替代放免，开展激素和肿瘤标志物测定磁分离均相酶联免疫定量测定方法

替代放免，开展激素和肿瘤标志物测定磁分离均相酶联免疫定量测定方法一、该方法是加拿大ＢｉｏｃｈｅｍＩｍｍｕｎｏｓｙｓｔｅｍｓ公司的独家专利，将免疫磁性微珠（红细胞直径大小）分离技术引人酶联免疫测定领域。磁性微珠连接的竿克隆抗体与相应的标本抗原结合后，在...     

用刀豆素A亲和层析法纯化过氧化物酶标记的抗体

通过许多免疫酶试验证明,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体是有效的。制备酶标抗体常用二步法,方法简单,结合物主要由抗体和酶所组成,两者的比率为1:1,但大部分反应产物是游离的抗体。因为未标记抗体能和标记抗体竞争抗原的位点,所以未标记抗体明显降低免疫酶试验的敏感性。标记的和未标记的抗体在分子量和电荷上仅有微小差异,要将二者分开是困难的。     

免疫电镜在自身免疫性大疱病研究中的应用

免疫电镜技术（IEM）是由细胞化学技术、免疫学技术与形态学技术相结合而发展起来的一门学科,为近30年来电子显微技术划时代的发展。在自身免疫性大疽病的研究中主要用免疫酶标记抗体技术和免疫金标记抗体技术对大疱病的自身抗原进行定位研究。酶标记抗体技术（常用辣根过氧化物酶）有遮盖背景结构、致癌作用。步骤繁琐等不足,应用较少。而金标记免疫电镜技术团所用试剂对人体无害、结果可长期保存、可制成大小不同的金颗粒用于免疫多重标记、可用于光镜水平的研究、不影响背景结构及可用于定量研究等优点,实际工作中较多应用。下面就…     

抗癌胚抗原单抗免疫磁性纳米微粒的制备及其与188 Re的放射性标记

目的:将抗CEA单抗与磁性纳米微粒偶联制备免疫磁性纳米微粒用于肿瘤的靶向治疗,并对其进行188Re标记。方法:采用氨基硅烷化修饰的磁性纳米微粒,选择不同的酸度经戊二醛活化后,在不同的酸度下与抗CEA单抗交联制备免疫磁性纳米微粒,并对188Re标记免疫磁性纳米微粒的实验条件进行探索。结果:以抗坏血酸作为抗体的还原剂,以SnC l2-柠檬酸还原188ReO4-溶液进行抗体的直接标记,结果表明,反应3h的标记率为90%,188Re-免疫磁性纳米微粒的免疫活性是188Re-抗CEA单抗的95%,188Re标记物的体外稳定性24h为91%、48h为85%。结论:188Re-免疫磁性纳米微粒的标记率及标记稳定性可满足于进一步的肿瘤靶向治疗的体内研究。     

标记免疫分析技术进展

1959年Berson和Yalow报道放射免疫分析测定血浆胰岛素,由此开创了放射免疫分析(RIA)技术检测微量物质的新纪元,四十余年RIA已成为成熟的技术,在临床检测和科学研究中产生重要影响.我国自二十世纪六十年代起的三十余年,经历了几个发展阶段取得了瞩目的进展和广泛应用.近十余年,应用相关的放射免疫原理,以非同位素物质替代放射性核素标记抗原或抗体,相继出现了一些新的非同位素标记免疫分析技术如酶、化学发光、酶放大和荧光免疫分析等技术,与放射免疫分析技术一起统称为标记免疫分析技术.现就标记免疫分析技术的现状和发展作如下综述.     

免疫组化方法简介(光镜与电镜结合的PAP法)

<正> 免疫组化技术是现代形态学科的重要研究工具之一。虽然40年代初出现了荧光抗体技术,但其标本不能用电镜观察。后来建立了酶标抗体法,特别是Sternberger(1979)的非酶标记抗体法(PAP),才使免疫电镜技术得到长足的发展。酶标抗体法是把酶(常用辣根过氧化物酶,简称HRP)标记在第一抗体(直接法)或第二抗体(间接法)上,     

银强化金标记免疫吸附剂试验的方法学研究

银强化金标记免疫吸附剂试验（ＳＥＧＬＩＳＡ）是一种新的非酶、非放射性免疫测定法，本文以兔抗ＢＳＡ抗体测定为模式，就它的原理、试剂制备和方法学最佳化等进行了研究，并与ＥＬＩＳＡ作了对比试验。     

EILS测定德国小蠊卵黄蛋白含量方法的建立

本文采用蒸馏水沉淀法提取了德国小蠊卵黄蛋白，免疫家兔，并将所得抗血清经雄虫血淋巴吸收，获得抗卵黄蛋白特异抗体，用ＤＥＡＥ－纤维素批次法纯化抗体ＩｇＧ，并用辣根过氧化物酶标记，建立ＥＬＩＳＡ直接法测定和卵黄蛋白含量的方法。     

ELISA测定德国小蠊卵黄蛋白含量方法的建立

本文采用蒸馏水沉淀法提取了德国小蠊卵黄蛋白，免疫家兔，并将所得抗血清经雄虫血淋巴吸收，获得抗卵黄蛋白特异抗体，用ＤＥＡＥ－纤维素批次法纯化抗体ＩｇＧ，并用辣根过氧化物酶标记，建立ＥＬＩＳＡ直接法测定卵黄蛋白含量的方法。     

MCAb、PcAb不同标记ELISA技术对HBeAg／抗－HBe检测的评估

用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和多克隆抗体（ＰｃＡｂ）进行辣根过氧化物酶标记或生物素标记作酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），检测乙型肝炎病毒ＨＢｅＡｇ／抗－ＨＢｅ标志物。结果显示，ＭｃＡｂ的灵敏性高于ＰｃＡｂ，且标记用的抗体量较少，一孔一期法同时测ＨＢｅＡｇ／抗－ＨＢｅ只能使用ＭｃＡｂ。利用生物素与亲和素系统与ＭｃＡｂ建立的Ｍｃ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ技术，其灵敏性与放射免疫法（ＲＩＡ）相同，特异性好，稳定性优于ＲＩＡ。生物素标记抗体至少１年保持效价不变，是一种新的较理想的检测ｅ系统的方法之一。     

一种可同时检测抗双链和单链DNA抗体的快速斑点免疫金渗滤试验

目的 建立一种可同时检测抗双链ＤＮＡ（ｄｓ－ＤＮＡ）和单链（ｓｓ－ＤＮＡ）抗体的快速斑点免疫渗滤试验（ＤＩＣ－ＦＡ）。方法 将ｄｓ－ＤＮＡ和ｓｓ－ＤＮＡ抗原结合在同一检测盒内,采用胶体金标记和快速膜斑点渗滤技术,同时检测抗ｄｓ－ＤＮＡ和ｓｓ－ＤＮＡ抗体。在结果：ＤＩＧＦＡ既可同步又可区别检测两种ＤＮＡ抗体,且检测ｄｓ－ＤＮＡ抗体的敏感性优于酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）,结论：ＤＩＧＦＡ简便,快速,     

磁性纳米粒子-抗体复合物分离肝癌线粒体

 摘要：目的 利用人肝癌组织，研究磁性纳米粒子-抗体复合物与传统线粒体分离方法之间的差异。方法 取人肝癌组织，分别采用磁性纳米粒子-抗体复合物和密度梯度离心方法分离线粒体。扫描电镜观察线粒体形态，Western blot检测线粒体蛋白标志物，流式细胞仪分析线粒体膜电位变化。结果 采用磁性纳米粒子-抗体复合物方法分离得到的肝癌组织线粒体结构完整，无胞核、胞膜等组分的污染，几乎没有过氧化物酶体和溶酶体的污染。经流式细胞仪检测，线粒体膜电位稳定。结论 与传统方法相比，磁性纳米粒子-抗体复合物分离方法具备简便易行，分离得到的线粒体结构完整、纯度及活性较高，并且不需要大型设备等优点。     

Isolation of mitochondria from liver cancer tissue with nanoparticle-antibody complex

目的 利用人肝癌组织,研究磁性纳米粒子-抗体复合物与传统线粒体分离方法之间的差异.方法 取人肝癌组织,分别采用磁性纳米粒子-抗体复合物和密度梯度离心方法分离线粒体.扫描电镜观察线粒体形态,Western blot检测线粒体蛋白标志物,流式细胞仪分析线粒体膜电位变化.结果 采用磁性纳米粒子-抗体复合物方法分离得到的肝癌组织线粒体结构完整,无胞核、胞膜等组分的污染,几乎没有过氧化物酶体和溶酶体的污染.经流式细胞仪检测,线粒体膜电位稳定.结论 与传统方法相比,磁性纳米粒子-抗体复合物分离方法具备简便易行,分离得到的线粒体结构完整、纯度及活性较高,并且不需要大型设备等优点.     

化学发光法、放免法检测血清TGA、TPoAb的比较

血清抗甲状腺球蛋白抗体 (ＴＧＡ)和抗甲状腺微粒体抗体(ＴＭＡ)检测在自身免疫性甲状腺疾病的鉴别诊断上具有重要意义。ＴＧ和ＴＭ抗体的检测 ,传统上采用放射免疫法 ,近年随着标记免疫技术的发展 ,全自动化化学发光免疫分析系统Ｉｍｍｕｌｉｔｅ也推出ＴＧＡ和与ＴＭＡ相似的甲状腺过氧化酶抗 　论文指导体 (ＴＰｏＡｂ)的检测技术 ,且以灵敏度高 ,检测范围广 ,速度快而受青睐。但是两种实验方法的结果可比性如何 ,临床需要了解。从实验学来说 ,放射免疫法检测的是ＴＧ和ＴＭ抗体 ,结果以抗原抗体结合率表示 ;发光法检查的是ＴＧ和ＴＰｏ…     

抗人脑神经元特异性烯醇化酶单克隆抗体的制备和鉴定

本文采用离子交换和凝胶过滤层析技术，分离纯化了人脑神经元特异性烯醇化酶，并以此为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过杂交瘤技术，获得了两株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为５Ｂ１和３Ａ８。两株杂交瘤细胞均分泌ＩｇＧ１型类抗体。间接ＥＬＩＳＡ实验显示：５Ｂ１与ＮＳＥ有特异性反应。与ＮＳＥ的同工酶－非神经元特异性烯醇化酶不发生交叉反应；３Ａ８与ＮＳＥ和ＮＮＥ有同等强度的阳性反应。免疫印迹实验结果表明：     

标记免疫分析的质量控制和标准化(二)

二标记免疫分析的标准化问题几十年来,免疫学从多克隆抗体发展到单克隆抗体的应用,标记方法从放射性核素、酶、胶体金标记的显色反应到荧光、化学发光标记测量荧光或化学发光等,形成了“标记免疫分析”这一独立学科。在应用方面,不断更新的商业化试剂盒,同时由于标记免疫分析的     

抗辣根过氧化物酶杂交瘤细胞系的建立与初步应用

单克隆抗体已被广泛地用于免疫组织化学研究,但是要充分发挥单克隆抗体的优势,就必须认真地选择最佳的免疫组织化学方法。非标记抗体技术由于敏感性高,非特异性显色浅,而受到多数学者的推荐。随着单克隆抗体和非标记抗体技术应用的增多,对鼠源性辣根过氧化物酶-抗辣根过氧化物酶(PAP)复合物的需求也逐渐增加。为此,我们进行了抗辣根过氧化物酶(HRP)单克隆抗体及鼠源性PAP的研制与初步应用。 通过用HRP常规免疫的BALB/c小鼠进行两次融合(融合率为100％)。和采     

生物素-抗生物素在酶免疫技术中的应用(综述)

酶免疫技术作为三大免疫标记技术之一,以其敏感性高、特异性强、快速易行的特点在生物学、医学基础研究及临床诊断上得到了广泛地应用,并正在不断改进和发展。70年代初,有人在非标记抗体技术的基础上,将过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)复合物用于免疫酶技术,使该技术的敏感性得到了提高,并使试剂更加通     

包被稳定剂和酶结合物稳定剂稳定效果的初步观察

包被稳定剂和酶结合物稳定剂稳定效果的初步观察薛茵，王金龙在ＥＬＩＳＡ检测中，为了能使予包被的抗原在较长时间内保持活性，常将予包被的酶标板真空干燥后密封保存。这样做的缺点是耗时。另一种常用的试剂是酶标记抗体，以ＨＲＰ标记的抗体为多。这种标记抗体极易失活...     

用噬菌体抗体分离NK细胞抑制受体特异性的ScFv片段

目的 探讨从噬菌体抗体库分离杀伤细胞抑制受体特异性ＳｃＦｖ的可行性及其特征。方法 所用ＫＩＲ为ＮＫＡＴ２，其可溶性形式为ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１。噬菌体抗体库为Ｎｉｓｓｉｍ等报道的半合成抗体库。抗体库经包被免疫管的ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１５次筛选后，可溶性ＳｃＦｖ由ＩＰＴＧ诱导细菌而获得，筛选效果由测定噬菌体的菌落形成单体及ＤＮＡ酶切图谱分析。