整合素α4β7的表达与溃疡性结肠炎大鼠肠淋巴细胞归巢

目的 探讨淋巴细胞归巢受体整合素α4β7的表达与溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠淋巴细胞归巢的关系,分析UC大鼠肠道黏膜免疫功能改变的机制.方法 将40只SD大鼠随机分为UC组和对照组,分别于造模后72 h取标本检测:免疫组织化学法检测肠组织中地址素MAdCAM-1;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠组织中α4β7的表达;流式细胞检测大鼠门静脉血中整合素α4阳性淋巴细胞数的变化.结果 UC组大鼠结肠黏膜下MAdCAM-1表达明显增强(0.72±0.33比0.21±0.41,P<0.01),主要表达在黏膜下微血管区;UC组α4、β7 mRNA的表达量与对照组比较明显升高(0.683±0.238;0.842±0.374比0.146±0.132;0.241±0.624,P均<0.01);UC组结肠静脉回流血中α4+淋巴细胞的比例明显高于对照组(76.73±8.24比14.66±6.74,P<0.01).结论 UC大鼠发病时α4β7阳性淋巴细胞的比例升高,参与肠淋巴细胞过渡归巢现象,肠黏膜免疫功能亢进可能是UC发病的重要因素.     

整合素α4、β7在胃癌中的表达

整合蛋白表达高低与肿瘤细胞生物学行为关系的研究倍受重视。我们采用流式细胞仪检测并探讨胃良恶性上皮中整合素α4、β7亚基的表达及其意义。     

次级淋巴组织趋化因子在溃疡性结肠炎发病中的作用

目的 探讨次级淋巴组织趋化因子(SLC)对实验性溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠病变的影响.方法 60只SD大鼠随机分为对照组、UC模型组(模型组)及SLC抗体干预治疗UC模型组(干预组),观察、比较不同组别结肠黏膜炎性和淋巴细胞归巢状况以及结肠组织细胞因子(IL-2和IL-6)的变化.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测结肠组织中的SLC表达.结果 3组大鼠的结肠黏膜炎性反应评分和结肠组织细胞因子含量差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01).模型组和干预组的结肠黏膜下存在淋巴细胞异常归巢现象;模型组和干预组SLCmRNA的表达量比对照组明显升高(0.846+0.047和0.768±0.135比0.312±0.112,P<0.01),但模型组与干预组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 SLC与实验性溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜炎性反应密切相关,阻断SLC是减轻结肠黏膜炎性反应的有效途径之一.     

整合素α6β4在膀胱移形细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究整合素α6β4在膀胱癌中的表达度其与膀胱癌分化、慢袭转移的关系.方法 应用免疫组织化学万法对85例膀胱癌石蜡包埋标本进行整合素α6β4半定量检测.结果 有60例膀胱癌组织整合素α6β4呈阳性或不同程度表达增强,高分化癌的整合素α6β4阳性率明显低于低分化癌(P <0 05).整合素α6β4阳性率在膀胱癌伴淋巴结转移组高于淋巴结阴性组(P<0 05).结论 整合素α6β4表达与肿瘤细胞的分化程度呈负相关、与淋巴结转移呈正相关,整合素α6β4可作为判断膀胱癌恶性程度度怠者预后的生物学指标.     

整合素αvβ6 在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用

目的 探讨整合素αvβ6 在大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8),对照组(C组)不行机械通气;高潮气量组(H组)行高潮气量(40 ml/kg)机械通气4 h,呼吸频率40次/min,氧浓度21%;高潮气量+阻滞剂S247组(HS组)腹腔注射S247(含有αv 亚单位整合素非特异性阻滞剂)100 mg/kg,1次/d,持续2周,在最后一次腹腔注射S247后30 min行高潮气量机械通气,参数设定同H组.C组和H组于上述相应时点腹腔注射等量生理盐水.通气结束后处死大鼠,观察肺组织病理学,计算肺湿,干重比(W/D),记录支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞(WBC)计数,测定总蛋白(TP)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度、整合素αvβ6 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 C组未见肺损伤的发生;H组肺泡结构严重破坏,肺泡内渗出物、出血和间质水肿明显;HS组中等程度炎性细胞浸润,肺泡内出血和肺泡壁增厚.与C组比较,H组和HS组肺W/D、BALF中WBC计数、TP浓度升高,整合素αvβ6 mRNA及其蛋白表达上调,H组BALF中MIP-2浓度升高(P＜0.01);与H组比较,HS组肺W/D、BALF中WBC计数、TP、TNF-α、MIP-2浓度降低,整合素αvβ6 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05或0.01).结论 整合素αvβ6参与了大鼠VILI的发生.     

溃疡性结肠炎大鼠淋巴细胞的过渡归巢与CCR7的表达

目的探讨实验性溃疡性结肠炎（UC）大鼠淋巴细胞过渡归巢现象与淋巴细胞表面CCR7受体表达的关系。方法40只SD大鼠随机分为对照组及模型组，观察结肠黏膜下淋巴细胞过渡归巢现象，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量法检测结肠组织中CCR7的表达；流式细胞法（FCM）测定结肠回流血液中CCR7＋淋巴细胞的比例。结果模型组大鼠结肠黏膜下存在淋巴细胞过渡归巢，派尔集合淋巴结增生，最大截面积比较，差异有统计学意义[（9．56±0．32）比（1．48±0．58），t=5．12，P〈0．01]，CCR7mRNA的表达量与对照组比较明显升高[（0．772d-0．108）比（0．126±0．029），t=4．37，P〈0．01]、模型组结肠静脉回流血中CCR7＋淋巴细胞的比例明显高于对照组[（76．58±9．73）％比（16．62±7．84），t=3．97，P〈0．01]。结论溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜下存在淋巴细胞过渡归巢现象，结肠组织中归巢受体CCR7的表达增高，结肠回流血液中CCR7＋的淋巴细胞的比例增高。     

结肠炎颗粒对模型大鼠溃疡性结肠炎的作用

溃疡性结肠炎是一种顽固难治性疾病．免疫因素已成为溃疡性结肠炎基础研究中较为活跃的部分。本研究旨在观察结肠炎颗粒对模型大鼠溃疡性结肠炎的作用。     

整合素αvβ6在胃癌AGS细胞增殖和凋亡中的作用

目的：研究整合素αvβ6在胃癌AGS细胞增殖和凋亡中的作用。方法：用单克隆抗体10D5封闭AGS细胞表面αvβ6功能,并采用10D5的阴性对照剂鼠IgG2a处理细胞作为阴性对照。MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Westernblot检测caspase-3蛋白的表达情况。结果：用10D5封闭αvβ6后,10D5组AGS细胞的存活率较对照组和IgG2a组下降,而凋亡率和caspase-3的表达水平则增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）。IgG2a组与对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：整合素αvβ6表达促进胃癌AGS细胞增殖并抑制其凋亡。     

elF4E和整合素αvβ6在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨elF4E和整合素αvβ6在结肠癌组织中的表达及临床意义.方法：采用免疫组化SP法检测69例结肠癌及30例正常结肠组织中elF4E和整合素αvβ6蛋白的表达,并分析二者与结肠癌临床病理因素的关系.结果：结肠癌组织中elF4E和整合素αvβ6蛋白的表达明显高于正常结肠组织,差异有统计学意义（P＜0.01）.elF4E表达与淋巴结转移有关（P=0.013）,整合素αvβ6表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床TNM分期有关（P=0.027,P=0.034,P=0.031）.结肠癌组织中elF4E与整合素αvβ6蛋白的表达呈低度正相关（P=0.016,r=0.288）.Kaplan-Meier法生存分析显示,elF4E和整合素αvβ6蛋白的表达与患者5年生存率显著相关（P=0.008,P=0.040）.Cox回归分析显示,elF4E及整合素αvβ6蛋白的表达水平、组织分化程度、肿瘤浸润深度和年龄是结肠癌的独立危险因素,其中elF4E高表达和α V β 6阳性表达的相对危险度分别是4.212 （95％ Cl：1.779,9.973）和2.774（95％ Cl：1.148,6.700）.结论：结肠癌组织中elF4E和整合素αvβ6蛋白可作为结肠癌患者术后预后不良的独立预测指标,二者潜在的信号通路可能成为治疗结肠癌的新靶点.     

次级淋巴组织趋化因子对溃疡性结肠炎大鼠淋巴细胞的体外趋化作用

的移行能力,SLC对模型组淋巴细胞的趋化活性明显高于对照组,并呈现剂量效应关系,80 μg/L为其饱和浓度.结论 SLC/CCR7可促进淋巴细胞的迁移,为探讨UC肠淋巴细胞归巢提供实验依据.     

黄芪对早期糖尿病大鼠肾小球整合素α3β1的影响

目的探讨糖尿病大鼠肾小球整合素α3β1的表达及黄芪对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型，将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（NC组，6只）、糖尿病模型组（DM组，8只）、氯沙坦治疗组（DL组，8只，10mg·kg^-1·d^-1灌胃）和黄芪治疗组（DA组，8只，5ml@kg^-1·d^-1灌胃）。6周末检测各组大鼠血糖、体重、肾重／体重及24h尿白蛋白排泄率（UAER）；观察肾小球病理形态及免疫组化检测肾小球整合素0．3B1的蛋白表达水平。结果糖尿病模型组大鼠血糖、肾重／体重、UAER、肾小球面积及肾小球容积均明显高于正常对照组（P〈0．01），而体重明显减轻（P〈0．01）；黄芪治疗组大鼠血糖无明显变化（P〉0．05），体重有所增加（P〈0．01），余指标均有所降低（P〈0．01或P〈0．05）。糖尿病模型组肾小球整合素α3β1表达明显低于正常对照组（P〈0.01），而黄芪治疗组其表达有所升高（P〈0．01）。结论黄芪对糖尿病大鼠肾脏有明显保护作用，其机制可能部分与上调肾小球整合素α3β1的表达有关。     

TRAF4在溃疡性结肠炎中的表达及意义

本研究探讨TRAF4在溃疡性结肠炎（UC）中的表达，进一步了解TRAF4与自身免疫性疾病的关系。将UC患者35例（UC组）和普通肠炎患者15例（对照组）经结肠镜活检，HE、免疫组织化学检测肠黏膜腺上皮及淋巴细胞、浆细胞的TRAF4表达情况．并进行分类比较。结果显示，UC中淋巴细胞、浆细胞核的TRAF4的阳性率明显高于对照组（P〈0．05），UC肠黏膜腺上皮细胞核的TRAF4表达阳性率明显高于对照组（P〈0．05），UC中肠黏膜腺上皮细胞浆的TRAF4表达与对照组无明显差异（P〉0．05）。结果表明，TRAF4在UC中细胞核的表达存在异常，尤其在淋巴细胞、浆细胞核中的表达存在明显异常。     

整合素β_3在生殖领域中的作用

近年来 ,整合素在胚泡着床过程中子宫内膜的表达及其生物学意义备受关注 ,尤其是整合素 β3 被视为评价子宫内膜容受性的良好指标。整合素有两个 β3 不同的成员 :αIIbβ3 和ανβ3 。前者主要表达于巨核细胞和血小板 ,后者在体内分布广泛 ,以上皮细胞为主。本综述着重介绍整合素β3 (主要指ανβ3 )在生殖领域的研究进展     

粘附分子整合素α5 β1在胆囊癌中的表达及其临床意义

目的 研究粘附分子整合素α５β１在胆囊腺癌中的表达及其与胆囊腺癌分化、侵袭转移和预后的关系。方法 应用免疫组织化学方法对５７例胆囊腺癌石蜡包埋标本进行整合素α５β１半定量检测。结果 有４１例（７１．９％）胆囊腺癌组织整合素α５β１表达弱或消失,高分化癌的整合素α５β１阳性率明显高于低分化癌。整合素α５β１阳性率在胆囊癌淋巴结组低于淋巴结阴性组。整合素α５β１表达阳性者２年生存率（３２．５％）显著高     

整合素αvβ3和VEGF在前列腺癌的表达及临床意义

目的 探讨整合素αvβ3和血管内皮生长因子（VEGF）在前列腺癌（PCa）中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链酶抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（SP法）检测整合素αvβ3和VEGF在41例前列腺癌中的表达,20例正常前列腺组织作对照.结果 前列腺癌组织中整合素αvβ3和VEGF的表达上调,与正常组织比较差异具有统计学意义（P〈0.01）.整合素αvβ3和VEGF的表达均随着PCa的病理分级、临床分期增加其表达上调（P〈0.05）,与PCa的病理分化程度呈负相关（P〈0.01）.在各术前血清PSA值组中,整合素αvβ3及VEGF表达无统计学差异（P〉0.05）.整合素αvβ3与VEGF表达呈正相关（rs=0.220）,相关有显著性（P〈0.05）.结论 整合素αvβ3和VEGF可能在前列腺癌的发生、发展及恶性进展过程中起重要作用.将二者结合分析,有助于判断PCa的恶性程度、转移潜能和预后.     

TGFβ、HNF4α在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的研究TGFβ和HNF4α在肝癌及癌旁组织中的表达,探讨其在肝癌发生、发展中的作用和意义。方法采用qRT-PCR和Western blotting方法检测54例原发性肝癌患者肝癌及对应癌旁组织中TGFβ和HNF4αmRNA及蛋白表达水平;免疫组化检测所有肝癌组织中TGFβ和HNF4α蛋白的表达水平,统计学分析两者与肝癌患者临床病理特征的关系。结果 (1)与癌旁组织比,TGFβmRNA在肝癌组织中表达升高[(0.294±0.142)vs(0.231±0.149),P=0.020];HNF4αmRNA在肝癌组织中表达降低[(0.104±0.130 vs(0.151±0.079),P=0.037];(2)Western blotting结果显示:与癌旁组织比,TGFβ蛋白在肝癌组织中高表达[(0.224±0.060)vs(0.051±0.019),P=0.025],HNF4α蛋白在肝癌组织中表达下降[(0.103±0.033)vs(0.315±0.024),P=0.017];(3)免疫组化检测显示,肝癌组织中TGFβ蛋白阳性表达率66.7%,HNF4α蛋白阳性表达率为57.4%。在肝癌组织中TGFβ蛋白表达水平与肿瘤分化(χ~2=4.339,P=0.037)及TNM分期(χ~2=4.488,P=0.034)相关;HNF4α蛋白与肿瘤分化(χ~2=5.032,P=0.025)相关。TGFβ蛋白与HNF4α蛋白呈负相关(r=-0.291,P=0.033)。结论 TGFβ和HNF4α基因相互调控EMT进程,参与原发性肝癌的发生发展。     

整合素αvβ3在大肠癌中的表达及其意义

整合素αvβ3是血管整合素的一种，在血管中的表达具有较高的特异性，被认定为新生血管的标志物。为了进一步探讨整合素αvβ3在大肠癌中的变化规律，我们采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）技术及免疫组织化学技术分别在mRNA转录水平和蛋白水平检测大肠癌标本肿瘤组织及远癌切端组织中整合素αvβ3的表达，探讨整合素αvβ3在大肠癌中侵袭转移的作用，为大肠癌合理的临床诊治及准确的预后评估提供理论依据。     

骨肉瘤患者血清中整合素α2β1的表达水平

目的 检测骨肉瘤患者血清中整合素α2β1的表达,探讨其与骨肉瘤生物学行为的关系及在治疗前后和肺转移时的变化.方法 应用酶联免疫吸附技术检测43例骨肉瘤患者(病例组)术前及术后、化疗前及化疗后血清整合素α2β1含量,男28例,女15例;年龄8～47岁,平均(18.42±9.10)岁;骨母细胞型24例,纤维母细胞型9例,软骨母细胞型7例,其他3例;EnnekingⅡA期13例,ⅡB期26例,Ⅲ期4例;其中22例患者接受新辅助化疗.26例志愿者为正常对照组,男16例,女10例;年龄18～32岁,平均(23.54±3.82)岁.病例组分别根据肿瘤大小、原发部位、临床分期、组织学分型以及转移情况进行分组,比较各组血清中整合素α2β1表达的差异.结果 病例组患者术前血清整合素α2β1为(2.44±0.89)μg/L,显著高于对照组(1.85±0.43)μg/L.术前表达水平与骨肉瘤Enneking临床分期、肿瘤大小和远处转移存在相关性,而与肿瘤原发部位及Dahlin组织学分型无关.骨肉瘤保肢术后患者整合素α2β1的血清浓度降低.接受新辅助化疗的患者化疗前后血清中整合素α2β1表达水平的差异具有统计学意义.结论 整合素α2β1的表达与骨肉瘤的发生、发展、转移呈正相关,可能成为一项新的诊断及评估骨肉瘤预后的生物学指标.

Abstract：

Objective To evaluate the expression of Integrin α2β1 in serum of osteosarcoma patients and to investigate the effect of Integrin α2β1 on metastasis of osteosarcoma. Methods Sandwich enzymelinked immunosorbent assay was applied to test Integrin α2β1 in serum of 26 healthy controls (male 16, female 10; age 18-32, average age 23.54±3.82) and 43 osteosarcoma patients (male 28, female 15;age 8-47,average age 18.42±9.10)before and after the surgery and the chemotherapy. The patients included osteoprogenitor cells type in 24 cases, fibroblast type in 9 cases, chondroblast type in 7 cases, and other types in 3cases; with Enneking stage ⅡA in 13 cases, stage ⅡB in 26 cases, stage Ⅲ in 4 cases. Among them, 22 patients receive the neo-adjuvant chemotherapy. After that, we compared the data of different groups. At the same time, in accordance with tumor size, position, clinical stage, histology grade and metastasis situation to categorize groups compared among the groups of serum Integrin α2β1 differences in order to explore its relationship with patients' prognosis and metastasis. Results The Integrin α2β1 of osteosarcoma patients in blood before the surgery was expressed highly. It was significantly higher than the control group. The expression before surgery had significant correlation with osteosarcoma Enneking clinical stages, tumor size and metastasis. And it was independent of tumor position and Dahlin histology grade. The expression of Integrin α2β1 in blood of the osteosarcoma patients after limb salvage surgery decreased significantly. And the expression of Integrin α2β1 in blood of patients receiving new adjuvant chemotherapy was significant differences before and after the chemotherapy. Conclusion The expression of Integrin α2β1 has positive correlation with the occurrence, development and metastasis of the osteosarcoma. It is probably a new biological indicator for diagnosis and estimating prognosis of osteosarcoma. Simultaneously surgery and new adjuvant chemotherapy are still effective methods to treat osteosarcoma.     

整合素αvβ6与钙黏蛋白Fat1在结肠癌中的表达差异性及其意义

目的：探讨整合素αvβ6和钙黏蛋白Fat1在结肠癌中的表达情况,进一步揭示其背后的意义。方法：将100例结肠癌标本的肿瘤边缘部分及肿瘤中心部分制作成200点的组织芯片,用免疫组织化学方法检测整合素αvβ6和钙黏蛋白Fat1在结肠癌不同部位的分布和表达差异。利用siRNA技术和转基因技术对HT-29结肠癌细胞和SW480结肠癌细胞进行试验分组,用流式细胞术检测各组结肠癌细胞表面整合素ανβ6和钙黏蛋白Fat1表达水平;应用Western Blot分析各组结肠癌中Ras蛋白活化的情况。结果：肿瘤侵袭边缘,整合素αvβ6呈现高表达,而钙黏蛋白Fat1低表达;瘤体中央,整合素αvβ6低表达,而钙黏蛋白Fat1高表达。流式细胞分析证实在结肠癌细胞表面,整合素αvβ6和钙黏蛋白Fat1表达水平同样呈现负相关关系。Western Blot分析证实,整合素αvβ6能够促进结肠癌细胞Ras蛋白的活化水平。结论：整合素αvβ6和钙黏蛋白Fat1在结肠癌中呈现负相关表达,αvβ6通过抑制Fat1功能促进Ras蛋白的活化。     

机械负荷调节猪腰椎间盘细胞表达α5β1整合素的体外研究

目的研究α5β1整合素在体外培养的猪腰椎间盘细胞中的表达和机械负荷对其的影响。方法取10只年龄5-6周、体重25-30kg的猪，处死后12h内，无菌条件下切取完整的腰椎，剔除腰椎周围的韧带和软组织，尤其是椎间盘周围的韧带。从腹侧一次性切开椎间盘取出髓核（nucleus pulpous，NP），仔细分离纤维环（anulus fibrous，AF），将两者立即置于Hanks平衡盐溶液中，制成细胞悬液。分别对腰椎间盘的AF和NP细胞施加1MPa、1Hz，3h／d，共3d的周期性液压，通过对细胞的形态学观察、Western免疫印迹和免疫组织化学染色，检测α5β1整合素在正常腰椎间盘AF细胞和NP细胞中的表达及周期性压力对其的影响。结果经周期性液压后，NP细胞的存活率大于90％，AF细胞的存活率大于85％，加压后的AF细胞和NP细胞均可见体积缩小。α5β1整合素在正常腰椎间盘AF细胞和NP细胞中的表达呈强阳性。Western免疫印迹结果显示：加压后α5β1整合素在AF细胞中的表达均明显减少，P值分别为0．000、0．003，与对照组比较差异有统计学意义；α5β1整合素在NP细胞中的表达也明显减少，P值分别为0．001、0．015，与对照组比较差异有统计学意义。结论机械负荷可引起腰椎间盘细胞中α5β1整合素的变化，提示α5β1整合素在腰椎间盘细胞中可能发挥力学传感器的作用。