以葡萄球菌A蛋白代替羊抗兔IgG应用于免疫组化显示大白鼠垂体的促黄体生成激素细胞

利用人的绒毛膜促性腺激素(HCG)与大白鼠的促黄体素(LH)有交叉反应,我们曾报道过用辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG抗血清作第二抗体,显示大白鼠垂体的促黄体生成激素细胞。为了探讨与其他动物的IgG分子结合,免去制备特异抗体,因此提取了葡萄球菌A蛋白SPA,利用SPA的广谱的第二抗体的特性,在原有工作的基础上试用酶联葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)和单纯的SPA分别代替免疫酶标组织化学间接法中HRP单抗兔     

应用酶标记金葡萄球菌A蛋白在尸检乙脑病毒组织中的免疫定位

金黄色葡萄球菌A蛋白具有与人和多种哺乳动物IgG的Fc段结合的特性,它容易与荧光素、辣根过氧化物酶、铁蛋白、~(125)I和胶体金等结合。Dubois—Dalcq和Falini等以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白用于免疫组化的研究,获得了满意的结果。国内丁宗武等首先成功地将辣根过氧化物酶标记在葡萄球菌蛋白A上,建立了一种新的酶联免疫方法(ELISA)。1984年凌静萍等将酶标记金葡菌A蛋白(HRA—SPA)应用于乙脑与狂犬小鼠脑组织的病毒抗原定位获得敏感性不低于酶标抗体法的结果。本文是将HRA—SPA应用在尸检乙脑病毒     

SPA在淋巴瘤及横纹肌肉瘤免疫技术中的应用

葡萄球菌蛋白-A(SPA),是金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白戍份,具有与人及多种哺乳动物血清中IgG类抗体Fc段结合的特性,每个SPA分子可以结合二个免疫球蛋白分子,而且结合后并不影响IgG的Fab段和抗原作用。SPA由于不受第一抗血清动物种属的限制,本文将其应用于淋巴瘤(7例)横纹肌肉病(4例)免疫PAP法中,     

标记葡萄球菌A蛋白在免疫学中的应用

葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成份。它能与人及多种哺乳动物IgG分子Fc段结合,而不影响该抗体与抗原的反应性。这一特性给免疫学研究提供了新的手段。近年来,将提纯的     

SPA-PAP-ELISA检测斑疹伤寒抗体

<正> 鉴于金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为一种可代替多种第二抗体的广谱免疫制剂,并广为应用,又酶-抗酶抗体可溶性复合物(PAP)用于酶免疫测定中可提高方法的灵敏度,再基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的基本原理及其简便、快速的优点,加之立克次体疾患具人畜共患性,为此,我们建立了以SPA为桥、PAP为检出诊断剂的SPA-PAP-ELISA诊断方法。     

酶联SPA-斑点-ELISA检测体液(痕)ABO血型抗原

金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与人和多种哺乳动物IgG的Fc段非特异性结合,稳定性好,易于长期保存等特点,是一种很好的免疫学试剂。本研究是将SPA用于斑点-ELISA的一种检测技术。基本原理与间接斑点-ELISA相同,只是以酶标记的SPA代替间接法中的酶标记第二抗体。直接、间接斑点-ELISA对20份唾液标本的研究结果表明,三种方法的灵敏度经统计学处理无显著差异,均能检出0.0001μl分泌型唾液的血型抗原。     

用于小鼠及兔源IgG的通用型二抗PA/G-HRP融合蛋白的真核表达及活性检测

目的 制备可与小鼠及兔来源IgG结合的通用型二抗,并用于多种免疫检测实验.方法 全基因合成金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)、链球菌蛋白G(SPG)与辣根过氧化物酶(HRP)融合基因片段,定向克隆至真核表达载体pcDNATM3.1骨架中,瞬时转染入人胚肾HEK293F细胞进行表达.通过SDS-PAGE、Western bl...     

葡萄球菌A蛋白在免疫学技术中的应用(上)

葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal ProteinA,简称SPA)是金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白质,它具有以下特点:(1)能与人及多种哺乳动物血清IgG分子的Fc段发生非特异性结合;(2)SPA-IgG复合物与一般抗原抗体复合物一样,能激活补体系统;(3)抑制IgG调理素对吞噬和杀菌的促进作用;(4)导致离体豚鼠回肠产生类似过敏反应样     

葡萄球菌花环试验检测抗巨噬细胞抗体

<正> 抗巨噬细胞抗体的发现和检测,对进一步研究巨噬细胞(Mφ)及其在自身免疫性疾病过程中的作用具有重要意义,迄今国内尚未见这方面的报道。我们建立的葡萄球菌花环试验,运用葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人和动物IgGFc段结合而成为携带特异抗体的颗粒载体,再与Mφ形成SPA花环的原理,检测抗Mφ抗体。     

抗体—SPA—PAP法在免疫病理检测中的应用

利用葡萄球菌蛋白A(SPA)和许多哺乳动物IgG分子具有亲合性,可以与任何片段IgG分子结合,不受一抗种属特异性限制,只需一套PAP试剂盒就可以对不同种属来源的一抗进行检测,敏感性明显高于SPA-PAP法及PAP法。     

应用酶联SPA结合法测定麻疹IgG抗体

<正> 检测麻疹抗体一般常规采用中和试验或血凝抑制试验。由于前者必须有细胞培养;后者又需用猴红细胞,因此给广泛开展麻疹血清流行病学调查或疫苗免疫后的效果考核带来困难。Shani(1981)报告快速免疫过氧化物酶试验测定麻疹的IgG抗体,具有快速诊断的优越性。我们则以感染麻疹病毒的Vero细胞为抗原,应用酶联葡萄球菌A蛋白(SPA)结合法(简称酶联法)测定人血清中的麻疹IgG抗体,取得满意的结果,为测定麻疹抗体提供敏感而快速的新途径,现报告如下。     

尿IgG固相放免法测定

制葡萄球菌蛋白A(SPA)包被管, 利用其结合IgG特性, 建立了固相尿IgG放射免疫分析法. 在此方法中, 固相SPA既是标记与非标记IgG的特异性竞争结合剂, 同时又作为固相免疫分离剂, 使整个分析过程简单、稳定, 现报道如下: 　　材料和方法 　　1 试剂 　　天然SPA纯品, 上海生物制品研究所产品; IgG标准及标记物, 天津九鼎生物技术公司产品, 用其液相法放免试剂盒作为对照.     

应用FITC-SPA菌体检测人外周血中SmIgG的B淋巴细胞

SPA具有与人IgG的Fc段结合的特性,将荧光素标记在含有SPA的金黄色葡萄球菌菌体上,直接和人的B淋巴细胞混和,FITC-SPA菌体能粘附在SmIgG+的细胞表面,便于计数。我们用该方法共检测正常人、SLE病人、PSS病人等67例的B淋巴细胞标本,同时用FITC-抗IgG作为对照组,两组在统计学上无显著差别(P>0.05)。     

用含A蛋白的葡萄球菌提取人血清IgG的初步探讨

自从1966年Forsgren阐明葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人IgG分子的Fc段结合之后,开拓了其在免疫学中应用的新途径。1972年Hjelm采用IgG-Sepharose亲和层析柱分离SPA以及用SPA-Sepharose层析柱提纯IgG,由此简化了IgG的提纯方法。加之Sjholm证明和SPA结合的IgG可     

葡萄球菌花环试验检测抗巨噬细胞抗体

抗巨噬细胞抗体的发现和检测对进一步研究巨噬细胞(Mφ)及其在自身免疫性疾病过程中的作用具有重要意义。我们建立的葡萄球菌花环试验,是利用葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人及多种哺乳类动物的Ig GFC段结合的特点,制成能吸附特异性抗体的颗粒载体,再与Mφ形成SPA花环,用来检     

HRP-SPA斑点免疫结合法检测棘球蚴抗体

<正> 斑点免疫结合试验检测棘球蚴抗体具有很高的敏感性和良好的特异性。特别是葡萄球菌A蛋白标记的酶免疫检测法应用日见广泛。我们以过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)代替HRP-马抗入免疫球蛋白进行斑点免疫结合试验用于检测棘球蚴抗体,获得满意的结果,现将试验结果报道如下。     

抗原抗体复合物诱导的免疫抑制

抗原抗体复合物和特异性IgG 抗体能通过封闭特异性抗原决定簇反馈地抑制免疫应答。曾认为主要起抑制作用的是抗体的Fc段,即完整的抗体通过Fc 段与B 细胞Fc 受体结合而抑制B 细胞活化。本文报道了抗原抗体复合物对B 细胞活化的抑制作用及去除Fc 段或用金黄色葡萄球菌A 蛋白(SPA)封闭Fc 段后抗体的免疫抑制作用。作者用10%马红细胞(HRC)经尾静脉注射给2～3月龄(AX 5 M)F1染交雌鼠3次,间隔为一周,末次注射后第5天     

血小板抗体的测定——悬液相放射免疫法

<正> 特发性血小板减少性紫癜是由于免疫因素引起,但长期以来缺乏理想的抗体检测方法。本文采用~(125)I标记的葡萄球菌A蛋白(SPA),直接与患者血小板表面的IgG(PA IgG)结合,而后在重力离心的作用下,使血小板穿过比重为1.012的中性油沉积于管底,与反应液分离,测出血小板沉积块所带放射性,从而计算出平均     

用含A蛋白的葡萄球菌去除风疹病人血清中IgG的探讨

本文报导了用含A蛋白(SPA)的葡萄球菌去除血清中IgG,测定风疹IgM抗体水平的初步结果。共处理340份风疹血凝抑制效价在1:40以上的血清,证明该试剂能去除血清中IgG,可作常规应用。所剩余的抗体进一步用2-ME处理,结果表明,确系风疹IgM抗体。     

人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究

目的:检测正常人和SLE患者血清中可溶型FcγRIIb(husFcγRIIb)含量,诱导表达并纯化人可溶性FcγRIIb,检测其与血清中免疫复合物结合力及对B细胞抗体分泌功能的影响。方法:ELISA法检测人血清中可溶型FcγRIIb含量,IPTG诱导含有pET-sFcγRIIb的大肠杆菌BL21,镍琼脂糖磁珠纯化目的蛋白,可溶型FcγRIIb包被ELISA板,ELISA方法检测其与血清中免疫复合物结合能力,免疫磁珠法分选B细胞,分组刺激培养,ELISA检测培养物上清中IgM含量。结果:SLE患者血清中可溶型FcγRIIb浓度低于正常人(P<0.05);诱导表达并纯化获得相对分子质量(Mr)为41 500的重组蛋白;重组可溶型FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,二者孵育后吸光度(A)值随血清中免疫复合物浓度逐渐增高,至受体结合度饱和时达最大;不同刺激条件下B细胞培养10 d,各实验组抗体浓度均高于细胞对照组(P<0.01),SPA组、SPA+husFcγRIIb组抗体浓度无显著差异(P﹥0.05),SPA+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显高于SPA组(P<0.01),SPA+husFcγRIIb+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显低于SPA+IgG型抗人IgM组(P<0.01)、SPA组(P<0.01)和SPA+husFcγRIIb组(P<0.01)。结论:SLE患者血清中可溶性FcγRIIb含量低于正常人,重组人可溶性FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,抑制免疫复合物对B淋巴细胞的激活,减少IgM型抗体的分泌。