血管内皮生长因子、MCL1、bcl-2在急性白血病中的表达

血管内皮生长因子(VEGF)是血管发生和生成过程中重要的细胞因子,对肿瘤的生长、侵袭起着重要作用。研究表明白血病细胞株VEGF及其特异性受体异常表达。为探讨VEGF在成人急性白血病(AL)发生发展中的作用,我们采用RT PCR技术检测VEGF基因和抗凋亡基因MCL1、bcl 2mRNA水平,并分析其相互的关系和临床意义,报道如下。病例和方法1　病例　6 4例成人初治AL患者为2 0 0 1年1～12月本院住院及门诊随访患者,均符合FAB诊断标准,其中男38例,女2 6例,中位年龄为34岁(15～6 0岁)。FAB分型:急性髓系白血病(AML) 4 9例(M0 1例、M13例、M2 …     

血管内皮细胞生长因子及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病中的表达及其意义

目的　分析血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病 (AML)中的表达和意义。方法　用RT PCR方法检测VEGF及其受体KDR、Flt1mRNA表达 ,ELISA法检测血浆中VEGF水平。结果　 13个髓系白血病细胞系VEGF、KDR及Flt1mRNA表达阳性率分别为 10 0 %、5 3 8%和 92 .3 %;39例治疗前AML患者有 32例检测了骨髓单个核细胞 (BMMNC)VEGF、KDR及Flt1mRNA的表达 ,其阳性例数分别为 2 1例 ( 6 5 .6 %)、1例 ( 3.1%)和 17例 ( 5 3 .1%) ,3名健康献髓者BMMNC及 2名健康人骨髓CD34 +细胞均不表达VEGF及其受体。 39例治疗前AML患者血浆VEGF水平为 ( 135 .3±87.9)ng/L ,较 15例治疗后获完全缓解 (CR)的AML患者 [( 80 .6± 36 .9)ng/L]及 12名正常对照 [( 80 .6± 33 .1)ng/L]明显升高 (P =0 .0 2 8,0 .0 0 7)。 39例患者中有 35例接受常规化疗 ,2个疗程后未达CR的15例患者血浆VEGF水平为 ( 188.2± 118.6 )ng/L ,明显高于 2个疗程内获CR的 2 0例患者血浆VEGF水平 [( 10 4.2± 30 .9)ng/L](P =0 .0 0 4)。结论　AML白血病细胞不同程度表达VEGF及其受体mRNA ,AML患者血浆VEGF水平升高 ,VEGF水平影响患者化疗的疗效。     

急性髓系白血病中eIF4E高表达与疾病进展相关

本研究检测未治疗、未缓解/复发及缓解期间急性髓系白血病(AML)和其他良性血液病患者骨髓细胞中eIF4E基因表达水平并分析其与疾病进展的关系。采用SYBR Green I荧光定量PCR和相对定量分析法检测30例AML患者(M2型6例,M3型5例,M4型8例,M5型10例,M6型1例),11例AML化疗后完全缓解患者和20例非肿瘤性血液病患者骨髓单个核细胞的eIF4E表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算eIF4E基因表达水平。结果表明:AML未治疗及未缓解/复发组患者骨髓细胞eIF4E表达水平(7.098±5.544)%明显高于非肿瘤患者(0.248±0.163)%(P<0.01)和化疗后完全缓解患者(0.964±0.312)%(P<0.01),各AML亚型之间不存在统计学差异,尽管M4、M5亚型的表达水平相对较高。非白血病患者与缓解患者比较,eIF4E表达水平不存在显著性差异。结论:eIF4E基因在急性髓系白血病细胞中出现高表达,并随着疾病的缓解而明显降低,因此eIF4E有可能作为监测白血病进展的一项参数。     

骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病患者血清中血管内皮生长因子水平的检测

为了解血管内皮生长因子 (VEGF)在血液系统肿瘤发病中的作用 ,我们采用ELISA方法对骨髓增生异常综合征(MDS)及急性髓系白血病 (AML)患者血清中VEGF的含量进行了测定 ,现报告如下。病例和方法1　病例　本组 6 2例均为 2 0 0 0年 7月至 2 0 0 2年 1月本院血液科就诊或住院的患者 ,均为初诊未治患者 ,其中男 4 1例 ,女 2 1例 ,年龄 14～ 70岁 ,中位年龄 38岁。其中MDS患者 34例 ,包括RA 7例 ,RAS 8例 ,RAEB 8例 ,RAEB t 11例 ;AML患者 2 8例 ,包括M2 5例 ,M39例 ,M4 6例 ,M58例。2　正常对照　均为健康献血员 ,共 10名 ,其中…     

CD117在白血病细胞上的表达分析

目的　探讨细胞表面分化抗原CD117在各型白血病细胞上的表达规律及其意义。方法　采用CD4 5/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术细胞表面分化抗原分析。结果　急性髓系白血病 (AML)患者CD117表达率为 6 8%,慢性粒细胞白血病急变期 (CML BC)患者CD117表达率为 80 %,而在急性淋巴细胞白血病中表达率极低 ,仅为 2 %。在慢性淋巴细胞白血病、CML慢性期中阴性。在AML中CD117主要表达在M0 /M1( 72 %)、M2 ( 88%)、M4 ( 5 0 %)、M5a( 75 %)、M6( 10 0 %) ,但在M3 和M5b中表达率较低 (分别为 39%和 2 9%) ,在M3 中CD117的表达率高于CD34 及HLA DR。CD117与CD14 在AML中的表达呈负相关。结论　CD117有助于淋巴系与髓系白血病的鉴别 ,并有助于白血病克隆与正常细胞的区分。     

CD73在白血病亚型中的表达特点和临床意义

本研究探究CD73在不同类型白血病中表达和与白血病分化程度的关系。结合细胞免疫组织化学和瑞氏-姬姆萨染色方法分析75例白血病、11例骨髓增生异常综合征(MDS)、13例非白血病和9例正常人骨髓有核细胞中CD73阳性率及其与白血病细胞分化关系。结果显示,B-ALL(com-B,pre-B)和PLL患者CD73阳性细胞率显著高于B-CLL(p<0.05);AML亚型M1、M2a、t(8;21)、t(15;17)、M4和M5患者阳性细胞率高于MDS;M6与MDS两者低且差异不显著。T-ALL、B-CLL、M6、MDS、非白血病患者及正常人CD73阳性细胞率相近,均低于B-ALL和其它AML亚型。结论:CD73表达与白血病细胞种类、分化程度及白血病的发生发展相关,髓系白血病和B淋巴细胞白血病分化程度越高CD73表达越低,T-ALL不符合这一规律。     

血管内皮生长因子在急性白血病中表达的研究

血管内皮生长因子 (VEGF)是最重要的促进血管生成的因子之一 ,具有增加血管通透性、促进内皮细胞分裂增殖等作用。我们应用免疫细胞化学及流式细胞仪的方法检测了初诊急性白血病患者骨髓单个核细胞VEGF蛋白的表达情况 ,以明确急性白血病细胞是否高表达VEGF ,VEGF在急性白血病发病过程中是否起重要作用。材料和方法1　病例　初诊急性白血病患者 5 9例 ,其中AML 31例 ,ALL2 8例 ,诊断均符合FAB标准。平均年龄 4 0 .5 (12～ 6 1)岁。 14例骨髓正常者做对照组。2　免疫细胞化学方法　应用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞 ,离心涂片…     

CD64和CD14单核细胞相关性急性髓系白血病诊断中的意义

目的探讨CD64、CD14在急性单核细胞相关的髓系白血病免疫分型鉴别诊断中的意义。方法采用CD45/SSC散点图设门多参数流式细胞术分析70例急性髓系白血病(AML)患者细胞CD64、CD14及其他相关抗原的表达情况。结果 CD64在AML上的表达情况为:M0(0.0%)、M1(0.0%)、M2(10.5%)、M3(46.2%)、M4(78.6%)、M5(100.0%),其中弱阳性、阳性表达可以出现在各型AML中,唯独强阳性表达出现在M5中(P<0.01)。CD14在AML上的表达情况为M4(57.1%)、M5(77.8%),其余均为阴性。结论 CD64对诊断AML的灵敏度优于CD14,CD14的特异度优于CD64,二者结合有助于提高AMLM4/M5型的检出率及其与其他AML亚型的鉴别诊断。     

髓系白血病患者中血管生成素及受体酪氨酸激酶的表达及其意义

目的:探讨血管生成素及受体酪氨酸激酶(Angs及Tie-2)与髓系白血痛的关系.以及与血管内皮生长因子(VEGF)的相互关系.方法:应用半定量RT-PCR检测80例急性髓系白血病(AML)、10例慢性髓系白血病(CML)和10例正常人骨髓单个核细胞(BMNCs)中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA的表达.用流式细胞术检测白血病细胞增殖指数(PI).结果:与正常对照相比,除Ang-1外,Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA在初治的髓系白血病中表达均增高,缓解后降低.在Ang-2与VEGF双阳性白血病组,髓外浸润率明显增高(P<0.05);Ang-2/Tie-2双阳性组缓解率低(P<0.05)、PI增高(P<0.05)并与CML的发展阶段有关.结论:髓系白血病患者高表达Angs/Tie-2,同时其与VEGF之间相互作用,与白血病的发展阶段相关.     

成人恶性血液病患者血管内皮生长因子的血清水平分析

目的　探讨急性髓细胞白血病和多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平与疾病发展的关系。方法　应用酶联免疫吸附技术和Envision免疫组化二步法 ,分别检测 4 1例次成人急性髓细胞白血病和 19例次多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平 ,以及部分患者的骨髓血管生成情况。分析治疗前后血清VEGF水平的差异性 ,及其与患者骨髓微血管数、部分实验室检查指标、患者临床疗效的相关性。结果　AML和MM患者血清VEGF水平在经过化疗获得缓解或部分显效后显著低于初发时水平 (P <0 0 1)。AML各亚型M2、M3、M4和M5患者的血清VEGF水平差异无统计学意义(P值 =0 12 6 ) ,但均显著低于MM初发患者的血清VEGF水平 (P <0 0 1)。AML、MM初发患者血清VEGF水平与初发时的骨髓微血管数之间无显著相关性。结论　血清VEGF水平与疾病的活动性相关 ,可能在一定程度上反映疾病的状态。有效的化疗可能通过抑制白血病细胞增殖 ,下调VEGF的分泌。     

BP1基因在成人急性白血病中的表达

目的　研究 β蛋白 1(BP1)基因在成人急性白血病中的表达并分析与急性白血病的关系。方法　用RT PCR方法分别检测 70例急性白血病患者、10名健康对照者及HEL细胞系中BP1基因的表达。结果　在正常人外周血、骨髓和完全缓解的患者骨髓中均没有检测到BP1基因的表达 ;在急性髓系白血病 (AML)中BP1表达阳性率为 5 7% (35例中 2 0例 ) ,在AML M5中阳性率高达 80 % (10例中 8例 ) ;在急性淋巴细胞白血病中无表达。结论　BP1与AML有一定的相关性 ,可作为AML的一种分子标志。     

CAG方案治疗复发难治急性髓系白血病

自2 0 0 2年12月～2 0 0 3年3月,我们用小剂量阿糖胞苷和阿克拉霉素联合G CSF(CAG)方案治疗复发难治急性髓系白血病(AML)患者10例,现报道如下。病例和方法1　病例　10例均为我院血液科住院患者,男4例,女6例,平均年龄5 2岁。其中AML M2 2例,AML M3 2例,AML M53例,骨髓增生异常综合征(MDS) 2例,急性混合细胞白血病1例,均为复发难治[1]患者。2　方法　所有患者均接受CAG方案诱导治疗:阿糖胞苷10mg/m2 ,皮下注射,每12h 1次,第1～14天;阿克拉霉素5～7mg·m 2 ·d 1,静滴,第1～8天;G CSF15 0 μg/d ,皮下注射,第1～14天。当中性粒细…     

CD34表达不能预测成人急性髓细胞白血病的预后

许多研究认为,急性髓细胞白血病(AML)原始细胞抗原CD34表达不利于完全缓解(CR)的预后因素。作者观察了1990～1992年诊断的80例成人AML中CD34表达与某些临床特征和结局的关系,探讨CD34表达在评价预后中的作用。 80例成人AML按FAB标准确定亚型,其中M0型指常规形态学和细胞化学方法不能检测出髓系标记,但表达髓系相关抗原CD13或CD33。亚型分布:M0 3例、M1 20例、M2 23例,M4 22例、M5 7     

急性和慢性髓系白血病患者SALL4基因的表达

本研究旨在探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)和慢性髓系白血病(chronic myeloidleukemia,CML)患者中SALL4基因的水平状态及其临床意义。应用RQ-PCR方法检测35例AML、12例CML患者和24例缺铁性贫血患者(作为对照)骨髓单个核细胞(BMMNC)SALL4 mRNA表达水平。结果表明,AML患者SALL4表达水平(0%-14%,中位1.43%)明显高于对照组(0%-1%,中位0%)(P<0.001),65.7%(23/35)AML患者中SALL4转录本呈阳性,SALL4表达频率依次为M2(86.7%,13/15)、M3(75.0%,6/8)、M1(60.0%,3/5)、M4(14.3%,1/7),4组间的差异有显著性(P=0.008);SALL4表达频率与AML患者年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数和染色体异常均无相关性(P>0.05)。13例CML患者中SALL4转录本均为阳性表达,相对含量为1%-128%(中位19.39%),明显高于对照组(P<0.001)。采用接收者操作特征曲线(receiver operatingcharacteristic curve,ROC曲线)分析显示,AML和CML曲线下面积(AUC)分别为0.983(95%可信区间0.95-1.017)和0.997(95%可信区间0.986-1.007)。结论:SALL4基因表达是AML和CML中常见的分子事件并且可考虑作为AML和CML辅助诊断的分子标记。     

血浆miR-221在急性髓细胞白血病中的表达及意义

目的:探讨血浆miR-221在急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的表达及意义.方法:收集38例成人AML患者,其中初发患者12例(M2 1例,M3 3例,M4 6例,M5 2例),复发患者8例(M2 2例,M3 3例,M4 2例,M5 1例),完全缓解(complete remission,CR)患者18例(M2 2例,M3 6例,M4 6例,M5 4例)及3例正常人的外周血血浆标本.采用基于SYBR Green荧光染料法的茎环实时定量PCR(qRT-PCR),以U6为内参照,用2(-ΔCt)方法计算miR-221的相对表达量,分析血浆miR-221的表达情况.结果:qRT-PCR结果显示,较之CR组和正常对照组,AML初发组和复发组中血浆miR-221的表达量明显升高,差异均有显著性(P＜0.05).初发组和复发组之间无统计学差异(P＞0.05).CR组比正常对照组的表达量高,但两组差异并无统计学意义(P＞0.05).结论:血浆miR-221在AML初发和复发患者中的表达量高,在CR患者及正常对照中的表达量低,提示血浆miR-221与AML肿瘤负荷呈正相关,微创的血浆miRNAs检测可作为临床微小残留病检测的新方法.     

CDll7在白血病细胞上的表达分析

目的 探讨细胞表面分化抗原CD117在各型白血病细胞上的表达规律及其意义。方法 采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术细胞表面分化抗原分析。结果急性髓系白血病(AML)患CD117表达率为68％，慢性粒细胞白血病急变期(CML-BC)患CD117表达率为80％，而在急性淋巴细胞白血病中表达率极低，仅为2％。在慢性淋巴细胞白血病、CML慢性期中阴性。在AML中CD117主要表达在M0／M1(72％)、M2(88％)、M4(50％)、M5b(75％)、M6(100％)，但在M3和M5b中表达率较低(分别为39％和29％)，在从中CD1l7的表达率高于CD54及HLA—DR。CD117与CD14在AML中的表达呈负相关。结论 CD117有助于淋巴系与髓系白血病的鉴别，并有助于白血病克隆与正常细胞的区分。     

Prame基因在白血病患者中的表达及其临床意义

黑色素瘤特异性抗原 (Prame)是由Ikeda等于 1997年首次在黑色素瘤患者中证实为能被细胞毒性T细胞 (CTL)识别的肿瘤抗原 ,该基因位于 2 2q11,编码 5 0 9个氨基酸的蛋白质。我们采用RT PCR方法测定白血病患者PramemRNA的表达 ,探讨其在白血病发病中的作用及临床意义。材料和方法1　研究对象　 5 8例白血病患者均为我院门诊或住院患者 ,经骨髓细胞及组化检查 ,符合诊断标准 ,其中男 32例 ,女 2 6例 ,中位年龄 4 2 (16～ 6 8)岁 ,急性髓系白血病 (AML) 2 3例 (其中M2 9例 ,M3 8例 ,M44例 ,M52例 ) ,急性淋巴细胞白血病(ALL) 15例 ,慢…     

神经毡蛋白-1在急性髓系白血病细胞中的表达和作用

本研究旨在探索神经毡蛋白(neuropilin-1,NRP-1)和NRP-2在髓系白血病细胞中的表达及抑制NRP-1基因表达后对白血病细胞生长和迁移的影响.采用RT-PCR观察NRP-1和NRP-2 mRNA在24例急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(MNC)及7种髓系白血病细胞系中的表达;以小干扰RNA(siRNA)干扰NRP-1基因在HEL细胞的表达,用MTT和细胞迁移试验观察细胞增殖、迁移的变化.结果显示NRP-1在24例AML患者骨髓MNC中表达,其阳性率为100%,显著高于正常对照组67%(p=0.03).79%AML患者表达NRP-2,67%正常人表达NRP-2,两者无明显差异(p=0.6).NRP-1的表达与AML患者骨髓、外周血原始细胞比例呈正相关(r=0.5,r=0.4,p＜0.05).NRP-1和NRP-2 mRNA分别在6/7和3/7种髓系白血病细胞系表达.用siRNA转染HEL细胞24小时后NRP-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低,当有VEGF165作用时,对照组细胞增殖明显增加,而干扰组无变化(MTT值对照组vs干扰组0.6±0.01 vs 0.49±0.02,p＜0.001).转染24小时后干扰组细胞迁移显著降低,其迁移细胞数干扰组vs对照组为500±17 vs 123±7(p＜0.001).结论NRP-1在AML患者骨髓MNC中表达增高,并在髓系白血病细胞的增殖和迁移中起重要作用.     

急性髓系白血病患者solGMRα表达的研究

目的研究可溶性人粒-巨噬细胞集落刺激因子受体(solGMRα)在急性髓系白血病(AML)患者中的表达及其临床意义.方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)对54例AML患者血清及4种白血病细胞系(HL-60、U937、TF-1、K562)培养上清液进行可溶性受体检测分析.结果 AML患者血清solGMRα水平为8 303.99±6 611.61 (ng/L),其中M4、M5亚型表达水平显著高于正常对照组[(4 027.85±2 501.26) ng/L,P<0.05].白血病细胞系HL-60、U937、TF-1培养上清液中均有solGMRα表达,而K562细胞系无表达.结论 solGMRα在急性髓系白血病患者中存在异常高表达,其中以单核细胞白血病更为明显.     

分化抑制因子nm23基因在急性白血病细胞中的表达及临床意义

目的 探讨分化抑制因子nm23在急性白血病细胞中的表达水平及临床意义。方法 应用RT-PCR半定量分析34例初诊急性白血病[22例急性髓系白血病(AML)，12例急性淋巴细胞白血病(ALL)]，9例临床完全缓解AML(AML-CR)，4例慢性粒细胞白血病(CML)患的骨髓标本中nm23-H1、nm23-H2的mRNA表达水平，并分析了其与一些临床指标的关系。结果 nm23-H1基因在急性白血病，尤其是粒-单核细胞及单核细胞白血病(M4,M5)中的表达水平明显增高；经化疗完全缓解后的AML患nm23基因表达显低于初诊AML患；在AML中，nm23-Hl的高表达与外周血白细胞计数、乳酸脱氢酶、CD7及髓外浸润等预后较差指标呈正相关性，而与特征性染色体异常如t(8；21)和t(15；17)呈负相关性。结论 nm23-Hl基因在急性白血病特别是粒．单核细胞白血病(M4,M5)中表达较正常人明显增高，可能是AML预后较差的一种标志。