新疆哈萨克族肥胖儿童菌群人源化动物模型的建立

目的 利用无菌小鼠建立新疆哈萨克族肥胖儿童菌群人源化（HFA）动物模型,为深入研究哈萨克族儿童肥胖的病理生理机制提供新的研究方式。方法 收集新疆哈萨克族7～13岁肥胖儿童新鲜粪便,男女各10例。20只3周龄无菌级C57BL/6J小鼠（雌雄各半）,按照性别进行分组并编号。小鼠灌胃接种哈萨克族肥胖儿童粪便菌悬液0.1 ml/次,隔日一次,共接种3次,且接种时遵循性别一致原则。于接种后第7天收集小鼠新鲜粪便标本,提取基因组DNA后,采用特异性引物对16S rRNA V3区进行PCR扩增,对扩增产物运用DGGE方法分离并鉴定,以了解HFA动物模型中肠道菌群的定植情况。结果 接种哈萨克族肥胖儿童肠道菌群后的无菌小鼠盲肠均减小为正常小鼠大小;HFA动物模型的PCR-DGGE指纹图谱显示各观察标本均形成复杂而多样的菌属条带。结论 本实验成功利用无菌C57BL/6J小鼠建立哈萨克族肥胖儿童HFA动物模型,该动物模型是探索哈萨克族儿童特征性肥胖与肠道菌群关系的新的选择方式。     

残留剂量恩诺沙星对SPF小鼠肠道微生态的影响

目的通过分析残留剂量恩诺沙星对SPF级小鼠肠道菌群耐药性、定植抗力的影响,评估现行恩诺沙星ADI值的微生物安全性。方法采用SPF级KM小鼠,通过饮水连续给药恩诺沙星35 d,给药剂量分别为0、0.005、0.05、0.55、mg/kg d。实验内容由两个独立的平行实验构成,实验一观察菌群耐药率的变化;实验二在给药恩诺沙星10 d后,灌胃接种白假丝酵母菌,观察小鼠肠道内白假丝酵母菌的清除情况。结果0.55、mg/kg d剂量组的总需氧菌及总厌氧菌的耐药率明显高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。0.55、mg/kg d剂量的恩诺沙星可降低小鼠肠道菌群对外源性白假丝酵母菌的清除力。结论未观察到0.05 mg/kg d恩诺沙星剂量（对应于现行ADI值）对小鼠肠道菌群的影响,当剂量大于0.05 mg/kg d时,可能对小鼠肠道微生态造成负面影响,说明我国现行恩诺沙星ADI值安全性较好,不会对人体肠道菌群造成负面影响。     

黄连解毒汤对小鼠肠道菌群的影响

目的通过观察黄连解毒汤对小鼠肠道菌群的影响,为临床合理使用清热解毒中药提供参考资料。方法建立抗生素引起菌群失调的小鼠模型和不同剂量的黄连解毒汤灌胃小鼠模型,与正常小鼠比较,评价黄连解毒汤对小鼠肠道菌群的影响情况。结果灌胃14d后黄连解毒汤高剂量组出现菌群失调,其肠道益生菌与正常组差异有统计学意义(P<0.05)。黄连解毒汤低剂量组无菌群失调现象,其肠道益生菌乳酸杆菌、双歧杆菌与抗生素组差异有统计学意义(P<0.05),且其条件致病菌肠球菌显著减少。结论黄连解毒汤在高剂量长期应用时有类似滥用抗生素的破坏作用,在低剂量使用时或许有调节肠道菌群平衡的作用。     

四君子汤对抗生素脱污染小鼠肠道菌群失调的预防作用

目的：观察四君子汤在小鼠肠道正常菌群失调形成过程中的作用，为进一步开发中药四君子汤提供理依据。方法：将小鼠分为正常对照组、抗生素造型组、中药预防组。预防组先给予四君子汤，3d后在给予四君子汤的同时，与抗生素造型共同给予盐酸林可霉素。3d后进行肠道菌群检测。结果：预防组小鼠肠道菌群受抗生素影响小，与抗生素造型组比较差异显(P＜0．001＞)。结论：四君子汤对抗生素造成的小鼠肠道菌群失调具有预防作用。     

调节肠道菌群动物模型和预防肠道菌群失调动物模型探讨

目的 建立调节肠道菌群动物模型和预防肠道菌群失调动物模型。方法 ①调节肠道菌群动物模型。小鼠灌服抗生素溶液，小鼠肠道出现菌群失调后．随机选取1组以生理盐水灌胃，作为自然恢复组．其余3组分别灌服微生态调节剂(主要成份为双歧杆菌．蜡样芽胞杆菌)．20％低聚果糖及中药(含党参、白术、茯苓、甘草等)。给受试物后无菌采取小鼠粪便，观察各组双歧杆菌，乳杆菌，肠杆菌及肠球菌数量。②预防肠道菌群失调动物模型。小鼠灌服抗生素溶液同时分别加生理盐水．微生态调节剂，20％低聚果糖及中药(同前)．给受试物后无菌采取小鼠粪便，观察各组双歧杆菌，乳杆菌．肠杆菌及肠球菌数量。结果 ①调节肠道菌群动物模型菌群失调后，给予微生态调节剂、果糖及中药后，小鼠肠道内的双歧杆菌．乳杆菌及肠杆菌在小鼠肠道内的数量和自然恢复组相比较明显增加；②预防肠道菌群失调动物模型。给予微生态调节剂、果糖及中药后，与正常对照组相比较小鼠肠道内的双歧杆菌，乳杆菌及肠杆菌的数量明显增加。结论 微生态调节剂、果糖及中药可调节小鼠肠道菌群，增殖双歧杆菌和乳杆菌的作用。     

三点金中黄酮类化合物对溃疡性结肠炎小鼠的干预作用及其对肠道菌群的影响

目的 探讨民族药三点金总黄酮及其中单体化合物毛蕊异黄酮和刺芒柄花素对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的干预作用及对其肠道菌群的影响。方法 用3%DSS构建UC小鼠模型,将30只C57BL/6小鼠分为正常组、模型组、三点金总黄酮组(500 mg/kg)、毛蕊异黄酮组(100 mg/kg)以及刺芒柄花素组(100 mg/kg)。观察小鼠体重变化,进行疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分,检测小鼠血清中IL-1β和IL-6含量,通过高通量测序分析小鼠肠道菌群的变化。结果 三点金总黄酮、毛蕊异黄酮以及刺芒柄花素可有效减轻小鼠结肠炎症状,降低炎症因子表达;菌群测序结果显示三点金总黄酮、毛蕊异黄酮以及刺芒柄花素使得肠道菌群的多样性明显提高,科水平上主要表现为致病菌群螺杆菌科比例降低,Muribaculaceae和毛螺菌科比例升高;属水平上主要表现为乳酸菌属的增加和条件致病菌拟杆菌的减少;种水平上主要表现对机会致病菌拟杆菌和大肠杆菌的减少。结论 三点金总黄酮、毛蕊异黄酮以及刺芒柄花素对UC小鼠的体征及炎性因子有一定的改善作用,对肠道菌群有良好的恢复作用。     

肠道菌群影响无菌小鼠对卵清蛋白的敏感性

目的 通过观察过敏和无过敏反应小鼠肠道菌群在无菌小鼠肠道内定植后对卵清蛋白(OVA)刺激的反应,探究肠道菌群在食物过敏中的作用.方法 采集用卵清蛋白成功诱导出的过敏和无过敏反应SPF级小鼠的粪便,分别移植给无菌小鼠(各10只),为过敏组(FA组)和无过敏反应组(NR组).粪菌移植后第3周,两组分别随机抽取7只再用OVA激发为实验组(FA-o组、NR-o组),余3只为生理盐水对照组(FA-c组、NR-c组).用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术评价粪菌移植后肠道菌群在肠道内的定植情况,比较FA组和NR组肠道菌群的差别.观察两组再用OVA激发后的临床表现,HE染色观察小鼠空肠组织形态学改变.结果 (1)粪菌移植后第3周,与供体小鼠相比,FA组与NR组小鼠肠道菌群的DGGE条带多数一致,而FA组与NR组肠道菌群比较,DGGE条带有明显不同,聚类分析和主成分分析(principal component analysis,PCA)两组均能很好分离,测序结果也表明无过敏反应组中厚壁菌门的细菌占优势,过敏组中变形菌门的细菌占优势;(2)移植粪菌的无菌鼠再次用OVA激发时,FA-o组有临床表现,NR-o组无明显临床表现;HE染色可见FA-o组较NR-o组小鼠空肠绒毛上皮细胞局灶性坏死、脱落,炎性细胞浸润明显严重.结论 肠道菌群不同使无菌小鼠对OVA的敏感性不同,说明肠道菌群的变化可能是食物过敏的始动因素,肠道菌群可传递宿主对食物过敏的敏感性.     

调节肠道菌群和预防肠道菌群失调动物模型探讨

目的建立调节肠道菌群动物模型和预防肠道菌群失调动物模型。方法(1)调节肠道菌群动物模型小鼠灌服抗生素溶液，小鼠肠道菌群失调后，随机选取1组以生理盐水灌胃，作为自然恢复组，其余3组分别灌服微生态调节剂(主要成份为双歧杆菌，蜡样芽胞杆菌)，20％低聚果糖及中药(含党参、白术、茯苓、甘草等)，给受试物后无菌采取粪便，观察各组双歧杆菌，乳杆菌，肠杆菌及肠球菌数量。(2)预防肠道菌群失调动物模型小鼠灌服抗生素溶液同时分别加生理盐水，微生态调节剂，20％低聚果糖及中药(同前)，给受试物后无菌采取粪便，观察各组双歧杆菌，乳杆菌，肠杆菌及肠球菌数量。结果(1)调节肠道菌群动物模型菌群失调后，给予微生态调节剂，果糖及中药后，小鼠肠道内的双歧杆菌，乳杆菌及肠杆菌在小鼠肠道内的数量与自然恢复组相比较明显增加；(2)预防肠道菌群失调动物模型给予微生态调节剂，果糖及中药后，与正常对照组相比较小鼠肠道内的双歧杆菌，乳杆菌及肠杆菌的数量明显增加。结论微生态调节剂，果糖及中药可产生调节小鼠肠道菌群，增殖双歧杆菌和乳杆菌的作用。     

调节小鼠肠道菌群和预防肠道菌群失调探讨

目的 建立调节小鼠肠道菌群动物模型和预防肠道菌群失调的模型,探讨微生态调节剂不同的使用方法对肠道菌群失调的作用.方法 ①预防菌群失调:建立小鼠肠道菌群失调预防组和对照组模型;②调节菌群失调:建立小鼠肠道菌群失调模型后,再分为自然恢复组和调节组.以上各组分别在给受试物后无菌采取粪便,观察各组双歧杆菌,乳酸杆菌,肠杆菌及肠球菌数量.结果 ①预防菌群失调:在菌群失调下同时给予微生态调节剂,与正常对照组相比较小鼠肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌的数量明显增加;②调节菌群失调:菌群失调后,给予微生态调节剂,乳酸杆菌及双歧杆菌在小鼠肠道内的数量与自然恢复组相比较明显增加.结论 微生态调节剂产生调节小鼠肠道菌群,增殖双歧杆菌和乳酸杆菌的作用.停用抗生素后肠道菌群恢复较快.     

常欣卫口服液对肠道菌群影响的实验研究

目的研究常欣卫口服液对肠道菌群的预保护作用。方法将小鼠分为对照组、低剂量预防组、中剂量预防组、高剂量预防组。对照组灌服蒸馏水14d,低剂量组、中剂量组、高剂量组灌服不同剂量的常欣卫口服液14d,检测肠道菌群。各组再灌服林可霉素3d造模,各组第2次检测肠道菌群。3个剂量组灌服不同剂量的样品、对照组继续灌服蒸馏水7d,各组第3次检测肠道菌群。结果继续灌服产品7d后,3个剂量组小鼠粪便菌群数量与灌服盐酸林可霉素前相比无显著性差异(P>0.05),而与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。结论常欣卫口服液对小鼠肠道菌群失调具有一定的预保护作用。     

乌梅木瓜汤对菌群失调小鼠肠道菌群及消化酶活性的影响

[目的] 研究乌梅木瓜汤对抗生素诱导的肠道菌群失调小鼠肠道菌群及消化酶活性的影响。[方法] 将32只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组及乌梅木瓜汤低、高剂量给药组,每组8只。除正常组外其余三组小鼠均采用混合抗生素灌胃8 d诱导肠道菌群失调模型。造模成功后,乌梅木瓜汤低、高剂量组分别灌胃乌梅木瓜汤[3.77、7.54 g/（kg·d）]连续8 d,正常组与模型组给予等量无菌水,记录小鼠体质量的变化。末次给药后收集各组小鼠粪便,分别采用16S rRNA高通量测序技术、福林酚比色法、DNS比色法检测分析小鼠肠道菌群及酶活性的变化。[结果] 与正常组相比,模型组小鼠肠道菌群多样性显著降低（P<0.01或P<0.05）,变形菌门、疣微菌门、克雷伯氏菌属、大肠杆菌-志贺菌属等菌丰度显著升高（P<0.01或P<0.05）,厚壁菌门、脱硫菌门、norank_f_Muribaculaceae属、乳杆菌属丰度显著降低（P<0.05）,蛋白酶、淀粉酶及纤维素酶活性显著升高（P<0.01）。与模型组相比,乌梅木瓜汤干预明显改善菌群失调小鼠肠道菌群多样性（P<0.05）,显著降低蛋白酶、淀粉酶及纤维素酶活性（P<0.01或P<0.05）,可显著增加菌群中norank_f_Muribaculaceae属、乳杆菌属等有益菌的丰度,减少变形菌门、克雷伯氏菌属、大肠杆菌-志贺氏菌属等条件致病菌的群落丰度性（P<0.01或P<0.05）。[结论] 乌梅木瓜汤可改善菌群失调小鼠肠道菌群结构及多样性,降低致病菌丰度、升高有益菌丰度,降低肠道消化酶活性,对菌群失调小鼠肠道微生态的平衡具有积极作用。     

血立停(DY-3)的抗菌作用研究

血立停是一种直接用于出血创面的止血粉,除了其本身应无菌处理外,对该药抑茵作用的研究具有重要意义。本文着重研究该药粉对几种常见致病菌的抑菌作用,结果表明:当药物浓度在50mg/ml时对甲、乙型链球菌有抑菌作用,在100mg/ml时对白色葡萄球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌有抑菌作用,在200mg/ml时对大肠杆菌、结核杆菌有抑菌作用。     

基于“心与小肠相表里”探讨阿尔茨海默病小鼠全肠道菌群移植对回肠肠道微环境的影响

【目的】在“心与小肠相表里”中医理论指导下,探讨阿尔茨海默病（AD）模型小鼠全肠道菌群移植,是否对正常小鼠回肠肠道微环境的影响更显著。【方法】将14只6月龄无特定病原体的雄性APP/PS1双转基因AD模型小鼠的全肠道菌群,移植至6只混合抗生素处理过的同月龄同背景正常C57BL/6J小鼠肠道内,移植14 d后再定殖14 d,观察小鼠回肠和结肠组织病理变化,并采用16S核糖体RNA(16S rRNA)基因测序技术分析小鼠回肠和结肠菌群。【结果】AD小鼠全肠道菌群移植到正常小鼠后,病理分析表明仅回肠组织出现粘膜层破坏和隐窝腺上皮细胞变性、坏死脱落;测序分析发现,仅回肠菌群的种类数量（P<0.01）、Chao1指数（P<0.01）和Simpson指数（P<0.01）降低且菌群组成和AD模型小鼠更相似。【结论】AD模型小鼠全肠道菌群移植对正常小鼠回肠菌群多样性及组成的影响显著高于结肠菌群,同时导致回肠粘膜的病理损伤,表明回肠肠道微环境可能和AD的发生发展关系更加密切,与“心与小肠相表里”中医理论高度切合。     

无菌动物在奶牛乳房炎发病机理研究中的应用

乳房炎是奶牛养殖场中的高发病,经抗生素治愈后极易复发。疾病的反复发作导致奶牛的产奶量持续下降,乳头坏死,进而被淘汰。乳房炎也是哺乳期妇女常患的疾病,传统的抗生素治疗损伤新生儿的神经系统。在乳房炎的治疗方法中,抗生素因其大量的负面作用使得其已不适合在乳房炎治疗中滥用,应加快开发新的且有效的抗生素替代物用以治疗或预防乳房炎。益生菌在多种疾病的预防与治疗中都有成功的应用实例。因此,益生菌在乳房炎的治疗与预防中是否真的有效是一个有趣的研究方向。益生菌主要于宿主的肠道中发挥其关键作用,因此肠道菌群与乳房炎发病是否有关联,是益生菌能否应用于乳房炎的治疗中需要解答的首个问题。通过菌群移植,对哺乳期小鼠的乳腺组织以及身体其他各项免疫指标进行监控,探究移植健康奶牛粪便小鼠组与移植乳房炎奶牛粪便小鼠组以及移植乳房炎奶牛粪便同时进行益生菌干预组小鼠的乳腺组织是否发生炎症以及炎症程度如何。奶牛肠道菌群移植入无菌小鼠之后,这种菌群结构与功能之上的差异同时被放大形成鲜明的对比。表明健康的肠道菌群结构对于保持奶牛的健康状态有直接的影响,益生菌可调节奶牛的肠道菌群,对于维持奶牛健康,预防和缓解乳房炎有不可忽视的潜能。     

黄连水煎剂对小鼠肠道菌群的影响

目的：观察黄连水煎剂对小鼠肠道菌群的调整作用。方法：用抗生素造成小鼠肠道菌群失调,然后给予黄连水煎剂,检测肠道正常菌群的变化。结果：黄连水煎剂治疗组小鼠肠菌数明显增多。结论：黄连水煎剂对小鼠肠道正常菌群失调有调节作用。     

几种中草药水煎剂对小鼠肠道菌群的调整作用

目的：探讨几种中草药水煎剂对小鼠肠道菌群的影响，以便弄清其作用机制，为进一步研究及临床应用提供理论基础。方法：用抗生素造成小鼠肠道菌群失调模型，然后给予中草药水煎剂，检测肠道正常菌群的变化。结果：中药治疗组小鼠肠道菌群数明显增加。结论：中草药水煎剂对小鼠肠道菌群有调整作用。     

抗生素诱导的胃肠道菌群失调动物模型的建立

目的建立稳定的抗生素诱导的胃肠道菌群失调的动物模型.方法 SPF级的BALB/c雌性小鼠随机分组,一组随机饮用0.5 mg/mL的头孢曲松溶液,一组灌胃125 mg/mL的头孢曲松溶液,连续4 d后检测盲肠菌群的变化,并且检测停用抗生素一周后菌群是否恢复正常.结果两种途径均能诱导菌群失调,且停用抗生素一周内难以恢复正常水平,但灌胃大剂量抗生素组小鼠的肠黏膜在一周内恢复较快,淋巴结的细菌移位率低于随机饮用抗生素组.结论饮用低浓度的抗生素是一种更优化的诱导菌群失调的方法.     

黄连素通过重塑肠道菌群和调节PI3K/AKT信号通路改善多囊卵巢综合征小鼠的作用机制研究

目的 探究黄连素(BBR)对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠肠道菌群的调节作用及其治疗机制。方法 于2021年6月—2022年6月在复旦大学附属上海市第五人民医院实验动物中心进行实验。清洁级健康雌性C57BL/6J小鼠24只,随机选取6只作为正常对照组,其余18只应用来曲唑灌胃制备PCOS模型。造模成功后,将造模小鼠随机分为模型(PCOS)组、阳性药达英-35(0.2 mg·kg^-1·d^-1)组和BBR(100·kg^-1·d^-1)组,每组6只,给予相应药物治疗14 d。收集小鼠结肠内粪便,采用16S rDNA测序检测肠道菌群;称小鼠体质量,观察小鼠阴道脱落细胞形态学改变;检测血清性激素和胰岛素水平;HE染色观察卵巢病理结构;免疫组化检测小鼠结肠Claudin-1、Occludin表达;Western-blot检测卵巢组织PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果 16S rDNA测序结果显示,PCOS组肠道菌群多样性较正常对照组发生变化。在属水平,与正常对照组比较,PCOS组布劳特氏菌属、韦永氏球菌属、孪...     

肠道菌群失调动物模型的研制

目的:建立一个简便快捷检验微生态制品保护效能的动物模型.方法:用氨苄西林钠8.4 g/kg灌喂小鼠,每天3次连续2d,造成小鼠肠道菌群Ⅱ度失调.随即再用氨苄西林钠12.5kg继续灌喂,每天1次连续6d;同时试验组加喂双歧杆菌7×106个/只,亦每天1次(均在抗生素灌喂后8h以上进行)连续给予12d.用粪便涂片革兰氏染色,显徽镜下细菌计数的办法判断肠道菌群失调的情况以及双歧杆菌的保护效能.结果:造成小鼠肠道菌群Ⅱ度失调持续发生7d,同时灌喂双歧杆菌者此期间肠菌群失调由Ⅱ度变为I度.结论:用氨苄西林钠灌喂的办法成功地制作肠道菌群Ⅱ度失调的动物模型,该模型可有效地检验微生态制品保护效能,方法简便快捷.     

电针早期干预对创伤后应激障碍模型小鼠行为及肠道菌群的影响

目的探讨电针(electroacupuncture, EA)早期干预对创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder, PTSD)模型小鼠的焦虑恐惧样行为及肠道菌群的影响。方法将32只雄性SPF级C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为对照组(Control组)、电针组(EA组)、模型组(PTSD组)、电针干预组(PTSD+EA组), 每组8只。适应性饲养7 d后, PTSD组和PTSD+EA组小鼠接受改良的单次延长应激造模。造模结束后, 给予PTSD+EA组和EA组小鼠电针刺激百会穴(2/15 Hz, 1 mA, 疏密波), 30 min/d, 连续干预7 d,给予Control组和PTSD组小鼠假刺激(只针刺百会穴, 不通电)干预7 d。干预结束7 d后, 收集各组小鼠粪便并采用高架十字迷宫实验和恐惧条件实验检测小鼠行为学变化, 收集的粪便通过16S rRNA测序检测分析其肠道菌群变化。采用SPSS 19.0进行统计分析, 多组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用Bonferroni检验。结果 (1)4组小鼠在高架十字迷宫实验中的开放臂活动时间和条件...