蛋白质磷酸化酶抑制剂对肺癌细胞株的增殖抑制作用

目的探讨蛋白质磷酸化酶抑制剂对肺癌细胞株的增殖抑制作用。方法用蛋白质磷酸化酶抑制剂对６株小细胞肺癌和７株非小细胞肺癌细胞株的增殖抑制效果进行了检测，并采用免疫法，测定了蛋白质磷酸化酶抑制剂对肺癌细胞内Ｒｂ蛋白表达的影响。结果随其浓度的增加，对肺癌细胞株的增殖抑制作用增强，小细胞肺癌的半数抑制量平均值ＳＴ为９５ｎＭ，ＵＣＮ－０１为５８８ｎＭ，非小细胞肺癌则分别为１８８ｎＭ和１０２９ｎＭ，ＳＴ和ＵＣＮ－０１可抑制肺癌细胞Ｒｂ蛋白的磷酸化。结论蛋白质磷酸化酶抑制剂通过抑制Ｒｂ蛋白的磷酸化，从而抑制肺癌细胞的增殖     

核桃青皮提取物对小鼠Lewis肺癌细胞生长的抑制作用

恶性肿瘤是威胁人类生命健康的第一杀手,在我国,肺癌是发病第一位的肿瘤.肺癌一经发现,首选手术治疗,术后还需经化疗等综合方法进行治疗.在各种疗法中,化疗在肿瘤治疗中占有不可替代的位置.但是,化疗由于用药量大,副作用多,有的患者难以耐受,因而,人们对中药治疗恶性肿瘤越来越感兴趣,很多国外的科研人员也开始对中药进行研究.白桃汤剂为民间秘方,为不少病人解除过病痛.     

塞来昔布对肺癌细胞的增殖抑制作用研究

目的研究非甾体类抗炎药塞来昔布对肺癌细胞的体外抑制作用。方法选用肺癌A549细胞系体外培养,在不同塞来昔布浓度作用下,MTT法检测肺癌细胞的增殖抑制,流式细胞仪测定肺癌细胞周期分布以及RTPCR法观察肺癌细胞血管内皮生长因子mRNA(VEGFmRNA)的表达水平。结果塞来昔布对肺癌细胞增殖有抑制作用,且呈剂量依赖关系,IC50为50μmol/L;塞来昔布可将肺癌细胞阻滞在G0/G1期,有剂量依赖性;RTPCR法中,对照组肺癌细胞VEGFmRNA的表达水平高于药物组(P<0.05),药物组中肺癌细胞VEGFmRNA表达水平与塞来昔布浓度相关。结论塞来昔布对肺癌细胞有明显的体外增殖抑制作用,与VEGFmRNA的表达下调和阻滞细胞周期在G/G期有关。     

螺旋藻多糖对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的 探讨螺旋藻多糖对小鼠Lewis肺癌的抑制作用.方法 C57BL/6小鼠45只,随机分为螺旋藻多糖治疗组、预防组及空白对照组,每组15只.对照组每只小鼠右后肢背部皮下接种1×106 Lewis肺癌细胞,待瘤体直径达5 mm时瘤内多点注射0.9%生理盐水100 mg/kg,每天1次,连续3 w;预防组给小鼠接种肿瘤细胞前1 w每天腹腔注射PSP 100 mg/kg,每天1次,1 w后,每只小鼠右后肢背部皮下接种1×106 Lewis肺癌细胞,待瘤体直径达5 mm时瘤内多点注射PSP 100 mg/kg,每天1次,连续3 w;PSP组首先于右后肢背部皮下接种1×106 Lewis肺癌细胞,待瘤体直径达5 mm时瘤内多点注射PSP 100 mg/kg,每天1次,连续3 w.结果 螺旋藻多糖治疗组、预防组与对照组相比较,肿瘤生长速度减慢,新生血管数量减少,肿瘤细胞凋亡增加,增殖减慢.结论 螺旋藻多糖对小鼠Lewis肺癌的生长具有一定的抑制作用.

Abstract：

Objective To study the inhibition effect of the polysaccharides on the mouse Lewis lung cancer.Methods The mouse Lewis lung cancer model was established, then the polysaccharides according to 100 mg/kg once a day were injected to the mouses' abdominal cavity, the inhibition effect on the mouse lung cancer was assessed.Results Compared with the blank group, tumor growth velocity of the polysaccharides group and prevention group stepped down, the neovascular grew downwards, tumor cell apoptosis increased, proliferation stepped down.Conclusions Polysaccharides have inhibition effect on the mouse Lewis lung cancer.     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对小鼠在体肺癌细胞的抑制作用

目的：探讨血管内皮生长因子反义寡核苷酸基因治疗方法对模型小鼠在体肺癌细胞的抑制作用。方法：于2001-05／2002-01在哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心制作C57BL／6小鼠皮下肺癌模型30只，分为血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗组、血管内皮生长因子正义寡核苷酸治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后24h内，用反义寡核苷酸及正义寡核苷酸皮下注射进行治疗，对照组只注射生理盐水，观察小鼠肿瘤的生长情况。用免疫组化方法检测血管内皮生长因子蛋白表达，强阳性为卅，弱阳性为+。通过反转录多聚酶链反应检测血管内皮生长因子mRNA的表达，计算血管内皮生长因子与β-actin比值作为血管内皮生长因子表达水平参数。结果：30只模型鼠均进入结果分析。①平均瘤质量：对照组、血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗组、血管内皮生长因子正义寡核苷酸治疗组分别为(7．83&;#177;0．78)，(4．49&;#177;0．43)和(7．73&;#177;0．69)g。②血管内皮生长因子在癌周表达强度高于癌内，在对照组及血管内皮生长因子正义寡核苷酸组多呈强阳性，而血管内皮生长因子反义寡核苷酸组多呈弱阳性。③血管内皮生长因子120／β-actin：血管内皮生长因子反义寡核苷酸组(0．1594&;#177;0．025)低于对照组[(0．4020&;#177;0．032)，P&;lt;0．01]，低于血管内皮生长因子正义寡核苷酸组【(0．3805&;#177;0．030)，P&;lt;．01】。④血管内皮生长因子164／β-actin：血管内皮生长因子反义寡核苷酸组(0．3073&;#177;0．021)低于对照组[(0．878O&;#177;0．029)，P&;lt;0．01]，低于血管内皮生长因子正义寡核苷酸组[(0．8481&;#177;0．020)，P&;lt;0．01]。结论：血管内皮生长因子反义寡核苷酸与肿瘤血管的生成密切相关。原位注射血管内皮生长因子反义寡核苷酸能抑制小鼠在体肺癌细胞的生长。     

ASPP1对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制

目的本研究扩增及鉴定包含人类ASPP1基因转录本蛋白编码区的cDNA片段,将此片段克隆入真核表达载体,转染胃癌细胞,观察其对胃癌细胞增殖力的影响。方法从胎盘组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增ASPP1基因全长编码序列CDS(full-length coding sequence),目的片段回收纯化后用限制性内切酶XbaⅠ,EcoR I酶切的方法鉴定目的片段正确与否并检测其纯度、浓度;并转染胃癌SGC-7901细胞,观察ASPP1蛋白的表达及用MTT法进行细胞增殖力检测。结果该扩增片段经限制性核酸内切酶切图谱分析,与预期结果吻合,p53表达增加,转染的胃癌SGC-7901细胞出现增殖受抑。结论人类ASPP1基因对胃癌细胞增殖有抑制作用,从而为临床上胃癌的基因治疗提供了新思路。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对小鼠在体肺癌细胞的抑制作用

目的:探讨血管内皮生长因子反义寡核苷酸基因治疗方法对模型小鼠在体肺癌细胞的抑制作用。方法:于2001-05/2002-01在哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心制作C57BL/6小鼠皮下肺癌模型30只,分为血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗组、血管内皮生长因子正义寡核苷酸治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后24h内,用反义寡核苷酸及正义寡核苷酸皮下注射进行治疗,对照组只注射生理盐水,观察小鼠肿瘤的生长情况。用免疫组化方法检测血管内皮生长因子蛋白表达,强阳性为,弱阳性为+。通过反转录多聚酶链反应检测血管内皮生长因子mRNA的表达,计算血管内皮生长因子与β-actin比值作为血管内皮生长因子表达水平参数。结果:30只模型鼠均进入结果分析。①平均瘤质量:对照组、血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗组、血管内皮生长因子正义寡核苷酸治疗组分别为(7.83±0.78),(4.49±0.43)和(7.73±0.69)g。②血管内皮生长因子在癌周表达强度高于癌内,在对照组及血管内皮生长因子正义寡核苷酸组多呈强阳性,而血管内皮生长因子反义寡核苷酸组多呈弱阳性。③血管内皮生长因子120/β-actin:血管内皮生长因子反义寡核苷酸组(0.1594±0.025)低于对照组[(0.4020±0.032),P<0.01],低于血管内皮生长因子正义寡核苷酸组[(0.3805±0.030),P<0.01]。④血管内皮生长因子164/β-actin:血管内皮生长因子反义寡核苷酸组(0.3073±0.021)低于对照组[(0.8780±0.029),P<0.01],低于血管内皮生长因子正义寡核苷酸组[(0.8481±0.020),P<0.01]。结论:血管内皮生长因子反义寡核苷酸与肿瘤血管的生成密切相关。原位注射血管内皮生长因子反义寡核苷酸能抑制小鼠在体肺癌细胞的生长。     

化纤方对人胚肺二倍体纤维母细胞的增殖抑制作用

目的：探讨中药化纤方对人胚肺二倍体纤维母细胞(2BS)增殖的抑制作用及其机理,为中医药介入肺纤维化防治提供实验和理论支持。方法：采用中药血清药理学实验方法,观察化纤方含药血清对2BS细胞的细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响：结果：经化纤方含药血清作用后,2BS细胞增殖受到显著抑制,并出现明显的细胞捌亡现象;化纤方各组S期细胞数显著增加．而G2／M期细胞数则明显下降,提示该方药可阻抑S期细胞向G2／M期的移行,从而抑制其分裂增殖：结论：化纤方有明显的抗肺纤维化作用,其作用机制可能是阻抑细胞增殖周期并诱导其发生细胞凋亡。     

纳米紫杉醇磁流体热化疗对肺癌细胞的抑制作用

目的 通过观察纳米紫杉醇磁流体热化疗对肺癌A549细胞的作用及对小鼠A549裸鼠移植瘤生长的影响,探讨纳米紫杉醇磁流体热化疗治疗肺癌的可行性。方法 通过化学共沉淀法配制纳米紫杉醇磁流体;体外培养肺癌A549细胞,并分为对照组、磁流体热疗组、化疗组及磁热化疗组,观察经过分组处理后的人肺癌A549细胞的光密度值、杀伤率、生长曲线、细胞形态变化、细胞周期及凋亡情况。建立人肺癌A549裸鼠移植瘤模型,将实验裸鼠随机分为对照组、磁流体热疗组、化疗组以及磁热化疗组,观察四组治疗后肿瘤体积和质量的变化、各组瘤体的病理表现。结果 细胞试验中,随着紫杉醇浓度的增加,磁流体热疗温度恒定,人肺癌A549细胞增殖抑制逐渐增强,其抑制作用更明显,活细胞数的光密度值明显下降,细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05);免疫组化得出磁流体热疗组及磁热化疗组中细胞周期停滞于S期。动物试验中,磁流体热疗组、化疗组及磁热化疗组小鼠肿瘤质量和体积均受到抑制,其中磁热化疗组肿瘤生长抑制最明显(P<0.05);光镜和电镜下观察到肿瘤细胞发生凋亡并出现坏死样改变。结论 纳米紫杉醇磁热化疗具有明显的抑制肿瘤生长作用,且较单用化...     

蒲公英萜醇对肺癌细胞的增殖及糖酵解的影响

目的:研究蒲公英萜醇对肺癌细胞糖酵解效应的影响。方法:采用肺癌细胞株H1299,A549检测细胞葡萄糖消耗及乳酸含量及细胞ATP,NAD+/N A D H含量;同时给予血小板衍生生长因子BB(platelet-derived grow th factor BB,PDGF-BB)上调Akt途径促进糖酵解反应,考察蒲公英萜醇对肺癌细胞糖酵解的影响。结果:蒲公英萜醇可明显降低肺癌细胞葡萄糖消耗、乳酸含量及细胞ATP含量,升高NAD+/NADH含量。给予PDGF刺激H1299,A549细胞后细胞葡萄糖消耗及乳酸含量显著升高,细胞ATP含量升高,己糖激酶(hexokinase,HK)活性明显升高,NAD+/NADH含量降低;给予蒲公英萜醇后,可明显降低PDGF-BB诱导的H1299,A549细胞糖酵解水平,抑制HK活性,并抑制Akt磷酸化水平;结论:蒲公英萜醇可抑制肺癌细胞糖酵解水平,抑制HK活性,该作用与调控Akt途径相关。     

氯化三乙基锡抑制大鼠C6胶质瘤细胞增殖并诱导凋亡

目的探讨氯化三乙基锡对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的抑瘤作用。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测氯化三乙基锡对C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用，采用普通倒置显微镜和HE染色形态学方法观察氯化三乙基锡对C6细胞增殖抑制作用。结果不同浓度的氯化三乙基锡在体外可抑制C6胶质瘤细胞的增殖，药物浓度为0．5μM、1．0μM和2．0μM时，抑制率分别为15．62％、36．16％和41．92％，存在着剂量依赖关系。氯化三乙基锡对C6胶质瘤细胞的增殖抑制率在不同浓度组与对照组之间具有显著性差异（P〈0．05），以及不同浓度组之间具有显著性差异（P〈0．01）。HE染色观察到2．0μM氯化三乙基锡作用于C6胶质瘤细胞48h后，出现细胞凋亡特有的形态学改变。结论氯化三乙基锡可抑制体外培养C6胶质瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

人参皂甙Rg3对Lewis肺癌细胞体外增殖及荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的探讨人参皂甙Rg3对Lewis肺癌细胞体外增殖及荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法将48只C57BL/6荷瘤小鼠随机分为Rg3高剂量组、Rg3低剂量组、DDP组和生理盐水组,每组12只,另选择12只正常小鼠每天1次灌注0.4mL生理盐水作为对照组。采用CCK-8法检测Lewis细胞增殖率,流式细胞仪测定肿瘤细胞凋亡情况,并比较各组小鼠自然杀伤细胞（NK）、淋巴因子激活杀伤细胞（LAK）、细胞毒性淋巴细胞（CTL）及血清肿瘤坏死因子（TNF）的活性。结果 15μg/mL与20μg/mL人参皂甙Rg3的抑制增殖作用显著强于10μg/mL,但15μg/mL与20μg/mL抑制增殖作用比较,差异无统计学意义;人参皂甙Rg3诱导Lewis肺癌细胞凋亡的作用随浓度的增加而增强,但当达到一定浓度（15μg/mL）后逐渐呈饱和状态。人参皂甙Rg3高、低剂量组NK、LAK、CTL活性和血清TNF水平均显著高于生理盐水组和DDP组,但低于对照组。结论人参皂甙Rg3可明显抑制Lewis增殖,诱导其凋亡,还可增强荷瘤小鼠的免疫功能。     

苦参碱对体外人肺癌A549细胞的抑制作用

目的:研究苦参碱对体外培养人肺癌A549细胞的抑制作用及其机制.方法:用不同浓度的苦参碱作用A549细胞24、48、72 h,以MTT法检测苦参碱对A549细胞的抑制作用,流式细胞仪检测凋亡率和细胞周期分布时相,TRAP-ELISA法检测端粒酶的活性.结果:随着时间和浓度的增加,苦参碱对A549细胞的抑制作用逐渐增强(P＜0.01);不同浓度苦参碱(0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)诱导A549细胞的凋亡率分别为3.2%、9.5%、13.4%、17.6%;G0/G1期细胞比例增加,G2/S期细胞比例下降;端粒酶的活性呈浓度和时间依赖性降低.结论:苦参碱可通过抑制端粒酶活性、诱导细胞凋亡抑制体外培养的A549细胞的增殖.     

氯化甲基汞对人SHG44胶质瘤细胞抗肿瘤活性的体外实验研究

目的探讨氯化甲基汞(MMC)对人SHG44胶质瘤细胞株的增殖、杀伤和细胞凋亡的影响,为胶质瘤治疗提供理论依据。方法体外培养SHG44胶质瘤细胞,分为空白对照组和MMC实验组(按氯化甲基汞浓度分组)。采用MTT比色法检测不同浓度MMC对体外培养SHG44细胞的增殖抑制和杀伤作用。用流式细胞仪测定MMC对SHG44细胞凋亡/坏死的影响。结果在体外1.25、2.50、5.00和10.00μmol.L-1的MMC均可抑制SHG44胶质瘤细胞的增殖,SHG44胶质瘤细胞存活率明显低于对照组(P0.05),增殖抑制作用随浓度的增加而增强。SHG44胶质瘤细胞接触2.50、5.00和10.00μmol.L-1的MMC后4、8、16和32 h的细胞存活率明显低于对照组(P0.05),细胞杀伤作用随浓度的增加和时间的延长而增强。SHG44胶质瘤细胞接触0.075、0.15、0.3和1.2μmol.L-1氯化甲基汞12 h后细胞凋亡/坏死率呈现剂量依赖性增高趋势(P0.01)。结论MMC具有杀伤SHG44胶质瘤细胞、抑制其增殖、诱导凋亡的抗肿瘤活性,有应用于胶质瘤治疗的潜在价值。     

土贝母含药血清对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察土贝母含药血清对人肺癌细胞增殖、凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用灌胃SD大鼠土贝母水提物的方法制备其含药血清.应用不同浓度(0.0％、2.5％、5.0％、10.0％、20.0％、40.0％)含药血清处理人肺癌A549和H1299细胞.采用MTT、免疫荧光法观察含药血清对人肺癌细胞增殖的影响,采用流式...     

15脱氧前列腺素J2对同型半胱氨酸诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨15脱氧前列腺素J2（15d-PGJ2）对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的抑制作用和对细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1/2）的作用。方法：用不同浓度的Hcy和15d-PGh对大鼠VSMCs进行刺激，以^3H-TdR掺入方法观察15d．PGJ2对Hcy诱导大鼠VSMCs增殖的抑制作用，以Western印迹方法分析ERK1/2蛋白表达和ERK1/2磷酸化水平。结果：15d-PGh可明显抑制Hcy诱导的大鼠VSMCs增殖，但对Hcy诱导的ERK1/2磷酸化无明显作用。结论：15d-PGJ2可能通过MAPK／ERK1/2信号途径的下游步骤抑制Hcy诱导的大鼠VSMCs增殖。     

抗钙调素抗体对细胞增殖抑制作用的研究

为探讨兔抗钙调素抗体（ＲＡＣａＭ）对细胞增殖作用的影响，将Ｋ５６２细胞接种于９６孔培养板，加入不同浓度兔抗钙调素抗体（ＲＡＣａＭ）、正常兔γ球蛋白（ＮＲ－γ）或重组人钙调素（ｒｅｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ｒｈＣａＭ培养４８ｈ，用ＭＴＴ比色法检测细胞增殖状况。结果表明，兔抗ＣａＭ抗体可抑制细胞增殖，ＮＲ－γ则无此抑制效应，ｒｈＣａＭ可改善兔抗ＣａＭ抗体对细胞增殖的抑制作用。     

槐耳清膏对肺腺癌细胞增殖凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨槐耳清膏抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡的抗肿瘤作用的分子机制。方法应用不同浓度槐耳清膏处理肺腺癌细胞,细胞增殖活性利用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色法检测,细胞凋亡应用 Annexin V‐FITC／PI双染流式细胞术检测,细胞中相关基因表达利用免疫技术检测。结果 CFSE 染色结果发现槐耳能够明显抑制肺腺癌细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性;Annexin V‐FITC／PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡结果发现槐耳能够促进肺腺癌细胞凋亡,具有浓度和时间依赖性;免疫蛋白印迹实验结果发现在肺腺癌细胞中,槐耳能够抑制相关基因 EZH2、β‐catenin 和 bcl‐2的表达。结论在肺腺癌细胞中槐耳清膏抗肿瘤作用的分子机制可能是通过抑制 EZH2／β‐catenin 信号通路,抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡。