内回收率测定的可行性;将血液探针和脑探针分别植入大鼠颈静脉和脑纹状体,考察探针在10h内体内回收率的稳定性。结果:芒柄花素,芍药苷血液和脑探针体外回收率随着流速的增高而降低,综合考虑取样时间和取样体积,确定流速为1.5μL·min^-1,取样时间间隔为20min;在相同流速和温度下,探针增量法回收率RR与减量法损失率RL近似相等,且探针回收率与药物浓度无关,说明可用反透析法进行体内回收率的测定;在大鼠体内微透析回收率考察中,血液和脑探针10h回收率保持相对稳定,但不同探针相对回收率之间存在一定的差异性。结论:所建立的芒柄花素、芍药苷血液和脑微透析方法可用于大鼠体内和脑局部药动学研究,反透析法可作为同时研究芒柄花素,芍药苷探针体内回收率的测定方法。     

微透析技术在肿瘤药物研究中的应用进展

微透析技术具有连续动态微创取样优势,能实时在线研究正常生理和肿瘤病理情况下肿瘤药物在体内,尤其是肿瘤组织局部的分布、代谢和消除,利用PK/PD参数模型设计个体化给药方案,预防和减少肿瘤药物的毒性反应。同时,微透析技术还可以应用于肿瘤细胞外间质微环境中生化物质的监测以及肿瘤药物局部给药治疗,是肿瘤药物研究的重要技术手段。本文对近年来微透析在肿瘤药物研究中的应用进展进行检索和归纳,为微透析技术在取样、监测以及治疗领域的进一步研究应用提供参考。