亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因型分析

目的 调查重庆医科大学附属第一医院临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性特点及碳青霉烯酶基因型和16S rRNA甲基化酶分析.方法 收集2009年11月至2010年2月临床分离出耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌菌株54株,经Vitek-2 Compact进行细菌鉴定、药敏实验及最小抑菌浓度(MIC)值测定;基因扩增仪(PCR)扩增碳青霉烯酶、16S rRNA甲基化酶耐药基因及其克隆测序.结果 54株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均为多重耐药表型,全部都携带OXA-66基因,其中53株携带有OXA-23基因,全部53株菌都检测到OXA-23基因上游插入序列ISAbal,41株菌检测到16S rRNA甲基化酶armA基因阳性.结论 产OXA-23型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的最主要原因,其上游插入序列ISAbal 在耐药中起重要作用.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶检测及同源性分析

目的 了解临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(IRAB)碳青霉烯酶的基因型及同源性.方法 采用MicroScan WalkAway-40微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58组碳青霉烯酶基因型,肠杆菌科重复序列PCR(ERIC-PCR)检测耐药基因阳性菌株的同源性.结果 64株IRAB均为多重耐药菌株,其中10株(15.6%)为泛耐药菌株,51株(79.7%)blaOXA-23阳性,4株(6.3%)blaOXA-58阳性,57株(89.1%)blaOXA-66/blaOXA-51组阳性.ERIC-PCR结果 显示blaOXA-23阳性菌株中47株为同一基因谱.结论 产OXA-23型碳青霉烯酶是我院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要机制,菌株间可能存在克隆传播.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药机制探析

目的通过对菌株的检验来对鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制进行探讨.方法在临床中要先对耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌进行分离,细菌鉴定采用法国梅里埃ATB半自动细菌鉴定仪,药敏选用KB纸片法与药敏上机板条相结合,三维试验检测ESBLs和AmpC酶,PCR检验方法检测耐药基因,PCR阳性产物进行基因测序.结果通过与基因库的比对可以发现,所选的6株鲍曼不动杆菌大多数是多重耐药菌株,在三维试验中,此类菌株均产生了ESBLs,有4株菌株产生了AmpC酶.在6株鲍曼不动杆菌的耐药基因型检测中发现有4株AmpC酶阳性,6株均为TEM阳性,4株为PER阳性,4株为OXA-24、VIM、IMP和VEB型等均为阴性,6株OXA-23型均阳性.结论耐亚胺培南鲍曼不动杆菌有OXA-23型碳青霉烯酶基因,OXA-23型碳青霉烯酶是主要耐药机制.     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型

鲍曼不动杆菌是引起院内感染的重要病原菌 ,它对多种抗菌药物耐药 ,临床上治疗比较困难。亚胺培南对不动杆菌有较好的抗菌活性 ,往往是鲍曼不动杆菌院内感染的首选抗菌药物 [1]。但随着亚胺培南在临床的广泛应用 ,对亚胺培南耐药的不动杆菌也日益增多 [2]。为了解亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌在我院的耐药性及流行情况 ,我们对在本院收集到的亚胺培南耐药菌株进行耐药性分析 ,并采用脉冲场凝胶电泳进行分型 ,报道如下。1.1材料收集2000年10月至2002年3月临床标本分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌20株 ,其中19株来自痰标本 ,1株来自心包积液。采用…     

西安地区鲍曼不动杆菌耐亚胺培南的机制研究

目的 调查和研究西安地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药分子机制和产碳青霉烯酶情况.方法 收集西安地区六所三级甲等医院一年间临床分离的非重复鲍曼不动杆菌株146株,采用K-B法进行药敏试验,E-test法检测金属酶,NaCl抑制试验检测OXA型碳青霉烯酶,PCR扩增OXA-23、OXA-58型碳青霉烯酶基因,其阳性产物经双向测序分析.结果 筛选出对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌非重复株15株,14株耐药菌经E-test法鉴定未产金属酶,经NaCl抑制后发现其对亚胺培南的敏感性增加,提示产生OXA型碳青霉烯酶,其中11株PCR扩增bla_(OXA-23)阳性,1株PCR扩增bla_(OXA-58)阳性,NaCl抑制试验与PCR检测结果的一致率达85.7%.结论 产OXA型碳青霉烯酶是西安地区该菌对亚胺培南耐药的主要原因,其OXA-58型基因在国内尚属新型碳青霉烯酶基因型;NaCl抑制试验是一种简单、有效、价廉的表型筛选OXA型碳青霉烯酶的新方法.

Abstract：

Objective To investigate the molecular mechanism of carbapenem resistance in the clinical isolates of A cinetobacter baumannii from Xi'an and their profile of carbapenemase production. Methods A total of 146 A cinetobacter baumannii strains were isolated from 6 general hospitals in Xi'an.Antimicrobial susceptibility test was performed for all the strains,followed by detection of imipenem resistance using E-test for metallo-β-lactamase(MBL)and NaCl inhibition test for OXA type carbapenemase.Bla_(OXA-23) and bla_(OXA-58) were amplified by PCR,and the positive products were sequenced.Results From the collected strains,15 non-repetitive imipenem-resistant A cinetobacter baumannii strains were identified,among which 14 yielded negative results in E-test for MBL production. All the resistant strains showed increased sensitivity to imipenem after NaCl inhibition.suggesting the presence of carbapenemase production.Eleven of the strains harbored OXA-23 type gene and 1 harbored OXA-58 type gene.The concordance rate of the results by NaCl inhibition test and PCR was 85.7%. Conclusions Production Of OXA-type carbapenemases is the most important reason for carbapemen resistance in A cinetobacter baumannii in Xi'an.The OXA-58 type gene is a novel carbapenemase genotype in China.NaCl inhibition test is a convenient and cost-effective method for detecting carbapenemases in A cinetobacter baumzmnii.     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因及同源性分析

目的 研究本院近3年临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药现状、同源性及碳青霉烯酶基因型.方法 收集2006年1月-2009年7月临床分离存活的、非重复的亚胺培南耐药及敏感对照株鲍曼不动杆菌,进行扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)分子鉴定菌种,采用琼脂稀释法测定菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的MIC;采用基因间重复序列引物PCR(REP-PCR)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性;用多重PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶包括TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型、PER-型及IMP-、VIM-型碳青霉烯酶和OXA型碳青霉烯酶分布特点.结果 274株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)对头孢菌素类、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、喹喏酮类抗生素敏感率＜10%,对米诺环素敏感率为41.2%;对多黏菌素B 100%敏感.2006年1月-2009年7月期间共检出5个克隆,主要为A1耐药克隆株于不同病房的暴发流行.β-内酰胺酶检测出OXA-23、-66、-69、-72、-58型碳青霉烯酶及PER-1型酶.blaOXA-23-like与blaOXA-51-like基因同时存在的CRAB株为53.6%(147/274).未检出IMP-、VIM-型碳青霉烯酶及TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型β-内酰胺酶.结论 CRAB克隆株的传播是造成我院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因.OXA-51-like、OXA-23型酶为对CRAB对碳青霉烯类耐药的主要碳青霉烯酶.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因分析

目的研究我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（IRAB）的耐药性与碳青霉烯酶基因型。方法收集我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌35株,K—B法和E—test法测定对常用抗茵药物的敏感性,采用改良Hodge试验和乙二胺四乙酸（EDTA）协同试验检测耐亚胺培南不动杆菌产碳青霉烯酶和金属β-内酰胺酶情况,聚合酶链反应（PcR）检测其碳青霉烯酶基因OXA-23、OXA-24、OXA-58、IMP、VIM。结果35株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类、部分氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗菌药物均有很高耐药率（〉70％）,仅对阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦和多粘菌素B有较高的敏感性（〉70％）,35株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均产碳青霉烯酶,未检测到金属β-内酰胺酶,全部检测到OXA-23型基因,未检测到OXA-24、OXA-58、IMP、VIM型基因。结论耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药相当严重;产OXA-23型碳青霉烯酶是我院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

泛耐药鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素机制研究

目的研究鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药的表型和分子机制。方法采用KB法及琼脂稀释法从临床分离的84株泛耐药鲍曼不动杆菌中随机选取8株,采用外排泵抑制试验筛查外排泵表型阳性菌株,EDTA协同实验筛选金属β-内酰胺酶表型,改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,PCR扩增耐药菌株的KPC酶、碳青霉烯酶和ESBLs基因,并测序分析。提取外膜蛋白行SDS-PAGE。结果 PAβN抑制试验显示亚胺培南MIC值下降均≤4倍,而美罗培南MIC值下降≥4倍者占50%(4/8)。EDTA协同试验结果显示阴性。改良Hodge试验检测8株耐药菌结果阳性。耐药基因PCR扩增和测序证实8株耐药菌中7株有blaOXA-23基因,5株含blaTEM-1基因,8株耐药菌均含有KPC-2酶基因;耐药菌株的外膜蛋白电泳条带在25 ku处出现明显缺失。结论鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药机制主要是产生KPC-2酶、blaOXA-23酶,外膜蛋白25 ku表达的缺失所致,外排泵过度表达可能参与美罗培南的耐药。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的检测

目的了解徐州地区三级医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的流行情况。方法收集徐州地区三级医院临床分离的对亚胺培南耐药的非重复鲍曼不动杆菌株97株,予VITEK-32型全自动微生物分析系统鉴定,予PCR方法检测金属酶耐药基因及OXA型碳青霉烯酶基因。结果经PCR方法检测所有受试菌未检测到金属酶基因blaIMP、blaVIM、blaSIM和OXA-24碳青霉烯基因,其中85株检测OXA-23型碳青霉烯酶基因,检出率为87.6%(85/97株)。结论徐州地区三级医院鲍曼不动杆菌产OXA-23型碳青霉烯酶可能是导致其对碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因型研究

目的 研究重庆地区对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌(CRAb)的耐药性及碳青霉烯酶基因型.方法 收集2007年1月至2009年12月重庆地区某两所教学医院153株从患者分离的对亚胺培南耐药的CRAb,用琼脂稀释法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度,PCR扩增D类碳青霉烯酶基因blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like、blaOXA-58-like.用EDTA纸片法检测金属酶表型,PCR检测基因型blaIMP、blaVIM、blaSIM.结果 所有耐碳青霉烯类的CRAb除对阿米卡星、庆大霉素和左氧氟沙星等保持一定敏感性外,对其余抗菌药物耐药率均为100%.所有耐碳青霉烯类的CRAb均产OXA-23型碳青霉烯酶,在blaOXA-23-like上游连接有ISAba1启动元件.结论 重庆地区流行的对亚胺培南耐药的CRAb均产OXA-23型碳青霉烯酶.     

鲍曼不动杆菌耐药性与16S rRNA甲基化酶基因表达相关性研究

目的:了解鲍曼不动杆菌对临床常用药物耐药性与16S rRNA甲基化酶基因表达水平之间的相关性。方法:从2008年9月至2011年1月收集的110株鲍曼不动杆菌,琼脂二倍稀释法测定其对21种药物(包括6种氨基糖苷类药物)的敏感性。PCR法检测7种甲基化酶基因(armA、rmtA-rmtE、npmA),RT-PCR检测甲基化酶基因armA的mRNA表达水平。结果:鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类的耐药率在58.2%～83.8%之间,且MIC值多在512.0μg/mL以上。对多粘菌素B敏感率100%,其余药物耐药率在43.6%～93.6%之间。armA基因检出率为36.4%(40株),其余基因未检出。RT-PCR结果显示,armA基因在高水平耐氨基糖苷菌株中有mRNA的表达。结论:鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物的高度耐药性与16S rRNA甲基化酶基因的表达有关。     

对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因型研究

目的探讨我省11个地区20家医院临床分离的对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌耐药性、同源性和碳青霉烯酶基因型。方法收集我省11个地区20家医院2004年12月至2005年12月临床分离的271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌。采用琼脂稀释法和浓度梯度法（Etest）测定亚胺培南耐药菌株对14种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）值；采用脉冲场凝胶电泳法（PFGE）分析亚胺培南耐药菌株的同源性；采用PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌对多黏菌素E耐药率最低（11.8％），头孢哌酮／舒巴坦、氨苄西林／舒巴坦耐药率分别为55．4％和68．6％，米诺环素耐药率75．6％，其余抗茵药物耐药率均大于90．O％；PFGE分型发现271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌中235株属于3个克隆株。在多个城市的医院内流行，另有13株属于2个克隆株。分别在一个城市的医院内播散；271株对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌均携带OXA-51组基因，258株携带OXA-23组基因，未检测到金属酶基因。结论克隆播散是对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌最主要的传播方式，OXA-23和OXA-66D类β-内酰胺酶基因是最主要的碳青霉烯酶基因型。     

多重耐药鲍曼不动杆菌存在新的氨基糖苷类药物耐药机制

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR—ABA）是否存在新的氨基糖苷类药物耐药机制。方法采用PCR检测30株MDR—ABA菌12种16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果9株检出16SrRNA甲基化酶基因（30．0％）,29株检出氨基糖苷类修饰酶基因（96．7％）。结论MDR—ABA菌存在新的氨基糖苷类药物耐药机制。     

1146株鲍曼不动杆菌临床分布及耐药性变迁分析

目的了解医院鲍曼不动杆菌的耐药性变迁,指导临床合理使用抗菌药物,有效控制医院感染。方法对我院2008～2010年临床分离的1146株鲍曼不动杆菌临床分布及药敏结果进行回顾性分析。结果3年来,我院鲍曼不动杆菌分离株占临床细菌构成比呈逐年上升趋势,多药耐药和泛耐药菌株日益增多,但亚胺培南、美洛配能、头孢哌酮／舒巴坦、左氧氟沙星、哌拉西林／他唑巴坦和阿米卡星对鲍曼不动杆菌仍有较好抗菌作用。结论临床分离的病原菌构成和耐药谱不断发生变化,所以要动态监测耐药性变迁,辅助临床制定最佳治疗方案,延缓细菌耐药性发展,控制多耐药株的流行。控制医院感染暴发流行。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的主要耐药机制研究

目的研究感染性鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因分布与耐药相关性。方法回顾性分析鲍曼不动杆菌在2010年1月~2015年12月期间的药物敏感性变迁,留取200株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌,检测青霉烯酶与外排泵表型,并统计比较200株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌与200株碳青霉烯类敏感组的差异。结果 2010年1月~2015年12月期间鲍曼不动杆菌耐药严峻,碳青霉烯类鲍曼不动杆菌检出率在35.8%~78.9%。其中在200株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌菌株中,检出携带OXA-51基因108株,携带OXA-23基因46株,同时携带OXA-51和OXA-23 26株,其余碳青霉烯酶基因均未检测到;外排泵表型在碳青霉烯类耐药菌阳性株为175株,碳青霉烯类敏感株阳性株为115株,χ~2检验碳青霉烯类敏感组的与耐药组比较,差异有统计学意义(χ~2=45.141,P=0.000)。结论近六年鲍曼不动杆菌耐药机制以OXA-51,OXA-23起主要作用,外排泵机制可能在碳青霉烯类耐药机制起作用。     

泛耐药鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌是一种常见的院内感染病原菌,常引起呼吸系统感染,近年来由于抗菌药物的不合理应用等原因,出现了越来越多的耐药菌株。鲍曼不动杆菌已对多种抗菌药物产生耐药,耐药机制复杂,有效抗菌药物极少。泛耐药鲍曼不动杆菌指对治疗鲍曼不动杆菌感染的经验用药全部耐药者,但多粘菌素类除外。本文主要就鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类及四环素类的耐药机制加以综述。     

碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌的临床特征及克隆变迁

目的:研究天津医科大学总医院碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）的临床特征、耐药机制以及克隆变迁情况。方法:回顾性分析天津医科大学总医院2011年1月—2018年12月感染CRAB患者的临 床资料;采用聚合酶链反应（PCR）检测CRAB的碳青霉烯酶基因;应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对CRAB进行分子流行病学分型。结果:该院CRAB对庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药性较高,且 97.5%的菌株blaOXA-23基因阳性,未检测出blaOXA-24-like 、blaOXA-58-like、blaIMP、blaVIM、blaSIM、 blaNDM基因。PFGE将2011-2015年79株CRAB分成15个克隆型,以A克隆型和C克隆型为主,2011 年CRAB呈散在流行,2012年以C克隆型为主,2013年A克隆型出现,并取代C克隆型成为2013—2015年主要的流行菌株。A克隆型对亚胺培南高度耐药（MIC50 =64 μg/mL）,对美罗培南中度耐药（MIC50 =16 μg/mL）,且与中央静脉插管相关（χ2 =5.80,P=0.016）;C克隆型对亚胺培南中度耐药（MIC50 =16 μg/mL）,对美罗培南低度耐药（MIC50 =8 μg/mL）,且与三代头孢菌素的使用相关（χ2 =4.65,P=0.031）。结论:blaOXA-23基因是该院CRAB最主要的碳青霉烯酶基因,对亚胺培南和美罗培南高中度耐药的A克隆型是该院流行传播的主要克隆型。     

四川省简阳市院感鲍曼不动杆菌耐药性及同源性溯源研究

目的分析临床患者和临床环境分离的鲍曼不动杆菌药敏和耐碳青霉烯酶基因携带情况,探讨各菌株间的同源性,为控制医院感染提供数据依据。方法收集2019年1月—2020年8月分离来源于临床患者和临床环境共38株鲍曼不动杆菌,采用最低抑菌浓度法检测抗菌药物敏感性,采用聚合酶链式反应检测相关耐药基因,肠杆菌基因重复一致序列指纹图谱进行菌株同源性分析。结果34株来源于临床患者的鲍曼不动杆菌和4株环境中分离的鲍曼不动杆菌均携带bla_OXA-51和bla_IMP耐药基因,均不携带bla_VIM基因,32株鲍曼不动杆菌携带bla _OXA-23基因,28株携带bla _TEM基因,7株携带bla _OXA-58基因。经聚类分析后,38株鲍曼不动杆菌分为7个基因型(分别用A、B、C、D、E、F、G表示),聚类E和聚类G为主要簇型,分别包含12株(12/38,31.6%)和18株(18/38,47.4%),为主要流行克隆株。结论临床患者和环境中分离的鲍曼不动杆菌耐药差异较大,携带的耐药基因差...