运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的研究运动对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠脂肪组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。 方法将30只Wistar大鼠随机分为对照组和高脂组，分别给予基础饲料与高脂饲料喂养18周；将造模成功的高脂组IR大鼠随机分为静息组和运动组，均继续给予高脂饲料喂养，同时对运动组大鼠实施游泳训练，共持续6周。于实验进行24周时检测各组大鼠体重、血清空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素(FINS)和游离脂肪酸(FFA)水平，并同时计算胰岛素敏感指数（ISI）；采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫印迹技术分别检测各组大鼠脂肪组织中TNF-α mRNA及蛋白表达水平。 结果喂养18周时发现高脂组ISI较对照组明显降低，提示高脂组IR模型制作成功；运动组大鼠经游泳训练6周后，其ISI较静息组明显升高（P<0.05），但仍显著低于对照组水平（P<0.01）；静息组大鼠脂肪组织中TNF-α mRNA及蛋白表达水平均较对照组明显升高（P<0.05）；运动组大鼠脂肪组织中TNF-α mRNA和蛋白表达较静息组进一步升高(P<0.05)。 结论高脂喂养可诱导大鼠产生IR，规律运动可减轻大鼠IR状态，其机制可能与上调脂肪组织中TNF-α表达有关。     

低压缺氧对兔动脉粥样硬化斑块中胶原含量的影响

目的观察低压缺氧对兔动脉粥样硬化斑块胶原含量的影响,并对其机制进行初步探讨。方法日本大耳兔随机分为常氧对照组和低压缺氧组两组,高胆固醇饮食12周建立兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变模型后,取主动脉内膜组织分别采用Woessner法、western blot法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测斑块组织中胶原含量、人核转录因子(NF-κB)蛋白、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6逆转核糖核酸(IL-6mRNA)表达。结果低压缺氧能明显降低斑块中胶原蛋白含量,提高NF-κB蛋白、TNF-α和IL-6mRNA表达(P0.05)。结论低压缺氧能明显降低斑块中胶原蛋白含量,其机制可能与促进炎性反应,升高NF-κB蛋白、TNF-α及IL-6mRNA表达有关。     

髓系细胞触发受体-1对重症急性胰腺炎大鼠肠屏障功能的影响

目的 探讨髓系细胞触发受体-1（triggering receptor-1 on myeloid cells,TREM-1）的表达与重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）肠屏障功能障碍的关系。方法 雄性Wistar大鼠64只,随机（随机数字法）分为假手术组(SO)和SAP组,每组32只,采用逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型,分别于造模后2,6,12,24h时点取血和回肠组织。改良分光光度法检测血浆D-乳酸、二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）和内毒素浓度。逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)方法检测回肠组织TREM-1、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）mRNA的表达水平。对数据进行单因素方差分析和spearman相关性分析,P＜0.05表示差异具有统计学意义。结果SAP组各时点血浆D-乳酸、DAO和内毒素的水平均高于假手术组(P ＜0.01,P＜0.05);SAP组各时点回肠组织TREM-1,IL-1β和TNF-α mRNA的表达水平较假手术组显著增高(P ＜0.01,P＜0.05),TREM-1 mRNA表达水平与IL-1β及TNF-α mRNA表达水平均呈正相关(r=0.956,P =0.044;r =0.986,P=0.015),IL-1β mRNA表达水平与TNF-α mRNA表达水平无明显相关性(P=0.133)。结论 SAP时,大鼠肠组织内TREM-1表达上调,促进炎症介质释放和肠黏膜损伤加重,TREM-1在SAP肠屏障功能障碍的发生发展中起重要作用。     

轮状病毒感染合并惊厥患儿外周血核转录因子-κB及相关炎性因子表达

目的探讨轮状病毒感染合并惊厥患儿外周血核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、外周血白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和IL-1β表达情况及其临床意义。方法 104例轮状病毒感染合并惊厥患儿为观察组,32例轮状病毒感染无惊厥患儿为对照组,2组采用Western blot法检测外周血白细胞NF-κB P65蛋白表达水平,采用反转录-PCR法检测IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达水平,采用ELISA法检测血清IL-6、TNF-α和IL-1β水平。结果观察组患儿外周血白细胞IL-6mRNA(8.06±1.25)、TNF-αmRNA(12.13±3.73)、IL-1βmRNA(3.97±1.35)及白细胞细胞核NF-κB P65表达水平(1.21±0.42)明显高于对照组(1.15±0.65、2.64±1.06、0.93±0.34、0.41±0.13)(P0.05),白细胞细胞质NF-κB P65蛋白表达水平(0.25±0.10)明显低于对照组(1.87±0.32)(P0.05);观察组患儿血清IL-6[(228.31±54.40)μg/L]、TNF-α[(236.14±36.78)μg/L]和IL-1β[(618.17±30.42)μg/L]水平明显高于对照组[(69.12±12.15)、(57.87±15.43)、(148.14±29.04)μg/L](P0.05)。结论轮状病毒感染合并惊厥可诱发患儿外周血白细胞胞质内NF-κB P65核转位及IL-6、TNF-α和IL-1β等炎性因子表达,对判断病情进展、指导临床治疗有一定意义。     

替米沙坦对代谢综合征大鼠脂肪分化相关蛋白及肿瘤坏死因子-α表达影响

目的探讨替米沙坦对代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠脂肪分化相关蛋白(adipocytedifferentiation-related protein,ADRP)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法 45只2月龄雄性Wistar大鼠随机分为普食对照组、MS组和MS+替米沙坦组(MS+Telm组)各15只,喂养6个月后测定3组空腹血糖、血脂、血清胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数;评估睾周脂肪组织细胞形态的变化;应用蛋白免疫印迹法检测ADRP,TNF-α的表达。结果与普食对照组比较,MS组及MS+Telm组大鼠睾周脂肪组织质量、ADRP、TNF-α表达增加(P均<0.05),空腹血糖、血脂、血清空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数水平增高(P<0.01);MS+Telm组大鼠血清空腹胰岛素水平、胰岛素抵抗指数、睾周脂肪组织质量、脂肪细胞面积、ADRP、TNF-α蛋白表达均较MS组降低(P<0.05)。结论替米沙坦可抑制MS大鼠脂肪组织TNF-α及ADRP的表达,减轻胰岛素抵抗。     

普罗布考对过氧化氢诱导新生大鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子-α生成的影响

目的探讨普罗布考对过氧化氢诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α生成的影响。方法培养新生大鼠心肌细胞,随机分为A,B,C,D 4组,A组加入0.2 mmol/L过氧化氢;B,C,D组分别给予1,10,100μmol/L普罗布考预处理6 h后,再分别加入0.2 mmol/L过氧化氢继续孵育6 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测心肌细胞TNF-α mRNA、Bcl-2 mRNA及Bax mRNA表达情况;ELISA法检测细胞培养液中TNF-α水平。结果与A组比较,B,C,D组细胞凋亡率均明显降低,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA表达升高,心肌细胞TNF-αmRNA表达及细胞培养液中TNF-α水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。心肌细胞凋亡率与培养液中TNF-α水平呈正相关(r=0.874,P<0.01)。多元线性回归分析结果表明,凋亡率与培养液中TNF-α水平独立相关(β=0.122,P<0.01)。结论普罗布考抑制过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制与抑制TNF-α生成有关。     

莱菔硫烷对重症急性胰腺炎大鼠肺组织内血红素加氧酶-1及环氧合酶表达的影响

目的探讨莱菔硫烷对重症急性胰腺炎(SAP)肺组织血红素加氧酶-1(HO-1)及环氧合酶(COX)表达的影响。方法将72只大鼠随机分为对照组(N组)、SAP模型组(SAP组)和莱菔硫烷组,每组各24只,分别于术后3、6、12h对各组进行肺损伤评分、检测肺组织湿干比(W/D)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、HO-1mRNA、COX mRNA的表达量。结果 SAP组的各指标均明显高于N组(P0.05);莱菔硫烷组的病理评分、肺W/D值、TNF-α、IL-1β、COX-2mRNA表达量较SAP组明显降低(P0.05),HO-1mRNA表达量较SAP组明显升高(P0.05);相关性分析示HO-1mRNA表达量与COX-2mRNA、TNF-α、IL-1β的表达水平呈明显负相关(P0.05)。结论莱菔硫烷增加了SAP肺组织中HO-1的表达量从而减轻急性肺损伤,这可能与通过抑制COX表达有关。     

糖皮质激素对大潮气量机械通气大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-1 α和核因子-κB表达的影响

目的 观察大潮气量机械通气大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)含量以及肺组织MIP-1α mRNA和NF-κBp65 mRNA表达水平.方法 32只健康雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组,机械通气致肺损伤(VILI)组、地塞米松干预(DEX)组和布地奈德干预(BUD)组.给与相应处理后分别采用ELISA法检测各组大鼠BALF和血浆MIP-1α含量,采用RT-PCR法检测其肺组织MIP-1αmRNA和NF-κB p65mRNA表达水平,比较4组之间的差异,并将VILI,DEX,BUD组间MIP-1α mRNA与MIP-1α含量,MIP-1α mRNA与NF-κB p65 mRNA表达水平间进行直线相关分析.结果 DEX组和BUD组BALF及血浆中MIP-1α含量及肺组织MIP-1αmRNA和NF-κBp65 mRNA表达水平均明显低于VILI组(P＜0.05),同时肺组织损伤程度明显减轻;BUD组BALF和血浆中MIP-1α含量及肺组织MIP-1α mRNA和NF-κB p65 mRNA表达水平虽高于DEX组,但差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析结果表明,肺组织MIP-1α mRNA表达量与BALF中MIP-1α含量呈正相关(r=0.895,P＜0.05);肺组织MIP-1α mRNA表达量与NF-κB p65 mRNA表达量呈正相关(r=0.801,P＜0.05).结论 糖皮质激素可能通过抑制NF-κB的活性而下调肺组织MIP-1α的表达,对VILI有一定防治作用;局部应用糖皮质激素对VILI的保护作用与全身用药的作用相似,且副作用小.     

粉防己碱对高脂饮食兔血清白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α及血管壁细胞核因子-κB表达的影响

目的：观察中药粉防己碱对高脂饮食兔血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血管壁细胞核因子-κB表达的影响，进一步探讨粉防己碱抗动脉粥样硬化的机制。方法：将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(普通饲料)、高脂模型组(高脂饲料)和粉防己碱组(高脂饲料+粉防己碱)。喂养12周后处死动物，放射免疫法检测血清IL-1β，TNF-α含量；采用逆转录聚合酶链式反应对血管壁细胞核因子-κB mRNA表达定量分析：Western杂交定量分析血管壁细胞核因子-κB p65蛋白亚基。结果：高脂模型组血清IL-1β，TNF-α显著高于正常对照组和粉防己碱组(P&;lt;0．05)，正常对照组和粉防己碱组差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；高脂模型组(1．414&;#177;0．106)NF-κB mRNA显著高于正常对照组(0．085&;#177;0．062)和粉防己碱组(0．453&;#177;0．034)，而高脂模型组NF-κB蛋白亚基p65(10．08&;#177;5．75)显著低于正常对照组(35．90&;#177;3．07)和粉防己碱组(35．91&;#177;4．38)(P&;lt;0．001)。结论：粉防己碱有抑制炎症因子IL-1β，TNF-α合成和分泌的作用；高血脂激活NF-κB，p65易位人胞核促进转录而降解，而粉防己碱对其有抑制作用，这可能是粉防己碱抗AS作用的机制。     

低氧诱导因子-1α对B-ALL细胞长春新碱敏感性的影响及机制研究

目的:研究低氧条件下急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞对长春新碱(VCR)敏感性的影响及可能的作用机制。方法:以B-ALL细胞SUP-B15、Nalm-6及RS4;11为研究对象,将细胞分为对照和低氧模拟组(CoCl₂预处理),两组细胞分别给予浓度递增的VCR处理24 h,采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测细胞内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、BAX、Bcl-2及β-Actin蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR技术检测细胞内BAX及β-actin mRNA表达水平。结果:CoCl₂可模拟低氧环境诱导HIF-1α蛋白表达,SUP-B15及RS4;11低氧模拟组细胞对VCR的敏感性低于对照组;80 nmol/L VCR处理后低氧模拟组细胞的凋亡率低于对照组(P<0.05);低氧模拟组细胞的BAX mRNA及蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平在两组细胞间均未见明显变化。结论:低氧条件下HIF-1α可能通过下调促凋亡蛋白BAX表达导致B-ALL细胞对VCR耐药。     

HIF-1α通过TLR4/NF-κB信号通路对 心肌缺血-再灌注大鼠心肌损伤的保护机制分析

目的分析缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通过TLR4/NF-κB信号通路保护心肌缺血-再灌注(MIRI)大鼠心肌损伤的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、MIRI组和HIF-MIRI组各10只,HIF-MIRI组于造模前24 h腹腔注射二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG,20μg/g),MIRI组和HIF-MIRI组大鼠采用手术结扎法制备MIRI模型,对照组只打开心包,不结扎。造模成功后,HE染色检测各组大鼠心肌组织损伤;试剂盒检测血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平; ELISA法测定心肌组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β和IL-6水平;实时荧光定量(RT)-PCR测定HIF-1αmRNA的表达; Western Blot检测HIF-1α、Toll-样受体4(TLR4)、核转录因子(NF-κB)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达。结果与对照组相比,MIRI组和HIF-MIRI组大鼠血清CK-MB和LDH、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P 0. 01),心肌组织HIF-1αmRNA的表达显著上调(P 0. 01),HIF-1α、TLR4、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达显著上调(P 0. 01);与MIRI组相比,HIF-MIRI组大鼠血清CK-MB和LDH水平、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6显著下降(P 0. 01),心肌组织HIF-1αmRNA和蛋白的表达显著上调(P 0. 01),TLR4、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达显著下调(P 0. 01),HE染色显示心肌组织的病理变化明显减轻。结论 HIF-1α可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症因子的释放,降低机体炎症因子水平,改善MIRI心肌损伤。     

组织因子途径抑制物-2水平与鼻息肉相关性的研究

目的 分析组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)水平与鼻息肉的相关性,明确潜在的干预治疗价值。方法选取2017年3月20日至2019年3月20日期间在上海市静安区闸北中心医院住院且经病理确诊为鼻息肉患者50例作为鼻息肉组,另选取同期住院系因鼻中隔偏曲行矫正术并下鼻甲肥大而行部分下鼻甲切除患者50例作为对照组,进行前瞻性队列研究。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测两组患者血浆标本中TFPI-2的蛋白质水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)检测组织标本中TFPI-2的mRNA表达水平以及采用免疫组织化学方法检测组织标本中TFPI-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平,分析TFPI-2与TNF-α、IL-1和VEGF的相关性。分离鼻息肉组织中的嗜酸性粒细胞,构建上调TFPI-2水平的体外培养鼻息肉组织中的嗜酸性粒细胞模型,观察TFPI-2表达上调后对嗜酸性粒细胞增殖的影响,分析空白对照组、阴性对照组和观察组细胞中TNF-α、IL-1和VEGF表达水平的变化。结果 鼻息肉组患者血浆中TFPI-2含量为3. 54±1. 21ng/L,与对照组相比显著增高(P 0. 05),组织标本中TFPI-2的mRNA相对表达量为2. 32±0. 93,水平显著提高,差异具有统计学意义(P 0. 05)。在蛋白水平方面,鼻息肉组患者的TFPI-2阳性率为56%,高于对照组,且与对照组相比,各类炎症因子的阳性率也表现出显著的不同,差异具有统计学意义(P 0. 05)。鼻息肉组患者TFPI-2的蛋白水平和TNF-α、IL-1、VEGF炎症因子存在显著的正相关关系(r=0. 642,P 0. 05; r=0. 535,P 0. 05; r=0. 769,P0. 05)。TFPI-2表达上调后,嗜酸性粒细胞增殖活性显著下降(P 0. 05),细胞增殖指数(PI)和S期细胞比率(SPF)与空白对照组及阴性对照组相比出现下降情况。三组嗜酸性粒细胞中,观察组TFPI-2的蛋白阳性率(100%)最高,并且TNF-α、IL-1和VEGF炎症因子的蛋白质表达出现了抑制情况。结论 鼻息肉患者体内TFPI-2水平增高,各炎症因子水平下降,TFPI-2起到抗炎作用,可以作为鼻息肉患者的生物标记物,帮助患者及医师进行早期诊断和术后预后。     

大骨节病患者膝关节置换术后IL-1β、TNF-α表达变化及其与疼痛指数的相关性

目的探讨大骨节病患者膝关节置换术后IL-1β及TNF-α表达变化及其与膝关节疼痛指数的相关性。方法大骨节病组与骨性关节炎组患者各30例,单纯半月板损伤患者20例作为对照组。采用ELISA法检测3组患者血液及滑液标本IL-1β和TNF-α的表达水平,流式细胞术检测关节软骨细胞凋亡率,疼痛指数变化采用VAS评分,分析VAS与IL-1β、TNF-α变化的相关性。结果大骨节病组与骨性关节炎组血液标本、滑液标本IL-1β和TNF-α的水平均显著高于对照组(P0.05);大骨节病组及骨性关节炎组细胞凋亡率显著高于对照组(P0.05);Pearson相关分析表明,患者手术前后血液中IL-1β和TNF-α表达水平变化与VAS呈显著正相关。结论大骨节病患者IL-1β和TNF-α的水平较高,且其表达变化与VAS密切相关。     

类风湿关节炎患者外周血白细胞介素-32的表达及临床意义

目的分析类风湿关节炎(RA)患者外周血白细胞介素-32(IL-32)的表达及临床意义。方法选取122例RA患者,根据活动度积分(DAS28)将其分为高活动组45例(DAS285.1)、中低活动组42例(DAS28≥2.6~≤5.1)和缓解期组35例(DAS282.6)。选取同期50例非RA结缔组织病患者作为非RA组,选取同期50名健康志愿者作为对照组。对5组研究对象血清IL-32、TNF-α水平及外周血单核细胞(PBMC)中的IL-32、TNF-α基因相对表达量进行检测和比较。结果高活动组患者PBMC中IL-32、TNF-αmRNA相对表达量和血清IL-32、TNF-α水平最高,其次为中低活动组患者,非RA组患者的血清TNF-α水平显著高于缓解期组和对照组(P0.05)。缓解期、非RA组和对照组PBMC中IL-32、TNF-αmRNA相对表达量和血清IL-32水平的差异均无统计学意义(P0.05),缓解期组和对照组研究对象的血清TNF-α水平的差异无统计学意义(P0.05)。RA患者血清和PBMC中的IL-32、TNF-α水平与RA患者的病情指标均具有相关性(P0.05)。结论 RA患者表现为外周血IL-32水平的显著升高,其水平与其疾病严重程度和活动性程度指标具有相关性,提示了IL-32可能在RA的活动性增强过程中具有重要的作用,可作为评价RA病情的辅助指标。     

高迁移率族蛋白B1对大鼠脾脏树突状细胞细胞因子表达的影响

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对树突状细胞(dendritic cells,DC)细胞因子蛋白合成和基因表达的影响.方法 分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于96孔培养板(1×105/孔),给予重组HMGB1刺激,研究HMGB1刺激与TNF-α,IL-12蛋白合成和基因表达的时间-效应关系,24孔细胞随机分为6组:正常对照24 h组(4孔/组)、正常对照48 h组(4孔/组)、正常对照72 h组(4孔/组)、HMGB1 24 h组(4孔/组)、HMGB1 48 h组(4孔/组)和HMGB1 72 h组(4孔/组),后3组分别以1 μg/mLHMGB1 刺激.刺激相应时间检测TNF-α,IL-12 mRNA的表达和蛋白水平.研究HMGB1刺激与TNF-α,IL-12蛋白合成和基因表达的剂量-效应关系,16孔细胞随机分为4组:正常对照组(4孔/组)、0.1μg/mL组(4孔/组)、1 μg/mL组(4孔/组)和10 μg/mL组(4孔/组),分别以相应剂量HMGB1刺激.刺激后48 h后检测TNF-α、IL-12 mRNA的表达和蛋白水平.应用Promega公司mRNA提取试剂盒裂解收集的DC,提取细胞mRNA.采用SYBR Green real-time(实时荧光定量)PCR技术检测TNF-α mRNA,IL-12mRNA表达水平.以三磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)作为内参对照.扩增产物经Fast 7500 real-time PCR仪处理,作相对定量(RQ)分析.以ELISA试剂盒检测各组上清中IL-12,TNF-α蛋白水平.数据进行单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 1 μg/mL HMGB1 刺激后,脾脏DC IL-12,TNF-α蛋白合成和基因表达均分别于24～72 h明显上调(P<0.05或P<0.01),其中以作用48 h后其表达上调尤为显著(P<0.01);0.1/.μg/mL,1 tcVmL,10μg/mL HMGB1刺激48 h均可诱导DC IL-12、TNF-α蛋白合成和基因表达增强(P<0.01),其中HMGB1浓度在1 μg/mL时,DC IL-12和TNF-α蛋白合成和基因表达表达最明显(P<0.01).结论 HMGB1诱导DC成熟分化过程中能促进DC合成、释放IL-12和TNF-α,从而发挥其免疫调节作用.     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和转化生长因子β1的影响

目的 观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)和转化牛长因子β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)mRNA及其蛋白表达水平,探讨氧化/抗氧化失衡在呼吸机相关性肺损伤(ventilator associated lung injury,Vau)中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组、小潮气量组和大潮气量组(各组8只),测定其肺组织和血浆中MDA含量,并分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织γ-GCS,TGF-β_1,mRNA及其蛋白表达水平,并进行相关性分析.组间差异比较采用方差分析法,各组均数间两两比较采用SNK-q检验,以P＜0.05表示差异有统计学意义,相关性分析采用Pearson直线相关分析法.结果 与对照组和小潮气量组比较,大潮气量组大鼠肺组织和血浆MDA含量、肺组织TGF-β_1mRNA及其蛋白表达水平明显升高(P＜0.01),而γ-GCS mRNA及其蛋白表达水平则明显低于对照组和小潮气量组(P＜0.01);小潮气量组与对照组各项指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析结果表明大潮气量组大鼠肺气道卜皮细胞γ-GCS和TGF-β_1 mRNA及其蛋白表达均呈负相关(r值分别为-0.96,-0.85,P＜0.01).结论 大潮气量机械通气町诱导肺组织TGF-β_1 mRNA及其蛋白高表达,使γ-GCS表达降低,谷胱甘肽合成减少,导致局部肺组织氧化/抗氧化系统失衡,是VALI发生的重要因素之一.     

胸腔积液中巨噬细胞细胞因子的表达

目的探讨在不同性质的胸腔积液患者中血清IL-6、TNF-α、IL-13、TGF-β1的含量及患者胸腔积液中IL-6、TNF-α、Arg-1 mRNA的表达水平,为临床胸腔积液的诊疗提供实验理论依据。方法回顾性分析我院在2016年5月至2017年12月期间在呼吸科住院治疗的70例胸腔积液患者,其中良性积液组39例,恶性积液组31例。采用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测IL-6、TNF-α、IL-13、TGF-β1细胞因子的含量。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测胸腔积液IL-6、TNF-α、Arg-1 mRNA的表达水平。并对恶性胸腔积液中TGF-β1、Arg-1 mRNA的表达与胸腔积液癌胚抗原(pCEA)、血清癌胚抗原(sCEA)的表达作Pearson相关性分析。结果恶性胸腔积液组IL-6、TNF-α、TGF-β1、Arg-1 mRNA含量明显高于良性胸腔积液组,两组相比差异具有统计学意义(P0.01);IL-13在恶性胸腔积液中表达明显低于良性胸腔积液组,两组相比差异具有统计学意义(P0.01);在恶性胸腔积液中TGF-β1、Arg-1 mRNA的表达与胸腔积液癌胚抗原(pCEA)、血清癌胚抗原(sCEA)的表达呈正相关。结论巨噬细胞因子IL-6、TNF-α、IL-13、TGF-β1、Arg-1 mRNA水平对于良恶性胸腔积液鉴别具有一定的价值。     

慢性牙周炎患者血清STAT6 mRNA、HMGB1、 MMP-13水平分析及临床意义探讨

目的 探讨慢性牙周炎患者血清信号转导和转录激活因子6(STAT6)mRNA、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)水平与病情、炎症反应和牙周临床指标的相关性。方法 将2019年2月至2022年2月该院收治的156例慢性牙周炎患者纳入研究作为牙周炎组,根据病情严重程度分为轻度组(80例)和中重度组(76例),另选取72例无口腔疾病的健康者作为对照组。检测受试者血清STAT6 mRNA、HMGB1、MMP-13、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6水平以及牙周炎患者出血指数(BI)、探诊深度(PD)和附着丧失(AL)。采用Pearson相关分析STAT6 mRNA、HMGB1、MMP-13和炎症因子、牙周临床指标之间相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析STAT6 mRNA、HMGB1、MMP-13诊断慢性牙周炎的价值。结果 牙周炎组血清STAT6 mRNA、HMGB1、MMP-13、TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-6水平均高于对照组(P<0.05)。中重度组血清STAT6 mRNA、HMGB1...     

黄芪甲苷Ⅳ预防肥胖性高血压的作用机制研究

目的 探讨黄芪甲苷Ⅳ(As Ⅳ)预防肥胖性高血压的作用机制.方法 将35只雄性Wistar大鼠分为正常脂肪饲料组(NC组,n=10)和高脂肪饲料组(n=25).16周后,将18只肥胖大鼠随机分为对照组(n=6)、As Ⅳ组(n=6)和As Ⅳ+α-bungaratoxin (α-BGT)组(n=6).测量各组干预前后体质量、血压,血浆和肾组织去甲肾上腺素(NE)水平.采用Western blot或实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组下丘脑组织中瘦素受体(LepRb)、磷酸化信号转换器和转录激活因子-3(p-STAT3)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、细胞因子信号抑制因子(SOCS3)、酪氨酸磷酸酶(PTP1B)、皮质素原(POMC)、神经肽Y(NPY)水平.检测各组下丘脑和脂肪组织中α7烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核因子κB激酶亚单位β/核因子κB抑制剂(IKKβ/NF-KB)和促炎细胞因子[白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]的水平.结果 与对照组相比,AsⅣ组干预后葡萄糖不耐受和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)改善,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05);连续干预6周后,对照组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血浆和肾脏组织中NE水平升高,AsⅣ组SBP、DBP和NE水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与NC组相比,对照组大鼠血浆瘦素水平升高,LepRb mRAN表达降低,瘦素信号分子p-STAT3的表达下降,p-PI3K、SOCS3 mRNA和PTP1B mRNA的表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05).而As Ⅳ组p-STAT3、LepRb mRNA和POMC mRNA表达增加,p-PI3K、SOCS3 mRNA和PTP1B mRNA水平降低.与对照组比较,As Ⅳ组α7nAChR蛋白和mRNA表达升高,p-IKKβ、NF-KB蛋白及其mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与As Ⅳ组比较,AsⅣ+α-BGT组α7nAChR阻断剂α-BGT降低了α7nAChR mRNA和蛋白表达水平,IKKβ mRNA、NF-KB mRNA、p-IKKβ、NF-KB、IL-1β和TNF-α蛋白水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组和As Ⅳ+α-BGT组比较,As Ⅳ组α7nAChR mRNA表达升高,p-IKKβ、NF-KB、IL-1β、TNF-α表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AsⅣ可通过抑制炎症反应和改善瘦素抵抗有效预防肥胖相关高血压,AsⅣ的改善作用与α7nAchR表达增加密切相关.     

环氧化酶-2与单核-内皮细胞黏附性的相关研究

目的探讨环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）表达水平同单核-内皮细胞黏附性的关系及其相关机制。方法采用细胞计数法检测单核-内皮细胞的黏附性;实时荧光定量PCR检测内皮细胞COX-2mRNA表达量;Westernblot检测内皮细胞COX-2蛋白表达量;ELISA检测内皮细胞前列腺素E2（ProstaglandinE2,PGE2）水平。结果内皮细胞COX-2mRNA及蛋白表达量在炎症因子TNF—α、IL-1β刺激后显著上调,并随时间变化（P〈0．05）;内皮细胞COX-2蛋白表达量增加与PGE。水平及单核-内皮细胞的黏附性成正相关;使用COX-2特异性抑制剂NS398预孵育后,内皮细胞PGE2表达水平降低（P〈0．05）,单核一内皮细胞的黏附性受到显著抑制（P〈0．01）。结论内皮细胞COX-2mRNA及蛋白表达量在炎症因子TNF-α、IL-1β刺激后明显上调,其表达增加后可能通过催化花生四烯酸代谢成PGE2,使单核一内皮细胞的黏附性增强,从而影响动脉粥样硬化性疾病的进程。