瘦素基因启动子区G-2548A多态性与脑梗死和腹型肥胖关系

目的探讨中国青岛地区汉族人群瘦素基因启动子区G-2548A多态性与腹型肥胖和脑梗死的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法,对216例脑梗死病人和182例健康者（对照组）的瘦素基因启动子区G-2548A位点进行多态性分析;根据腹围将两组均分为腹型肥胖组和非腹型肥胖组。结果所有受检者的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。脑梗死组GG基因型频率显著高于对照组（χ2=62.574,P〈0.001）,G等位基因频率显著高于对照组（χ2=29.173,P〈0.001）。GG基因型人群患脑梗死的风险是GA＋AA基因型的2.494倍（OR=2.494,95%CI=1.344-4.631）,GG基因型人群空腹血浆瘦素水平高于GA＋AA基因型（t=6.924,P〈0.001）。腹型肥胖者的基因型分布和等位基因频率与非腹型肥胖者相比差异无显著性（P〉0.05）。结论瘦素基因启动子区G-2548A多态性可能与脑梗死的易感性有关,G等位基因可能是脑梗死的遗传易感因素,瘦素基因启动子区G-2548A的多态性与腹型肥胖无相关性。     

TNF-α 基因多态性与睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压的关系

目的 探讨TNF-α 基因多态性与阻塞性睡眠呼吸低通气暂停综合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS） 合并高血压的关系。方法 2009 - 2012 年于本院行多导睡眠检查,结果为重度OSAHS 的300 例男性患者,其中OSAHS 伴高血压者145 例,并随机抽取100 例健康男性对照,采用基因测序的方法,检测TNF-α 启动区基因-308G ＞A 和-863C ＞ A 的基因多态性。采用R×C 列联表χ 2 检验统计OSAHS 伴高血压组、单纯OSAHS 组以及健康对照组之间TNF-α 基因多态性的关系。结果 OSAHS 合并高血压组TNF-α-308GA 型基因频率分布明显降低,为4.1%,而单纯OSAHS 组和健康对照组GA 型基因所占比例增高,分别为11.6% 和12.0%。TNF-α-863 基因类型以CC 型为主,各组之间的基因频率分布差异无统计学意义。结论 TNF-α-308GA 型基因可能通过减少TNF-α 表达而对OSAHS 合并高血压具有保护作用,TNF-α-308GA 型与OSAHS 伴高血压存在一定关联。     

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与西南地区汉族人群阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的关系

目的探讨西南地区汉族人群瘦素受体基因Gln223Arg多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)之间的关系。方法选取西南地区汉族人群215例(其中OSAHS组116例,健康对照组99例);用聚合酶链反应(PCR)分析研究对象瘦素受体基因Gln223Arg多态性;双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定瘦素(LEP)、真胰岛素(TI),同时测定体重指数(BMI)、颈围(NC)、腰围(WC)。结果 OSAHS组116例中,瘦素受体基因Gln223Arg多态性的GG、AA、GA的基因型频率表达分别为0.854、0.017、0.129,G等位基因频率为0.918;A等位基因频率为0.082。对照组中,瘦素受体基因Gln223Arg多态性的GG、AA、GA的基因型频率表达分别为0.840、0.020、0.14;G等位基因频率为0.90;A等位基因频率为0.10。两组基因型频率比较差异无统计学意义(X~2=0.784,P0.05)。Gln223Arg基因多态性的GG基因型OSAHS患者与(GA+AA)基因型OSAHS患者BMI、WC、NC比较差异有统计学意义(均P0.05)。对照组及轻、中、重度OSAHS组血清LEP、TI水平逐渐升高,各组间比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论瘦素受体基因型Gln223Arg多态性可能参与肥胖的发生,但与西南地区汉族人群OSAHS的发病无关;OSAHS患者Gln223Arg多态性与LEP、TI无关。OSAHS患者存在高瘦素血症、高胰岛素血症。     

IL-6和IL-10基因多态性与睡眠呼吸暂停综合征合并高血压的关系

目的：探讨IL-6和IL-10基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea hypoventilation syndrom, OSAHS）合并高血压的关系。方法选择2006-2012年于本院行多导睡眠检查为重度OSAHS的男性患者300例,其中合并高血压者145例,单纯OSAHS155例,同时随机抽取100例健康男性为对照组,采用基因测序的方法,检测IL-6启动区基因-572C＞G和-174C＞A,以及IL-10启动区基因-592A＞C和-1082C＞A的基因多态性。比较OSAHS伴高血压组、单纯OSAHS组以及健康对照组之间IL-6和IL-10基因多态性的关系。结果 IL-6-572的GG型基因在OSAHS合并高血压组比例增高,为11.0%,而单纯OSAHS组为4.1%;IL-6-174的CG型基因在OSAHS合并高血压组明显增高,为6.2%,而单纯OSAHS组为0.6%;IL-6-174的C等位基因频率在OSAHS合并高血压组也明显增高,为3.1%,而单纯OSAHS组为0.3%;IL-10-1082的AG型基因在OSAHS合并高血压组明显增高,为20.7%,而单纯OSAHS组为11.0%;IL-10-1082的G等位基因频率也明显增高,为10.4%,而单纯OSAHS组为5.5%;IL-10-592A/C的基因类型在各组之间的基因频率分布差异无统计学意义。结论 IL-6-572GG型基因、IL-6-174CG型基因和IL-10-1082AG型基因可能参与OSAHS相关高血压的发病。     

RANTES-403G/A、MCP-1-2518A/G基因多态性与呼吸道合胞病毒毛细支气管炎易感性的相关性

目的：探讨调节激活正常T细胞表达、分泌的细胞因子（RANTES）-403G/A、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）-2518A/G基因多态性与呼吸道合胞病毒（RSV）毛细支气管炎易感性的相关性。方法：应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测150例RSV毛细支气管炎患儿和120例正常儿童上述位点单核苷酸多态性（SNPs）。结果：病例组RANTES-403G/A基因型和等位基因型频率分别为GG20.7%、GA63.3%、AA16.0%、G52.3%、A47.7%,对照组为GG37.5%、GA46.7%、AA15.8%、G60.8%、A39.2%,两组基因型频率差异有显著性（P〈0.05）;病例组A等位基因频率高于对照组（P〈0.05）,与G等位基因携带者相比,A等位基因携带者患病风险增加（OR=1.415,P〈0.05）。两组MCP-1-2518基因型和等位基因频率差异无显著性（均P〉0.05）。结论：RANTES-403A等位基因与RSV毛细支气管炎易感性相关,其可能是影响发病的一个重要候选基因;未发现MCP-1-2518A/G基因多态性与RSV毛细支气管炎易感性存在关联。     

DAZL基因单核苷酸多态性与男性不育相关性研究

目的探讨常染色体DAZL基因单核苷酸多态性与男性不育的关系。方法采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法检测71例男性不育患者和200例正常对照者DAZL基因单核苷酸多态位点Rs2303591A〉G的基因型,计算基因型频率和等位基因频率,对比分析两组基因频率和基因型频率分布。结果Rs2303591A〉G位点在中国汉族人群中具有多态性,其基因频率与基因型频率分布在病例组和对照组中均符合Hardy-Weinberg平衡,基因型AA、GA和GG的频率在病例组分别为0.155、0.563和0.282,在对照组中分别为0.285、0.550和0.165,该位点的基因型频率在病例组和对照组间的差异均无统计学意义（P〉0.05）,而基因频率差异有统计学意义（P〈0.05）,提示该多态位点与中国汉族人群男性不育无显著相关性。结论DAZL基因Rs2303591A〉G与中国汉族人群男性不育易感性没有显著相关性。     

乙醛脱氢酶2基因多态性与脑梗死相关性研究

目的探讨乙醛脱氢酶2（ALDH2）基因多态性与脑梗死的相关性。方法以156例经MRI确诊的脑梗死患者为脑梗死组,以同期MRI排除脑梗死诊断的160例患者为对照组,取外周血标本提取DNA,应用聚合酶链式反应技术扩增目的基因片段,分析ALDH2基因型与脑梗死的关系。结果单因素分析,AA基因型脑梗死的危险性是GG基因型的4．13倍（P〈0．01）。多元Logistic回归分析,A等位基因脑梗死的危险型是G等位基因的2．35倍（P〈0．01）。结论ALDH2基因G487A多态性与脑梗死的发病有关,A等位基因增加脑梗死的危险性。     

金属硫蛋白基因G-201A多态性在2型糖尿病及原发性高血压的分布差异性

［摘要］目的　探讨金属硫蛋白（metallotionein,MT）基因家族中的MT4基因 G-201A位点单核苷酸多态性（SNPs）在2型糖尿病及原发性高血压的分布差异性．方法　选取2型糖尿病患者324例,原发性高血压患者301例,正常对照者301例．应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测MT4基因 G-201A位点的基因多态性． 结果 （1）2型糖尿病324例、原发性高血压301例、正常对照者301例中MT4 G-201A基因型GG、GA、AA的频率分别为39.5%、46.6%、13.9%;42.2%、48.5%、9.3%;42.5%、51.5%、6.0%;基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）;（2）MT4 G-201A多态性:3组间基因型及等位基因（G和A）频率分布差异有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组和正常组比较分布差异无统计学意义（P＞0.05）;2型糖尿病组和正常组比较分布均差异有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组与2型糖尿病组比较,基因型及等位基因均差异无统计学意义（P＞0.05）;（3）男性MT4G-201A多态性:3组间基因型及等位基因频率分布差异有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组与2型糖尿病组比较,基因型及等位基因均无统计学意义;女性MT4 G-201A多态性:3组间基因型及等位基因频率分布,有统计学意义（P＜0.05）,2型糖尿病组和正常对照组比较分布均有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组与2型糖尿病组比较,等位基因频率无统计学意义（P＞0.05）．结论 （1）MT基因G-210A多态性与2型糖尿病相关,与原发性高血压无相关性;（2）女性2型糖尿病MT基因G-210A多态性基因型分布与正常不同,但与高血压无异;男性则无此差异.     

宁夏汉族群体Calpain-10基因SNP43、SNP19的分布特征

目的研究CAPN-10基因SNP43、SNP19在宁夏汉族群体中的基因型频率和等位基因频率分布特征。方法应用PCR-RFLP技术,对132例宁夏汉族人群CAPN-10基因SNP43、SNP19分布进行检测。结果宁夏汉族人群中CAPN-10 SNP43GG、GA、AA基因型频率分别为71.97%、24.24%和3.79%,G、A等位基因频率分别为84.09%和15.91%,GG基因型频率和G等位基因频率与北京、天津和云南汉族群体相近（P〉0.05）,低于辽宁、湖北和上海汉族群体,差异具有统计学意义（P〈0.01）。SNP19 11、12、22基因型频率分别为18.94%、43.18%和37.88%,1、2等位基因频率分别为40.53%和59.47%,11基因型频率和1等位基因频率与与北京、上海汉族群体相近,差异无统计学意义（P〉0.05）。与国外群体比较,中国人SNP43GG基因型频率和G等位基因频率低于亚洲的日本、韩国人群,高于欧洲高加索人及南美洲的智利和墨西哥人,差异具有统计学意义（P〈0.01）,不同国家人群SNP19位点11基因型频率和1等位基因频率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论不同种族和地域人群CAPN-10基因SNP43基因型频率和等位基因频率分布不同,具有其特有的群体遗传学特征。     

雌激素代谢酶CYP17、COMT基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症易感性的关系

目的探讨参与雌激素合成和代谢的CYP17和COMT基因多态性与成都地区妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）发病的关系。方法应用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术,对100例ICP患者和100名正常对照孕妇CYPl7基因启动予区（T．C）多态和COMT基因外显子4密码子158（G—A）多态性进行分析。结果①两组均存在CYP17基因T．c多态,但两组基因型TF、TC、CC频率和等位基因T、c频率的比较差异均无统计学意义（P〉0．05）;②两组均存在COMT基因G．A多态,但两组基因型GG、GA、AA频率和等位基因G、A频率的比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论CYP17和COMT基因单核苷酸多态性与成都地区ICP发病风险无相关性。     

醛脱氢酶超家族研究进展

醛类物质在体内是高度活跃的一类分子,体内多种酶系统参与它们的代谢,其中最重要的酶之一就是醛脱氢酶(ALDH)超家族,该家族由一系列催化醛类物质氧化的NAD(P)+依赖的酶组成.该文综述了目前已知的人ALDH超家族各成员的研究进展,对其病理生理意义作了较为详细的阐述,将为比较人ALDH家族各成员的功能以及ALDH家族在肿瘤发生和发展过程中的作用提供有用的信息.     

高效毛细管电泳法测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量

目的测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量。方法以苯甲酸为内标,用高效毛细管电泳法（HPCE）测定了香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量。电泳分离条件未涂层毛细管27cm×75μm,运行缓冲液20mmol/L硼砂-3mmol/Lβ-CD（pH9.0）,高压进样5s,操作电压6kV（+）→（-）,柱上检测209nm,柱温25℃。结果丹参素的线性范围为4.06～48.72μg/ml,相关系数为0.9994;原儿茶醛的线性范围为3.59～43.08μg/ml,相关系数为0.9978。结论HPCE可以用于香丹注射液的定量分析。     

赫哲族人乙醛脱氢酶2基因型分布及其与饮酒习惯的关系

目的 研究乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性在赫哲族人群中的分布频率及其与饮酒习惯的关系.方法 在赫哲族聚居地选择101个赫哲族样本进行流行病学调查,并采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测研究对象的ALDH2基因型.结果 ALDH2基因变异型等位基因(GA/AA)在赫哲族人中的分布频率为24.8%,ALDH12突变等位基因携带者与ALDH2野生等位基因携带者之间饮酒频率和每次饮酒量间无显著性差异.结论 1/4的赫哲族人ALDH2酶的活性缺乏.赫哲族人的饮酒习惯与ALDH2基因型分布无明显的相关关系.     

哮喘豚鼠血浆丙二醛变化及糖皮质激素的干预作用

目的　了解豚鼠哮喘发作时脂质过氧化物 (LPO)的变化及糖皮质激素对其影响 ,以探讨发病机理 ,并为治疗提供参考依据。方法　制作豚鼠哮喘模型 ,检测哮喘发作及激素干预后不同时间点 (1、2 4h)LPO代谢产物丙二醛 (MDA)、血淋巴细胞 (LYM)水平及两者的相关性。结果　MDA含量在哮喘发作后 1h上升至 (5 .36± 0 .37)nmol L ,2 4h时为 (6 .0 8± 0 .70 )nmol L ,且有时间依存性 ;激素在哮喘发作早期 (1h)对MDA即有抑制作用 (4 .5 9± 0 .6 8)nmol L ,对后期 (2 4h)影响较小 (5 .31± 0 .5 0 )nmol L ;MDA的变化与LYM呈显著正相关 (r=0 .92 )。结论　哮喘发作时氧自由基释放增多 ,淋巴细胞参与相应反应 ,糖皮质激素对哮喘早期有较强干预作用。     

女性生殖系统恶性肿瘤患者血中SOD和MDA含量的测定及评价

目的 探讨女性生殖系统恶性肿瘤血中ＳＯＤ、ＭＤＡ含量之间的关系。方法 采用分光光度法测定患者与对照组血中ＳＯＤ、ＭＤＡ水平，并进行比较。结果 恶性肿瘤组血中ＳＯＤ含量明显低于良性肿瘤组与对照组；ＭＤＡ含量明显高于良性肿瘤组与对照组。结论 ＳＯＤ和ＭＤＡ含量测定对诊断妇科恶性肿瘤及判断预后有一定价值。     

酒精代谢关键酶乙醛脱氢酶2基因分型方法研究进展

乙醛脱氢酶2是催化酒精代谢中间产物乙醛氧化分解的关键酶,其基因ALDH2存在一个重要的功能性多态位点Glu487 Lys,突变型等位基因记为ALDH2 ＊2.中国人群有较高频率的个体携带ALDH2＊2,其乙醛脱氢酶2活性极低或者缺失,饮酒后容易造成致毒、致癌的乙醛滞留.检测ALDH2基因型,能够指导人们根据自己的基因型正确饮酒,减少酒精相关性疾病的发生.本文介绍几种乙醛脱氢酶2基因分型方法.     

高效液相色谱法测定5种不同产地丹参中丹参素和原儿茶醛含量

目的 :测定 5种产地丹参中丹参素、原儿茶醛的含量。方法 :采用高效液相色谱法 ,Kro masil分析柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm ;流动相 :甲醇 10g/L冰醋酸 2 0 80 ;紫外检测波长 :2 80nm ;流速 :1.0ml/min。结果 :丹参素在 4 .2～ 33.6 μg/ml,原儿茶醛在 0 .36～ 1.80 μg/ml范围内线性关系良好 ,丹参素和原儿茶醛最低检测限分别为 10 .5ng和 0 .6ng ,回收率分别为 99.36 % (RSD为 1.2 6 % )和 97.5 4% (RSD为 0 .81% )。结论 :该方法简便、灵敏、准确 ,样品处理简便易行 ,在考察评价丹参药材质量上有实用价值。不同产地的丹参 ,其丹参素和原儿茶醛含量有一定差异。     

ALDH2在高氧引起的肺泡上皮细胞损伤中的作用

目的探讨线粒体乙醛脱氢酶2（mitochondrialaldehydedehydrogenase2,AI．DH2）在高氧引起肺泡上皮细胞损伤中的作用。方法采用pcDNA3．1ALDH2转染A549细胞增加ALDH2的表达,采用ALDH2siRNA转染A549细胞抑制ALDH2的表达,细胞分组如下：①对照组（A549细胞）,②高ALDH2表达组（A549细胞＋pcDNA3．ALDH2）,③低ALDH2表达组（A549细胞＋ALDH2siRNA）,将3组细胞均置于常氧（95％空气＋5％C02）和高氧（95％O2＋5％C02）中培养72h。ALDH2表达量检测采用Westernblot,ALDH2活性通过在酶标仪上测定A34（）nm下NAD＋转化为NADH的含量变化来得到,细胞脂质过氧化程度检测采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量进行,细胞损伤情况通过检测细胞培养液和细胞内乳酸脱氢酶活力来计算,细胞凋亡检测采用AnnexinVFITC及PI染色后流式细胞术进行,细胞死亡率检测采用台盼蓝染色法。结果转染pcDNA3．1-ALDH2后A549细胞中ALDH2表达显著增多（P〈0．05）,活性显著增强（P〈0．05）,转染ALDH2siRNA后A549细胞中ALDH2的表达显著减少（P〈0．05）,活性显著减弱（P〈0．05）,高氧暴露可显著降低ALDH2的表达及活性（P〈0．05）。转染pcD—NA3．1-ALDH2显著减轻了A549细胞高氧暴露后的脂质过氧化和细胞损伤程度（P〈0．05）,降低了细胞凋亡率及死亡率（P〈0．05）;转染ALDH2siRNA则显著加重了A549细胞高氧暴露后的脂质过氧化和细胞损伤程度（P〈0．05）,增加了细胞凋亡率及死亡率（P〈0．05）。结论ALDH2可以减轻高氧引起的肺泡上皮细胞损伤,其机制可能与ALDH2清除了细胞脂质过氧化产物有关。     

构建新型细胞芯片的初步研究

目的:设计一种全新概念的细胞芯片.方法:将CD3,CD4,CD8抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列,从全血中分离出的单个核细胞与之反应,形成选择性细胞群.将细胞芯片进行扫描电镜观察,台盼蓝染色,瑞氏染色,CD3-Cy5 CD4-FITC CD8-RPE三色荧光染色并观察结果.结果:电镜照片显示所结合淋巴细胞外形完整,细胞膜表面有呈皱折状突起,还可见散射状的细长毛状突起.台盼蓝染色显示活细胞数＞95%;瑞氏染色细胞形态良好,杂交点边缘整齐,背景干净;荧光染色显示特异性良好.结论:本实验能根据细胞表面不同的免疫标志进行细胞分群,可为以后制作大规模、高通量的细胞芯片做准备,并提出了全新意义的细胞芯片模型.     

HPLC法测定血浆中丹参脂质体的原儿茶醛浓度

丹参(Salvia miltiorrhiza)具有活血化瘀、理气开窍,扩张血管与增加冠动脉血流量的作用。其水溶性成分为丹参素,原儿茶醛等。丹参脂质体,临床上用于预防手术病人的肠粘连。为了解该制剂体内吸收、消除情况,我们用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),采用离子抑制技术分离