HPLC-MS/MS法测定人血浆中乌苯美司浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中乌苯美司浓度。方法采用API3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(50mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70∶30∶0.05,V/V/V),流速为0.2mL/min,格拉司琼作为内标。样品经过固相萃取后浓缩进样,多反应离子检测模式,正离子扫描,离子源为ESI源。结果检测乌苯美司的线性范围为0.4～4000ng/mL,最低定量限为0.4ng/mL。批内精密度和批间精密度均小于6%。结论本法具有快速简便、灵敏准确的特点,可满足乌苯美司临床药物浓度测定的需要。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中普罗布考浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术测定人血浆中普罗布考浓度的方法。方法血浆经乙酸乙酯∶二氯甲烷(1∶1,V/V)提取后,采用HPLC-MS/MS测定。以ultimate CN(50mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,乙腈∶水∶氨水=97∶3∶0.05(甲酸调pH=7.20)为流动相进行分离。质谱采用负离子模式检测,以大黄素甲醚为内标,检测离子515.5→236.1(普罗布考)和283.0→239.9(内标)。结果普罗布考在2.5～6000ng/mL范围内线性关系良好,最低定量限为2.5ng/mL,方法回收率在93.02%～104.12%之间,日内、日间精密度分别小于4.67%及5.72%。结论本研究所建立的方法准确、灵敏,可用于普罗布考血药浓度测定及药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中华法林对映异构体的浓度。方法 以乙酸乙酯为萃取剂,采用MS Chiral? MS-OD(50×2.1 mm, 3 μm)为手性柱,流动相为甲醇∶水∶甲酸=85∶15∶0.05,流速为0.18 mL/min。采用负离子模式,电喷雾离子源（ESI）,以萘普生为内标定量,华法林和内标的检测离子对质荷比分别为（m/z）307.2→160.9和（m/z）228.9→185.1。结果 R-华法林批内精密度,其相对标准偏差(RSD)为3.2%~5.8%,批间RSD为2.5%~5.1%;方法回收率(96.1±5.6)%~(105.4±4.7)%,提取回收率80.7%~84.4%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%;S-华法林批内精密度RSD为3.7%~5.2%,批间RSD为3.2%~4.8%;方法回收率(98.3±5.1)%~(103.7±3.8)%,提取回收率81.3%~84.6%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%。最低定量限均为0.1 μg/mL。结论 本文建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于人血浆中华法林对映体的拆分和血药浓度的测定。     

LC-MS/MS法测定人尿液中布南色林及其代谢物的浓度

目的 建立测定人尿液中布南色林及其代谢产物N-去乙基布南色林(布南色林C)的药物质量浓度方法.方法 尿液样品0.5 mL经饱和H2CO3水溶液0.2 mL碱化后用乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)萃取,布南色林与布南色林C分别以布南色林B和布南色林D为内标,采用LC-MS/MS法测定.色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(4.6mmx150mm,3.5 μm),以乙腈-水(体积比87∶13,含0.005 mol·L-1甲酸铵和质量分数0.1％甲酸)为流动相,流速为0.5 mL·min-1,柱温为40℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子监测(SRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 368.2→297.2(布南色林),m/z396.3→297.2(布南色林B),m/z 340.2→297.1(布南色林C),m/z 356.2→313.3(布南色林D).结果 布南色林和布南色林C在10 ～2000ng· L-1(r2 =0.997)范围内线性良好,其平均回收率分别为93.54％和74.50％以上,日内、日间精密度RSD值分别小于8.6％与16.4％.结论 本试验建立的布南色林及布南色林C尿药质量浓度的测定方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床研究中布南色林及其代谢物的药动学研究与治疗药物监测.     

HPLC法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的建立测定人血浆中二甲双胍浓度的方法。方法反相高效液相色谱法,0.15 mL血浆加入内标,再加入饱和氢氧化钠水溶液碱化后,用2 mL正丁醇-正己烷(体积比2∶1)混合物萃取,再用适量质量分数为1%的甲酸反萃浓缩,以乙腈-磷酸二氢钾水溶液[磷酸二氢钾浓度:10 mmol/L,十二烷基磺酸钠(SDS)浓度:6 mmol/L,三乙胺0.12%,磷酸调pH=3.50](体积比30∶70)为流动相,用依利特Kypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)进行分离,检测波长为233 nm,柱温40℃。结果标准曲线的线性范围为10~1000 ng/mL,最低定量限为10 ng/mL。低、中、高3个质量浓度的质控样品的绝对回收率均大于78.0%(n=5),日内RSD均小于5.3%,日间RSD均小于8.7%(n=3)。结论该方法灵敏度高,准确、可靠,可用于二甲双胍药动学和生物等效性的研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中氨溴索浓度

目的建立测定人血浆中盐酸氨溴索浓度的液相色谱-质谱-质谱联用法(HPLC-MS-MS)。方法血浆中加入内标曲马多,经液-液萃取后离心,取上清液吹干,再用甲醇复溶。色谱系统:SYMMETRYTM C18柱(150 mm&#215;3.9 mm,5μm),流动相由20 mmo.ll-1乙酸铵水溶液∶甲醇(10∶90)组成,流速为0.6 ml.min-1。质谱检测方式:多重反应监测(MRM)。用于定量分析的离子对分别为质荷比(m/z)379.0→m/z 263.9(氨溴索)和m/z 264.2→m/z 58.1(内标曲马多)。结果盐酸氨溴索线性范围为0.1~400.0 ng.ml-1,最低检测浓度为0.1 ng.ml-1;标准曲线相关系数r≥0.99。结论HPLC-MS/MS法具有专属、灵敏、准确、操作简单及快速的优点,可以用于测定人血浆氨溴索浓度。     

测定人血浆中利奈唑胺浓度的HPLC-MS/MS法建立

目的：建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中利奈唑胺的血药浓度,为临床合理用药提供参考。方法以替米沙坦为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白进行提取分离,以含0.1%甲酸的1 mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,采用m/z 338.1→m/z 296.3（利奈唑胺）和m/z 515.3→m/z 276.3（替米沙坦,内标）离子对进行扫描。结果利奈唑胺在0.23~46μg/ml线性范围内关系良好,r=0.9993,最低定量限为46 ng/ml,提取回收率为87%~109%,日内、日间精密度的相对标准偏差均在2.5%~8.6%范围内。结论建立的LC-MS/MS方法专属性强,灵敏度高,操作简单,适于临床利奈唑胺血药浓度监测。     

柱前衍生化HPLC-MS/MS法测定人血浆中5-HT、AD和NA方法的建立

目的建立衍生化高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中5-羟色胺（5-HT）、肾上腺素（AD）和去甲肾上腺素（NA）质量浓度。方法采用Ultimate C18 (50 mm×4.6 mm, 5 μm)色谱柱,流动相为乙腈∶水∶甲酸为95∶5∶0.05（V∶V∶V）,流速为0.2 mL/min,柱温为室温。检测方式为多反应离子监测,正离子模式,电喷雾离子源。血浆样品经沉淀蛋白后,在pH 10.5条件下与丹酰氯发生衍生化反应,产物经乙酸乙酯萃取浓集后进样。结果标准曲线线性范围为2.5~200 ng/mL;日内精密度相对标准偏差（RSD）为1.33%~8.13%,日间RSD 2.86%~7.73%,均小于9%;方法回收率95.44%~109.71%,基质效应4.86%~12.81%。结论本法简单、快速,可用于人血浆中5-HT、AD和NA质量浓度测定和研究。     

RPHPLC法测定人血浆中二甲双胍浓度

目的:建立测定人血浆中二甲双胍浓度的反相高效液相色谱法.方法:人血浆标本以盐酸阿替洛尔为内标,酸化后以乙腈沉淀蛋白、二氯甲烷反洗上清液后,取上清液进行色谱分析,以5 mmol/L SDS∶0.04 mol/L KH2PO4∶ CH3OH= 1∶ 1∶1.7为流动相,流速1 ml/min,经Agilent Zorbax SB C18(150×4.6 mm, 5 μm)柱分离,检测波长240 nm.结果:二甲双胍标准曲线范围10～5 000 μg/L,y=0.001 12x+0.012 671 (r =0.999 4), 最低检测限为10 μg/L ,高、中、低3种浓度的日内精密度均<7%,日间精密度均<8%,萃取回收率75.6%～86.6%.结论:该方法简便、快速、准确,可用于人体内二甲双胍药动学研究和临床血药浓度监测.     

LC-MS/MS法测定人血浆中洛伐他汀及其活性代谢物的含量

目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中洛伐他汀及其活性代谢物洛伐他汀酸的浓度.方法 样品用乙酸乙酯∶二氯甲烷(体积比为1∶1)提取浓集后进样,色谱柱为Phenomenex Gemini C18(50×3 mm, 3 μm),流动相为乙腈-水(85∶15).质谱采用ESI离子源MRM模式检测,以辛伐他汀为内标,按内标法定量. 洛伐他汀、洛伐他汀酸和内标的检测离子对分别为质荷比(m/z)427.4→325.4、445.4→343.4和436.4→325.4.结果 洛伐他汀在0.031～64 μg/L范围内线性关系良好(r=0.9987),最低定量限为0.031 μg/L,方法 回收率在96%～102%之间,日内、日间精密度相对标准偏差(RSD)分别小于5.3%及9.3%.结论 本文建立的方法 准确、灵敏,可用于洛伐他汀血药浓度测定及药代动力学研究.     

HPLC-MS/MS测定人血浆中伏立康唑质量浓度及其生物等效性研究

目的 建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中伏立康唑的方法,并进行伏立康唑片生物等效性研究。方法 采用双周期随机交叉自身对照试验设计,48例健康男性受试者分别单次空腹口服两种伏立康唑片200 mg,采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中伏立康唑质量浓度,以WinNonlin?6.1软件计算主要药动学参数,并评价两种伏立康唑片的生物等效性。结果 伏立康唑标准曲线范围均为1~5 000 ng/mL,日内及日间精密度〔相对标准偏差（RSD）〕均小于11%,准确度在100.00%~109.73%之间,以内标基质效应校准后的伏立康唑基质效应RSD小于15%,萃取回收率大于50%,各项稳定性考察结果合格。伏立康唑峰浓度(Cmax)和药-时曲线下面积(AUC0-t、AUC0-∞)的90%置信区间在80.00%~125.00%等效区间之内,受试制剂与参比制剂间达峰时间(Tmax)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 所建立的HPLC-MS/MS方法可用于人血浆中伏立康唑质量浓度的测定,伏立康唑片受试制剂与参比制剂生物等效。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆及组织中盐酸戊乙奎醚浓度

目的 建立用高效液相色谱质谱联用(HPLC-MS/MS)技术测定大鼠血浆、脑组织及肺组织中戊乙奎醚浓度的方法.方法 大鼠血浆、脑组织及肺组织样品中戊乙奎醚及内标苯海拉明经石油醚:乙醚(70:30)提取后,采用HPLC-MS/MS技术进行测定.以Allure C_(18)(50×2.1 mm,5 μm)为色谱柱,以甲醇:5 mmol/L醋酸胺:三乙胺=90:10:0.05(甲酸调pH5.8)为流动相进行分离,检测离子为质荷比(m/z)316.2/128.3(戊乙奎醚),256.3/167.1(内标).结果 标准曲线线性范围为血浆0.391～200 ng/mL,脑组织及肺组织0.391～100 ng/mL.预处理回收率为血浆67.32%～70.80%,肺组织84.99%～89.27%,脑组织76.86%～81.98%;方法 回收率为血浆97.66%～99.97%,肺组织96.55%～101.65%,脑组织95.18%～100.21%;日内精密度RSD分别为:血浆1.94%～2.93%,肺组织1.73%～3.70%,脑组织2.35%～2.79%;日间精密度RSD分别为:血浆3.00%～3.85%,肺组织2.86%～3.94%,脑组织2.77%～5.00%;血浆和组织样品保存于-30℃低温冰箱7、21 d,分别测定浓度以考察稳定性,RSD分别为:血浆1.52%～5.26%,肺组织1.88%～2.93%,脑组织2.22%～3.76%;反复冻融1次和2次测定样品浓度,血浆RSD为0.38%～3.55%,肺组织为2.79%～9.60%,脑组织为1.35%～2.29%.结论 成功建立HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆及组织中戊乙奎醚浓度的方法 ,该法简便、准确、重现性好,可用于盐酸戊乙奎醚药动学和生物利用度研究.     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中烟酸及其代谢物

目的 建立人血浆中烟酸及其代谢物的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定法.方法 血浆样品加乙腈沉淀蛋白,取上清液挥干,用流动相溶解,二氯甲烷反洗后进样分析.使用Genimi C18柱(50×3.00mm,3 μm),柱温35℃,流动相为0.1%乙酸水溶液:甲醇:异丙醇(98:1:1),流速为0.2 mL/min,以正离子MRM模式检测,烟酸、烟酰胺、烟脲酸和内标6-甲基烟酸的检测离子对质荷比(m/z)分别为124.1→80.0、123.1→80.0、181.1→135.0和138.1→92.0.结果 烟酸线性范围为1.25～320 μg/L,烟酰胺和烟脲酸线性范围均为1.25～1280 μg/L,最低检测限均为1.25 μg/L,日内和日间RSD均小于9%,方法回收率为89%～105%.结论 该法具有快速、灵敏、准确、简便等特点,适用于人血浆烟酸浓度测定及药代动力学和生物利用度研究.     

HPLC—MS／MS测定人血浆中文拉法辛的浓度及人体生物等效性

目的研究2种盐酸文拉法辛胶囊的人体生物等效性。方法 24名男性健康志愿者采用随机双交叉试验方案设计,分别口服受试制剂或参比制剂（博乐欣）50 mg,采集36 h内动态血标本;HPLC-MS/MS法测定血浆中文拉法辛的浓度,DAS程序对试验数据进行处理,计算药动学参数和相对生物利用度,判定2种制剂的生物等效性。结果受试制剂和参比制剂的主要药动学参数Cm ax分别为（59.32±17.21）、（60.58±17.42）μg·L^-1,Tm ax分别为（2.08±0.46）、（2.25±0.55）h,T1/2分别为（6.69±1.67）、（6.35±1.69）h,AUC0-36分别为（524.65±227.01）、（528.22±226.57）μg·L^-1.h,AUC0-∞分别为（544.81±246.05）、（546.85±244.62）μg·L^-1.h,2种制剂主要药动学参数经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90%置信区间,表明2种制剂生物等效,受试制剂的人体相对生物利用度为（100.37±10.41）%。结论 2种盐酸文拉法辛胶囊生物等效。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿那曲唑的浓度及生物等效性研究

目的:建立人血浆中阿那曲唑的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)测定方法,并评价两种阿那曲唑片的药动学和人体生物等效性。方法:12名男性健康受试者随机交叉口服阿那曲唑受试制剂和参比制剂各2mg,采用HPLC-MS/MS测定血药浓度,并计算其药动学参数,考察其生物等效性。结果:阿那曲唑的受试制剂与参比制剂Cmax分别为(33.31±7.31)、(32.37±5.71)μg/L,Tmax分别为(1.53,1.02)、(1.72,1.64)h,t1/2分别为(44.26±10.10)、(44.51 9.80)h,AUC0-120分别为(1420.52 324.79)、(1365.49 244.60)μg/h/L,AUC0-分别为(1707.07 508.03)、(1631.89 361.07)μg/h/L。与参比制剂相比,受试制剂的相对生物利用度为(104.7 18.6)%。结论:本方法特异性强,重复性好,灵敏度高,测定结果可靠。阿那曲唑片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

HPLC—MS同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸的浓度

目的 :同时测定人血浆中阿莫西林及克拉维酸的浓度 ,并用本法研究 Augmentin(阿莫西林∶克拉维酸钾 =7∶ 1 )干混悬剂的人体相对生物利用度。方法 :色谱柱为 Kromasil ODS 1 5 0 mm× 4 .6 mm ID,5μm,检测器为四极质谱检测器。内标为头孢羟氨苄 ,血浆样品通过 Microcon YM-1 0超滤膜超滤制备。结果 :阿莫西林、克拉维酸的线性范围分别为 0 .0 4～ 4 0 μg/ ml和 0 .0 2～ 2 μg/ ml,方法的回收率大于 80 %。 2 0名志愿者随机交叉口服单剂量 Augmentin的干混悬剂和分散片后 ,以本法测定其体内血药浓度经时过程。两种制剂的 AUC0→ 8,Cmax,Tmax均无显著性差异。结论 :阿莫西林和克拉维酸血药浓度的同时测定结果表明两种制剂生物等效 ,干混悬剂对分散片两成分的相对生物利用度分别为 1 0 1 .7%和 99.2 %。