巨噬细胞在脓毒症小鼠急性肾损伤发生中的可能作用机制

目的 探讨小鼠肾脏组织巨噬细胞的生理构成及其在脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)时的变化及可能作用机制。方法 将54只小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、假手术组、CLP组,每组各18只小鼠。正常对照组为正常小鼠,假手术组小鼠只打开腹腔不建模,CLP组小鼠采用盲肠结扎穿刺法(CLP)制作SA-AKI模型。观察时间点为术后第0.5天、第1天、第2天和第21天。采用酶联免疫吸附试验测定外周血肌酐水平、苏木精和伊红染色评估肾脏组织病理。采用流氏细胞分析法测定小鼠巨噬细胞的构成及功能指标。应用单细胞测序技术测定SA-AKI急性期巨噬细胞差异性表达的基因,再用KEGG数据库富集得到相关信号通路,以推测巨噬细胞在AKI过程中所发挥的可能作用机制。结果 生理状态下,小鼠肾脏组织的固有巨噬细胞分为两群：MC1和MC2二者在数量上差异无统计学意义(P>0.05);MC1表达iNOS的量高于MC2,差异有统计学意义(P<0.05)。AKI时肾脏巨噬细胞显著增多、以MC1为主。术后第0.5天、第1天和第2天,CLP组MC2细胞表达iNOS表达量均显著高于假手术组,差异均有统计学意义(P<...     

巨噬细胞在急性肺损伤中的作用

目的 通过观察急性肺损伤中炎细胞的变化规律。阐明炎细胞在急性肺损伤中的作用。方法 采用20%Ⅲ度体表烧伤复合一次性腹腔内毒素（1mg/kg)注射为实验动物模型。并分别以单纯烧伤，单纯内毒素注射，生理盐水注射为对照组，观察伤后肺组织的病理变化，支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数及中性粒细胞（PMN）分类计数。结果 单烧组和单注组BALF细胞总数明显高于正常对照组，主要是巨噬细胞（Mφ）增加，而烧注组BALF细胞总数除1.5h外无明显升高，1.5h时PMN比例却明显增加，烧注组肺病理改变比单烧组，单烧组明显加重，以伤后1.5h最为显著，结论 PMN是内毒素血症急性肺损伤的主要效应细胞，而Mφ则对急性肺损伤可能有某种保护作用。     

双歧杆菌对裸鼠腹腔巨噬细胞产生细胞毒性效应分子的影响

目的 了解青春型双歧杆菌刺激裸鼠腹腔巨噬细胞后产生的IL－6、IL－12及TNF－α的水平。方法 以青春型双歧杆菌注射于裸鼠腹腔，体外获取腹腔巨噬细胞，分别滴加兔抗鼠IL－6、IL－12及TNF-α单抗，然后以FITC标羊抗兔IgG孵育，最后用激光共聚焦显微镜测定巨噬细胞发出的荧光强度。结果 双歧杆菌注射组裸鼠腹腔巨噬细胞产生的IL－6、IL－12及TNF－α水平均显高于对照组（P＜0．01）。结论 青春型双歧杆菌能激活巨噬细胞，使之分泌多量的IL－6、IL－12及TNF－α。     

高强度超声对荷宫颈癌小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的影响

目的探讨高强度超声（HIU）治疗对荷瘤鼠巨噬细胞功能的影响。方法应用双抗夹心酶联免疫（ELISA）技术检测HIU组、手术组、荷瘤组及对照组小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α分泌。结果受LPS刺激时,HIU组、手术组、荷瘤组及对照组小鼠腹腔巨噬细胞培养上清TNF-α浓度分别为：（1322±616.91）、（1044±671.33）、（606.50±230.73）、（938.00±625.50）pg/ml,HIU组与荷瘤组比较P〈0.05;未经LPS刺激时,HIU组、手术组、荷瘤组及对照组巨噬细胞培养上清TNF-α浓度分别为：（792.35±388.00）、（543.25±348.49）、（268.13±68.55）、（848.88±501.10）pg/ml,HIU组、对照组与荷瘤组比较P〈0.05。结论HIU治疗能够增强荷瘤小鼠巨噬细胞的功能。     

小鼠腹腔巨噬细胞的提取与鉴定

目的探讨小鼠腹腔诱导和提取巨噬细胞的简便方法。方法以5%淀粉肉汤刺激诱导小鼠产生炎性腹腔巨噬细胞,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含有10%小牛血清的RPMI1640培养液中培养,显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色鉴定细胞活力,体内吞噬鸡红细胞测定其吞噬率、吞噬指数,瑞氏染色、免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度。结果获得高纯度、高细胞活性的巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征。结论该研究采用的方法简单实用,可提取大量巨噬细胞。     

髓系细胞触发受体2在急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞上的表达

目的：研究髓细胞触发受体2（TREM2）在脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）小鼠肺泡巨噬细胞（AM）上的表达,并探讨其作用机制及意义。方法：采用动物实验,以腹腔注射大剂量LPS诱导ALI模型;以腹腔注射生理盐水作为对照。用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）对AM表达的TREM2mRNA做定量分析。用ELISA对支气管肺泡灌洗液中的肺肿瘤坏死因子（TNF—α）定量检测。结果：AM在正常情况下表达大量的TREM2,在LPS造成急性损伤后表达大幅度下降。TREM2与TNF—α的表达呈负相关（P〈0．001）。结论：TREM2可能在LPS致ALI中起重要的抗炎作用。     

创伤小鼠注射内毒素后巨噬细胞Ⅰa抗原表达的变化

目的:探讨内毒素注射对创伤小鼠巨噬细胞抗原提呈功能的影响.方法:60只小鼠以双侧股骨骨折及软组织挤压致伤,伤后次日静脉注射内毒素(1 ml/kg),对照组注射等量生理盐水.观察动物腹腔和肺泡巨噬细胞Ⅰa抗原的表达;测定血清白介素6(IL6)含量.结果:创伤后小鼠巨噬细胞Ⅰa表达明显降低,伤后第1日为最低水平,第7日恢复至接近正常.注射内毒素后巨噬细胞Ⅰa抗原表达降低更为剧烈,持续在较低水平,伤后7日仍显著低于伤前.伤后血清IL6含量显著升高,注射内毒素后升高更为显著.结论:内毒素能够显著加重创伤后巨噬细胞抗原提呈功能的紊乱.     

磁性纳米颗粒在小鼠巨噬细胞体外MRI中的应用

目的探讨应用超微超顺磁性氧化铁纳米颗粒(ultra-micro superparamagnetic iron oxide nanoparticle,USPIO)标记小鼠巨噬细胞株RAW264.7的最适浓度以及比较MRI中不同扫描序列在细胞吞噬功能评价中的敏感度差别.材料与方法用终浓度为0、25、50、75、100、12...     

MIF依赖性巨噬细胞在顺铂诱导的急性肾损伤中的作用

目的探讨巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)依赖性巨噬细胞在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)中的作用和机制。方法 MIF基因敲除(MIF^-/-)小鼠被随机分为正常对照组(n=6)和实验组(n=18)。正常对照组小鼠尾静脉注射生理盐水,实验组小鼠腹腔注射顺铂建立AKI模型。建模6 h后小鼠被随机分为AKI模型组、巨噬细胞对照组和MIF^-/-巨噬细胞组(每组n=6),尾静脉分别注射生理盐水、野生型C57BL/6J小鼠的巨噬细胞、MIF^-/-小鼠的巨噬细胞。3 d后处死小鼠,收集血清和肾脏组织标本。评估肾功能、肾组织病理学改变以及肾组织中单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和TNF-α的分布与表达,检测肾组织中Mincle、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、F4/80的蛋白表达。结果与AKI模型组相比,巨噬细胞对照组小鼠血清肌酐升高(P <0.001)、肾小管坏死加重(P <0.001),肾脏中MCP-1和TNF-α的蛋白表达增加(P均<0.01),M1型巨噬细胞增多(P <0.001)。与巨噬细胞对照组相比,MIF<...     

干扰素基因刺激因子通过肺巨噬细胞胞葬功能调控急性肺损伤小鼠修复的研究

目的本研究旨在探讨干扰素基因刺激因子（STING）对小鼠急性肺损伤修复过程的作用,并深入研究其对小鼠巨噬细胞胞葬功能的影响。 方法选取25只10 ~ 12周龄的C57BL/6小鼠,并随机分为D0组、D1组、D3组、D5组、D7组,每组5只,分别给予气管内注射0.5 mg/kg脂多糖（LPS）0、1、3、5、7 d后收集小鼠样本。另外,分别选择野生型STING^+/+和STING基因缺失型（STING^-/-）小鼠各5只,分为STING^+/+ + LPS组和STING^-/- + LPS组,同样给予气管内注射0.5 mg/kg LPS诱导5 d后收取小鼠样本。通过苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织的损伤病理变化,并检测小鼠肺泡灌洗液细胞数、中性粒细胞数、蛋白浓度来评估肺损伤程度;经小鼠气管注射凋亡的中性粒细胞,并于3 h后收集肺泡灌洗液细胞进行流式细胞术检测,观察巨噬细胞的胞葬功能;采用免疫荧光染色法对肺组织进行TUNEL和F4/80双染评估胞葬作用;并采用巴氏染色法观察肺泡巨噬细胞的胞葬现象。 结果C57BL/6小鼠诱导急性肺损伤后3 d达到肺损伤的顶峰,5 d后开始修复,并在不治疗的情况下,于7 d内修复基本完成。小鼠急性肺损伤5 d后,与STING^+/+ + LPS组小鼠相比,STING^-/- + LPS组小鼠的肺损伤评分、肺泡灌洗液总蛋白浓度、肺泡灌洗液总细胞数、肺泡灌洗液中性粒细胞数均较STING^+/+ + LPS组更低（t = 3.257、2.926、3.946、2.669,P = 0.012、0.019、0.004、0.028）。流式细胞术及免疫荧光染色检测结果显示,STING^-/- + LPS组小鼠肺泡巨噬细胞胞葬率均显著高于STING^+/+ + LPS组（t = 3.143、6.963,P = 0.016、< 0.001）。 结论STING缺失可能通过促进巨噬细胞胞葬功能,从而调控急性肺损伤的修复过程。本研究有望为深入理解STING在肺部损伤和修复中的作用提供新的见解。     

小鼠烫伤创面区域巨噬细胞集落刺激因子表达的变化

目的：通过应用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）及巢式多聚酶链式反应（Nest-PCR）技术，研究创面区域巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）mRNA的表达情况，探求创面区域M-CSF水平升高的来源。方法：清洁级无特异病原体C57BL/6小鼠18只，随机分为烫伤组（n=9）及假烫组（n=9），烫伤组造成20％TBSAIII度烫伤。分别于烫伤后第1、10天取创面区域组织及相应背部皮肤，抽提组织总RNA。RT-PCR及Nest-PCR产物经2％琼脂糖电泳，溴化乙锭染色、紫外灯下照相，密度分析软件分析密度。结果：在烫伤后第1天创面组织中几乎检测不到M-CSFmRNA的表达，而在烫伤后第10天创面组织中的M-CSFmRNA明显高于假烫组。结论：结合组织学检查结果，我们推测创面区域M-CSF表达的升高可能与创面局部的成纤维细胞、内皮细胞有关。     

巨噬细胞移动抑制因子在急性肺损伤中的作用

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一个重要的宿主防御中介物,通过引起细胞因子、趋化因子以及氧自由基等炎性介质级联释放,使促炎和抗炎失衡促进急性肺损伤(ALI)的发生、发展.MIF还具有免疫调节功能,能调节和平衡ALI 时局部和全身炎性反应和免疫紊乱,参与肺组织内的防御反应.目前MIF对ALI 促炎反应以及免疫调节的机制尚不清楚.研究发现MIF与ALI/ARDS 肺损伤的严重程度及疾病的预后相关,现查阅近年有关MIF在ALI中的基础研究及临床相关文献,对MIF在ALI中的作用进行综述.     

山莨菪碱对急性肺损伤时肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的干预探讨

目的观察山莨菪碱(654-2)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,探讨其对ALI治疗作用的可能机制。方法复制ALI大鼠模型。实验动物随机分为ALI模型组、654-2治疗组、对照组,进行各组大鼠动脉血气、肺湿／干(W／D）值测定及肺组织病理学光镜检查。分离培养各组大鼠肺泡巨噬细胞,采用生物活性法进行AM上清液TNF-α、IL-6测定。结果654-2治疗组大鼠AM分泌TNF-α［（38．98±4.51)KU/L］和IL-6［（20．82±6.3)kU/L］的水平明显低于ALI组［TNF-α为(68.27±9.13)kU/L,P＜0.001;IL-6为(33.84±9.02)kU/L,P＜0.01］,并能使血气改善(P＜0.05)、W／D值下降(P＜0.05),肺组织损伤程度减轻。结论654-2对ALI大鼠肺泡巨噬细胞过度活化、分泌TNF-α、IL-6具有显著抑制作用,在一定程度上防止ALI的发生和发展。     

P2X家族受体在急性T淋巴细胞白血病小鼠腹腔巨噬细胞中的表达

本研究旨在探讨Notch1诱导的小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中,腹腔巨噬细胞P2x家族受体的表达变化规律及其与巨噬细胞活化状态的相关性。建立小鼠急性T淋巴细胞白血病模型后,根据F4／80和CD206两个表面标记,用流式细胞术分别分选腹腔巨噬细胞以及CD206＋的M2样和CD206-的M1样腹腔巨噬细胞;用实时定量PCR法研究各亚群细胞中P2X家族受体的表达变化规律。结果表明：腹腔巨噬细胞、M2样和M1样腹腔巨噬细胞均表达除P2X5受体外的其他P2X家族受体,且表达强度中等。各受体的表达随白血病发展变化而有所不同,其中腹腔巨噬细胞中P2X1和P2X7受体的表达逐渐提高,P2X2和P2X3受体表达在白血病晚期显著降低,P2X4受体表达仅在中期有所降低,P2X6受体表达无显著变化。在白血病发展中期M2样和M1样腹腔巨噬细胞间P2X家族受体表达亦存在差异,其中M2样巨噬细胞P2X1受体的表达水平显著低于Mt样巨噬细胞,而M2样巨噬细胞P2X7受体表达水平显著高于M1样巨噬细胞,提示P2x家族受体表达与腹腔巨噬细胞活化状态相关。结论：白血病小鼠腹腔巨噬细胞P2x家族受体表达与白血病进程和巨噬细胞活化状态相关。本研究为深入探究巨噬细胞在白血病发展中的作用机制奠定基础。     

肝巨噬细胞在急性胰腺炎并发肝损伤中的作用及机制研究进展

急性胰腺炎（acute pancreatitis, AP）是一种发病急且致死率较高的消化科急腹症,主要发病机制为多种因素诱发的胰腺组织损伤和炎症细胞过度活化。由于其解剖学特点,肝脏是发生AP时最早受到高浓度胰蛋白酶和炎症介质攻击的胰腺外器官。肝巨噬细胞已被证实是AP相关炎性因子的主要来源,针对肝巨噬细胞的靶向干预可能成为阻断AP并发肝损伤/衰竭、促进组织修复、减轻全身症状的关键。该文总结了发生AP时肝巨噬细胞的病理作用以及靶向干预,为解析AP的发病机制及缓解并发肝损伤提供新的思路与方法。     

持续性游泳对妊娠小鼠巨噬细胞功能的影响

目的观察持续性游泳对妊娠期小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮(NO)水平及巨噬细胞功能的变化。方法成年昆明种妊娠期小鼠分别进行持续时间不同的游泳训练,采用Griess试剂检测各组巨噬细胞产生NO的水平,姬姆萨染色法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结果各试验组孕鼠腹腔巨噬细胞产生NO水平及吞噬细胞吞噬功能明显增强,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05),适宜游泳应激可增加巨噬细胞产生NO及增强巨噬细胞吞噬功能。结论妊娠期进行适宜的游泳应激可增强妊娠小鼠的非特异性免疫功能。     

失血性休克诱导小鼠肺组织巨噬细胞TLR4原位表达的变化

目的 复制失血性休克致急性肺损伤(ALI)模型,原位观察其肺组织巨噬细胞TLR4表达的变化及其意义.方法 32只C57BL/6雄性小鼠随机分为两组:NCG组为空白对照组,PCG组为单纯失血性休克组,分别于失血性休克后1、2、4、6 h处死小鼠.观察肺组织病理变化,EMSA检测肺组织核转录因子-κB(NF-κB)活性,ELISA检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,激光共聚焦观察肺巨噬细胞TLR4原位表达的变化.结果 失血性休克诱导的ALI肺组织病理显示,随时间变化肺部损伤逐渐加重,NF-κB活性及TNF-α水平均随时间变化逐渐增加,与NCG组比较差异有统计学意义(P<0.05),原位观察肺巨噬细胞TLR4的表达亦随时间变化逐渐增加.结论 失血性休克诱导小鼠肺部的炎症反应,肺巨噬细胞TLR4的表达随时间变化逐渐增加,调控肺巨噬细胞TLR4的表达可能成为早期治疗失血性休克诱导ALI的一个新的途径.     

发酵乳杆菌对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响

乳杆菌是一类大量存活在人体内的正常细菌，属于产乳酸菌的一种。许多产乳酸菌的免疫复活作用已被证实，但乳杆菌属中的发酵乳杆菌对免疫系统的影响则未见报道。本文用碳粒廓清法在体外证实了发酵乳杆菌对单核巨噬细胞吞噬功能的影响，现将结果报道如下。