紫花高乌头总碱对吗啡依赖大鼠氯唑沙宗药动学的影响

目的:观察紫花高乌头总碱对吗啡依赖大鼠氯唑沙宗药动学的影响。方法:采用剂量递增法复制吗啡依赖大鼠模型,注射纳洛酮催促产生戒断症状,高效液相色谱法测定经CYP2E1代谢的探针药物氯唑沙宗血药浓度经时变化。结果:吗啡依赖可致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC减少,Cmax减少。催促戒断可致体质量减轻,CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性进一步增强。紫花高乌头总碱可降低大鼠的戒断反应症状分值,控制大鼠的体质量下降,下调吗啡依赖所致的CYP2E1的代谢活性增强。结论:紫花高乌头总碱可抑制吗啡依赖大鼠的戒断症状,使吗啡依赖及其催促戒断后增高的CYP2E1代谢活力下调。     

免疫性肝损伤和酒精性肝损伤中CYP2E1代谢活力的差异性变化

目的:观察免疫性肝损伤和酒精性肝损伤对大鼠CYP2E1代谢活力的影响。方法:采用尾静脉注射卡介苗诱发大鼠产生免疫性肝损伤,采用白酒灌胃法制备大鼠酒精性肝损伤模型,HPLC法测定经CYP2E1代谢的探针药物氯唑沙宗血药浓度经时变化。结果:卡介苗刺激可致大鼠肝脏明显肿大,大量单核、淋巴细胞浸润,肉芽肿形成;致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性减弱,AUC增大,Cmax增大。酒精性肝损伤可致肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞体积增大,呈弥漫性中度水变性,肝窦受压,大部分肝细胞胞浆内见大小不等的脂肪空泡。致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC减少,Cmax减少。结论:免疫性肝损伤可致CYP2E1代谢活性降低,酒精性肝损伤可致CYP2E1代谢活性增强。     

酒精性肝损伤大鼠细胞色素P450 CYP2E1和细胞色素P450 CYP3A的代谢活性

目的观察酒精性肝损伤对大鼠细胞色素P450CYP3A(CYP3A)和细胞色素P450CYP2E1(CYP2E1)代谢活性的影响。方法采用ig给予白酒制备大鼠酒精性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,采用HE染色法光镜下观测酒精对肝脏损伤程度。大鼠ip给予CYP3A探针药物咪达唑仑10mg·kg-1或ig给予CYP2E1探针药物氯唑沙宗50mg·kg-1后,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中咪达唑仑和氯唑沙宗的血药浓度,并应用3P87软件计算其药代动力学参数,以考察CYP2E1和CYP3A的代谢活性的变化。大鼠ig给予氯唑沙宗80mg·kg-1后,热板方法测定大鼠添足次数和添足反射潜伏期。结果酒精性肝损伤可致大鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞体积增大,呈弥漫性中度水变性,肝窦受压,大部分肝细胞胞浆内见大小不等的脂肪空泡;与正常对照组相比,酒精性肝损伤组大鼠GPT和GOT活性分别增加了16.0%和20.0%(P<0.05,P<0.01)。酒精性肝损伤致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了38.0%,30.5%和35.0%(P<0.05);酒精肝损伤组大鼠氯唑沙宗镇痛效果明显降低;酒精性肝损伤致大鼠CYP3A对探针药物咪达唑仑的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了122.6%,54.9%和56.9%(P<0.01,P<0.05)。结论酒精性肝损伤可使大鼠CYP2E1和CYP3A代谢活性增强。     

糖尿病模型大鼠肝脏CYP2E1酶活性的变化

采用四氧嘧啶诱发糖尿病大鼠模型,测定肝苯胺羟化酶及其他药酶活性,同时用氯唑沙宗探针间接评价CYP2E1的活性。结果表明,糖尿病大鼠苯胺羟化酶活性增加80%,伴有其他药酶活性增加。大鼠单次po氯唑沙宗50mg·kg^-1,糖尿病组氯唑沙宗的C_max和AUC分别减少37%和34%,6 羟氯唑沙宗的Tpeak缩短,羟化指数(OH-CZX与CZX的AUC比或浓度比)升高表明糖尿病大鼠可诱导CYP2E1活性。提示糖尿病患者服用经CYP2E1酶代谢的药物应慎重。     

速效救心丸对大鼠体内CYP450酶活性影响的研究

目的采用Cocktail探针药物法研究速效救心丸对大鼠体内药物代谢酶CYP2E1和CYP3A4的影响,为临床用药提供参考。方法 Wistar大鼠,随机分为,①实验组:灌胃给予速效救心丸(给药体积0.5mL/100g,给药剂量64.8mg·kg-1);②对照组:灌胃给予等体积的纤维素钠混悬液。采用高效液相色谱法(HPLC)测定探针底物氯唑沙宗和咪达唑仑的血药浓度,计算其药代动力学参数,考察大鼠体内CYP2E1及CYP3A4酶的活性。结果实验组氯唑沙宗的代谢无显著性差异,咪达唑仑的代谢明显减慢。结论速效救心丸对大鼠的CYP2E1酶活性无明显影响,对CYP3A4酶活性有抑制作用。     

振源胶囊对细胞色素P_(450)酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响

目的:研究振源胶囊对细胞色素P450酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1的影响。方法:用Cocktail探针药物法,将Wistar大鼠随机分组,灌胃给予振源胶囊溶液,以生理盐水组为空白对照,诱导10d,于股动脉插管,注射给予3种探针药物咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗,通过高效液相色谱法检测各探针药物的代谢率来评价各组CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1亚型酶的活性;药动学计算采用DAS2.0软件完成。结果:给予振源胶囊的大鼠,咖啡因代谢加快,半衰期缩短;氨苯砜代谢减慢,半衰期延长;氯唑沙宗半衰期与空白对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:振源胶囊对大鼠CYP1A2有诱导作用,对CYP3A4有抑制作用,对CYP2E1的作用不明显。     

Cocktail探针药物法评价生、醋莪术对CYP450酶亚型的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究生、醋莪术对大鼠CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响并进行比较,探讨其通过炮制增强或改变作用的趋向性。方法将SD大鼠随机分组,生、醋莪术组分别给予生、醋莪术提取液(9 g.kg-1),以生理盐水为空白对照,在一定时间点采集血样,用HPLC检测探针药物在大鼠体内的代谢情况,以评价生、醋莪术对CYP450酶的影响。结果生莪术的茶碱、氨苯酚和氯唑沙宗的代谢情况与空白组相比差异无显著性;但醋莪术与空白组相比,茶碱和氯唑沙宗的T12、Tmax和AUC明显增加,CL/F明显降低;氨苯酚的T12变化不明显,AUC明显降低,CL/F明显增加;氯唑沙宗的T12、Tmax、AUC明显增加,CL/F明显降低。结论单次给予大鼠生、醋莪术后,生莪术对CYP450酶的作用不明显,醋莪术对CYP1A2和CYP2E1具有抑制作用,对CYP3A4具有诱导作用。     

慢性不可预见性温和应激模型大鼠的肝脏药物代谢酶活性变化研究

采用鸡尾酒(cocktail)探针药物法研究慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)造成的抑郁状态对大鼠体内6种CYP450亚酶活性的影响。根据Katz法建立CUMS大鼠抑郁模型;分别选用甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、茶碱、咪达唑仑、奥美拉唑及右美沙芬作为大鼠CYP2C6、CYP2E1、CYP1A2、CYP3A2、CYP2D1、CYP2D2的探针底物,采用液质联用法(LC-MS/MS)测定对照组与模型组大鼠体内6种混合探针的血药浓度,计算药动学参数。结果表明,茶碱和氯唑沙宗代谢显著加快(P<0.01),甲苯磺丁脲、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑的代谢无显著差异。结果说明,慢性不可预见性温和应激造成的抑郁状态对CYP1A2有强诱导、对CYP2E1有中强诱导作用。     

钝化NF-κB的活化对免疫性肝损伤大鼠CYP2E1的影响

目的研究核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在免疫性肝损伤大鼠模型中的作用及对细胞色素P450总含量,亚型2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)表达、代谢活力的影响。方法采用尾静脉注射BCG(125 mg·kg-1)14d制备免疫性肝损伤大鼠模型。采用双光束紫外可见分光光度法测定肝匀浆中CYP450总含量,通过肝脏组织HE染色和血清中ALT和AST水平测定观察大鼠肝损伤情况。采用Western blot方法检测大鼠肝组织中CYP2E1蛋白表达;通过HPLC法检测CYP2E1的探针药物氯唑沙宗的血浆药物浓度,从而反映特异性代谢酶CYP2E1的代谢活力。结果大鼠尾静脉注射BCG 14 d后,可引起肝组织炎性细胞浸润,肝重、脾重增加,血清转氨酶ALT及AST水平明显升高,CYP450总含量降低,CYP2E1表达和代谢活力明显降低。采用吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)钝化NF-κB活化,可抑制CYP450总含量的降低,减缓CYP2E1蛋白表达和代谢活力的下调。结论免疫损伤刺激明显下调CYP2E1,钝化NF-κB活化可明显抑制免疫性肝损伤大鼠肝组织中CYP2E1的下调,NF-κB可能参与CYP2E1下调机制。     

毛冬青胶囊对大鼠体内细胞色素P450 代谢活性的影响*

目的：采用Cocktail探针药物法研究毛冬青胶囊对大鼠CYP1A2、CYP3A2、CYP2C6、CYP2D1、CYP2D2和CYP2E1体内代谢活性的影响。方法：分别以茶碱、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬和氯唑沙宗作为探针底物,将大鼠随机分为3组：空白对照组、毛冬青的低剂量组和高剂量组。低、高剂量组每日分别灌胃给予毛冬青胶囊1.8、3.6 g·kg-1,空白对照组每日给予与低剂量组等体积的生理盐水,各组均为1次/天,连续14 d。各组分别于第15天给予Cocktail探针药物,于给药前、后不同时间点取血,用LC-MS/MS检测各探针药物的血药浓度,计算药代动力学参数。结果：茶碱低剂量组cmax、AUC0-t有极显著差异（P≤0.01）;甲苯磺丁脲高剂量组和氯唑沙宗低剂量组AUC0-t有显著差异（P≤0.05）;其他无统计学差异。结论：毛冬青胶囊对大鼠体内CYP2C6和CYP1A2有强诱导作用,对CYP2E1有中强诱导作用,其他亚型基本无影响。     

金甲王颗粒对吗啡依赖猴和大鼠戒断症状的抑制作用

目的 :观察中药金甲王颗粒对吗啡依赖猴和大鼠戒断症状的抑制作用。方法 :采用吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断、自然戒断模型以及吗啡依赖猴模型 ,观察金甲王颗粒对戒断症状的抑制作用。结果 :(1) 3个剂量的金甲王颗粒 (3 5 4、7 0 3和 14 0 7g生药·kg- 1 )均可显著降低吗啡依赖大鼠的催促戒断症状分值 (P <0 0 1) ;(2 )金甲王颗粒治疗组在大鼠自然戒断后期的体重恢复优于吗啡依赖组 ,3 5 4g生药·kg- 1 剂量的金甲王颗粒组大鼠体重下降百分率低于吗啡依赖组 ,但无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;(3)在猴自然戒断治疗实验中 ,金甲王颗粒 3个剂量 (3 2 4、6 4 7、12 94g生药·kg- 1 )均能明显抑制吗啡依赖性猴的戒断症状 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,金甲王颗粒中、大剂量组可明显抑制猴戒断后的体重下降 (P <0 0 5 ) ,但对体温下降的抑制作用不明显 (P >0 0 5 )。结论 :金甲王颗粒能改善吗啡依赖性动物催促戒断和自然戒断后所产生的戒断症状。     

异博定对幼年大鼠吗啡戒断症状的治疗作用

目的··:观察异博定对幼年大鼠吗啡成瘾后戒断症状的治疗作用。方法··:将50只SD幼鼠分为异博定治疗组(n=20)、实验对照组 (n=20)和阴性对照组 (n=10) ,建立吗啡成瘾幼鼠动物模型和吗啡戒断动物模型 ,用异博定对纳洛酮诱发的吗啡戒断幼鼠的戒断症状进行治疗 ,并分别对异博定治疗组和试验对照组吗啡成瘾及戒断症状进行观察和比较。结果··:给成瘾动物单次ip异博定 (10mg·kg-1)能明显缓解由纳洛酮诱发的吗啡戒断症状 ,并对吗啡戒断引起的体重下降有减轻作用。而连续3d治疗能明显加速纳洛酮诱发的戒断症状的缓解 ,且与试验对照组比较有显著性差异 (P<0.01)。结论··:异博定对纳洛酮诱发的幼年大鼠吗啡戒断症状有一定治疗作用。     

川芎嗪可抑制吗啡戒断大鼠的血压及血清单胺类递质升高

目的··:观察川芎嗪对吗啡戒断大鼠高血压的抑制及血清单胺类递质的影响。方法··:采用剂量递增的方法皮下注射吗啡 ,经纳洛酮催促戒断建立吗啡戒断大鼠模型,根据戒断反应中大鼠的平均动脉压(mABP)评定戒断大鼠血压水平。用分光光度计检测血中单胺类递质的含量。结果··:3种不同剂量的川芎嗪组mABP与生理盐水组比较 ,显著下降 (P<0.05,P<0.01) ,与戒断组比较 ,60mg·kg-1 川芎嗪组血中单胺类递质含量显著下降(P<0.01)。结论·· :川芎嗪可明显抑制吗啡戒断大鼠的血压升高 ,并抑制戒断反应引起的血清单胺类递质的升高。     

三七总皂甙对吗啡戒断大鼠海马组织CaMK Ⅱ活性及CaMK Ⅱ α亚基蛋白表达的影响

目的:研究三七总皂甙(Panax notoginseng,PNS)对吗啡戒断大鼠海马组织CaMK Ⅱ活性及CaMK Ⅱα亚基蛋白表达的影响,探讨PNS抑制吗啡戒断症状的作用机制。方法:应用剂量递增法建立大鼠吗啡躯体依赖模型(MOR组),采用腹腔注射(ip)纳洛酮建立催促戒断模型(NAL组),大鼠在给予吗啡的同时,采用3种不同剂量PNS(100、200、400mg·kg-1)进行灌胃(ig)。应用放射酶法测定CaMK Ⅱ活性,Western blot方法检测CaMK Ⅱα亚基蛋白表达。结果:(1)MOR组CaMK Ⅱ活性降低,CaMK Ⅱα亚基蛋白表达升高;(2)NAL组CaMK Ⅱ活性和CaMK Ⅱα亚基蛋白表达均显著升高;(3)PNS可以剂量依赖性地抑制纳洛酮催促戒断所引起CaMK Ⅱ活性和CaMK Ⅱα亚基蛋白的升高。结论:PNS可能通过抑制纳洛酮催促戒断所引起的CaMKⅡ活性和CaMK Ⅱα亚基蛋白表达的升高来缓解大鼠吗啡戒断症状。     

地尔硫抑制小鼠吗啡戒断反应及血浆和脑匀浆一氧化氮的含量

目的··:观察钙拮抗剂盐酸地尔硫对小鼠吗啡戒断反应及血浆和脑匀浆一氧化氮 (NO)含量的影响。方法··:皮下注射定量吗啡 ,建立小鼠吗啡依赖动物模型 ;腹腔注射纳洛酮催促 ,根据小鼠戒断反应中出现跳跃反应的潜伏期、跳跃次数和体重丢失评定戒断反应的强度 ;用硝酸还原法检测其血浆和脑内NO含量。结果·· :3种不同剂量 (25、50、100mg·kg-1)的盐酸地尔硫对小鼠吗啡戒断反应有明显的抑制作用 ,并呈量效关系;100mg·kg-1的盐酸地尔硫可抑制吗啡戒断反应引起的血浆和脑匀浆NO含量的升高。结论·· :盐酸地尔硫可抑制小鼠吗啡戒断反应 ,并能抑制戒断反应引起的血浆和脑匀浆NO含量的升高。     

洛非西定抑制吗啡依赖大鼠蓝斑Fos蛋白的表达

目的·· :研究洛非西定控制阿片类戒断症状的分子机理。方法·· :采用连续5dip 吗啡,建立大鼠吗啡依赖模型 ,给予洛非西定干预、纳洛酮促瘾后观察戒断症状 ,并取桥脑蓝斑切片 ,进行Fos蛋白免疫细胞化学实验。结果··:吗啡依赖大鼠经洛非西定干预后 ,由纳洛酮催促的戒断症状明显低于未经洛非西定处理组 ;经洛非西定干预后 ,蓝斑Fos蛋白免疫反应活性明显低于未经洛非西定处理组 ;但较盐水对照组高。结论·· :洛非西定能抑制吗啡依赖大鼠戒断症状以及蓝斑Fos蛋白的表达。     

吗啡在基因水平对脑嘌呤核苷酸代谢的影响

目的:通过研究吗啡对大鼠脑组织嘌呤核苷酸代谢的影响,寻找吗啡依赖相关的调控与效应基因。方法:利用核酸分子杂交测定吗啡依赖与戒断大鼠丘脑及颞叶脑组织次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)mRNA的含量变化。结果:核酸分子杂交密度扫描结果显示吗啡依赖、急性及慢性戒断时大鼠丘脑及颞叶脑组织HGPRTmRNA均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论:吗啡能明显抑制丘脑及颞叶脑组织HGPRT的基因表达,提示吗啡可能通过调控脑核苷酸代谢的关键酶,影响脑核苷酸及核酸代谢。     

卡马西平对吗啡依赖大鼠戒断症状及ACTH的影响

目的 :观察卡马西平 (Carb)对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断症状的抑制作用及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)水平的影响。方法 :剂量递增法皮下注射 (sc)盐酸吗啡 (Mor) ,建立大鼠吗啡依赖模型 ,腹腔注射 (ip)盐酸纳洛酮 1mg·kg- 1 催促 ,观察戒断反应并评分 ;免疫发光法测定血清ACTH水平。结果 :Carb 10 0mg·kg- 1 及 2 0 0mg·kg- 1 均可明显减轻大鼠戒断症状 (P <0 0 5 )。 10 0mg·kg- 1 剂量组的ACTH水平接近正常 ,低于Carb 2 0 0mg·kg- 1 组(P <0 0 5 )。结论 :适当剂量的卡马西平可有效控制吗啡依赖大鼠的戒断症状     

褪黑素对吗啡戒断大鼠脑脊液和血浆中cAMP水平抑制的影响

目的·· :探讨褪黑素(melatonin,MT)抑制吗啡戒断反应的作用及其与脑脊液(CSF)和血浆中cAMP含量的关系。方法··:建立吗啡依赖大鼠自然戒断模型 ,脑室插管及放免测定吗啡依赖大鼠CSF和血浆中cAMP含量。结果·· :(1)MT对大鼠吗啡戒断反应有明显的抑制作用;(2)吗啡依赖大鼠CSF中(20.07pmol·ml-1±s4.62pmol·ml-1)和血浆中(76.40pmol·ml-1±s8.71pmol·ml-1)cAMP含量均低于正常大鼠,P<0.01 ;吗啡戒断大鼠CSF中(38.19pmol·ml-1±s6.62pmol·ml-1)和血浆中(96.65pmol·ml-1±s5.32pmol·ml-1)cAMP含量则明显高于吗啡依赖大鼠,P<0.001;(3)MT可使吗啡戒断大鼠CSF中(23.28pmol·ml-1±s4.10pmol·ml-1)和血浆中(61.72pmol·ml-1±s3.49pmol·ml-1)cAMP含量明显降低,P<0.01和P<0.001。结论·· :MT可抑制大鼠吗啡戒断反应 ,并与MT降低CSF和血浆中cAMP的含量有关。     

川芎嗪对吗啡依赖大鼠戒断综合征的抑制作用

目的··:观察川芎嗪对吗啡依赖大鼠戒断综合征的影响。方法··:采用剂量递增方式皮下注射吗啡5d的大鼠,经过川芎嗪处理30min后,用纳洛酮催促,在停用吗啡后不同时间里观察评定戒断症状分值。结果··:川芎嗪明显减轻戒断症状和体重下降。结论··:川芎嗪能明显抑制吗啡依赖大鼠的戒断反应,其作用机制可能与阻断细胞钙内流有关。