耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌抗菌药物的耐药机制研究

鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii,AB）是自然界中常见的一种非发酵革兰阴性杆菌,广泛存在于医院、自然界等环境中,同时也易积聚在人体的呼吸道、泌尿生殖道、皮肤等重要部位,引发医院获得性肺炎、血流感染、中枢神经系统感染等,其中最常见的属于下呼吸道感染,鲍曼不动杆菌是导致医院发生感染的重要致病菌,易引发医院病情危重、免疫力低下、抵抗力低下患者发生重度感染,甚至在医院重症监护病房、肿瘤病房等区域内造成大面积流行,危害医院患者的身心健康以及生命安全。鲍曼不动杆菌在医院中易留存在患者使用过的枕头、桌子、被子、门把手等部位,甚至留存在医院医务人员的隔离衣、手套等地方,使得鲍曼不动杆菌大面积传播流散。临床上使用抗菌谱广、抗菌活性强的碳青霉烯类抗生素治疗鲍曼不动杆菌引发的感染,碳青霉烯类抗生素对鲍曼不动杆菌有较强的抗菌作用,因此,常被作为首选治疗鲍曼不动杆菌感染的临床药物。近几年临床上碳青霉烯类抗生素药物的广泛使用,导致耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的激增。目前,大环境中鲍曼不动杆菌引发的感染不断严重、恶化,且耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌不断增加,临床治疗面临着巨大的、严峻的挑战。因此,本...     

鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶及流行分布研究

鲍曼不动杆菌是非发酵的革兰阴性细菌,一种机会性感染的病原体,可以引起血流、伤口感染和机械相关性肺炎并能引起院内ICU科室的暴发感染,因其极强的获得耐药的能力成为全球棘手的病原体。近些年碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌(CRAB)和多重耐药的鲍曼不动杆菌(MDRAB)逐渐增加,日渐成为临床上治疗的难题,其耐药机制主要是由于碳青霉烯酶的产生。迄今为止,已在鲍曼不动杆菌中发现多种类型的碳青霉烯酶,本文就主要的碳青霉烯酶和流行分布特点加以概述。     

产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌检测及耐药性分析

目的 了解鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶状况及耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 2011年7-12月南京医科大学第一附属医院住院患者标本中分离出鲍曼不动杆菌361株,对其来源、科室分布及耐药率进行统计分析,药物敏感试验采用K-B法,用改良Hodge试验检测鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的情况.结果 分离出的361株鲍曼不动杆菌中耐亚胺培南和美罗培南菌株328株,改良Hodge试验阳性株278株(84.8％).临床常用的16种抗菌药物中对多粘菌素E耐药率8.4％,米诺环素耐药率47.5％,对其他14种抗生素耐药率均＞60％.结论 鲍曼不动杆菌耐药性升高主要是产碳青霉烯酶;多粘菌素对产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌有较好的抑菌作用.     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因研究

目的 检测鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性,了解耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因、插入序列和Ⅰ类整合酶基因的分布.方法 采用琼脂二倍稀释法检测90株鲍曼不动杆菌对20种β-内酰胺类抗菌药物的最低抑菌浓度,常规PCR检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的4种OXA酶基因、插入序列和Ⅰ类整合酶基因.结果 90株鲍曼不动杆菌对20种β-内酰胺类抗菌药物的耐药性为5.7%～94.2%; 21株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌中,8株OXA-23阳性,且ISAbal同为阳性,4株OXA-51阳性,1株Ⅰ类整合酶基因阳性.结论 临床分离的鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药形势严峻,耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因和ISAbal检出率均很高.     

鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶的研究

目的了解鲍曼不动杆菌耐药谱及碳青霉烯酶的研究。方法用VITEK60型全自动药敏分析系统鉴定药敏系统及纸片扩散法进行药敏实验;PCR扩增和测序分析检测碳青霉烯酶VIM、IMP、OXA-23和OXA-24。结果217株鲍曼不动杆菌中头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,其次是亚胺培南,再者是头孢他啶和哌拉西林/他唑巴坦;头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶的中介率分别是27.6%和19.8%;20株亚胺培南耐药菌中,PCR扩增VIM、IMP和OXA-24均阴性;OXA-23基因扩增显示19株（95%）阳性,PCR产物并经序列分析证实为OXA-23。结论碳青霉烯类抗生素的长期广泛应用使鲍曼不动杆菌的耐药率不断升高;产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要原因。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)作为医院感染中最重要的致病菌之一,因抗生素不合理使用等多个因素使耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(Carbapenem resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)检出率逐年上升,导致交叉耐药或多重耐药。其耐药机制主要包括碳青霉烯酶产生、外膜孔蛋白改变、外排泵活性增强、青霉素结合蛋白位点改变及整合子机制。本文就耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展做一综述,为临床抗感染治疗及新药研制提供参考。     

我院ICU患者耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的感染分布及耐药趋势分析

目的 分析重症监护病房(ICU)患者耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)感染情况及耐药趋势,为ICU的CRAB防控和抗菌药物的选择提供参考依据。方法 回顾性调查我院2016～2019年ICU患者CRAB感染与耐药情况。结果 4年间ICU的CRAB总检出率均>90%,其中综合ICU的CRAB检出率最高(>95%),综合ICU患者CRAB医院感染发生率最高(2.81%),远高于专科ICU。感染部位以下呼吸道为主。分离出的179株CRAB中,定植92株,占比最高(51.40%),综合ICU的CRAB院内感染和社区感染高于各专科ICU,而专科ICU CRAB定植则高于综合ICU,差异有统计学意义(P<0.05)。CRAB对多粘菌素耐药较低(<8%),对多粘菌素、亚胺培南和复方新诺明的耐药率呈现逐年上升趋势。结论 合理谨慎地使用抗菌药物能延缓和减少CRAB的产生,正确判断CRAB感染与定植,针对性地做好ICU的CRAB防控可以从根本上减少ICU的CRAB感染。     

耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药机制的研究

目的：调查和研究南昌地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法：收集南昌大学第二附属医院2012年间临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（CRAB）非重复株。Vitek-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药敏试验,三维试验检测AmpC酶,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应（PCR）扩增耐药基因,并对阳性产物进行双向测序分析,确定其基因型。结果：84株CRAB对临床常用的12种抗菌药物有9种耐药率〉90%,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低（44.0%）,所有菌株均为多重耐药株。三维试验在83株菌（98.8%）中检出AmpC酶,协同试验未检出产金属酶菌株。所有菌株均携带blaOXA-23、blaOXA-51及blaADC基因,1株携带blaOXA-58基因,未检测到blaOXA-24及金属酶基因（blaIMP、blaVIM-2、blaNDM-1及blaSIM-1）;外排泵编码基因adeB、调控基因adeS和adeR的检出率分别为98.8%（83/84）、81.0%（68/84）和67.9%（57/84）;所有菌株均检出外膜蛋白carO基因;69株（82.1%）检测出I类整合酶基因（intI1）,全部菌株携带插入序列ISAba1。结论：南昌地区CRAB耐药性及多重耐药性非常严重,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为产OXA-23型碳青霉烯酶,AmpC酶、外排泵AdeABC、I类整合子和插入序列ISAba1,可能与CRAB的多重耐药性密切相关。     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的对耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌进行基因同源性研究,结合病史资料综合分析其临床流行特点,为加强其医院内感染控制工作提供依据。方法收集该院2008年1月至12月临床分离到的31株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,采用肠杆菌基因间保守重复序列(ERIC)-PCR方法对其进行基因多态性分析;并对患者病史资料进行回顾性调查。结果 31株鲍曼不动杆菌ERIC-PCR方法分为3个基因型:A型1株,B型29株,C型1株;其中B型主要集中分离自本院ICU病房(23株)及其相关科室。结论该院有耐流碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌同一克隆株的流行,以ICU最为严重,并有向外扩散的趋势。应及时采取有效的控制措施,杜绝其院内交叉感染的发生。     

鲍曼不动杆菌的耐药性及产ESBL和碳青霉烯酶分析

目的:分析我院鲍曼不动杆菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和产碳青霉烯酶情况.方法:K-B法进行药物敏感试验,运用表型确证试验检测ESBL,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶.结果:135株鲍曼不动杆菌中,对亚胺培南和关罗培南的耐药率高达72.6％,对阿米卡星、头孢噻肟等10种抗菌药物耐药率为61.5％～100.0％,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为34.8％,其次是左氧氟沙星耐药率为54.1％.其中有22株检出ESBL占16.3％;46株检出碳青霉烯酶占34.1％.结论:我院鲍曼不动杆菌耐药率高,应加强细菌检测和药敏试验,指导临床合理应用抗茵药物.对于临床经验用药建议选用头孢哌酮/舒巴坦;鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药可能与产ESBL和碳青霉烯酶有关.     

血流感染的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的分子机制及临床研究

目的 探讨血流感染的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)耐药机制,分析菌株同源性及患者的临床特征,为CRAB的感染控制提供实验依据。方法 采用Bact/Alert 3D全自动血培养系统进行血培养,细菌鉴定和药敏使用Vitek-2 Compact全自动微生物分析系统。对2010年6月-2016年5月临床血流感染患者分离到的27株碳青霉烯类药物(亚胺培南和/或美罗培南MIC≥16μg/mL)耐药的CRAB复苏菌株,重新采用Vitek-MS质谱分析仪鉴定,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,PCR法检测B类酶基因(blaNDM、blaIMP和blaVIM)和D类酶基因(blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51和blaOXA-58)并测序比对。采用MALDI-TOF分析菌株同源性,并分析患者的临床资料及感染相关信息。结果 血流感染的CRAB绝大多数对常用抗生素耐药。27株CRAB改良Hodge试验均阳性。所有CRAB均未检测到B类酶基因(blaNDM、blaIMP和blaVIM);25株CRAB同时检测到blaOXA-23和blaOXA-51;另2株CRAB则为blaOXA-58阳性。采用Vitek-MS进行同源性分析,细菌分成3大簇(Ⅰ型13株、Ⅱ型12株、Ⅲ型2株)。85.2%(25/27)患者来自重症监护病房或专科的监护病床,原发感染灶以肺部炎症最常见(11例)。所有的患者在血培养出CRAB前的30d内均有抗菌药物使用史,使用频率较高的抗菌药物有：碳青霉烯类、氟喹诺酮类、头霉素类。15例CRAB血流感染患者死亡。结论 厦门地区的CRAB以D类产碳青霉烯酶OXA-23和OXA-51最为多见。CRAB血流感染的原发感染多为肺部炎症。     

耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的分子流行病学研究

目的：了解某医院临床分离耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的菌株同源性及其耐药情况。方法收集2013年1月－2014年12月,某院临床分离到的48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌,采用 K －B 法进行药敏试验,肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应（ERIC －PCR）试验研究上述菌株的基因同源性和科室分布。结果48株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌用 ERIC －PCR 方法可分为三个基因型,A 型2株,B 型43株,C 型3株,其中 B 型为主要的流行株,主要来自于重症监护病房、呼吸科和神经外科。结论耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的多重耐药性严重,该医院内存在耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌的克隆流行,以 ICU 最为严重,应采取有效措施防止和延缓其院内交叉感染的发生和耐药性的进一步增高。     

Characteristics of carbapenem-resistant Acinetobacter spp. other than Acinetobacter baumannii in South Korea

Although many studies have been performed on carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, only a few studies have addressed carbapenem resistance in Acinetobacter spp. other than A. baumannii (non-baumannii Acinetobacter). Amongst 287 Acinetobacter spp. isolates from patients with bacteraemia in a South Korean hospital collected between 2003 and 2010, 160 (55.7%) were non-baumannii Acinetobacter spp. Antimicrobial susceptibility testing was performed and the effect of efflux pump inhibitors was examined. Antimicrobial resistance genes were identified and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) analysis was performed. OprD expression was also evaluated by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), and CarO disruption was investigated by PCR. Seventeen non-baumannii Acinetobacter isolates (10.6%) were resistant to imipenem or meropenem, comprising eight Acinetobacter pittii (or Acinetobacter genomospecies 3), four Acinetobacter nosocomialis (or Acinetobacter genomospecies 13TU), two Acinetobacter genomospecies ‘close to 13TU’, two Acinetobacter bereziniae (or Acinetobacter genomospecies 10) and one Acinetobacter genomospecies 16. bla_IMP-1 genes were detected in seven and two carbapenem-resistant A. pittii and A. bereziniae isolates, respectively. PFGE showed that A. pittii isolates carrying bla_IMP-1 belonged to the same clone. In addition, bla_SIM-1 and bla_PER-1 genes were simultaneously identified in two A. nosocomialis isolates. In four isolates (one each of A. pittii, A. nosocomialis, Acinetobacter genomospecies ‘close to 13TU’ and Acinetobacter genomospecies 16), efflux pumps were implicated in the increase in carbapenem minimum inhibitory concentrations. No decreased expression of OprD was identified in any carbapenem-resistant non-baumannii Acinetobacter isolates, and disruption of carO was also not detected. Clonal spread of carbapenem-resistant A. pittii carrying bla_IMP-1, which contributes to a high resistance rate in this species, was identified. The bla_IMP-1 and bla_SIM-1 genes were first identified in A. bereziniae and A. nosocomialis, respectively. Since no carbapenem resistance mechanisms could be identified, further efforts to find the resistance mechanism should be made.     

3株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌临床株耐药机制的研究

目的 研究鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）对碳青霉烯耐药的分子机制。方法 采用琼脂纸片扩散法（KB法）及微量肉汤法筛选出3株对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌临床株，PCR扩增blaox-23基因和测序、提取外膜蛋白及进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。结果 3株耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌具有多重耐药性；耐药基因PCR扩增和测序证实3株耐药菌均有blaOX-23 基因；其中1株耐药菌AB173的外膜蛋白电泳条带在28．8ku处出现明显缺失，其余2株耐药菌在该条带处与敏感菌相比较无明显差异。结论 本次试验中对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌全部含有blaoxhm基因，其中一株耐药菌还出现了外膜蛋白孔道的缺失可能与其多重耐药性有关。     

安徽地区耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的 研究安徽地区耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)的耐药性、碳青 霉烯酶基因型及分子流行病学研究,为控制医院感染提供理论依据。方法 收集安徽地区43家三级医院2015年9月和2016年9月 CRAB非重复菌株312株,从中挑选出两年内均有CRAB的医院12家,菌株147株。对挑选出的147株CRAB采用琼脂稀释法测定 16种抗菌药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC);PCR扩增碳青霉烯酶耐药基因;采用多位点序列分型技 术(multilocus sequence typing, MLST)进行分子分型,使用eBURST软件分析菌株亲缘性。结果 147株临床分离的CRAB均为多 重耐药菌株,对16种抗菌药物耐药性均较高,其中对替加环素和米诺环素耐药性较低,分别为9.27%和54.26%。147株CRAB中 有134株携带blaOXA-23基因,1株携带blaOXA-24 基因,4株携带blaIMP基因,全部携带blaOXA-51基因,其余碳青霉稀类耐药基因均未检 出。147株CRAB分为26个ST基因型,其中13个ST分型属于CC92克隆群,ST195有48株,为安徽地区最常见ST型,另外新发现 15个ST基因型。结论 本研究中安徽地区147株CRAB对临床常用抗生素耐药性严重,除替加环素和米诺环素外,耐药率均在 76%以上。blaOXA-51是位于染色体上的固有基因,检出率为100%;blaOXA-23 是安徽地区最主要的碳青霉烯酶基因型,检出率为 91.15%。CC92为安徽地区最主要克隆群,与世界流行克隆群一致。本研究所测147株菌株间存在进化间关系,提示可能存在水 平传播趋势。     

重症监护病房耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌6种耐药基因检测

目的 研究医院重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者感染鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因,以指导临床合理用药,控制ICU病房感染暴发流行。方法 采用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定药敏系统对细菌进行鉴定及药敏试验,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法检测6种常见碳青霉烯酶耐药基因(blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-23、blaOXA-24和blaOXA-58)。结果 38株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对15种临床常用青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类及β-内酰胺酶抑制剂类抗菌药物全部耐药,对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素的耐药率分别为92.1%和81.6%,仅对替加环素保持较高敏感性,敏感率为94.7%。38株CRAB中携带blaOXA-23基因共36株(94.7%),未检出blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-24和blaOXA-58基因。结论 我院ICU分离耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物耐药广泛,携带blaOXA-23基因是可能该院ICU耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因。临床医生应合理使用抗菌药物,加强细菌耐药性监测,防止耐药菌株的产生和进一步传播。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药性及OXA碳青霉烯酶检测

目的 分析97株临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药特点及OxA碳青霉烯酶分布.方法 用国际标准平皿二倍稀释法,明确研究菌株的耐药表型;用脉冲场凝胶电泳法,对其进行分型并用PCR的方法,检测OXA碳青霉烯酶.结果 97株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均为多药耐药菌株,其中2株为泛耐药菌株;主要存在7个流行克隆株;有78株菌携带bal-oxa-23基因(80.4%);2株菌携带bal-oxa-58基因(2.1%);未发现携带bal-oxa-24基因的菌株.结论 在我国的亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌中,OXA-23仍为主要分布的碳青霉烯酶.     

Enhanced bacterial killing with colistin/sulbactam combination against carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii

Aims: Polymyxin-based combination therapy is often used to treat carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii (A. baumannii) infections. Although sulbactam is intrinsically active against A. baumannii, few studies have investigated colistin/sulbactam combinations against carbapenem-resistant A. baumannii.Methods: Whole genome sequencing was undertaken on eight carbapenem-resistant (colistin-susceptible) isolates of A. baumannii from Chinese patients. Bacterial killing of colistin and sulbactam, alone and in combination, was examined with checkerboard (all isolates) and static and dynamic time-kill studies (three isolates). In the dynamic studies, antibiotics were administered in various clinically-relevant dosing regimens that mimicked patient pharmacokinetics.Results: The eight isolates consisted of ST195, ST191 and ST208 belonging to clonal complex 208, which is the most epidemic clonal type of A. baumannii globally. All isolates possessed Acinetobacter-derived cephalosporinase (ADC-61 or ADC-78) and seven of eight isolates contained the carbapenem-resistance gene bla_OXA-23. The colistin/sulbactam combination was synergistic against two of eight isolates in checkerboard studies. In time-kill studies, rapid bacterial killing of ca. 3–6 log₁₀ CFU/mL was observed with colistin monotherapy, followed by steady regrowth. Sulbactam monotherapy was generally ineffective. Substantially enhanced bacterial killing was observed with colistin/sulbactam combinations in both static and dynamic models, especially with the higher sulbactam concentration (2 g) and/or longer sulbactam infusion time (2 hours) in the dynamic model.Conclusions: This study was the first to use a pharmacokinetics/pharmacodynamics model to investigate synergistic activity of colistin/sulbactam combinations against A. baumannii. It showed that clinically-relevant dosing regimens of colistin combined with sulbactam may substantially improve bacterial killing of multidrug-resistant and carbapenem-resistant A. baumannii.