西黄丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

目的:研究西黄丸对H₂₂荷瘤小鼠的抑制作用及相关作用机制。方法:采用H₂₂荷瘤小鼠模型分析西黄丸对肿瘤抑制作用;流式细胞仪测定血中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺细胞含量;酶联免疫法测定相关因子含量。网络药理学预测其抑制肝癌的相关通路,并用蛋白免疫印迹法(Western blot)对关键蛋白靶点验证。结果:西黄丸给药组可降低H₂₂荷瘤小鼠的肿瘤重量(P<0.05);升高胸腺指数、脾脏指数(P<0.05),升高CD4⁺/CD8⁺水平(P<0.05);升高IL-2、IFN-γ的水平,降低IL-6、IL-10的水平(P<0.05)。网络药理学筛选得到77个重要有效成分,28个核心靶点,Western blot验证显示,西黄丸对PI3K-Akt-MMP9通路关键蛋白靶点有显著调节作用。结论:西黄丸具有抑制肝癌移植瘤的作用,纠正患瘤小鼠的免疫紊乱,其作用机制与多成分多靶点的整合调节效应有关。     

化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的体内和体外作用(英文)

化合物209是一个新合成的氨基二硫代甲酸酯类化合物,它在体外水平可以抑制肿瘤细胞的增殖,但是化合物209的体内抗肿瘤作用及其抗肿瘤机制并不明确。本文探究了化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的作用并初步探讨了相关机制。体外研究表明,化合物209可以显著抑制HT-29细胞的增殖;体内研究结果表明,化合物209可以显著抑制裸鼠HT-29移植瘤的生长,但是对裸鼠体重和白细胞无影响。流式细胞分析实验结果表明,化合物209可将HT-29细胞阻滞于细胞周期的G1期。同时,化合物209能上调体外培养HT-29细胞中p27,cyclin E,CDK2,cyclin D1和CDK4的表达。在体内瘤组织中上述蛋白表达情况与体外实验结果一致。这些结果说明,化合物209具有较好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞及其相关蛋白的表达变化有关。     

克癌新丸对小鼠肝癌H22移植瘤生长及免疫的影响

目的：探讨克癌新丸对小鼠肝癌H₂₂移植瘤生长的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫的影响。方法：在ICR小鼠右腋皮下注射小鼠肝癌H₂₂细胞,建立小鼠移植性肿瘤模型,通过瘤重计算抑瘤率,观察克癌新丸对H₂₂移植瘤生长的抑制作用;采用腹腔巨噬细胞吞噬试验、淋巴细胞转化试验、Elisa法测定血清细胞因子TNF-α、IL-2、IL-12的水平及利用Western-blot检测瘤组织中IL-2、TNF-α的蛋白表达,观察克癌新丸对H₂₂移植瘤小鼠免疫的影响。结果：在200,400,800 mg· kg^-1时克癌新丸对H₂₂的抑瘤率分别为23.12%,38.71%和48.92%,且能提高H₂₂移植瘤小鼠的胸腺和脾指数;克癌新丸能增强H22移植瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,促进淋巴细胞转化,提高血清细胞因子TNF-α、IL-2、IL-12的水平,上调瘤组织中IL-2、TNF-α的蛋白表达。结论：克癌新丸明显抑制H₂₂移植瘤的生长,具有较强的体内抗肿瘤活,其机制可能与增强移植瘤小鼠的免疫有关。     

七叶皂苷钠对小鼠肝癌H22移植瘤的抗肿瘤作用机制

目的:通过体内模型研探讨七叶皂苷钠对H22小鼠肝癌移植瘤的抗肿瘤作用机制。方法:采用ICR小鼠H22荷瘤肝癌模型观察七叶皂苷钠抗肿瘤作用,采用Western Blot分析肿瘤组织中相关蛋白的表达变化,通过免疫组化分析肿瘤组织中CD31变化,评价微血管密度。结果:1.4和2.8 mg.kg-1七叶皂苷钠对H22的抑瘤率分别为19.2%,40.7%。免疫组化结果显示,七叶皂苷钠能够显著降低肿瘤内部微血管密度,低高剂量组可分别达到44.1%和48.5%。Western Blot证实,七叶皂苷钠能不同程度下调cyclinD1、cdk2、cyclinE、VEGF、p-Akt等蛋白的表达,抑制p65的核转位。结论:七叶皂苷钠有一定的抗肿瘤作用,其机制可能与阻滞细胞周期,抑制血管新生以及干扰信号转导有关。     

4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3,3-二苯基)丙酯盐酸盐在小鼠的抗肿瘤作用

目的 :观察 4 甲基哌嗪 1 二硫代甲酸 (3 氰基 3,3 二苯基 )丙酯盐酸盐 (Hyd)对小鼠移植性肿瘤的抑制作用 ,以确定该化合物的应用前景。方法 :采用小鼠肉瘤 180和肝癌 2 2及人胃癌异种移植裸鼠肿瘤模型 ,观察Hyd对小鼠移植性肿瘤生长的影响。结果 :通过口服灌胃给药 ,不同浓度Hyd对小鼠移植性肉瘤S180 抑制率可达到 4 6 .4 %～ 5 9.6 % (P <0 .0 1～ 0 .0 0 1) ;对小鼠移植性肝癌H2 2 抑制率可达到39 .3%～ 5 1.6 % (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1) ;对裸鼠人胃癌异种移植瘤的抑制率可达到 18.1%～ 5 9.0 %。结论 :Hyd对小鼠移植性肝癌H2 2 和小鼠移植性肉瘤S180 有明显抑制作用 ,对人胃癌裸小鼠异种移植性肿瘤也有明显抑制作用     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人甲状腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制的研究#br#

目的　观察去甲基化制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法　将人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞接种于16只BALB/c雌性裸鼠右前肢腋下。移植瘤模型建立后,用随机数字表法将裸鼠分为2组,实验组按照1 μg/g腹腔注射5-Aza-CdR 200 μL,每2 d给药1次,给药4周。对照组腹腔注射等体积生理盐水。末次给药后处死荷瘤鼠,观察2组裸鼠移植瘤的生长情况,HE染色观察移植瘤的病理形态学改变,采用甲基化特异性PCR检测死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因甲基化程度,采用免疫组化染色与Western blot检测DAPK和DNA甲基转移酶（DNMTs）的蛋白表达水平。结果　经药物干预4周后,实验组移植瘤体积和质量均较对照组明显减少（P＜0.05）,相比对照组,实验组抑瘤率为45.38%。HE染色结果显示,实验组肿瘤细胞数量减少,部分区域肿瘤细胞核淡染、缩小,局部出现核固缩、核溶解。实验组DAPK基因甲基化程度低于对照组。免疫组化染色和Western blot结果显示,实验组DAPK蛋白表达量明显高于对照组,DNMT1、DNMT3A蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义（均P＜0.05）,2组DNMT3B的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　5-Aza-CdR可通过调节裸鼠移植瘤内DNMTs来提高DAPK的表达,从而抑制甲状腺乳头状癌生长。     

O6-苄基鸟嘌呤增强1，3-二（2-氯乙基）-亚硝基脲对人肝癌细胞及其移植瘤的抗肿瘤作用

应用噻唑蓝（MTT）法检测O⁶-苄基鸟嘌呤(O⁶-BG)与1,3-二（2-氯乙基）-亚硝基脲（BCNU）合用的细胞毒作用及透射电镜检测凋亡细胞的方法研究了O⁶-BG对O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（O⁶-AGT）阳性的人肝癌细胞SMMC-7721对BCNU细胞毒作用敏感性的影响及其与BCNU合用治疗移植瘤的协同效果. 结果显示：1.5-6.0 mg·L^-1的O⁶-BG预先作用2 h后,SMMC- 7721细胞对BCNU的敏感性明显增加;0.75-6.0 mg·L^-1的O⁶-BG可完全快速地抑制肿瘤细胞的AGT活性并持续12 h; ip 90 mg·kg^-1的O⁶-BG预处理2 h后给予25 mg·kg^-1的BCNU治疗,可使动物sc接种的人肝癌移植瘤生长延迟38.6 d, 诱导肿瘤细胞凋亡,并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性. 说明O⁶-BG与BCNU合用于AGT阳性的肿瘤将具有明显的治疗效果.     

醒脑益智组分中药对β-淀粉样蛋白（1-40）诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的：探讨醒脑益智组分中药对β-淀粉样蛋白（Aβ_1-40）诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法：以SH-SY5Y细胞体外培养为研究对象,Aβ_1-40损伤细胞建立模型,石杉碱甲（6 μg·mL^-1）和不同浓度（70,35,17.5 μg·mL^-1）药物干预,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率;细胞膜损伤测定乳酸脱氢酶（LDH）漏出率;酶联免疫吸附法检测脑源性神经营养因子（BDNF）和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量;Hochest 33258染色观察药物对损伤细胞的作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果：醒脑益智组分中药能明显改善Aβ_1-40（15 μmol·L^-1）诱导的神经细胞存活率,降低LDH漏出率,改善细胞内BDNF含量,降低TNF-α水平,并抑制细胞的凋亡。结论：醒脑益智组分中药可以改善Aβ_1-40诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并抑制其凋亡,其机制可能与改善BDNF水平,调节免疫及相关凋亡基因的表达有关。     

生鹅血对小鼠移植瘤H(22)抑瘤作用的初步实验研究

目的:研究生鹅血对小鼠移植瘤H_(22)的抑瘤作用对生存期的影响。方法:通过生鹅血对昆明纯系小鼠移植瘤H_(22)抑瘤作用,计算抑瘤率及生鹅血对移植瘤小鼠体重、生存期的影响,结果:不同计量的生鹅血对H_(22)抑瘤作用,计算抑瘤率及生鹅血对移植瘤小鼠体重、生存期的影响,结果:不同计量的生鹅血对H_(22)移植瘤接种前后小鼠体重与对照组相比无差异(P>0.05)。抑瘤作用显著(P<0.01,P<0.02),抑瘤率分别为33.56％、41.20％、10.86％、45.85％、63.18％、64.86％、62.63％。生存率分别为77.67％、50.89％。结论:初步实验证明生鹅血对H_(22)移植瘤抑瘤作用显著,延长荷瘤小鼠生命。     

乙二酰二脱水卫矛醇对小鼠移植性肝癌H_(22)肿瘤生长和血管生成的抑制作用

目的:研究乙二酰二脱水卫矛醇(DADAG)在体内对肿瘤生长和血管生成的抑制作用及其机制。方法:采用小鼠H22模型观察DADAG对肿瘤生长的影响;免疫组化和W estern blot法分别检测DADAG对肿瘤组织中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)以及转录因子Sp1表达的影响。结果:DAD-AG(5和10 mg.kg-1.d-1)可以浓度依赖性地降低小鼠瘤重(抑制率分别为29.8%和60.2%)和MVD(抑制率分别为38.9%和66.7%),引起肿瘤组织坏死,降低VEGF及Sp1的表达量,但无明显肝、肾毒性。结论:DADAG可以抑制小鼠H22移植瘤的生长和血管生成,下调VEGF及Sp1的表达是其可能的作用机制之一。     

Inhibitory effect of 5-fluorouracil on human cytochrome P(450) isoforms in human liver microsomes

Objective A number of case reports have been described regarding drug interactions with 5-fluorouracil (5-FU) and co-administered drugs. However, little is known regarding the inhibitory potential of 5-FU on the metabolism of co-administered drugs by cytochrome P₄₅₀ (CYP). The aim of the present study was to elucidate the inhibitory effect of 5-FU on CYP isoforms using human liver microsomes.Methods The inhibitory effect of 5-FU on CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2C8, CYP2E1, CYP2D6, and CYP3A4 activities was examined with specific probe drugs in human liver microsomes.Results 5-FU showed little or no inhibitory effect on CYP-catalyzed reactions in human liver microsomal preparations.Conclusion 5-FU has no inhibitory effect on CYP isoforms or drug metabolism causing drug interaction with 5-FU. The mechanism that causes drug interaction between co-administered drugs and 5-FU may not be related to direct CYP inhibition by 5-FU.     

HPLC法测定H22小鼠肿瘤腹水中补骨脂内酯的含量

根据临床研究需要,我们建立了用HPLC 测定小鼠肿瘤腹水中补骨脂内酯含量的方法.本方法回收率100.44%,日内误差CV%<4%,日间误差CV%<8.7%.我们认为本法比较简便、迅速,有较好的实用性.     

银耳孢糖合用氟尿嘧啶对肉瘤S180和肝癌H22小鼠的抗肿瘤作用

目的对银耳孢糖与氟尿嘧啶(5-FU)合用的抗肿瘤作用进行研究.方法采用小鼠肉瘤S180和肝癌H22肿瘤模型,连续给药7 d后,剥出瘤块、胸腺及脾脏称取质量,计算抑瘤率和免疫器官指数;采用碳粒廓清实验测定吞噬指数.结果银耳孢糖合用5-FU(5,10,20 mg·kg-1)对小鼠肉瘤S180和肝癌H22有明显的抑制作用,对肉瘤S180的抑瘤率分别为41.7%,50.1%,68.8%,对肝癌H22的抑瘤率分别为42.3%,58.4%,69.8%.银耳孢糖合用5-FU能增加H22肝癌小鼠的免疫器官指数和吞噬指数.结论银耳孢糖与5-FU合用抗肿瘤具有增效作用,银耳孢糖对5-FU所致的免疫功能损伤有保护作用.     

三肽化合物酪丝亮肽(YSL)对腹水型肝癌H_(22)小鼠免疫调节作用实验研究

目的观察三肽化合物酪丝亮肽(tyroserleutide,YSL)对腹水型肝癌H22小鼠的抗肿瘤作用,观察YSL对荷瘤小鼠T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性的影响。方法建立腹水型肝癌H22小鼠动物模型,观察YSL对腹水型肝癌H22小鼠生存时间的影响;以MTT法检测YSL对荷瘤小鼠T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性的影响。结果YSL能够明显延长腹水型肝癌H22小鼠生存时间;YSL在5μg.kg-1和50μg.kg-1时可以促进腹水型肝癌H22小鼠T淋巴细胞的转化;YSL在0.5、5和50μg.kg-1时增强荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性。结论YSL可以延长腹水型肝癌H22小鼠的生存时间;促进荷瘤鼠的T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性。     

灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞VEGF表达的影响

目的观察灵芝孢子油对荷H22瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法小鼠右腋皮下接种H22瘤细胞(浓度1×107/ml),0.2 ml/只,给药12天后,处死动物,剥离瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率,用免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中VEGF的表达程度。结果与模型组比较,灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。造模后各组小鼠VEGF均为阳性表达,灵芝孢子油各组可降低小鼠H22瘤组织中VEGF的阳性表达(P<0.05,P<0.01)。结论灵芝孢子油对H22移植性癌细胞生长有抑制作用,可降低瘤细胞中血管生成调控基因VEGF的表达。     

In vitro cytotoxicity, in vivo biodistribution and antitumor activity of HPMA copolymer–5-fluorouracil conjugates

5-Fluorouracil (5-FU) is an antimetabolite with a broad-spectrum activity against solid tumors. However, its very short half-life in plasma circulation greatly limited the in vivo antitumor efficacy and clinical application. The current work aimed to solve this problem as well as to increase 5-FU biodistribution to tumor by covalently conjugating 5-FU to a biocompatible, non-toxic and non-immunogenic drug carrier – N-(2-hydroxypropyl) methacrylamide (HPMA) copolymer. The in vitro cytotoxicity, in vivo biodistribution and therapeutic efficacy of HPMA copolymer–5-FU conjugates (P-FU) were reported. Cytotoxicity was evaluated by using a serial of tumor cells (A549, CT-26, Hela, HepG₂ cells and 5-FU resistant HepG₂ cells). In vivo biodistribution and therapeutic efficacy were investigated in Kunming mice-bearing hepatoma 22 (H₂₂). Results indicated that P-FU could increase the cytotoxicity of 5-FU in Hela, HepG₂ and 5-FU resistant HepG₂ cells, while it decreases the cytotoxicity of 5-FU in A549 and CT-26. Both in vitro release profile in plasma and biodistribution study showed that P-FU significantly prolonged the drug plasma circulation time. P-FU also showed an over 3-fold larger area under the concentration–time curve (AUC) in tumor when compared with free drug. Therapeutic evaluation also demonstrated that the treatment with P-FU displayed stronger inhibition of the tumor growth when compared with that of control group (physiologic saline) or 5-FU group at the same dose. All the results suggested that P-FU could increase cytotoxicity of 5-FU in certain cancer cell lines, prolong 5-FU circulation time in vivo, enhance 5-FU distribution to tumor and improve therapeutic efficacy. Therefore, HPMA copolymer is a potential carrier for 5-FU for the effective treatment of cancer.     

Studies on microencapsulation of 5-fluorouracil with poly(ortho ester) polymers

Microencapsulation of 5-fluorouracil was successfully accomplished with poly(ortho ester) polymers by the emulsification-solvent evaporation method. While actual drug loading increased with increasing drug load (5-15% w/w), the entrapment efficiency remained essentially unaffected, under a given set of experimental conditions. Incorporation of sorbitan sesquioleate enhanced entrapment efficiency, decreased the volume-surface mean diameter of the poly(ortho ester) microspheres and provided controlled release of 5-fluorouracil. T he volume of the aqueous phase was more important than the concentration of polyvinyl alcohol in it. The entrapment efficiency improved from 13 to 33 %when the volume of the aqueous phase was increased from 20 to 80 ml. The volume of organic phase (methylene chloride) and the concentration of polymer in it played an important role. The use of smaller volumes of more concentrated polymer solution enhanced actual drug loading, entrapment efficiency and produced larger microspheres. The release studies conducted in 0.01M phosphate buffer at 37 +/- 1.0°C demonstrated that the release of 5-FU from the microspheres prepared with sorbitan sequioleate was nearly independent of the initial drug load with a mean zero-order rate constant of 0.0063% per hour. The data suggested that drug release was largely a diffusional process with contributions from dissolution and polymer degradation.     

人参茎叶皂甙对5-氟脲嘧啶抗肿瘤的增强作用

目的 :观察人参茎叶皂甙 (GSL)促进氟脲嘧啶 (5 FU)对小鼠S1 80实体瘤的抑瘤作用。方法 :采用昆明种小鼠 ,随机分组进行实验 ,分别给予不同剂量人参茎叶皂甙与氟脲嘧啶配伍使用 ,观察其对小鼠S1 80实体瘤抑瘤率的差别。结果 :低剂量人参茎叶皂甙 (1 5mg·kg-1)与氟脲嘧啶 (1 .5mg·kg-1)组方对小鼠S1 80实体瘤有显著的抑瘤作用 (抑瘤率达2 6.90 % ,P <0 .0 5 ) ,对胸腺无抑制作用 ;阳性对照药5 FU(2 5mg·kg-1)的抑瘤率为 3 6.61 % ,但其对胸腺有显著抑制作用 ;而人参茎叶皂甙 (1 0 0mg·kg-1)单用对小鼠S1 80实体瘤抑瘤率为 2 7.44%。结论 :低剂量人参茎叶皂甙 (1 5mg·kg-1)显著促进 5 FU(1 .5mg·kg-1)对小鼠S1 80实体瘤的抑瘤作用而无胸腺抑制作用 ,可并减少 5 FU的毒副作用