重组人血小板型PLA2体外抗菌活性研究

目的观察重组人血小板型磷脂酶A2（PLA2）的体外抗菌活性。方法将不同浓度的重组PLA2与9种细菌在37％共同孵育2h,然后倾注琼脂板,次日记录每一琼脂板上的菌落生成数（CFU）,计算出PLA2杀菌率和PLA2的最低杀菌浓度（MBC）。结果重组人血小板型PLA2对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、炭疽杆菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌等革兰氏阳性（G^＋）菌有较强杀菌作用,作用2h后PLA2的MBC范围为0．015～0．240μg／ml。对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等革兰氏阴性（G^-）菌则需要较高浓度的血小板型PLA2,作用2h后的MBC为30～90μg／ml。结论血小板型PLA2对G^＋菌有较强的杀菌作用,对G^＋菌的杀菌作用较弱。     

苏州大学附属第一医院2010～2011年细菌耐药性监测分析

目的分析苏州大学附属第一医院2010和2011年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法采用Kirby-Bauer(K-B)法对临床分离菌进行药敏试验,结果按CLSI 2010年版标准判断并采用WHONET 5.5软件进行数据分析。结果两年共分离细菌12 991株,其中革兰阳性菌3 100株(24.0%),革兰阴性菌9 891株(76.0%)。MRSA和MRCNS检出率分别为65.3%(581/889)和89.7%(979/1 091),未检测到万古霉素、利奈唑胺耐药株,粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为1.5%和4.3%。2010年大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌的产ESBLs率分别为67.0%、49.0%和30.0%,2011年则分别为66.1%、54.6%和37.6%。肠杆菌科细菌对亚胺培南仍保持较高的敏感率(>96%)。鲍曼不动杆菌的耐药率很高,仅对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低,为36.7%,亚胺培南耐药率>70%。铜绿假单胞菌对阿米卡星耐药率最低,为16.8%,其次是环丙沙星和头孢哌酮/舒巴坦(20.3%和20.8%),对亚胺培南耐药率为39.7%。结论 2010～2011年我院分离的细菌以阴性杆菌为主,细菌多重耐药性严重,万古霉素耐药肠球菌和碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌有增多趋势,应引起重视。     

2005～2007年医院病原菌分布和耐药性分析

目的 分析2005~2007年度本院临床分离的病原菌种类、构成比以及耐药性特点.方法 对临床送检标本按常规进行病原菌分离,采用Vitek-Two和ATB-Express系统对病原菌进行鉴定,采用微量肉汤稀释法测定对相应抗菌药物的最低抑菌浓度值,并根据美国临床实验室标准化研究所的指导原则判定细菌耐药性.结果 各年度均以革兰阴性杆菌为主,感染类型以呼吸道和泌尿道感染最为常见.2006~2007年度,铜绿假单胞菌跃居首位,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌等常见革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的耐药率较低,粪肠球菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌等革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑烷等具有高度的敏感性,白假丝酵母和热带假丝酵母对所试抗真菌药物均保持较高的敏感率.结论 临床感染的病原微生物种类、构成比以及耐药性已发生了较为明显的变化,引起感染的病原菌对常规应用的抗菌药物耐药性日趋严重,耐药率监测与定期通报对临床正确应用抗菌药物具有重要的指导作用.     

2010年我院细菌耐药监测情况分析

目的了解我院2010年临床分离病原菌对常用抗菌药物的耐药性。方法采用回顾性调查分析方法,对2010年1月～12月住院患者送检的标本中分离得到的病原菌进行分析,了解病原菌的耐药性。结果共分离1635株病原菌,其中革兰阳性菌435株（26．7％）,革兰阴性菌1200株（73．4％）。排名前5位的病原菌依次为：大肠埃希菌（20．4％）、不动杆菌属（14．2％）、铜绿假单胞菌（13．6％）、克雷伯菌属（12．8％）、凝固酶阴性葡萄球菌（10．8％）。未检测出耐万古霉素的葡萄球菌,但检测到5株耐万古霉素的屎场球菌;肠杆菌科细菌对亚胺培南耐药率最低：铜绿假单胞菌对阿米卡星、头孢他啶、亚胺培南、头孢哌酮、哌拉西林／他唑巴坦较敏感,对其他抗菌药物耐药率均〉60％：不动杆菌属对亚胺培南、阿米卡星耐药率为39.3％和3S．9％,对其他抗菌药物耐药率〉70％。结论我院细菌耐药状况较为严重,应加强病原学和耐药性监测以促进临床抗菌药物的合理使用和预防医院感染。     

加替沙星与头孢他啶对临床分离革兰阴性致病菌的体外抗菌活性比较

目的观察比较加替沙星对革兰阴性致病菌株的体外抗菌活性。方法用琼脂二倍稀释法测定药物在体外的最低抑菌浓度(MIC)。结果临床分离革兰阴性致病菌对加替沙星和头孢他啶的敏感率分别为72. 3%、75%,耐药率分别为16. 9%、14.2%。经统计学处理两组差异无显著性。结论加替沙星对革兰阴性致病菌的体外抗菌活性较强,和头孢他啶相似,是一种高效的新型抗菌药物。     

肝硬化腹水时细胞因子水平测定的临床应用研究

目的探讨肝硬化腹水及并发自发性细菌性腹膜炎时，血清及腹水中细胞因子水平的变化特点，从而指导临床使用抗生素。方法肝硬化腹水患者常规作腹水检查，以区别渗出性腹水或漏出性腹水，对渗出性腹水患者均作细菌培养＋药敏，所有肝硬化腹水患者均同时作血清及腹水一氧化氮、肿瘤坏死因子、内毒素水平检测。结果肝硬化伴渗出性腹水患者外周血及腹水中NO、TNFa、LPS水平明显高于肝硬化漏出性腹水患者；肝硬化革兰阴性菌感染引起的自发性腹膜炎时，腹水中NO、TNFa、LPS水平显著高于革兰阳性菌感染引起的腹水。结论肝硬化腹水患者血清及腹水中测定NO、TNFa、LPS，有助于鉴别渗出性腹水和漏出性腹水；有助于鉴别自发性腹膜炎是革兰阴性菌或革兰阳性菌感染引起，指导临床用药。     

人工合成多肽抗原检测血清HIV抗体的研究

13种人工合成HIV多肽经ELISA检测发现,CH-10抗原性最强,其次为CH-10a和CH-12a。其余10种抗原性较弱。抗原浓度以80μg/ml为宜。CH-10与Organon试剂盒比较,结果基本相似。初步实验证明合成肽可望替代病毒抗原或重组抗原,用于血清HIV抗体检测.     

注射用磷霉素钠应用于老年人的安全性探讨

注射用磷霉素钠是一种广谱抗生素,对大多数革兰阳性菌和革兰阴性菌均有一定的抗菌作用.为探讨其应用于老年人的安全性,对2002年1月至2005年10月在我院住院的老年患者1 200例应用注射用磷霉素钠(东北制药总厂生产,商品名:复美欣)后发生的不良反应进行回顾性统计分析,现报告如下.     

氧氟沙星的不良反应临床分析

氧氟沙星是一种广谱、高效的抗菌药，不仅有抗革兰阳性菌的活性，而且对葡萄球菌也有很强的抗菌活性，同时还扩大了对革兰阴性菌的抗菌谱。随着临床的广泛应用，出现了各种不良反应，现将笔者收集的40例氧氟沙星注射液引起不良反应病例进行分析，现报道如下。     

Study on Bactericidal Activity of the Polypeptide Derived From N-terminal 11 Amimo Acid Residues of Human Group ⅡA Phospholipase A2

目的 观察衍生自人ⅡA型磷脂酶A2(PLA2)N-端的多肽hPLA2N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应.方法 根据人ⅡA型PLA2 N-端11个氨基酸残基的顺序,合成hPLA2N1-11.将不同浓度的多肽分别与革兰阳性菌和革兰阴性菌在温度为37℃中水浴2 h,取出铺板,置于37℃培养18～24 h,取出并记录每块琼脂板的菌落生成数(CFU),计算杀菌率.结果 hPLA2N1-11对同属革兰阳性(G+)菌的金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、炭疽杆菌的杀菌作用较强;对同属革兰阴性(G-)菌的大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,人ⅡA型PLA2衍生肽虽然只有原分子1/10的大小,但仍具有与ⅡA型PLA2类似的杀菌效应.结论 多肽hPLA2N1-11对革兰阳性菌杀菌作用强,对革兰阴性菌杀菌作用弱,可能具有与ⅡA型PLA2类似的杀菌机制.     

纳洛酮对帕金森病IL-12P40表达影响的实验研究

目的利用动物模型探讨纳洛酮对帕金森病(PD)细胞因子IL-12P40表达的影响。方法30只SD大鼠随机分成3组,每组10只。第一组(PD组)立体定向将6羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)注入右侧黑质制作PD模型,术后每周用阿朴吗啡诱发旋转30min至第4周旋转>6次/min者定为成功的PD模型,第二组(纳洛酮)利用立体定向将纳洛酮注入大鼠的右侧黑质,然后用与第一组相同的方法制作PD模型,第三组注入生理盐水作为对照组。取鼠的术侧中脑黑质利用免疫组化(IH)检测IL-12P40的表达。结果IH检测IL-12P40,与正常对照组比较,PD组显著增加(P<0.01);与PD组比较,纳洛酮组表达显著减少(P<0.01)。结论纳洛酮对PD发病的重要干预机制之一可能是通过影响IL-12P40的表达来实现。     

白细胞介素12基因的体外抗结肠癌效应

目的　构建共表达P35、P4 0二个亚基的逆转录病毒载体 (Rv mIL12 )、建立PA317 mIL12包装细胞系并评估其IL12的生物学活性及经PA317 mIL12作用后淋巴细胞对结肠癌细胞 (C2 6 )的体外杀伤作用。方法　将经PCR扩增mIL12 p35、p4 0获取的 p35和 p4 0双亚基cDNA片段与经NotI及SalI酶切的逆转录病毒载体 (PL P35 P P4 0 SN)DNA在T4噬菌体DNA连接酶作用下进行粘端连接反应。然后将构建的 pGCXEXPN mIL12经电穿孔法转录单嗜性逆转录病毒包装细胞系 (PE5 0 1) ,再以其病毒上清加Polybrene感染PA317,筛选出病毒滴度最高的携有mIL12逆转录病毒载体的包装细胞系 :PA317 mIL12。采用脾淋巴细胞增殖法检测PA317 mIL12的生物学活性。另外 ,将PA317 mIL12、淋巴细胞以及人结肠癌细胞 (LOVO)按不同浓度比体外共同培养 ,采用MTT法检测经PA317 mIL12作用后的淋巴细胞对LOVO的杀伤率。结果　经筛选的携有mIL12逆转录病毒载体包装细胞系PA317 mIL12的上清mIL12浓度达 2 7ng/ ( 10 6cells·4 8h) ,其促脾淋巴细胞增殖的生物学活性也与mIL12标准品活性相近 ,经PA317 mIL12作用后的淋巴细胞体外杀伤试验结果则显示 :随着PA317 mIL12浓度的增高 ,其淋巴细胞对结肠癌细胞杀伤作用也逐渐增强 ,与对照组相比统计学有显著性差异 (P     

IFN、IL-4、IL-12及IL-12P40在子宫内膜异位症的变化

目的 探讨盆腔内子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者IFN、IL-4、IL-12、以及IL-12P40细胞因子平衡与EM发病的相关性。方法 用半定量PCR法和ELISA酶联免疫检测20例EM患者的血及腹腔中的IFN、IL-4、IL-12及IL-12P40细胞因子,并与无子宫内膜异位症患者相比较,以观察上述指标在EM患者血及腹腔液中的变化。结果 1.EM患者血清和腹腔液中IL-12浓度分别为(66.38±12.6)pg/ml和(77.76±14.6)pg/ml,显著低于无EM对照组(84.97±13.7)pg/ml和(106.92±10.7)pg/ml(P均<0.05)。2.EM患者血清中IL-12P40(35.64±10.6)pg/ml,与对照组无显著性差别(P>0.05);其腹腔液中含量为(79.76±12.6)pg/ml,显著高于对照组(40.54±10.0)pg/ml(P<0.05),并与EM的严重程度呈负相关。3.EM组IL-4/IFN-γ比值0.328显著高于对照组(0.07)。结论 EM患者体内IL-12含量降低,IL-12P40含量增高,这可能与EM的发生密切相关的NK细胞功能下降有关。EM患者外周血单核淋巴细胞中IL-4细胞因子升高,在Th1/Th2细胞因子平衡网络中出现Th2细胞的偏移并占优势。     

新的P2Y12抑制剂在冠状动脉疾病中的应用

在新的P2Y12受体拮抗剂中,普拉格雷对于糖尿病、ST段抬高型心肌梗死、冠状动脉支架、近期心血管事件的抗栓治疗方面优于氯吡格雷;对于ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死患者预防主要心血管事件的有效性和安全性方面,替卡格雷均优于氯吡格雷;依诺格雷是一种直接作用、可逆性的P2Y12抑制剂,较氯吡格雷有更好的抗血栓作用,且出血发生率同安慰剂。     

12种抗菌药物体外抗表皮葡萄球菌的活性研究

用微量肉汤稀释法测定从慢性前列腺炎患者标本中分离的４９株表皮葡萄球菌的抗菌活性及β－内酰胺酶。结果显示：美满霉素、白霉素有较强的抗菌作用，ＭＩＣ５０分别为０．２５ｍｇ／Ｌ、１ｍｇ／Ｌ，ＭＩＣ９０分别为２ｍｇ／Ｌ、８ｍｇ／Ｌ。环丙沙星、氧氟沙星抗菌作用次之，ＭＩＣ５０分别为０．５ｍｇ／Ｌ、１ｍｇ／Ｌ，ＭＩＣ９０均为３２ｍｇ／Ｌ。氨苄青霉素、林可霉素、淋必治抗菌作用较弱，ＭＩＣ５０分别为４ｍｇ／Ｌ、８ｍｇ／Ｌ、１６ｍｇ／Ｌ，ＭＩＣ９０分别为３２ｍｇ／Ｌ、６４ｍｇ／Ｌ、３２ｍｇ／Ｌ。表皮葡萄球菌对交沙霉素、阿奇红霉素、头孢拉定、罗红霉素及菌必治有较高抵抗作用，耐药率分别达４２．８６％、５９．１８％、６３．２７％、６７．３５％及７５．５１％。４９株表皮葡萄球菌β－内酰胺酶阳性率为８１．６３％。研究表明表皮葡萄球菌的多重耐药性较多见，临床医师应根据药敏结果，选用有效的抗生素以控制表皮葡萄球菌的机会感染，防止耐药菌株产生     

重组人IL－12对体外培养的绒癌细胞活性的影响

目的：探讨重组人白细胞介素-12（IL-12）作用不同时间对绒毛膜癌JEG-3细胞活性的影响。方法：人绒毛膜癌JEG-3细胞经体外培养后,分别给予不同作用时间的5 ng/mL IL-12进行诱导,四甲基氮唑（MTT）比色法检测细胞活力的变化。结果：绒癌JEG-3细胞对IL-12的诱导作用表现为良好的时间效应。5 ng/mL IL-12作用与绒癌JEG-3细胞24h后,细胞生长抑制作用相对增加,并呈现时间依赖性（P〈0.01）。结论：外源性IL-12能够抑制绒毛膜癌JEG-3细胞的活性,具有良好的时间效应。     

CXCL12促进人胃癌AGS细胞体外侵袭及其机制研究

目的研究趋化因子CXCL12对人胃癌AGS细胞侵袭性的影响。方法在体外用不同浓度CXCL12处理AGS细胞后,应用Transwell侵袭实验、RT-PCR、明胶酶谱分析法、ELISA法,观察CXCL12对肿瘤体外侵袭能力及金属基质蛋白酶MMP-9活性和VEGF表达的影响。结果CXCL12作用后,人胃癌AGS细胞侵袭能力明显增强,并具一定的量效关系;金属基质蛋白酶MMP-9活性呈剂量依赖性增强,VEGF的分泌增加。结论CXCL12在体外可增加人胃癌AGS细胞的体外侵袭性。     

APP5肽模拟物P165对体外培养大鼠海马神经干细胞增殖和分化的影响

目的 研究一种小分子多肽─APP5肽的模拟物P165对体外培养的大鼠胚胎海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和分化的影响,以期能找到一种可代替神经营养因子的小分子物质,能够促进NSCs的增殖或分化,为将来的临床应用提供理论依据.方法 (1)原代培养SD大鼠胚胎脑海马NSCs; (2)利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的特异性标记物微管相关蛋白2(MAP2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、2,3-环核苷酸-3磷酸二酯酶(CNPase)对培养的NSCs进行鉴定;(3)将培养的NSCs分为对照组、血清组、APP5肽反序列组和P165组, 观察各组细胞形态的变化;(4)将培养的NSCs分为对照组、APP5肽反序列组和P165组,利用细胞计数,测定干细胞克隆形成率、干细胞克隆形成大小的方法分析P165对海马NSCs增殖的影响.结果 (1)海马神经干细胞呈神经球聚集生长,BrdU染色阳性;加入血清后神经球周围有细胞呈放射状向四周生长,并带有突起.染色呈MAP2、GFAP或CNPase阳性; (2)海马NSCs加入P165及其反序列后细胞形态上与对照组相比没有明显改变;(3)与对照组相比,加P165后海马NSCs数量明显增加,克隆形成率和克隆形成的直径均有明显的增加, 并有统计学差异.结论 P165能够促进海马NSCs的增殖,但并不促进其分化.     

Effects of coexisting polymorphisms of CYP2C19 and P2Y12 on clopidogrel responsiveness and clinical outcome in patients with acute coronary syndromes undergoing stent-based coronary intervention

Background The CYP2C19 G681A single polymorphism has been proven to affect clopidogrel responsiveness.However,the effect of coexisting polymorphisms of other genes has not yet been reported in the Chin...