非小细胞肺癌骨转移规律和影响因素分析

目的 探讨非小细胞肺癌的骨转移规律和影响因素。方法 对６３８例非小细胞肺癌患者的骨转移情况进行了统计分析。结果 非小细胞肺癌骨转移率为３５．３％。多发转移者２０１例，全组平均病灶３．４个。骨转移的部位以胸部最常见，其它依次为脊柱、骨盆、肢体和颅骨，各组间比较有非常显著差异（Ｐ〈０．００５）。腺癌和腺鳞癌骨转移率明显高于鳞癌（Ｐ〈０．００５）。细胞分化程度较低者骨转移率明显增高（Ｐ〈０．００５）。Ⅲ     

肉桂酸对人肺腺癌细胞诱导分化的实验研究

目的：研究肉桂酸对人肺腺癌细胞的诱导分化作用。方法：在细胞培养中,用不同浓度的肉桂酸处理人肺腺癌Ａ５４９细胞,进行细胞群体增殖动力学检测,流式细胞计量术（ＦＣＭ）测定来观察诱导分化作用效果。结果：肉桂酸能明显抑制Ａ５４９细胞增殖和促进细胞分化（Ｐ〈０．０５）;细胞在软琼脂中的集落形成率明显下降（Ｐ〈０．０５）;ＦＣＭ显示细胞周期移行被阻滞于Ｇ１／Ｇ０期。结论：肉桂酸具有使人肺腺癌细胞逆转的作用,是     

食管癌患者染色体端粒联合的观察

采用外周血淋巴细胞短期培养对１６例食管癌病人和１６例正常人的染色体粒联合现象进行观察。结果表明：食管癌组细胞端粒联合率显著高于对照组，Ｐ〈０．０１。在两组中，端粒联合所涉及的染色体组别均是非随机的，以Ｂ组最常见，Ｄ，Ｇ＋Ｙ组最少。两组的分布基本一致。但各组染色体的端粒融合率均为食管癌组高于对照组。     

血浆心钠素测定与肺癌关系的初步研究

作者测定了６４例原发性肺癌、３２例肺良性疾病患者和３２名健康人血浆心钠素（ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｅｃｐｏｌｙｐｅｐ－ｔｉｄｅ，ＡＮＰ）含量，并比较了１５例肺癌患者治疗前后血浆ＡＮＰ含量变化。结果表明肺癌组血浆ＡＮＰ显著高于肺良性疾病组和健康对照组（Ｐ＜０．０１）；小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）显著高于鳞癌和腺癌（Ｐ＜０．０１）；晚期肺癌高于早期肺癌（ｐ＜０．０５）；ＡＮＰ对肺癌诊断的敏感性为４３．７５％，特异性为８５．９３％，诊断符合率为６４．８４％；治疗后ＡＮＰ显著低于治疗前（Ｐ＜０．００１）。所以血浆ＡＮＰ的测定有助于肺癌的诊断和组织学分类，也是判断病情和疗效的一项较有效指标。     

人非小细胞肺癌组织p73基因转录表达研究

目的 探讨Ｐ７３基因转录表达与肺癌发生、发展的关系。方法 采用逆转录多聚酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３２例非小细胞肺组织、癌组织和７例肺良性病变组织,及其对应正常肺组织Ｐ７３ｍ,ＲＮＡ的表达。结果 ３２例肺癌组织中２８例Ｐ７３表达明显升高,肺７癌组织Ｐ７３ｍＲＮＡ阳性表达率明显高于癌旁肺组织和肺良性病变组织（Ｐ〈０．０１）。肺癌组织强Ｐ７３ｍＲＮＡ阳性表达率型、细胞分化程度和Ｐ－ＴＮＭ分期无明     

肺耐药蛋白基因表达与肺癌临床病理生理特征的关系

目的 探讨肺耐药蛋白（ＬＲＰ）基因表达与肺癌临床病理特征的关系。方法 采用逆转录一多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,检测４９例肺癌组织和组应的４１例癌旁肺组织中ＬＲＰ基因表达水平,结果 肺癌与癌旁肺组织中均有ＬＲＰ基因表达,两者的阳性率分别为６３．３％（３１／４９）和２１．９％（９／４１）,具有显著性差异（Ｐ〈０．０１）,非小细胞肺癌ＬＲＰ表达阳性率（７０．７％,２９／４１）高于小细胞肺癌（２５％、２／８）（Ｐ〈０．０５）,腺癌（９１．７％,１１／１２）表达阳性率高于鳞癌（５０％,１１／２２）（Ｐ〈０．０５）;吸烟患者的ＬＲＰ基因表达（７４．３％,２６／３５）显著高于非吸烟患者（３５．７％,５／１４）（Ｐ〈０．０５）,结论 ＬＲＰ基因表达与肺癌耐药有关,吸烟可导致ＬＲＰ基因表达增加。     

肺癌BSL＿1受体的表达与临床病理关系的探讨

应用亲合组织化学方法对１９６例原发性肺癌西非单叶豆受体的表达及与各项临床病理指标的关系进行了探讨，结果发现，该受体在肺癌中的阳性率为６２．７６％，质膜上的表达以及胞浆中的表达在肺鳞癌及腺癌中差异均有极显著性（Ｐ＜０．００５，Ｐ＜０．００５）。腔膜上的表达在Ｄ＜３ｃｍ组与其它两组腺癌中差异均具显著性（Ｐ＜０．００５，Ｐ＜０．００５）；质膜阳性率及全阴性率与两组不同生存期鳞癌患者预后的关系均有显著性差异（Ｐ＜０．００５，Ｐ＜０．０２５），提示该受体对肺癌有相对特异性，对揭示肺癌临床病理的生物学行为有一定的作用。     

多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌表达的研究

目的：研究多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌的表达情况及其两者关系。方法：应用单克隆抗体ＱＣＲＬ－１行ＬＳＡＢ免疫组化法研究６１例非小细胞肺癌组织中多药耐药相关蛋白表达水平。结果：肺癌组织中多药耐药相关蛋白表达的总阳性率为６８．９２％；癌旁正常肺组织呈阴性或弱阳性表达；高和中分化肺癌多药耐药相关蛋白表达的阳性率高于低分化癌（Ｐ＜０．００５）；Ⅰ－Ⅱ期肺癌多药耐药相关蛋白表达的阳性率高于Ⅲ－Ⅳ期者（Ｐ＜０．０１）。结论：表明多药耐药相关蛋白是非小细胞肺癌多药耐药的重要参与因素。     

人肺癌中细胞凋亡水平与预后关系的研究

目的 探讨肺癌细胞凋亡水平与肺癌发生、发展和预后的关系。方法 应用ＴＵＮＥＬ法检测１２４例人非小细胞肺癌组织、癌旁肺组织和４０例正常肺组织中细胞凋亡水平。结果 （１）肺癌组织细胞凋亡指数（ＡＩ）明显低于癌旁肺和正常肺组织（Ｐ〈０．０１）；（２）肺癌细胞凋亡水平与肺癌Ｐ，ＴＮＭ分期、淋巴结转移状态有密切关系（Ｐ〈０．０５）而与肺癌组织学类型，细胞分化程度、原发肿瘤大小、部位、患者性别，年龄以及吸烟与     

凋亡相关基因产物Fas／APO—1和Bcl—2蛋白在肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨凋亡相关基因Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和Ｂｃｌ－２在肺癌发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法对６５例肺癌组织中４６例远离肺癌正常肺癌组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和Ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果 肺癌组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１蛋白阳性表达率（５６．９２％）明显低于正常肺组织的阳性表达率（８２．６１％）（Ｐ〈０．０１）,而Ｂｃｌ－２蛋白阳性表达率（４６。１５％）明显高于正常肺组织的阳性表达率（６．５     

热休克蛋白HDJ1影响肺腺癌细胞侵袭和迁移能力的研究

目的：研究热休克蛋白HDJ1在人肺腺癌组织、肺腺癌细胞株以及正常肺上皮细胞株中的表达情况,探讨HDJ1对肺腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法：采用免疫组织化学法检测HDJ1在人肺腺癌组织和癌旁正常组织中的表达情况;Western blot检测HDJ1在人肺腺癌细胞A549、H1299、H292及正常肺上皮细胞Bease-2B中的表达情况;使用pMagic 7.1-HDJ1-KD慢病毒转染A549细胞构建HDJ1稳定下调表达的细胞模型,并通过划痕实验、Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力。结果：HDJ1在人肺腺癌组织中呈高表达;HDJ1在A549细胞中呈高表达;细胞划痕实验结果显示,与对照组细胞比较,HDJ1表达下调的A549细胞迁移率下降（P < 0.05）;Transwell实验结果表明,相对于对照组细胞,HDJI表达下调的A549细胞在侵袭和迁移实验中的穿膜细胞数均减少（P < 0.05）。结论：HDJ1在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达,并促进肺腺癌细胞的侵袭和迁移能力。     

Decorin基因表达对人肺腺癌A549细胞生物学行为的影响

目的 探讨Decorin表达降低对人肺腺癌A549细胞的生物学行为的影响。方法 体外化学合成DCN-siRNA特异性序列,在LipofectamineTM2000的介导下转染人肺腺癌A549细胞;分别采用RT-PCR法和Western blot方法检测Decorin基因和蛋白表达情况;CCK-8法检测细胞的增殖能力;流式细胞技术检测细胞凋亡;Transwell小室测定细胞侵袭能力;划痕实验检测肿瘤细胞迁移能力。结果 RT-PCR及Western blot证实靶向Decorin的siRNA干扰明显降低了A549细胞Decorin mRNA和蛋白表达水平。CCK-8检测结果显示与对照组比较,siRNA干扰组A549细胞增殖能力增强,差异具有统计学意义(P＜0.05)。流式细胞技术显示,DCN-siRNA组与对照组比较凋亡率差异无统计学意义(P=0.214)。Transwell侵袭实验显示siRNA干扰后,A549细胞穿膜细胞数明显多于对照组(P＜0.05)。细胞划痕实验显示与空载体组比较,DCN-siRNA组细胞48h、72h细胞生长明显增多,愈合加快。结论 应用siRNA技术在肺腺癌细胞中下调Decorin表达促进了A549细胞的增殖,迁移以及侵袭能力,不影响细胞的凋亡能力。该结果为Decorin在肺癌的作用及功能方面的研究提供了新的证据。     

低氧对人肺腺癌A549细胞HIF-1α、P53和CyclinD1表达的影响

背景与目的:研究表明低氧诱导因子-1α(hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)是低氧诱导细胞周期阻滞的必需元件,但其具体作用机理及对细胞周期阻滞的影响程度目前尚不清楚。本研究旨在探讨低氧导致肿瘤细胞周期阻滞的作用及机制。材料与方法:将人肺腺癌细胞A549分成3组:低氧12h组、低氧24h组及对照组。低氧组分别在低氧条件下(37℃,5%CO2、2.0%O2饱和度)培养12h和24h,对照组置于正常氧浓度条件下(37℃,5%CO2、21%O2饱和度)培养24h。流式细胞仪分别测定3组细胞周期分布及cyclinD1表达,免疫组织化学SP法分别测定3组细胞HIF-1α及P53蛋白表达。结果:(1)低氧12h组、低氧24h组的G0/G1期细胞比例分别为(70.20±3.33)%、(82.85±1.75)%,对照组为(50.36±4.09)%,其差异有显著性(F=202.34,P<0.01);(2)低氧12h组、低氧24h组、对照组cyclinD1表达分别为(80.22±1.55)%、(73.65±2.10)%、(90.35±2.68)%,三组间的差异有显著性(F=100.45,P<0.01);(3)低氧12h组、24h组HIF-1α表达为0.16±0.02、0.26±0.05,对照组HIF-1α表达为0.01±0.00,其差异有显著性(F=105.28,P<0.01);(4)低氧组cyclinD1表达与G0/G1阻滞呈显著性负相关(r=0.91,P<0.01),低氧组HIF-1α表达与P53表达呈显著性正相关(r=-0.84,P<0.01),低氧组HIF-1α表     

发光二极管光动力作用对人肺腺癌细胞株A549的增殖抑制效应

目的：探讨以发光二极管（Light-emitting diode,LED）作为光动力学疗法（photodynamic therapy,PDT）的光源,对人肺腺癌细胞株A549体外增殖的影响及其与传统大功率半导体激光器的比较。方法：采用肺腺癌A549细胞常规培养并传代,将细胞接种于底部澄清黑色96孔板内培养,加入相同浓度的血卟啉衍生物类光敏剂photosan3,分别用LED激光器（光功率为50mW）和大功率半导体激光器（光功率为200mW）采用相同光能量密度（分为三组：5J/cm^2、10 J/cm^2、20J/cm^2）进行照射。照光后用MTT法检测不同激光器PDT作用后细胞OD492值,并计算细胞存活率。结果：在光敏剂浓度相同、能量密度为5、10、20J/cm^2的条件下进行PDT,结果表明与大功率半导体激光器相比,以LED为光源对肺腺癌A549细胞进行PDT后细胞存活率更低,各组相互比较有统计学差异（P〈0.05）。结论：在相同光敏剂浓度及能量密度下采用低功率、长时间照射的LED-PDT组较半导体激光器PDT组,细胞存活率更低,LED-PDT对肺腺癌细胞株A549具有更好的杀伤效果。     

Effect of TRAF6 on the biological behavior of human lung adenocarcinoma cell

Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6 (TRAF6) is a unique adaptor protein of the tumor necrosis factor receptor-associated factor family that mediates both tumor necrosis factor receptor and interleukin-1 receptor/Toll-like receptor signaling. A recent study showed that TRAF6 played an important role in tumorigenesis and invasion through activation of nuclear factor kappa B (NF-κB). However, the biological role of TRAF6 remains unknown in lung cancer up to now. To address the expression of TRAF6 in lung cancer cells, four lung cancer cell lines (A549, HCC827, NCI-H292, and 95-D) and human bronchial epithelial cells were used to detect the expression of TRAF6 protein by western blotting. Results indicated that TRAF6 displayed an upregulation in human lung cancer cell lines. To investigate the effects of TRAF6 on the biological behavior of human lung adenocarcinoma cell, we generated human lung adenocarcinoma A549 cell line in which TRAF6 was depleted. The results showed that downregulation of TRAF6 could decrease cell viability, suppress cell proliferation and invasion, and promote cell apoptosis. At the same time, we explored the effects of TRAF6 on the expression of the following proteins: phosphor-NF-κB (p-p65), cyclin D1, caspase-3, and matrix metalloproteinase 9 (MMP9). Downregulation of TRAF6 could decrease the expression of p-p65, cyclin D1, and MMP9 and increase the expression of caspase-3. All these results suggested that TRAF6 might be involved in the potentiation of growth, proliferation, and invasion of A549 cell line, as well as the inhibition of A549 cell apoptosis by the activation of NF-κB. To make a long story short, the overexpression of TRAF6 might be related to the tumorigenesis and invasion of lung cancer.     

苯丁酸调控对顺铂抑制人肺腺癌A549/DDP耐药细胞株增殖与侵袭协同作用研究

目的肺癌已成为威胁人类生存的重要杀手,且随着环境恶化,其发病率和死亡率有逐年升高趋势。本研究分析4-苯丁酸对顺铂作用下人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP细胞增殖和侵袭影响,为临床治疗提供参考。方法体外培养人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP至生长状态良好,分析顺铂及4-苯丁酸联合顺铂对A549/DDP细胞株增殖作用,酶联免疫吸附测定法分析细胞凋亡相关蛋白表达变化,Transwell实验分析细胞侵袭力变化,蛋白质印迹法和免疫细胞化学分析细胞中JAK/STAT信号通路蛋白表达变化。结果随着时间延长,各组对A549/DDP细胞株增殖抑制率呈上升趋势,且高剂量4-苯丁酸联合顺铂组对A549/DDP细胞株增殖抑制率较高,差异有统计学意义,F药物=110.342,P<0.001;F时间=34.527,P<0.001;F药物×时间=58.321,P<0.001。与对照组相比,低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组细胞凋亡蛋白Bcl-2水平降低,Bax、Caspase-3和Caspase-6水平升高,均P<0.001。对照组、顺铂组、低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组细胞侵袭力分别为423.3±35.6、389.3±24.7、375.6±35.2和285.6±23.9,F=44.458,P<0.001;蛋白质印迹法检测发现对照组、顺铂组、低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组JAK2水平分别为1.32±0.26、1.01±0.24、0.90±0.12和0.74±0.13,F=18.633,P<0.001;STAT2水平分别为0.78±0.13、0.70±0.15、0.62±0.09和0.54±0.09,F=18.996,P<0.001;STAT3水平分别为1.01±0.23、0.89±0.14、0.74±0.10和0.40±0.10,F=19.687,P<0.001。免疫细胞化学法检测发现对照组、顺铂组、低剂量4-苯丁酸联合顺铂组和高剂量4-苯丁酸联合顺铂组JAK2水平分别为0.85±0.14、0.78±0.11、0.62±0.17和0.52±0.09,F=21.854,P<0.001;STAT2水平分别为0.85±0.20、0.77±0.14、0.69±0.08和0.52±0.13,F=17.852,P<0.001;STAT3水平分别为0.63±0.14、0.57±0.11、0.50±0.09和0.42±0.08,F=29.754,P<0.001。结论4-苯丁酸调控对顺铂作用下人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP细胞增殖、侵袭有明显抑制作用,且其作用可能与影响JAK/STAT信号通路蛋白表达有关。     

Effects of BTG2 on proliferation inhibition and anti-invasion in human lung cancer cells

The objective of the study was to investigate the impact of the B cell translocation gene 2 (BTG2) on lung cancer cell growth, proliferation, metastasis, and other biological characteristics and to provide experimental evidence for the biological treatment of human lung cancer. A pcDNA3.1-BTG2 eukaryotic expression vector was constructed and transfected into the human lung cancer cell line A549. The biological changes in the BTG2-expressing cells were analyzed using growth curves, the MTT (tetrazolium) assay, propidium iodide (PI) staining, and the Transwell invasion chamber. Additionally, Western blotting was used to determine the impact of BTG2 on the protein expression of cyclin D1, MMP-1, and MMP-2. Compared to the empty vector-transfected A549 cells or the mock-transfected A549 cells, the pcDNA3.1-BTG2-transfected A549 cells grew significantly slower. No significant differences were detected between the empty vector-transfected group and the mock-transfected A549 cells. The growth curve analysis and the PI staining showed that the pcDNA3.1-BTG2-transfected cells grew significantly slower than the empty vector-transfected A549 cells (P < 0.05). The cell invasion assay results suggested that the invasion rate of the pcDNA3.1-BTG2-transfected A549 cells was significantly slower than the invasion rate of the empty vector-transfected group and the mock-transfected group (P < 0.05). The overexpression of BTG2 may inhibit the protein expression of cyclin D1, MMP-1, and MMP-2 in A549 cells. The overexpression of BTG2 may inhibit the growth, proliferation, and invasiveness of the A549 human lung cancer cell line.     

亚砷酸诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对MAPK／ERK信号通路的影响

目的探讨亚砷酸对肺腺癌A549细胞凋亡、MAPK／ERK信号通路的影响及其作用机制。方法体外培养肺腺癌A549细胞,实验组采用不同浓度(1、3、6 μmol／L)亚砷酸处理,对照组加入等体积的二甲基亚砜(DMSO),MTT法检测细胞增殖率,FMC法检测细胞周期分布与细胞凋亡率,Hoechst 33342观察凋亡小体,Western blotting检测Bcl 2、Bax、p53、Caspase 3及MAPK／ERK信号通路相关蛋白表达水平,RT PCR检测PCNA、CDK2、CyclinA1表达量。结果实验组肺腺癌A549细胞增殖率、凋亡率、凋亡小体数量随着亚砷酸处理时间延长而降低,且存在剂量反应效应(P<005);Western blotting结果显示,实验组肺腺癌A549细胞中Bax、p53、Caspase 3、p JNK／JNK及p38蛋白水平高于对照组,而Bcl 2、p ERK／ERK蛋白含量低于对照组,均呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<005);RT PCR结果显示实验组肺腺癌A549细胞PCNA、CDK2、CyclinA1表达量低于对照组,均呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<005)。结论亚砷酸可以通过下调细胞周期基因水平、上调细胞凋亡相关因子含量、降低MAPK／ERK信号传导,来诱导肺腺癌A549细胞凋亡。     

p53-dependent anticancer effects of leptomycin B on lung adenocarcinoma

Purpose  

Leptomycin B (LMB) and/or its derivatives are considered a novel class of cancer therapeutics through blocking chromosome maintenance region 1, which mediates p53 nuclear export. The objectives of the present study were to first evaluate the cytotoxic effects of LMB on a normal human lung epithelial cell line (BEAS-2B) and three human lung adenocarcinoma cell lines with various p53 status (wild type: A549, mutant: NCI-H522, and null: NCI-H358) and then to identify LMB-induced gene expression alterations in human p53 signaling pathway.