高压液相色谱法测定安神二号蜜丸和赤芍中芍药甙含量的研究

用高压液相色谱法测定安神二号蜜丸制剂和赤芍中芍药甙的含量，以寻找控制制剂和药材质量的方法。安神二号蜜丸和赤芍饮片经冷浸，温浸，回流，超声处理，芍药甙提取安全，采用ＹＷＧＣ１８不锈钢柱（１５０／４．６／１０），以甲醇／０．０５ｍｏｌ（ｐＨ３．６）磷酸二氢钾（３５：６５）为流动相，在流速０．８ｍｌ／ｍｉｎ，工作压力２２６００ｋＰａ，检测波长２４０ｎｍ的条件下，芍药甙ｔｒ为６．１０ｍｉｎ，单一样本测定时     

反相HPLC法快速测定人血清中抗坏血酸含量

应用ＵｌｔｒａｓｐｈｅｒｅＯｃｔｙｌ柱，建立了快速测定人血清中抗坏血酸含量的反相ＨＰＬＣ法。流动相为醋酸盐缓冲液（ｐＨ５．２５）。电化学检测器用碳膜电极和甘汞参比电极，工作电压＋０．６０Ｖ，灵敏度１００ｎＡ／Ｖ。抗坏血酸的平均回收率为１００．４６％，日内（ｎ＝５）和日间（ｎ＝８）的平均变异系数分别为３．８５％和６．８０％。最低检出浓度为０．１３６μｇ／ｍｌ，线性范围０．１３６μｇ／ｍｌ～１３．６μｇ／ｍｌ（ｎ＝９，ｒ＝０．９９９９）。     

紫外分光光度法测定芸香甙—PVP共沉物含量

采用紫外分光光度法测定芸香甙－ＰＶＰ共沉物的含量。测定滤长为２５６ｎｍ。测定液浓度在３μｇ／ｍｌ￣１８ μ／ｍｌ范围内，浓度（Ｃ）与吸收率（Ａ）呈良好的线性关系，ｒ＝０．９９８３，平均回收率为９９．８３％，ＲＳＤ＝０．１７％（ｎ＝６）。该法简便，样液稳定，赋形剂对测定无干扰。     

中成药中有机氯农药残留量的GC法测定

研究中药制剂中有机氯农药残留量的气相色谱测定方法。采用环己烷提取，去除杂质色素后，经ＯＶ－１７：ＯＶ－２１０柱分离进入电子捕获检测器检测。本法灵敏度高，当六六六浓度在０．０１～０．２０μｇ／ｍｌ，ＤＤＴ浓度０．１～２．０μｇ／ｍｌ内，线性相关，ｒ＝０．９９９７，精密度ＣＶ％＜３．０％，（ｎ＝６）。方法最低检测限可达ｎｇ／ｍｌ（ＰＰｂ级），平均回收率达９５％以上，环己烷溶剂一次提取效率达９０％以上。本法灵敏、快速，检出率高，回收率高。     

高效液相色谱法测定奥美拉唑血浆药物浓度

用反相高效液相色谱法测定人体血浆中奥美拉唑的浓度，采用国产填料（ＹＷＧ－Ｃ１８，１０μｍ）反相色谱柱，１．０％三乙胺甲醇：水（６０：４０，Ｖ：Ｖ）为流动相，心律平为内标，紫外检测液长为３０２ｎｍ，方法回收率分别为９８．０３％（５０ｍｇ／ｍｌ）１０１．５５％（４００ｍｇ／ｍｌ）和１０３．１３％（１０００ｍｇ／ｍｌ），相应变异系数（ＣＶ）分别为２．９６％（ｎ＝３），１．９２％（ｎ＝３）和１．０４％（ｎ     

高效液相色谱法测定奥美拉唑血浆药物浓度

用反相高效液相色谱法测定人体血浆中奥美拉唑的浓度。采用国产填料（ＹＷＧ－Ｃ１８，１０ｕｍ）反相色谱柱，１．０％三乙胺甲醇：水（６０：４０，Ｖ：Ｖ）为流动相，心律平为内标。紫外检测波长为３０２ｎｍ。方法回收率分别为９８．０３％（５０ｎｇ／ｍｌ）、１０１．５５％（４００ｎｇ／ｍｌ）和１０３．１３％（１０００ｎｇ／ｍｌ），相应变异系数（ＣＶ）分别为２．９６％（ｎ＝３）、１．９２％（ｎ＝３）和１．０４％（ｎ＝３）。本方法最小检测量为３ｎｇ，最低检测血药浓度为１０ｎｇ／ｍｌ。至少在５０ｎｇ／ｍｌ至１０００ｎｇ／ｍｌ范围内呈良好线性关系。本方法专一性强、灵敏度高、准确、简便、快速。     

高效液相色谱法测定舒他西林片中氨苄青霉素的血药浓度及药动学研究

采用ＨＰＬＣ－荧光检测法测定舒他西林片中氨苄青霉素的血药浓度，采用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＯＤＳ柱，流动相为磷酸盐缓冲液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝４．０）－乙腈（７８２２，Ｖ／Ｖ），标准曲线范围０．２２～１３．８９μｇ／ｍｌ，ｒ＝０．９９９７，保留时间为７．３ｍｉｎ，回收率大于９５％，日内和日间差小于７％，最低检测浓度为０．２２μｇ／ｍｌ，无内源性杂质干扰。９名受试者的主要药动学参数：Ｔ１／２＝１．０４±０．２２ｈ，Ｃｍａｘ＝１２．３５±３．１３μｇ／ｍｌ，Ｔｍａｘ＝０．８３±０．４５ｈ，ＡＵＣ＝１９．４９±３．４６μｇｈ／ｍｌ。     

α1受体激动对浦肯野纤维延迟后除极的双相效应

用乙酰毒毛旋花子甙元（ＡＳ）２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ中毒诱发绵羊心室浦肯野纤维产生延迟后除极（ＤＡＤ）作为模型，在心得安５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ作用下观察苯肾上腺素（ＰＥ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ、３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ等不同浓度对ＤＡＤ幅值的影响。６０ｍｉｎ持续灌流中，前２０ｍｉｎＤＡＤ幅值分别增加８％、９％和１０％（每一浓度ｎ＝８，Ｐ＜０．０５）；随后４０ｍｉｎ内，ＤＡＤ幅值呈剂量依赖性减小，ＰＥ１０－７ｍｏｌ／Ｌ减值６．９±０．２％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０５），ＰＥ３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ减值１３．９±０．１％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０１），ＰＥ１０－６ｍｏｌ／Ｌ减值１８．６±０．２％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０１）。ＰＥ的作用可被哌唑嗪５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ所阻断，提示ＰＥ作用经α１受体兴奋引起。     

青霉素酶标记抗睾丸酮酶联免疫吸附分析法的研究

作者采用青霉素酶作标记酶，硝酸纤维素膜作免疫吸附载体，青霉素Ｖ－淀粉－碘试剂作底物，建立了一种测定睾九酮的酶联免疫吸附分析法。该法最低检出量为０．５ｎｇ／ｍｌ（２５ｐｇ／孔），其睾丸酮含量在１０￣（－２）～１０￣（－７）ｍｇ／ｍｌ范围内与吸光度值呈线性关系（ｒ＝０．９９６９），日内、日间变异系数（ＣＶ）分别小于３．３％（ｎ＝８）、５．９％（ｎ＝８），与放射免疫分析法检测之间有良好的相关性（ｒ＝０．９３７）     

SPECT快速法测定肾小球滤过率的研究

受检者静脉注射９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ（３～８ｍｃｉ），使用ｒ相机，采集６分钟，利用Ｇａｔｅｓ法计算肾小球滤过率（ＧＦＲ）．重复性实验ｌ０例ＧＦＲ（１１～１０１．９ｍｌ／ｍｉｎ），结果两均数分别是６３．３５ｍｌ／ｍｉｎ，６２．５５ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ＝０．４７，两均数间均无差别，相关性很好，ｒ＝０．９８６，１５例ＧＦＲ与肌酐清除率（ＣＣｒ）比较，ＧＦＲ（８．１～１０１．７ｍｌ／ｍｉｎ）．ＣＣｒ（５．２～９７．４ｍｌ／ｍｉｎ）回归方程是ＣＣｒ＝－４．６３８＋０．９５ＧＦＲ，相关性很好，ｒ＝０．９８３     

运用蛋白质组学研究三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中核基质蛋白的变化

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对慢性粒细胞性白血病细胞系K562细胞核基质蛋白的影响. 方法:用DNA梯度电泳观察As2O3作用后K562细胞凋亡的情况.单向、双向电泳观察As2O3对K562细胞核基质蛋白分布影响. 结果:2.5 μmol/L As2O3处理72 h后,DNA电泳已能检测到发生凋亡的K562细胞,但早在As2O3处理48 h时, 即能观察到核基质蛋白分布的改变,此时尚不能观察到凋亡特征性的DNA片段梯形条带.双向电泳可检测出200多个核基质蛋白点,其中约18个点与As2O3处理相关. 结论:As2O3对K562细胞的影响是时间和剂量依赖性的.双向电泳检测As2O3对K562核基质蛋白分布的影响较DNA梯度电泳检测更为敏感.核基质蛋白成分可能是砷作用的靶蛋白,并且可能是药物发挥抗癌作用的关键点之一.     

K2O对Li2O-SiO2系微晶玻璃低温共烧陶瓷的影响

采用烧结法制备了Li2O SiO2系微晶玻璃低温共烧陶瓷。通过热膨胀系数、DTA、XRD、影像式烧结点试验仪、SEM、体积电阻率等方法,研究了K2O含量对玻璃热力学性质、析晶行为、烧结性能、形貌和电学性能的影响。结果表明：用K2O取代Li2O,可降低玻璃转变温度,减弱析晶倾向,提高热膨胀系数和析晶活化能;K2O有助于玻璃粉体烧结致密,可以控制微晶玻璃晶相组成和含量。电学性能研究结果表明,K2O可显著提高微晶玻璃的电学性能。     

一起由两种罕见血清型副溶血性弧菌引起食物中毒事件分析

目的 分析一起由两种罕见血清型混合感染引起的副溶血性弧菌食物中毒病原学的检测结果,为食物中毒病原学检查途径提供依据。方法 对一起在龙门县人民医院就诊食物中毒事件的9例患者采集其肛拭子样本,参照《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》( GB 4789.7—2013) 等标准进行病原学分析鉴定。结果 本次事件出现临床症状者9例,其中≤20岁2例,20~<40岁1例,40~<60岁4例,≥60岁2例;9份肛拭子样本检出8株副溶血性弧菌,血清分型O2:K28构成比占25.00%(2/8);O8:K21构成比占75.00%(6/8);经PFGE分子分型,2株O2∶K28血清型(VP18171、VP18175)相似度为66.7%;3株O8∶K21血清型(VP18172、VP18173、VP18176)相似度为100.0%,与另外3株O8∶K21血清型(VP18177、VP18174、VP18170)相似度为88.4%~95.2%;药敏试验结果显示,除有1株菌株对氨苄西林、头孢唑林二重耐药、1株菌株对氨苄西林耐药、3株菌株对头孢唑林耐药外,其它菌株对所有测试药物均敏感,无多重耐药现象。结论 此次食物中毒是由O2:K28和O8:K21这两种罕见血清型的副溶血性弧菌混合感染引起的。     

白花蛇舌草氮、磷、钾吸收分配特性研究

目的在大田条件下研究了白花蛇舌草对氮、磷、钾的吸收分配规律。方法定期取样研究干物质积累规律,采用常规测定方法测定植株氮、磷、钾的量。结果白花蛇舌草苗期对氮、磷、钾吸收较少,分枝开花期和结果期吸收量快速增加,成熟期氮、磷吸收减少,钾出现"负吸收"。白花蛇舌草植株对氮素吸收最多、钾次之、磷最少,全生育期植株对氮、磷、钾的吸收比率为1.00:0.16:0.54。苗期和分枝开花期氮、磷、钾主要积累在叶和茎中,其中氮素以叶中分配最多,磷和钾则主要分配在茎中;结果期和成熟期氮、磷、钾多分配在花果和茎中,氮和磷花果中最多,钾则茎中最高。结论白花蛇舌草在苗期对肥料要求不多,可适当少施。分枝开花期和结果期吸收量骤增,要加大施肥用量,结果期对磷肥和钾肥要求较多,应适当补施磷肥和钾肥以满足此期果实生长的需要。     

白血病细胞株耐药与核因子κB蛋白质诱导表达的关系

目的:探讨慢性粒细胞性白血病细胞K562与其耐药株K562/ADR细胞中IκB-α和NF-κB的表达,以及三氧化二砷(As2O3)诱导白血病细胞凋亡的关系.方法:应用不同浓度的As2O3诱导K562和K562/ADR细胞凋亡,以Western-blot免疫印迹电泳检测NF-κB、IκB-α的表达,流式细胞术检测细胞凋亡及分析IκB-α的阳性表达率变化.结果:As2O3诱导K562/ADR细胞凋亡率明显低于K562细胞,当As2O3浓度为1 μmol/L时,两种细胞凋亡率分别是(6.33±1.51)%、(13.25±1.83)%,当As2O3浓度增高到4 μmol/L时,细胞凋亡率则分别为(8.00±1.47)%、(50.56±8.62)%(P＜0.05).在K562细胞胞浆中,IκB-α阳性表达率则由(88.07±0.99)%减少到(49.21±0.95)%(P＜0.01),胞核中P65量逐渐增加;而K562/ADR细胞中无明显变化.结论:As2O3可诱导K562细胞凋亡,伴有IκB-α的降解及NF-κB的激活;K562/ADR细胞NF-κB表达增加,对As2O3诱导的反应无明显改变.     

Proteomic analysis of nuclear matrix proteins during arsenic trioxide induced apoptosis in leukemia K562 cells

Background Arsenic trioxide (As2O3 ) has been identified as a very potent anti-acute leukemic agent. However its role in apoptosis needs to be elucidated. As2O3 interferes with the proliferation and survival of tumor cells via a variety of mechanisms. Drug-target interactions at the level of nuclear matrix (NM) may be critical events in the induction of cell death by As2O3. This study dealt with As2O3 -target interactions at the level of NM in chronic myelogenous leukemia cell line K562 by proteomics. Methods K562 cells were cultured in MEM and treated with different concentrations of As2O3. The nuclear matrix proteins were analyzed by high-resolution two-dimensional gel electrophoresis and computer-assisted image analysis. Results As2O3 significantly inhibited the growth of chronic myelogenous leukemia cell line K562 at low concentrations. While more than 200 protein spots were shared among the nuclear matrices, about 18 distinct spots in the nuclear matrices were found characteristic for As2O3 treated cells. Conclusions: As2O3 induces apoptosis in K562 cells in a dose and time-dependent manner. Our results demonstrated that for the detection of the onset of apoptosis, the alteration in the composition of nuclear matrix proteins was a more sensitive indicator than nucleosomal DNA fragmentation test. These results indicated that As2O3 might be clinically useful in the treatment of chronic myelogenous leukemia. The changes of nuclear matrix proteins in the treated cells can be used as a useful indicator for this treatment.     

钨磷酸盐联合表阿霉素抑制K562细胞增殖

目的：探讨低浓度的钨磷酸盐（K6[P2W18O62]·14H2O）对表阿霉素抑制K562细胞增殖的影响与机制。方法体外培养K562细胞,不同浓度钨磷酸盐和表阿霉素处理后,WST-1还原法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞内表阿霉素的相对含量和活性氧值。结果钨磷酸盐（15μmol/L）与阿霉素（2.5、5和10μmol/L）的联合指数分别为1.62和1.29。结论两者具有协同抗肿瘤效应;钨磷酸盐可促进阿霉素内化入细胞并降低细胞内活性氧水平;钨磷酸盐可能通过促进表阿霉素内化入细胞而发挥协同抗肿瘤的作用。     

三氧化二砷诱导表达带3蛋白膜段结构域K562细胞凋亡作用的研究

目的 探讨三氧化二砷诱导表达带3蛋白膜段结构域K562细胞凋亡的作用。方法 将纯化的表达载体pYDl—mdb3转染K562细胞，Western Blot检定有带3蛋白膜段结构域的表达；通过光学显微镜、DNA电泳和线粒体膜电位的测定，观察三氧化二砷对表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞凋亡的影响。结果 表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞的上述凋亡特征均比未表达带3蛋白的K562细胞明显。结论 表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞对三氧化二砷更敏感。     

三氧化二砷诱导慢性髓系白血病细胞G2/M周期停滞及其机理

目的 研究三氧化二砷对慢性髓系白血病细胞的体外作用特点及其机理。方法 将三氧化二砷与慢性髓性白血病细胞系K562作用后，测定细胞的生长曲线及活性，流式细胞测量术检测细胞凋亡和细胞周期分布的改变；同时，采用RT-PCR方法检测药物作用前后细胞周期相关基因表达的变化。结果 ①三氧化二砷明显抑制K562细胞的生长，其作用呈时间和浓度依赖性；②三氧化二砷诱导K562细胞凋亡的作用较弱，但可明显诱导K562细胞在G2／M期停滞，此效应也呈时间和浓度依赖性；③三氧化二砷作用后，细胞周期抑制基因p57表达明显上调，而细胞周期促进基因cyclinB的表达受到抑制。结论 三氧化二砷能有效抑制慢性髓系白血病细胞的生长，其机理主要为诱导细胞G2／M期周期停滞；该效应与细胞周期相关基因的表达变化有关。     

中国仓鼠肺成纤维细胞和HeLa细胞DNA氧化损伤的自身修复能力与比较

目的:研究不同氧化相关因素对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)和HeLa细胞DNA损伤的自身修复情况.方法:将CHL细胞和HeLa细胞用不同氧化相关因素处理一定时间[CHL细胞:过氧化氢(H2O2)25 min,重铬酸钾(K2Cr2O7)105 min,阿霉素(Dox)75 min;HeLa细胞:H2O2 25 min,K2Cr2O7 105 min],随后立即去毒培养0、0.5、1、2、3 h,以碱性单细胞凝胶电泳技术检测DNA链断裂情况.结果:①CHL细胞经H2O2、K2Cr2O7、Dox作用后引起DNA链断裂,去毒培养1 h链断裂修复明显(P<0.01);去毒培养2～3 h,前两毒剂的损伤组完全修复,而Dox组链断裂仍高于未损伤组;②HeLa细胞经H2O2、K2Cr2O7作用后引起DNA链断裂,去毒培养0.5 h链断裂明显修复(P<0.01),去毒培养1 h则完全修复;③CHL细胞和HeLa细胞损伤后修复的拖尾率与修复时间的回归系数显著不同(P<0.05).结论:两种细胞在氧化性DNA损伤后均迅速启动自身修复,但HeLa细胞比CHL细胞有更快的修复能力;同时这两种细胞由Dox所致损伤修复能力均较H2O2、K2Cr2O7所致的差.