COMT基因与精神分裂症的关系

儿茶酚氧位甲基转移酶（catechol-O-methyhransferase，COMT）是广泛存在于人体内的一种代谢酶，它存在二种形式即膜结合型COMT（MB-COMT）、可溶型COMT（S—COMT）。在突触间隙，特别是突触后膜COMT活性较高，它能将S-腺苷蛋氨酸提供的甲基转移到儿茶酚胺苯环的3位氧上，成为3-甲氧基4-羟基衍生物，是具生物活性或毒性的儿茶酚胺的主要代谢酶，也是中枢神经系统外多巴胺的主要降解酶。儿茶酚胺特别是多巴胺系统是精神分裂症发病机制中最引人关注的生物学因素，COMT与精神分裂症的关系是目前研究的热点。现将COMT基因与精神分裂症的关系综述如下。     

儿茶酚—O—甲基转移酶Val158Met基因多态性与海洛因依赖的相关性研究

目的：探讨儿茶酚－O－甲基转移酶（COMT）基因多态性与海洛因依赖是否相关。方法：采用聚合酶链式反应（PCR）及限制性内切酶（NaIII)酶切片断多态（RELPs)技术对154例患者及98例正常对照研究以探讨COMT（Val158Met)基因多态性与海洛因依赖是否相关。结果：COMT（Val158Met)基因多态性与海洛因依赖存在相关（P＜0．01）,编码低活性COMT的等位基因Met158可能是海洛因依赖的易感基因之一（OR＝2．146）。结论：COMT（Val158Met)基因多态性与海洛因依赖相关,编码低活性COMT的等位基因Met158可能是海洛因依赖的易感基因之一。     

儿茶酚胺酶促放射测定法

儿茶酚胺酶促放射测定法(Radioenzymatic assay)是目前测定儿茶酚胺最敏感、精确的微量测定方法之一,应用于研究生理和病理状态下血浆或组织中儿茶酚胺的含量变化。测定的原理是以S-腺苷[~3H]甲基甲硫氨酸([~3H]SAM)作为甲基供体,在儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)的催化下,将多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)和肾上腺素(Ad)转变成[~3H]甲基衍生物:3-[~3H]甲氧酪胺([~3H]MT)、3-O-[~3H]甲基去甲肾上腺素([~3H]NMN)、3-O-[~3H]肾上腺素([~3H]MN)。经提取、薄层分离,液闪计数,测定血浆或组织内的DA、NA、Ad的含量。近     

儿茶酚-O-甲基转移酶Val158Met基因多态性与海洛因依赖的相关性研究

目的探讨儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因多态性与海洛因依赖是否相关.方法采用聚合酶链式反应(PCR)及限制性内切酶(NlaⅢ)酶切片断多态(RFLPs)技术对154例患者及98例正常对照研究以探讨COMT(Val158Met)基因多态性与海洛因依赖是否相关.结果 OOMT(Val158Met)基因多态性与海洛因依赖存在相关(P＜0.01),编码低活性COMT的等位基因Met158可能是海洛因依赖的易感基因之一(OR=2.146).结论 COMT(Val158Met)基因多态性与海洛因依赖相关,编码低活性COMT的等位基因Met158可能是海洛因依赖的易感基因之一.     

一个蛇苔氧甲基转移酶基因的克隆与功能鉴定

目的 克隆蛇苔氧甲基转移酶(CcOMT1)基因并对其进行功能鉴定。 方法 通过RT-PCR技术获得CcOMT1基因的cDNA全长。构建原核表达质粒pET32a-CcOMT1,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达后,利用Ni-NTA吸附柱对表达的重组蛋白进行纯化,并通过体外酶活分析其活性。采用DNAMAN 7.0和MEGA 5.1软件分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析。 结果 克隆得到的CcOMT1开放读码框为837 bp,编码278个氨基酸,预测分子量为30.95 kDa,等电点为5.59。与来自钝鳞紫背苔、紫花苜蓿和冰叶日中花的氧甲基转移酶的同源性分别为73.18%、53.60%和44.60%。对纯化的重组蛋白进行酶活检测,结果表明融合蛋白可以催化具有邻二酚羟基的黄酮和苯丙类化合物,产生相应的氧甲基化产物,其最适底物为槲皮素。 结论 克隆并鉴定了一个CcOMT1基因,为通过酶法实现化合物的氧甲基化修饰提供了一个候选基因。     

人DNA甲基转移酶家族与肿瘤发生发展关系的研究进展

DNA甲基化是由DNA甲基转移酶催化完成的,在高等真核生物中只发现了DNA-C5胞嘧啶的甲基化形式。在DNA甲基化过程中,胞嘧啶从DNA双螺旋中突出,进入与酶结合部位的裂隙,并通过DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DN-MT),把活性甲基从S-腺苷蛋氨酸(SAM)转移至C5胞嘧啶位上,形成5-     

一条土壤来源S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因克隆与进化分析

目的获取土壤来源基因编码s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,为通过基因工程生产s-腺苷甲硫氨酸创造条件。方法设计基因特异简并引物,以土壤总DNA为模板,利用PCR技术扩增得到一条基因编码区,通过TA克隆、测序和同源比对及进化分析表明该基因为放线菌来源基因。结果该基因全长编码区为1209bp,推测该基因编码全长为402个氨基酸残基,等电点（PI）为4.68、分子量为43452道尔顿,含有S-腺苷甲硫氨酸合成酶全酶必备的3个完整功能区的酸性蛋白质。进化分析表明该蛋白与天蓝色链霉菌A3（2）来源的s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因相似性高达98%。结论成功从土壤总DNA中克隆得到1条链霉菌同源的s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,为进一步利用该蛋白奠定了基础。     

黄粉甲抗冻蛋白基因克隆及生物信息学分析

目的：获得黄粉甲抗冻蛋白基因afpTx及相关生物信息学资料.方法：从黄粉甲幼虫中提取总RNA,通过RT-PCR合成黄粉甲抗冻蛋白基因afpTx的cDNA片段,克隆入载体pMD19-T,进行测序分析.酶切后将其亚克隆入表达载体pET32a（＋）,构建表达质粒pET32a-afpTx,并转化到大肠杆菌DL21后提取质粒,双酶切鉴定.采用MEGA4.0,BioEdit5.0.6软件对本研究克隆的抗冻蛋白基因afpTx进行氨基酸序列同源性变异及进化分析.结果：测序结果afpTx的cDNA长度为336bp;编码112个氨基酸;酶切、电泳结果表明克隆和亚克隆获得成功.抗冻蛋白氨基酸序列相似性分析表明afpTx与GenBank上提交的23条黄粉甲抗冻蛋白的氨基酸序列平均一致性为88%;与11条赤翅甲抗冻蛋白氨基酸序列的平均一致性为67%,2种甲虫的平均一致性为63%.进化树分析结果显示黄粉甲与赤翅甲抗冻蛋白序列是同源序列.赤翅甲的序列趋异度显著大于黄粉甲抗冻蛋白基因序列.结论：成功克隆了本地黄粉甲的afpTx基因,该序列是GenBank上提交的黄粉甲与赤翅甲抗冻蛋白的同源序列.     

COMT 基因多态性与精神障碍相关性研究进展

儿茶酚氧位甲基转移酶(catechol-O-methyllrans-ferase,COMT)是儿茶酚胺的代谢酶,是肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺的降解酶.COMT以可溶性COMT(s-COMT)和膜结合COMT(MB-COMT)两种形式存在于脑神经系统、肝肾组织中.     

儿茶酚胺氧位甲基转移酶基因多态性研究

为分析中国汉族人儿茶酚胺氧位甲基转移酶 (COMT)基因多态性 ,用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术分析了 53名正常中国汉族人COMT基因 1 94 7位点的多态性 ;并对NIaⅢ内切酶酶切后有异常带出现的标本PCR产物直接进行序列分析。发现中国汉族人COMT基因的A 1 94 7位点的频率为 0 .2 8;基因型G/G、G/A与A/A的频率分别为 0 .51 ,0 .4 2和 0 .0 7;并发现了C1 883/G和G1 966/T 2个多态性位点     

弓形虫三磷酸核苷水解酶基因的克隆与序列分析

目的：克隆并分析我国刚地弓形虫三磷酸核苷水解酶（NTPase）的编码基因。方法：采用聚合酶链反应（PCR）扩增弓形虫RH株的NTPase基因,克隆入pGEM-TEasy载体,转化后挑取阳性克隆进行酶切与测序鉴定,并对获得的NTPase基因及推导的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果：PCR扩增得到特异的弓形虫NTPase基因序列,测序结果表明,获得的弓形虫NTPase-Ⅱ基因全长1812bp,编码的603个氨基酸与Genebank报道的氨基酸序列同源性为100%。经DNAStar预测NTPase-Ⅱ存在6个潜在抗原表位。结论：成功克隆出序列正确的弓形虫NTPase-Ⅱ基因,为其相关研究奠定了基础。     

S-腺苷蛋氨酸的研究进展及其临床应用

1概述 S-腺苷蛋氨酸（英文名为S-adenosyl-L-methion-ine,SAM,SAMe或AdoMe）,是一种辅酶,参与甲基的转运,存在于所有的真核细胞中。     

SAMe可有效治疗膝关节炎

最新研究结果显示,食品添加剂S-腺苷甲硫胺酸(SAMe)与环氧合酶抑制剂(COX-2)——Celecoxib相比,药效产生较慢,但这两种药物用于临床治疗膝关节炎症状可获得同样疗效。     

细粒棘球蚴中国大陆株谷胱苷肽S-转移酶基因的克隆和序列分析

目的 对细粒棘球蚴谷胱苷肽S-转移酶基因进行克隆和序列分析。方法 从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA，根据国外细粒棘球蚴谷胱苷肽S-转移酶基因的已知序列设计一对引物，采用RT-PCR技术扩增，将PCR产物纯化后，将其克隆到pGEM-T载体后进行序列测定以及生物信息学分析。结果 用RT-PCR成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株谷胱苷肽S-转移酶基因，测序表明该基因开放阅读框为660bp，与已发表基因核苷酸序列相比，同源性为99％。结论 成功克隆了细粒棘球蚴中国大陆株谷胱苷肽S-转移酶基因序列，为其进一步的研究奠定基础。     

一种新的质粒介导的肠球菌氨基糖苷类耐药基因aph(2")-Ie

目的明确庆大霉素高水平耐药肠球菌（HLGR）新氨基糖苷类耐药基因及其传播机制。方法采用琼脂筛选法筛选获得HLGR,用琼脂稀释法及K—B纸片法进行抗菌药物的药敏试验,并通过聚合酶链反应（PCR）、质粒提取、Southem杂交、酶切克隆测序对耐药基因及其传播机制进行研究。结果肠球菌可通过产新的质粒介导的氨基糖苷类耐药基因aph（2”）-Ie编码的修饰酶APH（2”）-Ie引起HLGR。酶切克隆测序显示aph（2”）-Ie与染色体介导的aph（2”）-Id有较高的氨基酸同源性,其上游存在编码转座酶TnpA的插人序列,下游存在编码链霉素腺苷转移酶（str）基因。Southern杂交证实该耐药基因位于16kb左右的质粒上。结论HLGR可由一种新的质粒介导的APH（2”）-Ie的氨基糖苷类修饰酶引起,并可通过转座酶与其他耐药基因一起在质粒或染色体之间进行传播。     

当归咖啡酸-O-甲基转移酶在大肠杆菌中的表达及组织表达分析

目的研究当归咖啡酸-O-甲基转移酶(As COMT)在大肠杆菌(E.coli) BL21(DE3)中的表达,以及As COMT基因在当归抽苔植株和紫外线(UV)-B辐射胁迫下不同组织中的表达。方法基于前期克隆的As COMT基因全长cDNA序列,利用双酶切技术构建pGEX-4T-3-AsCOMT原核表达载体,将其转化至E. coli BL21(DE3)中,优化重组蛋白诱导表达条件,通过聚丙烯酰胺凝胶制备试剂盒(SDS-PAGE)电泳检测;并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析As COMT在当归抽苔植株和UV-B辐射胁迫下不同组织中的表达模式。结果异源表达得到重组蛋白分子量为40 KDa,大小与预测分子量一致,As COMT蛋白主要以包涵体形式存在。qRT-PCR分析显示,抽苔当归茎中COMT的表达量显著高于其他组织(P0.05); UV-B辐射胁迫下,茎和叶中As COMT基因的表达水平差异有统计学意义(P0.05),即随UV-B辐射增强,As COMT基因的表达量在茎和叶中呈先增加后减少的趋势,而在根中无明显变化。结论 As COMT在不同组织和处理下表达水平存在差异,且在E.coli中成功表达,为后期深入研究当归阿魏酸生物合成调控研究奠定了基础。     

产后抑郁与去甲肾上腺素代谢酶基因多态性的关联及危险因素分析

目的探究剖宫产产后抑郁发病与去甲肾上腺素代谢酶基因多态性的关联以及其相关危险因素。方法招募591例行择 期剖宫产的中国产妇,以爱丁堡产后抑郁评分（EPDS）9/10分为产后抑郁评估截点;并对所有无产前抑郁产妇的儿茶酚氧甲基 转移酶基因5个位点（rs2020917, rs737865等）和单胺氧化酶A基因1个位点（rs6323)进行基因型检测。采用SPSS18.0 分析各 单核苷酸多态性与剖宫产产后抑郁的相关性,分析所有单核苷酸多态性、连锁不平衡、单倍型等在产后抑郁发病中的作用,并对 所有相关危险因素行logistic 回归分析以及基因与环境的交互作用分析。结果产后抑郁发生率为18.1%;单因素分析显示 COMT 多态性rs2020917 基因、COMT 多态性rs737865 基因与产后抑郁发病率相关（P<0.05）;COMT基因型rs2020917 和 rs737865具有共线性,logistic分析显示COMT基因多态性rs2020917TT基因型和rs737865GG基因型、孕期压力大、家庭暴力 是产后抑郁的危险因素（P<0.05）,以上两种基因多态性与环境因素不存在显著的交互作用。结论携带COMT 多态性 rs2020917TT基因型、COMT多态性rs737865GG基因型,孕期压力大、家庭暴力是产后抑郁的危险因素。     

黄连N-甲基乌药碱-3'-羟化酶基因的克隆及序列分析

目的 克隆黄连Coptis chinensis N-甲基乌药碱-3'-羟化酶[(S)-N-methylcoclaurine-3'-hydroxylase]基因并做序列分析.方法 采用RT-PCR方法,以新鲜的黄连嫩叶cDNA为模板,克隆出黄连N-甲基乌药碱-3'-羟化酶基因的全部序列.结果 克隆到的基因(命名为CYP8083)全长为1680 bp,编码一个488个氨基酸残基组成的多肽.其氨基酸序列与日本黄连、唐松草、罂粟和花菱草的N-甲基乌药碱-3'一羟化酶的氨基酸序列同源性分别达95%、82%、70%、68%.将得到的序列提交Genbank,序列号为EF492879.通过与日本黄连的氨基酸序列比对,具有相同功能区域,因而可以参与N-甲基乌药碱的3'位羟基化反应.结论 黄连N-甲基乌药碱-3'-羟化酶基因的成功克隆为黄连植物中原小檗碱型苄基异喹啉类生物碱的基因工程等研究打下了良好的基础.     

去甲肾上腺素的放射酶学测定法(简讯)

去甲肾上腺素(NA)的放射酶学测定法灵敏度高、特异性强,是生理学和药理学研究中的一项重要技术。我们借鉴国外经验,建立了一种改进的NA放射酶学测定法:用S-腺苷-L-[甲基-~3H]-甲硫氨酸(~3H-SAM)作为甲基供体,在苯乙胺-N-甲基转移酶的作用下,使样品中的NA在苯乙胺-N端接上一个氚标记的甲基,成为氚标记的肾上腺素(~3H-A),测定~3H-A的放射强度,便可推算出NA的含量。本方     

COMT多态性对利培酮所致男性高泌乳素血症的影响

目的探讨儿茶酚氧位甲基转移酶（catechol—0．methyhransferase,COMT）的基因多态性与利培酮所致男性精神分裂症（SCZ）患者高泌乳素血症之间的相关性。方法按照CCMD-3诊断标准,在中国汉族人群中收集52例首发男性SCZ患者作为研究对象。在利培酮药物治疗前与治疗6周后分别抽取其外周血液样本,采用微粒酶免疫分析法对用药前后的泌乳素含量进行测定,利用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态分析（polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR—RFLP）技术对患者外周血所提取的基因组DNA进行基因分型。结果COMT基因Vall58／108Met多态性与男性SCZ患者的人口学因素没有明显的关联,入组病例在单药应用利培酮治疗6周后泌乳素水平显著升高（P〈0．01）。然而,Val/Val基因型患者血液中的催乳素水平的升高幅度明显地低于其它基因型（P=0．007）。结论COMT基因Vall58／108Met多态性有望成为预测利培酮治疗SCZ所致高泌乳素血症的潜在生物学标记。