人肾透明细胞癌组织中细胞增殖与凋亡及凋亡相关因子的表达

目的:本课题旨在通过检测人肾透明细胞癌组织中细胞增殖(PCNA)与凋亡(TUNEL法)及凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-9表达的变化,研究这些因子的表达与肾癌的关系.方法:标本离体后分成三组,(Ⅰ)肾透明细胞癌组;(2)癌旁组织组;(3)证常肾组织组,应用HE染色法、TUNEL法及免疫组织化学方法进行观察研究.结果:(1)HE染色结粜:肾透明细胞癌组织镜下可见肿瘤细胞体积较大,圆形或多边形,胞质染色浅,透明或颗粒状,核同缩,间质富有毛细血管和血窦.(2)TUNEL检测结果:在肾癌组织、癌旁组织及正常肾组织组均有凋亡发生.凋亡肾组织细胞表现为染色质凝集、边集,核固缩.正常肾组织组细胞核有弱的阳性表达,癌旁组织表达明显增多,肾癌组织阳性表达最少.(3)PCNA免疫组化染色结果:正常肾组织内的细胞核有弱的阳性表达,癌旁阳性表达增加,肾癌组织阳性表达明显增多.(4)Caspase-3、Caspase-9免疫组化结果:Caspase_3 Caspase-9在难常肾组织中可见少量弱的阳性反应,癌旁组织阳性表达增加,肾癌组织表达明显减少.结论:癌旁细胞组织Caspase-3和Caspase-9的蛋白表达明显高于正常肾组织及癌组织,癌组织表达最少;而PCNA则相反,癌组织高于癌旁组织和正常肾组织,正常肾组织表达最少.癌组织中Caspase-3和Caspase-9表达下降,PCNA表达升高说明细胞凋亡减少,癌组织细胞增殖旺盛,是肿瘤形成的重要机制.Caspase-3、Caspase-9、PCNA于肾透明细胞癌的表达在肿瘤分期间无明显差异性.     

肾透明细胞癌发病机制中细胞凋亡的初步研究

目的:研究肾透明细胞癌发病机制与组织细胞凋亡的关系.方法:将标本离体后分成三组,(1)肾透明细胞癌组(根据肿瘤分期再分四组);(2)癌旁组织组;(3)正常肾组织组.用TUNEL法对标本检测.结果:在肾癌组织、癌旁组织及正常肾组织组均有凋亡发生.正常肾组织组细胞核有弱的阳性表达,癌旁组织表达明显增多,肾癌组织阳性表达最少.结论:细胞凋亡减少是肾透明细胞癌发生的重要机制之一.     

Caspase-3与Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的 检测Caspase-3、Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌(RCCC)、癌旁、正常肾组织中的表达,探讨两者在不同临床分期、病理分级的表达及与预后的关系,并分析两者的相关性.方法 采用免疫组化的方法 检测75例RCCC及其癌旁组织、15例正常肾组织标本中的Caspase-3和Caspase-6蛋白表达水平.结果 Caspase-3和Caspase-6蛋白在RCCC中的阳性表达率(74.67%,76.00%)低于癌旁组织(92.00%,90.67%)和正常肾组织(93.33%,86.67%),差异有统计学意义(P<0.05).Caspase-3病理G3期阳性表达率(53.58%)低于G1期(87.50%),P<0.05;临床Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率(63.64%)低于Ⅰ期(87.97%),P<0.05;淋巴结转移阳性组中阳性表达率(55.56%)低于阴性组(80.70%).Caspase-6在不同病理分级和临床分期以及是否有淋巴结转移申阳性表率无显著性差异.两者在RCCC中的阳性表达率无相关性(C=0.0921,P>0.05).结论 Caspase-3和Caspase-6表达减少导致细胞凋亡减少、与肾细胞癌发病有密切关系,但不是肾细胞癌有价值的标记物.且两者的表达降低并不存在相关性.     

XIAP和Caspase-3在肾癌中的表达研究

目的 研究XIAP、Caspase -3在肾癌中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学方法检测XIAP、Caspase-3蛋白在肾癌中的表达情况.结果 XIAP在肾癌中的阳性表达率明显高于癌旁肾组织,而Caspase-3的阳性表达率明显低于癌旁肾组织( P＜0.01).XIAP的阳性表达与肾癌不同病理分级、临床分期及有无淋巴结转移有关(P ＜0.05或P＜0.01),Caspase-3的表达程度与肾癌的病理分级有关(P＜0.01).在不同年龄、性别及不同组织学类型的肾癌组织中,XIAP和Caspase-3的阳性表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 XIAP在肾癌中的表达明显上调,而Caspase-3的表达则相应下调.XIAP在肾癌中的阳性表达与Caspase-3的表达呈负相关,两者表达的改变可能在肾癌的发生、发展中起重要作用.     

Caspase-3在肾细胞癌中表达及其意义

目的探讨Caspase-3在肾细胞癌发病过程中的作用及其与细胞凋亡之间的关系.方法应用免疫组化方法检测51例肾细胞癌和12例正常肾组织中Caspase-3的表达;应用原位细胞凋亡检测TUNEL法检测肾细胞癌组织中细胞凋亡状况.结果Caspase-3在肾细胞癌中阳性表达率为51.0%,显著低于正常肾组织的83.3%,P＜0.05.Caspase-3表达与肾细胞癌表达分期、分级、病理类型、淋巴结转移和肿瘤大小之间差异均无显著性,P＞0.05.肾细胞癌Caspase-3阳性表达者细胞凋亡指数显著高于阴性表达者,P＜0.01.结论Caspase-3表达减少导致细胞凋亡减少、与肾细胞癌发病有密切关系,但不是肾细胞癌有价值的标记物.     

Omi/HtrA2和Caspase-9在食管癌中的表达及与凋亡的关系

目的探讨在食管鳞癌中Omi/HtrA2、Caspase-9蛋白的表达及其与癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌病例的正常组织、癌旁组织及癌组织进行Omi/HtrA2和Caspase-9蛋白免疫组化分析。采用TUNEL法检测细胞凋亡水平,并分析食管癌中Omi/HtrA2和Caspase-9的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。结果 1 Omi/HtrA2、Caspase-9在食管鳞癌组织阳性表达率分别为76.25%、58.75%,在癌旁组织中的阳性表达率分别为27.50%、72.50%,在正常组织中的阳性表达率分别为22.50%、85.00%;Omi/HtrA2、Caspase-9在食管鳞癌组织中的阳性表达率与其在癌旁组织、正常组织中蛋白的阳性表达率分别进行比较,差异均有统计学意义(P0.05);癌旁组织与正常组织的Omi/HtrA2和Caspase-9蛋白阳性表达率进行比较,差异均无统计学意义(P0.05)。2 Omi/HtrA2蛋白表达阳性组癌细胞凋亡指数(18.186±1.331)‰,明显高于阴性组凋亡指数(5.108±1.783)‰(P0.01);Caspase-9蛋白表达阳性组细胞凋亡指数为(17.763±0.675)‰,明显高于阴性组细胞凋亡指数(11.619±0.712)‰(P0.05)。结论 Omi/HtrA2在食管癌中高表达,而Caspase-9在食管癌中低表达,两者在促进食管癌细胞凋亡中有相反的调节作用。     

MMP9、PCNA在人肾癌中的表达及意义

目的分析肾癌中MMF9（一种蛋白水解酶，也称明胶酶B）与PCNA（一种核内蛋白，又称周期蛋白）的表达与组织学类型、临床分期、病理分级及预后的关系。方法免疫组织化学法检测35例肾癌及12例癌旁正常肾组织中MMF9及PCNA的表达。结果MMP9在肾癌及癌旁正常肾组织中的阳性表达率有显著性差异（P=0．020），MMP9表达在肾透明细胞癌及颗粒细胞癌间无显著性差异，随肾癌分级、分期升高而明显增高，MMP9阳性表达组术后5年生存率明显低于阴性表达组；肾癌PCNA表达率高于癌旁正常肾组织（P=0．008），肾癌的PCNA表达率随肿瘤分级增高而增高，各分期间差异无显著性（H=5．746，P〉0．05）。肾癌的PCNA表达与预后有关，与肾癌的组织类型无关（P=0．329）。结论MMF9及PCNA的检测可作为肾癌的辅助诊断及恶性程度和预后的参考指标。     

P53、Caspase-3和PCNA蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的 研究P53、Caspase-3和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在肝细胞癌中的表达和意义.方法 采用免疫组织化学S-P法检测P53、Caspase-3和PCNA蛋白在69例肝细胞癌(HCC)及癌旁组织中的表达.结果 (1)P53和PCNA蛋白在肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为56.52%、20.29%,在癌旁组织中的阳性表达率均为1.45%,肝细胞癌组织中P53和PCNA蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);(2)Caspase-3蛋白在肝细胞癌及癌旁组织中均有表达,差异有统计学意义(P<0.05);(3)P53蛋白的表达与肝细胞癌的分化程度呈负相关(r-s=-0.239, P<0.05),肝细胞癌的分化程度越低,P53蛋白的阳性表达率及表达强度越高.结论 P53和PCNA蛋白的过度表达及Caspase-3蛋白的低表达可能在肝细胞癌的发生和发展中起重要作用.     

Caspase-3与Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨Caspase-3、Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌（RCCC）的表达及与预后的关系。方法采用免疫组化（SP法）对75例RCCC及其癌旁组织、15例正常肾组织标本中的Caspase-3、Caspase-6蛋白的表达进行研究，分析与RCCC临床病理特征及其术后生存率的关系。结果Caspase-3蛋白在RCCC中阳性表达率低于癌旁对照组，差异有显著性（P〈0．01）；在病理分级中的阳性表达率G3低于G1；在临床分期中的阳性表达率Ⅲ～Ⅳ期低于Ⅰ期；在淋巴结转移阳性组中阳性表达率低于阴性组，差异均有显著性（P〈0．05）。Caspase-6蛋白在RCCC中阳性表达率低于癌旁对照组，差异有显著性（P〈0．05）；在不同病理分级和临床分期中阳性表达率差异均无显著性（P〉0．05）；在淋巴结转移阳性、阴性组中的阳性表达率差异无显著性（P〉0．05）。在RCCC中，统计学显示Caspase-3与Caspase-6蛋白表达无相关性（C=0．0921，P〉0．05）。在35例随访患者中，Caspase-3、Caspase-6蛋白表达阳性、阴性的术后3年死亡率差异均无显著性（P〉0．05）。结论Caspase-3蛋白在RCCC中的阳性表达率低于癌旁和正常肾组织，与临床分期、病理分级呈负相关，其低表达与淋巴转移有关。Caspase-6蛋白在RCCC中的阳性表达率低于癌旁和正常肾组织，但与临床分期、病理分级及淋巴转移无关。在RCCC中，Caspase-3蛋白的表达与Caspase-6蛋白的表达无相关性。     

肾透明细胞癌PDCD5表达及与预后的关系

目的探讨PDCD5在。肾透明细胞癌发生、发展巾的作用及与预后关系。方法采用免疫组织化学方法．对46例肾透明细胞癌组织中PDCD5表达进行研究，对患者存活率进行回顾性随访：结果癌旁。肾组织中PDCD5阳性表达率显著高于肾癌组织。PDCD5阳性表达率随肾透明细胞癌病理分级和临床分期的上升而下降，染色强度也减弱。PDCD5阳性表达组3年及5年存活率高于阴性表达组：结论PDCD5为肾透明细胞癌的负性调节因子，对抑制肾透明细胞癌的恶性转化和进展可能有重要的意义。     

Caspase-8及Caspase-3与细胞凋亡

细胞凋亡与多种疾病的发生、发展密切相关。Caspasec依赖的凋亡过程中caspase-8与caspase-3着关键作用。就Caspase-872．Caspase-3在细胞凋亡过程中的作用及其研究进展做一综述。     

Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9在胎膜早破中的作用

目的:通过检测自发性胎膜早破患者、正常分娩产妇和择期剖宫产产妇胎膜中凋亡因子Caspase-3,-8,-9蛋白的表达及定位,探讨凋亡因子Caspase-3-、8-、9在自发性胎膜早破中的作用。方法:取自发性胎膜早破未发动分娩行剖宫产的患者的胎膜(即胎膜早破组)8例,正常经阴道分娩产妇的胎膜(即阴道分娩组)8例以及无产科并发症择期剖宫产的产妇的胎膜(即剖宫产组)8例,其中,阴道分娩组和剖宫产组均作为对照组。应用免疫组化方法(SP法)对三组胎膜中Caspase-3,-8,-9蛋白的表达及定位进行检测,同时在光学显微镜下观察胎膜组织形态学的改变,在透射电镜下观察胎膜细胞超微结构的变化。结果:Caspase-3,-9蛋白在3组胎膜中均表达,Caspase-3,-9蛋白主要表达在羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养层细胞,少数表达于网状细胞和间叶细胞,均为胞浆表达,胎膜早破组Caspase-3蛋白表达量(OD)为[(62.86±3.83)×10-2],高于阴道分娩组[(42.33±2.99)×10-2]和剖宫产组[(20.97±2.94)×10-2],在阴道分娩组的表达高于剖宫产组,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05);胎膜早破组Caspase-9蛋白表达量为[(52.20±3.28)×10-2],高于阴道分娩组[(25.87±5.52)×10-2]和剖宫产组[(17.65±1.78)×10-2],在阴道分娩组的表达高于剖宫产组,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Caspase-8在3组几乎不表达。胎膜早破组胎膜在光镜下观察发现组织形态学发生明显改变,电镜下可观察到大量凋亡细胞。结论:Caspase-9和Caspase-3分别作为凋亡的线粒体途径的启动因子和效应因子,在胎膜早破中表达明显增高,超微结构也观察到大量凋亡细胞。因此推测线粒体途径的凋亡在胎膜早破发病机制中可能起到一定的作用。     

Caspase-3和Caspase-6在胃癌组织中的表达及意义

目的 检测Caspase-3、Caspase-6 基因在胃癌组织、癌旁正常组织中的表达,探讨两者与临床、病理因素的关系及两者之间的关系.方法 采用RT-PCR方法检测42例胃癌患者的癌组织、癌旁正常组织中Caspase-3、Caspase-6 基因的表达情况,并分析这2个基因与临床、病理因素之间的关系.结果 Caspase-3、Caspase-6基因在胃癌组织中表达率分别为38.09%(16/42)、31.05%(13/42),在癌旁正常组织中的表达率分别为78.57%(33/42)、69.05%(29/42),两者在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.01).Caspase-3、Caspase-6 基因的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小差异无统计学意义(P＞0.05),与胃癌肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度差异有统计学意义(P＜0.05).Caspase-3 基因的表达与淋巴结转移差异有统计学意义(P＜0.05),Caspase-6 基因的表达与淋巴结转移差异无统计学意义(P＞0.05).在胃癌组织中,两者之间的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Caspase-3、Caspase-6 基因的表达可能与胃癌的发生、发展相关,对胃癌发生、发展的过程起到下调的作用.联合检测Caspase-3、Caspase-6 基因的表达更能反映胃癌的生物学行为,优于单项检测.     

三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中依赖Caspase-9的Caspase-3激活

目的 探讨有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡过程中可能的信号通路.方法 用0.125、0.25、015、1.0、2.0 mmol/L的TCE处理NHEK4 h,并培养4、8、12、24 h,分光光度法测上清中Caspase-9和Caspase-3活性,Annexin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡;Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK和Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理组,用100 μmol/L ZDEVD-FMK或Z-LEHD-FMK预处理NHEK 1 h,再用2.0mmol/L TCE染毒4 h后培养至12 h.结果不同浓度TCE处理NHEK 4 h后培养不同时间,可诱导Caspase-3和Caspase-9活性升高,培养12、24 h时,各TCE处理组Caspase-3和Caspase-9活性与溶剂对照比差异有统计学意义(P<0.05).不同浓度TCE处理NHEK 4 h后培养12 h.凋亡细胞(Annexin-V+/PI-)所占百分比随TCE剂量增加而升高,除0.125 mmol/L TCE组外,其它各处理组AnnexinV+/PI-细胞所占百分比与对照组比差异均有统计学意义(P<0.05).相关分析显示Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与Caspase-3和Caspase-9活性都呈正相关(P<0.05).100 μmol/L Z-DEVD-FMK预处理明显抑制2.0 mmol/L TCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加(P<0.05),对Caspase-9活性影响不明显(P>0.05).100 μmol/L Z-LEHD-FMK预处理不仅抑制2.0mmol/L TCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加,还抑制Caspase-9活性上升(P<0.01).结论 TCE诱导NHEK凋亡中,内部凋亡途径中上游关键酶Caspase-9和下游效应分子Caspase-3均激活.且Caspase-3的激活依赖Casapase-9的活化.     

糖痛方对施万细胞凋亡及Bcl-2、caspase-3、caspase-9表达的影响

目的 探讨中药糖痛方对高糖诱导的施万细胞凋亡的影响.方法 将原代培养的施万细胞共分为对照组、高糖组、高糖加川芎嚷组、高糖加黄芪多糖组、高糖加川芎嗪和黄芪多糖混合组、高糖加糖痛方含药血清组,各组干预细胞48h后用流式细胞仪检测细胞Annexin V/PI标记的细胞凋亡率、用Western blot法和PCR法检测caspase-3、caspase-9及Bcl-2表达.结果 糖痛方组细胞凋亡率与高糖组相比显著降低（P＜0.05）;糖痛方组细胞caspase-3、caspase-9蛋白及mRNA表达与高糖组相比显著降低（P＜0.05）,Bcl-2蛋白及mRNA表达与高糖组相比显著升高（P＜0.05）.结论 中药糖痛方对神经细胞的损伤修复作用可能是通过提高Bcl-2、下调caspase-9和caspase-3的活性表达从而抑制施万细胞的凋亡来实现的.     

胃癌caspase-3表达及其与细胞凋亡的关系研究

目的 研究caspase-3表达在胃癌发生发展中的作用.方法 采用免疫组化S-P法观察113例胃癌旁上皮细胞、原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞以及转移灶癌细胞中caspase-3表达,TUNEL法检测上述组织的细胞凋亡,并分析原发灶癌细胞中caspase-3表达与胃癌临床病理特征的关系,并探讨caspase-3表达与细胞凋亡的关系.结果 caspase-3在50.4%(57/113)的胃癌旁上皮细胞中表达,高于原发灶癌细胞中的阳性率32.7%(37/113)(P<0.05);caspase-3在胃癌原发灶浸润淋巴细胞中的阳性率为70.8%(80/113),高于胃癌旁上皮细胞和原发灶癌细胞中阳性率(P<0.05);58.1%(25/43)的转移灶癌细胞中caspase-3表达阳性,其阳性率高于对应原发灶癌细胞(34.2%,13/38)(P<0.05);原发灶癌细胞中caspase-3表达与胃癌患者的年龄、性别以及胃癌肿瘤大小、浸润深度、转移、TNM分期、生长方式和分化程度无相关性(P>0.05).原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数明显低于癌旁上皮细胞(P<0.01).结论胃癌原发灶癌细胞中caspase-3表达下调和浸润淋巴细胞中caspase-3表达上调与胃癌发生有关,由caspase-3介导的细胞凋亡与胃癌的发生与发展有关.     

Caspase-8在喉癌组织中的表达及其与细胞凋亡相关性研究

目的探讨半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)在喉癌组织中的表达及其与细胞凋亡的相关性。方法采用流式细胞术检测45例喉癌患者喉癌组织和相应癌旁组织中Caspase-8的表达,并以20例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照;同时检测喉癌组织中的细胞凋亡率。结果 (1)喉癌组织中Caspase-8蛋白的表达量及阳性表达率均明显低于癌旁组织及正常喉黏膜组织(P<0.01),癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Caspase-8蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度有相关性(P<0.05);与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性(P>0.05)。(3)喉癌组织细胞凋亡率与临床分期、淋巴结转移有相关性;与临床分型、病理分级、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关。(4)喉癌组织中Caspase-8蛋白表达水平与喉癌组织细胞凋亡率呈正相关(P<0.01)。结论 Caspase-8蛋白的低表达可促进喉癌的发生、发展,并通过抑制凋亡并促进细胞增殖参与喉癌发展。     

Caspase8、3蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化

目的研究Caspase8、3蛋白在补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病K562细胞凋亡时的变化。方法用不同浓度的中药补骨脂中提取的PSO和（或）不同照射时间、波长为360nm的UVA作用于K562细胞,检测细胞凋亡率、在电镜下细胞超微结构改变及Caspase8、3蛋白的表达,用多因素方差分析法对定量资料进行统计分析。结果PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,后两者上调Caspase8、3蛋白的表达,PUVA的作用显著强于前两者;PUVA处理后的K562细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。结论PUVA可通过激活Caspase8、3基因诱导K562细胞凋亡。