不同碘营养对大鼠甲状腺Ⅰ型脱碘酶活性及mRNA水平的影响

目的:观察碘缺乏和不同程度碘过量大鼠甲状腺组织Ⅰ型脱碘酶(D1)mRNA的表达及D1活性的变化。方法:断乳1月龄的Wistar大鼠随机分为6组,即低碘(LI)、正常碘(NI)、5倍(5HI)、10倍(10HI)、50倍(50HI)和100倍(100HI)碘组,饲养3、6和12个月后分三批处死动物。采用RT-PCR方法,对甲状腺组织D1mRNA水平进行检测。同时以125I-rT3作为底物,结合离子交换层析技术,测定甲状腺D1活性。结果:与NI组比较,各月龄大鼠LI组D1mRNA表达呈下降趋势,但无统计学差异,各月龄大鼠HI组D1mRNA表达也均呈下降趋势,其中3月龄大鼠5HI、10HI、50HI组、6月龄大鼠100HI组、12月龄大鼠50HI、100HI组D1mRNA表达均显著低于NI组。与NI组比较,各月龄大鼠LI组D1活性均显著升高,各HI组D1活性随碘摄入量的增加而呈逐渐减低趋势,其中6月龄和12月龄50HI及100HI组D1活性则显著降低。结论:碘缺乏情况下,D1活性明显升高,以促进更多的T4转变为T3,但碘缺乏对D1mRNA的表达未见促进作用。碘过量可明显抑制D1活性,且随碘摄入量的增加,D1活性降低更为明显,碘过量对D1mRNA的表达具有一定的抑制作用。     

碘对环孢霉素A抑制免疫性甲状腺炎拮抗作用

目的研究碘过量对环孢霉素A(Cyclosporin A,CsA)抑制实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)形成的拮抗作用,进一步探讨碘在自身免疫性甲状腺炎发病中的作用。方法给予Lewis大鼠不同碘摄入量,EAT诱发组和EAT+CsA组均用猪Tg进行免疫诱发EAT形成,EAT+CsA组于首次免疫后的第10 d开始腹腔注射CsA,5 mg/(kg.d),非EAT对照组不做任何处理,末次免疫后2周处死各组大鼠并取材。观察大鼠甲状腺组织的病理改变和炎细胞浸润程度,采用放射免疫法检测血清中甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)和T3、T4水平。结果(1)不同碘摄入量的EAT组和EAT+CsA组的大鼠甲状腺组织均有不同程度的炎性细胞浸润,非EAT对照组大鼠甲状腺未见明显炎性细胞浸润。EAT组大鼠甲状腺的炎症反应重于EAT+CsA组,诱发EAT的2组甲状腺的炎症反应随碘摄入量的增加而加重。(2)EAT组和EAT+CsA组的血清中自身抗体TG-Ab和TPO-Ab水平均高于对照组(P<0.05),EAT+CsA组的TG-Ab和TPO-Ab水平均低于EAT组,2组自身抗体水平亦随着碘摄入量的增加有升高趋势。(3)100倍碘水平的各组T4水平下降,各组的血清T3含量比较差异无统计学意义。结论增加碘的摄入量会明显加重EAT的炎症反应,促进EAT的形成和发展;CsA对EAT的形成及甲状腺自身抗体的产生有一定的抑制作用,碘过量可以拮抗CsA的这种作用,且随碘摄入量的增加拮抗效应增强;碘摄入过多可以抑制甲状腺激素的合成和释放。     

碘摄入量对大鼠钠/碘转运体分布及表达影响

目的利用组织芯片分析钠/碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)在不同碘摄入量下的大鼠组织器官的分布及表达。方法 Wistar大鼠随机分为3组,分别给予低碘(LI)、正常碘(NI)和高碘(HI)饮食,饲养3个月测定尿碘及制备不同碘摄入量大鼠组织器官的组织芯片,利用免疫组织化学的方法观察NIS的分布和表达。结果 LI组、HI组与NI组大鼠的尿碘含量中位数分别为1.7,305.8,28 056.5mg/L,LI组、HI组与NI组比较差异均有统计学意义(P0.001);与NI组比较,LI组NIS在甲状腺滤泡上皮细胞基底膜上强表达,而HI组表达较弱;相反,NIS在组肾HI小管上皮细胞基底膜和胞头均有较强表达,而LI组相对较弱表达。结论 NIS不均一性分布于大鼠各组织器官,且碘摄入量可引起甲状腺和肾脏等组织NIS表达量的改变。     

V型狼疮性肾炎患者外周血Th1/Th2因子的变化及意义

目的采用流式细胞小球微阵列术(cytometric Bead Array,CBA)检测V型狼疮性肾炎(LN)患者外周血Th1/Th2细胞因子的表达并探讨其意义。方法用CBA法检测20例V型LN患者和20例正常人血清中Th1(TNFα、IFN-γ)和Th2(IL4和IL5)类细胞因子表达情况。结果 V型LN组Th1类细胞因子TNFα和IFNγ表达均高于正常对照组,而正常对照组中IL4和IL5则高于狼疮肾患者。结论 Th1和Th2类细胞因子平衡/紊乱在狼疮肾患者肾组织损害中可能起一定作用。CBA法检测Th1/Th2细胞因子是一种高效、简便和敏感度高的方法。     

不同碘摄入量对大鼠甲状腺和肝肾组织碘分布影响

目的 研究不同碘摄入量对大鼠甲状腺、肝、肾组织碘含量以及钠碘转运体(NIS)表达的影响.方法 将断乳后1个月的SPF/VAF级健康Wistar大鼠按体重随机分为低碘组(LI,碘摄入量约为0.6μg/d),正常碘组(NI,碘摄入量约为6.0 μg/d),高碘组(HI,碘摄入量约为600.0 μg/d),每组10只,雌雄各半.饲养3个月后,收集尿液,采用过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度法测定尿碘含量.采用碱灰化-砷铈催化分光光度法测定甲状腺、肝脏、肾脏组织碘含量,并采用免疫组化技术检测NIS蛋白的分布与表达.结果 LI、NI、HI组尿碘中位数分别为8.1、344.7、25 404.3 μg/L,尿碘中位数随着饮食中碘含量的增加而增加.LI组三种组织碘含量均低于NI组,HI组均高于NI组(均P＜0.05).LI组肾脏、甲状腺碘含量高于肝脏(P＜0.05),肾脏与甲状腺的碘含量差异无统计学意义(P＞0.05); NI组肝脏、肾脏、甲状腺碘含量依次增加,三者之间差异均具有统计学意义(F=46.443,P＜0.05);HI组甲状腺碘含量低于肾脏、肝脏(P＜0.05),肾脏与肝脏比,碘含量有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).与NI组比较,NIS在LI组甲状腺滤泡上皮细胞基底膜强表达,而在HI组表达较弱;肾脏组织中,HI组肾小管上皮细胞基底膜和胞浆均有较强表达,而LI组表达相对较弱;肝脏组织中,不同组大鼠NIS的表达均不明显.结论 碘摄入量不同时大鼠体内甲状腺、肝脏、肾脏的碘分布存在差异,这与组织中NIS蛋白的表达不同有关.     

自身免疫性甲状腺病Th1/Th2细胞因子平衡的偏离

目的探讨自身免疫性甲状腺病中Graves病和桥本甲状腺炎患者外周血Th1/Th2细胞因子平衡偏离的方向。方法应用酶联免疫吸附法分别检测50例Graves病患者,20例桥本甲状腺炎患者和20例健康献血者外周血γ干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)。以IFN-γ/IL-4作为反映Th1/Th2细胞因子的指标。结果与正常对照组对比,Graves病和桥本甲状腺炎患者外周血IFN-γ无明显变化(P>0.05),IL-4明显下降(P<0.01),而IFN-γ/IL-4比值升高(P<0.05)。结论自身免疫性甲状腺病中Graves病和桥本甲状腺炎外周血Th1/Th2细胞因子平衡显现Th2细胞因子低下型,而Th1/Th2相对升高。     

环孢霉素A对不明原因反复自然流产患者外周血Th1/Th2比例转换的研究

目的 探讨环孢霉素A(CsA)对不明原因反复自然流产(URSA)患者外周血Th1/Th2模式的作用.方法 利用CsA作用反复自然流产患者外周血单核细胞( PBMC)的体外实验模型, 以流式细胞仪分析对Th1/Th2 模式的转化.结果 实验组加入CsA培养72 h后可上调IL-4水平,并下调IFN-γ的表达水平.IFN-γ/ IL -4的比值明显低于对照组, 两者差异有统计学意义(P<0.05).CsA 10 μg /mL组与1 μg/mL组IFN/ IL-4的比值, 差异无统计学意义(P>0.05).结论 CsA有利于调控Th1/Th2模式趋向Th2型偏倚,可使URSA患者外周血有利于妊娠维持的Th2型细胞因子(IL-4)表达水平升高,同时降低不利于妊娠维持的Th1型细胞因子(TNF-γ )的表达.从而诱导母胎免疫耐受,使妊娠成功.     

硫酸铅对大鼠心肌Th1/Th2细胞相关细胞因子的影响

[目的]通过观察硫酸铅对大鼠心肌辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞2(Th2)相关细胞因子的影响,探讨铅对心肌损伤的免疫调节机制,以及铅对心血管系统损伤的可能作用机制. [方法] Wistar大鼠气管滴注硫酸铅,染毒剂量(按体重计)分别为13.5、67.5、337.5 μg/kg,1次/d,连续3d.最后一次染毒24h后,取大鼠心脏,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应测定大鼠心肌组织中Th1和Th2相关转录因子的mRNA水平,使用酶联免疫吸附法测定心肌组织上清液中Th1和Th2相关细胞因子的表达水平,采用免疫组化方法观察Th1和Th2相关细胞因子的蛋白表达水平.[结果]心肌组织上清液中白细胞介素(IL)-4、IL-13和干扰素-γ(IFN-γ)的表达,染毒组与对照组差异有统计学意义;IL-13的表达,高剂量组与低剂量组间差异有统计学意义.Th1和Th2相关转录因子的mRNA表达水平,染毒组与对照组间差异有统计学意义,且高剂量组与低剂量组间差异有统计学意义.左心室中IL-4和IFN-γ的蛋白表达,染毒组与对照组间差异有统计学意义. [结论]进入肺脏的硫酸铅可致心脏出现明显的炎症反应和免疫毒性,Th1和Th2相关细胞因子水平的改变可能是铅导致心肌损伤的机制之一.     

Th1/Th2型细胞因子失衡与自身免疫性甲状腺疾病的关系研究

目的分析血清Th1/Th2型细胞因子水平与抗甲状腺自身抗体的相关性,研究甲状腺Th1/Th2细胞免疫失衡与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发病关系。方法选取21例Graves病(GD)患者、18例桥本甲状腺炎(HT)患者,17例非毒性结节性甲状腺肿(NTNG)患者,20例正常人作为对照进行研究。采用ELISA法检测各组人群血清Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白介素2(IL-2)和Th2型细胞因子白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)的含量,并与血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平进行相关分析。结果GD患者血清IL-4和IL-10水平明显高于HT、NTNG和对照组(P<0.01);而HT患者血清IFN-γ和IL-2水平明显高于GD、NTNG和对照组(P<0.01),IL-4水平明显低于对照组(P<0.05);GD患者血清IL-4和IL-10含量与TRAb水平呈显著正相关(r=0.683,0.579;P<0.05);HT患者血清IFN-γ和IL-2水平与TGAb、TPOAb均呈显著正相关(IFN-γ:r=0.542,0.650;IL-2:r=0.517,0.602;P<0.05)。结论GD患者Th1/Th2细胞免疫平衡偏向以Th2细胞免疫占优势的免疫应答,而HT患者Th1/Th2细胞免疫平衡偏向以Th1细胞免疫占优势的免疫应答。     

肝气郁结证与脾气虚证的Th细胞分化中的相关性实验研究

目的　探讨中医肝脾在T细胞活化中的相关性。方法　应用细胞培养技术和RT -PCR法研究肝郁、脾虚及柴胡疏肝散、四君子汤对应交叉干预后T细胞内IL -4、IFN -r表达的变化。结果　脾虚时IFN -rmRNA表达水平明显低于正常对照组、IL -4rmRNA表达水平明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ;经四君子汤治疗后IFN -rmRNA表达水平上调、IL -4rmRNA表达水平下调恢复正常 (P <0 0 5 ) ;经柴胡疏肝散治疗后IFN -rmRNA、IL -4rmRNA表达水平无明显变化 ;肝郁时IFN -rmRNA表达水平明显高于正常对照组、IL -4mRNA表达水平明显低于正常对照组 (P <0 0 5 ) ;经柴胡疏肝散治疗后IFN -rmRNA表达水平下调、IL -4mRNA表达水平上调恢复正常 ( P <0 0 5 ) ;经四君子汤治疗后IFN -rmRNA、IL -4mRNA表达水平有所恢复 ,但仍低于正常对照组 ( P >0 0 5 )。结论　肝脾两脏在调节TH0细胞功能方面相关     

辅助性T细胞亚群失衡与结核病的关系

目的通过检测结核病患者外周血和局部病灶的辅助性T细胞亚群细胞因子的表达,探讨结核病患者的免疫失衡.方法收集活动性结核病患者20例,其中肺结核15例,淋巴结结核5例;同时选取正常对照组15例.应用流式细胞仪在单个核细胞水平检测结核病患者外周血和局部病灶Th细胞内的细胞因子.结果结核病组20例外周血中Th1细胞较正常对照组普遍偏低(P=0.000),而Th2细胞较正常对照组无显著性差异(P＞0.05).其中5例淋巴结结核患者淋巴结活检标本中的Th1、Th2细胞和正常对照组相比均无显著性差异(P＞0.05),和其外周血相比均有显著性差异(P＜0.05).结论结核病的发生、发展与Th细胞亚群的失衡有密切关系,主要表现为Th1细胞数量低下.结核患者的Th1细胞低下主要表现在外周血,而局部病灶中的Th1细胞并未减少.在外周血Th1细胞低下的同时有Th2细胞的增加.     

新利尿合剂对子痫前期患者Th1/Th2比率的影响

目的:探讨新利尿合剂(多巴胺、酚妥拉明、速尿及硫酸镁)治疗子痫前期的机理。方法:采用流式细胞技术分别测定24例使用新利尿合剂治疗的子痫前期患者(新利尿合剂组)、20例使用硫酸镁治疗的子痫前期患者(硫酸镁组)以及21例正常妊娠妇女(正常妊娠组)Th1、Th2细胞百分比和Th1/Th2比率,同时测量各组受试者血压、肝、肾功能。结果:①新利尿合剂组和硫酸镁组治疗后Th1细胞、Th1/Th2比率均降低(P<0.05),新利尿合剂组较硫酸镁组降低明显(P<0.05),但均未降至正常妊娠状态(P<0.05)。②新利尿合剂组和硫酸镁组治疗后Th2细胞比率无明显变化(P>0.05)。③用药后新利尿合剂组的血压较硫酸镁组有显著下降(P<0.05),肝、肾功能明显好转(P<0.05),但未完全恢复正常妊娠状态(P<0.05)。结论:使用新利尿合剂治疗可以改变Th1细胞与Th1/Th2比率,可以促进子痫前期患者体内Th1/Th2比率趋于平衡,是临床上治疗子痫前期的一种有效、可行的方法。     

胆红素对脐血Th1/Th2功能状态的影响

[目的]探讨胆红素对足月新生儿脐血Th1/Th2（T-helper typel/T-helper type2）功能状态的影响.[方法]收集并分离21例正常足月新生儿脐血单个核细胞（cord blood mononuclear cells,CBMC）,分别置于含有不同浓度胆红素（0、60、90、120 mg/L）的牛血清白蛋白溶液中进行预先孵育,洗涤后经植物血凝素-P（phytohemagglutinin-P,PHA-P）刺激培养48 h,采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测培养上清液中自细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）水平. [结果]①经PHA-P诱生的IFN-γ水平120 mg/L组明显低于60 mg/L组、0mg/L组（Q=38.17、41.95,P＜0.01）,90 mg/L组亦明显低于60 mg/L组、0 mg/L组（Q=35.95、39.73,P＜0.01）,120 mg/L组与90 mg/L组比较,差异无显著性（Q=2.21,P＞0.05）,60 mg/L组低于0 mg/L组,差异有显著性（Q=3.78,P＜0.05）.②各组培养上清液中IL-4产生水平差异无显著性（P＞0.05）.[结论]生理性黄疸状态下胆红素水平≥60 mg/L时可进一步加重新生儿时期的Th1/Th2失衡状态.     

复发性念珠菌性阴道炎与Th1/Th2失衡

外阴阴道念珠菌病是育龄妇女常见的生殖道感染性疾病,目前认为局部Th1和Th2型细胞因子协调作用决定了机体对真菌的易感性.现有的治疗手段包括局部和系统用药,对防止复发作用均有限,免疫治疗有望为复发性外阴阴道念珠菌病的治愈带来希望.     

急性非淋巴细胞白血病Th1/Th2极化改变

目的探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者Th1/Th2极化改变的临床意义。方法采用流式细胞仪检测26例ANLL患者起病时及治疗缓解后外周血CD3 CD8-细胞内IFN-γ和IL-4水平,并与同期28例对照组比较。结果ANLL患者治疗前Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较对照组显著降低(P<0.01),Th2细胞升高(P<0.05),治疗后Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较治疗前显著增高(P<0.01),Th2减低(P<0.05)。结论ANLL的发病可能与Th1/Th2失调有关。     

Th相关细胞因子与乙型、丙型肝炎

乙型、丙型肝炎的发病及转归与其细胞免疫机制有很密切的关系,参与细胞免疫的细胞主要有T淋巴细胞和抗原提呈细胞,它们通过一系列细胞因子和受体的网络实现细胞免疫的调节功能。这些细胞因子与近年发现的Th1/Th2细胞亚型密切相关,细胞因子分泌的变化引起Th1/Th2亚型的转换,对病毒性肝炎的发病和转归起决定性作用。细胞因子分泌异常介导HBV、HCV对组织细胞的损伤,引起病毒清除障碍和疾病慢性化,也为治疗提供新靶点。本文将介绍这些Th1/Th2类细胞相关细胞因子在乙型、丙型肝炎发病机制各个环节中的研究进展。     

子宫内膜息肉患者Th1/Th2细胞因子的血清学研究

目的探讨Th1/Th2细胞因子的变化与子宫内膜息肉(endometrial polyps,EP)的关系。方法回顾性分析2014年9~12月暨南大学附属深圳市宝安区妇幼保健院妇产科收治的45例患者的临床资料,采用流式微球分析法(cytometric bead array,CBA)分别检测25例EP患者(A组)和20例同期行宫腔镜检查未见异常者为对照组(B组),检测比较Th1[代表性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(γ-IFN)、白细胞介素-2(IL-2)]/Th2[代表性细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10)]型细胞因子的表达水平。结果 EP患者TNF-α、γ-IFN、IL-2的表达高于对照组,IL-4、IL-6的表达低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。IL-10的表达略低于对照组,差异无统计学意义(P0.05)。结论 Th1/Th2细胞失衡可能对EP的发生发展有重要作用。     

Th1/Th2细胞因子在子痫前期的表达变化及意义

目的:研究Th1/Th2细胞因子在子痫前期的表达变化,并分析其与子痫前期之间的关系。方法:随机搜集2008年3月～2009年10月住院孕妇共60例,其中20例为正常妊娠妇女(对照组),40例为子痫前期患者(子痫前期组,轻度20例,重度20例),采用ELISA法检测孕妇外周静脉血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平。结果:轻度子痫前期组、重度子痫前期组IFN-γ表达水平高于对照组(P<0.01),重度子痫前期组IFN-γ表达水平高于轻度组(P<0.01);轻度子痫前期组、重度子痫前期组IL-4表达水平低于对照组(P<0.01),重度子痫前期组IL-4表达水平低于轻度组(P<0.01)。IFN-γ与IL-4水平呈负相关(r=-0.74,P<0.05);IFN-γ与胎盘重量呈负相关(r=-0.58,P<0.05);IFN-γ与新生儿体重呈负相关(r=-0.83,P<0.05);IL-4与胎盘重量呈正相关(r=0.78,P<0.05);IL-4与新生儿体重呈正相关(r=0.63,P<0.05)。结论:Th1/Th2细胞因子失衡,可能与子痫前期的发生有关。     

急性颅脑损伤后肺损伤患者血清Th1/Th2细胞因子表达分析

目的 探讨急性颅脑损伤后急性肺损伤(ALI)患者,血清Th1/Th2细胞因子水平改变.方法 设立发生ALI组23例和未发生ALI为对照组53例;用ELISA法检测细胞因子IFN-γ、IL-4的水平.结果 与对照组相比,发生ALI组血清IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显低下,而IL-4浓度则显著高于后者,差异有统计学意义(P＜0.05或0.01).结论 急性颅脑损伤后ALI患者存在Th2类细胞因子优势状态表达.     

糖皮质激素对哮喘患者Th1/Th2类细胞因子水平失衡的影响

目的为了解糖皮质激素对哮喘患者Th1/Th2类细胞因子水平失衡的影响,探讨吸入糖皮质激素治疗哮喘的机制.方法取外周血,用ELISA法检测患者治疗前后和对照组血浆IL-4(白介素-4)、IL-12(白介素-12)、IgE的水平,并对统计结果进行统计分析.结果哮喘组治疗后较治疗前血浆IL-4、IgE和PEF(峰值呼气流速)变异率均下降(P＜0.05 );IL-12的浓度升高(P＜0.05).哮喘组治疗前血浆IL-4、IgE和PEF变异率均高于对照组(P＜0.01);IL-12的浓度低于对照组(P＜0.01).经布地奈得(BUD)治疗后,IL-4和IgE浓度仍高于对照组(P＜0.01,P＜0.05);IL-12低于对照组(P＜0.05);PFE变异率与对照组相比无显著性差异.经相关分析IL-4同IgE和 PEF变异率呈正相关(r=0.64,r=0.52;P＜0.05,P＜0.05);IL-12同IgE和PEF变异率呈负相关(r=-0.61,r=-0.49;P＜0.05,P＜0.05 );IL-4 同IL-12呈负相关(r=-0.86,P＜0.01).结论糖皮质激素治疗哮喘的机制可能是抑制TH2类细胞因子的过度分泌,调节TH亚群功能失衡.