银染组织的透射电镜样品制备

本文试图在银染的光镜标本上再经处理制备成透射电镜样品,以适用于电镜观察。其优点在于它既能利用银染后的光镜材料定位,组织和细胞基本无损伤及变形。较好地保持了组织细胞的超微结构,并增强了清晰度。     

菌斑生物膜的透射电镜样品制备

1　材料和方法1 .1　材料　收集拔除的正常第一恒磨牙 ,去除表面的菌斑 ,将其制备成直径为 4mm、厚度为 0 .5mm的牙釉质磨片 ,常规高压消毒 .将直径为 3mm、厚度为 1 mm,孔径为 1 mm的硬塑料环消毒后粘于牙釉质磨片上 (用 3M光固化树脂 ) .将这种装置用光固化树脂粘结于志愿者的同侧第一磨牙上 ,分别于 4,5,6和 7d后取下 .1 .2　方法　将取下的菌斑生物膜装置投入 40 m L· L-1戊二醛 ,0 .1 mol· L-1 磷酸缓冲液 (p H 7.4)前固定 4 h,其间在真空中放置 1 5 min(JY- 71 2 4型真空泵 ,上海微型电机厂 ) ,磷酸缓冲液漂洗 ;1 0 g· L-1 四…     

培养神经细胞透射电镜样本制备方法的探讨

目的探讨培养神经细胞透射电镜样本制备的新方法。方法分离SD大鼠大脑皮层神经细胞,培养于铺有琼脂糖和多聚赖氨酸薄膜的盖玻片上,适时固定、取膜,按常规程序制作超薄切片,电镜观察。结果,电镜观察神经细胞及髓鞘超微结构清晰,原有位置关系和连接方式保存良好,可见细胞间的紧密连接。结论薄膜细胞培养法是培养细胞超微结构研究的好方法,也适用于培养细胞电镜免疫组化、电镜原位杂交的研究。     

透射电镜样品快速制备技术的探讨

随着病理电镜诊断工作的不断深入和发展,电镜用于某些疾病的病理诊断已为广大医务工作者熟知。但电镜样品常规制备的方法周期长,约4d,影响及时诊断,为了配合临床诊断各类标本的快速制样工作成为首位重要的工作,我们在实践工作中,经过多次实验,总结出电镜诊断的快速制样方法。该方法不仅缩短了样品制备时间,同时还可以满足电镜诊断要求。现将电镜快速制备方法报道如下。     

透射电镜视网膜标本的制备方法

视网膜很薄 ,其透射电镜样品的制备与一般的组织有些差异。从取材到切片每一环节都必须更加认真、仔细。总结近两年的工作经验 ,归纳出下列实验方法。1　实验过程1 1　灌流视网膜组织不便于迅速摘取 ,又极易受损 ,所以采用灌流固定的方法 ,使组织在原位固定后再摘取下来。先将动物用 10 %水合氯醛麻醉 ,5ｍｇ/ｋｇ ,然后采用心脏灌流法。具体方法是 :(1)把透明胶管将两个吊瓶分别与Ｙ型管的两个上端连接起来 ,Ｙ型管的下端用胶管连接注射针头。将生理盐水倒入一个吊瓶内 ,使盐水充满胶管 ,并排净气泡。夹紧另一吊瓶与Ｙ型管间的胶管后 ,将固…     

以氯金酸代用四氧化锇制备扫描电镜样品

在电镜制样技术中,基本试剂都离不开四氧化锇,由于它能固定蛋白质、脂肪、脂蛋白和生物膜结构,并有强烈的电子染色作用,可使电镜样品图像出现良好的反差。但最大的缺点是其蒸气对皮肤、呼吸道粘膜及眼睛有伤害作用,而且价格昂贵。作者在阅资料反复试验,发现用氯金酸或氯铂酸代替之,可做成质量相似的透射和扫描电镜样品。现仅将扫描电     

低温冷冻标本制备透射电镜样品

1　材料和方法　标本取材于 - 70℃冰箱保存 3a,手术完整切除的先天性胫骨假关节 .将冷冻的胫骨周围病变软组织修切 1 mm× 1 mm× 1 mm小块数粒 ,投入 40 g· L-1戊二醛 ,0 .1 mol· L-1磷酸缓冲液 (p H7.4)前固定 4h,磷酸缓冲液漂洗 ;1 0 g· L-1四氧化锇 ,0 .1 mol· L-1磷酸缓冲液后固定 2 h,磷酸缓冲液漂洗 .常规丙酮脱水 ,Epon81 2包埋 ,LKB NOVA型超薄切片机切片 ,电子染色 ,JEM- 2 0 0 0 EX电镜观察并拍照 .2　结果　先天性胫骨假关节为一种起源于骨膜的纤维瘤病(CPT) .电镜下细胞呈梭形、星形或不规则形 ,散布于胶原纤维…     

介绍一种血小板整体黏附电镜样品制备方法

本文介绍制备黏附聚集的整体血小板电镜样品。将抗凝血直接铺在覆有Formvar（聚乙烯醇缩甲醛）的铜网上,然后依次对样品进行温育、冲洗、固定、再冲洗、空气自然干燥后电镜观察。这种方法制作简单而且省时,在电镜下可见各种形态完好的血小板,圆形、树突形、扩展形度聚集形。     

浅谈透射电镜生物样品取材实验课的体会

透射电镜生物样品的取材是电镜样品制备过程中的关键步骤之一,并由实验者亲自动手操作完成。作者根据多年电镜实验课的教学经验,就指导学生取材的正确方法及培养学生的动手能力,谈谈实验教学中的一些方法和体会。     

透射电镜样品制备用硝酸铀替代醋酸铀染色方法的探讨

目的探讨透射电镜生物样品制备时,用硝酸铀乙醇溶液替代常规醋酸双氧铀乙醇溶液染色方法。方法在相同条件下,分别用硝酸铀乙醇溶液、硝酸铀水溶液和醋酸双氧铀乙醇溶液对同一样品切片染色,在电镜下观察、比较切片反差情况。结果硝酸铀乙醇溶液染色切片与醋酸双氧铀乙醇溶液染色切片反差基本相同,而硝酸铀水溶液染色切片反差弱。结论硝酸铀乙醇溶液可替代常规的醋酸双氧铀乙醇溶液染色。     

透射电镜样品制备中常见污染问题的探讨

透射电镜生物样品制备最常用的是超薄切片法,超薄切片技术的制片过程很复杂,要求很细致,稍有不慎便会造成污染,影响图片质量.本文就如何减少样品制备污染问题,总结了本实验室长期以来的制样经验,供广大电镜工作者,特别是初学者借鉴.     

电镜病理诊断中样品快速制备方法

1　材　料1.1　动物　昆明鼠 ,牡丹江医学院动物中心提供。1.2　试剂　OsO4 (进口 )、6 18#环氧树脂、十二烷基琥珀酸酐 (DDSA)、邻苯二甲酸二丁酯、2 ,4 ,6—三 (二甲基氨基苯酚 )、醋酸铀、硝酸铅等药品由牡丹江医学院供应科外购。1.3　仪器　WZR—D95 1型药用振荡器、LEICAULTRACUTR型超薄切片机、OLYMPUSBX6 0光学显微镜、JEM— 10 10透射电镜。2　方　法2 .1　实验组　将昆明鼠脊柱断头猝死 ,在冰盒上取材心脏和肝脏 ,每块样品大小为 1mm3左右 ,样品放入盛3%的戊二醛固定液的西林瓶中并放入 4℃冰箱中固定2h ;磷酸盐缓…     

脂肪组织扫描电镜样品制备方法

脂肪组织由于自身脂类含量丰富,采用常规扫描电镜生物样品制备法,很难达到预期效果。经过数次摸索,作者在常规制备样品基础上,增加了锇酸后固定,以使脂肪酸和磷脂蛋白得到稳定,即而稳定细胞膜结构;为使组织细胞内有机溶剂充分置换,又延长脱水时间。通过对这些具体操作细节进行改良,取得了较为满意的结果。     

冷冻保存Epon812包埋剂在电镜样品制备中的应用

[目的]探讨冷冻保存Epon812包埋剂及其再利用的方法。[方法]将电镜样品制备中剩余包埋剂在特定条件下冷冻保存,需要时解冻,进行常规浸透包埋。比较包埋剂冷冻前后超薄切片的切割性能。[结果]用冷冻后复温的包埋剂制备的包埋块,超薄切片时切割性能良好,两种包埋剂制备的样品各项观察指标无明显差异。[结论]冷冻保存Epon812包埋剂及其再利用的方法是可行的。     

游离细胞扫描电镜样品制备方法的改良

<正>作者将常规游离细胞扫描电镜样品制作方法法作了某些改良,取得了较为满意的效果,适于电镜观察,拍摄照片清晰,介绍如下。 方法 1.盖玻片预处理:盖玻片酸泡24小时,自来水冲洗,双重蒸馏水漂洗,无水酒精浸泡,烘干备用。此种玻片适合于贴壁生长的组织培养细胞如巨噬细胞、腹水癌细胞等;如果样品为游离不易贴壁生长的细胞,则可在上述处理过的玻片上涂一层5％的卵蛋白,烘干备用。     

常规透射电镜生物样品制样条件的摸索总结

透射电镜被用来作为形态学研究的工具,被广泛应用于生物学领域,但生物样品透射电镜制样过程繁琐,需要从事透射电镜制样的工作人员长期大量反复的摸索才能保证制样的质量.现就本研究室实际摸索的条件及相关文献的阐述进行总结,以期更好的服务于临床和科研.