麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织形态及细胞bFGF影响的研究

目的：观察麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织形态及细胞bFGF的影响,探讨麝香乌龙丸治疗骨关节炎是否与改变软骨组织形态以及调节细胞bFGF有关。方法：建立木瓜蛋白酶关节腔注射兔实验性膝骨关节炎模型,灌胃4周后,观察软骨组织形态及细胞bFGF表达情况。以软骨组织病理积分、阳性细胞率、阳性细胞平均光密度对观察目标量化。结果：麝香乌龙丸能减轻实验兔关节软骨病理积分,麝香乌龙丸组与模型组比较单项病理积分有显著差异（P〈0.01）,麝香乌龙丸组与模型组比较病理总积分有显著差异（P〈0.01）。麝香乌龙丸能上调细胞bFGF的表达,麝香乌龙丸组与模型组和正常组比较均有差异（P〈0.01）,模型组和正常组比较无差异（P〉0.05）。结论：麝香乌龙丸治疗膝骨关节炎可能与调节bFGF的表达,修复软骨损害有关。     

麝香乌龙丸对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 观察麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡和凋亡调控基因bcl-2及其抑制基因bax的影响,探讨麝香乌龙丸对关节软骨的保护作用是否与抑制细胞凋亡与调节bcl-2及bax的表达有关.方法 选用健康日本大耳白兔30只,随机分成正常对照组、造模组、麝香乌龙丸组.用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型, 4周后处死全部动物,取右膝关节胫骨内侧髁软骨,软骨组织切片用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,免疫组化法检测关节软骨中bcl-2、bax的水平.结果 麝香乌龙丸组细胞凋亡率明显低于造模组(P＜0.05),bcl-2在麝香乌龙丸组中的表达高于造模组(P＜0.05),bax的表达低于造模组(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸通过上调bcl-2的表达,下调bax的表达,达到抑制兔实验性膝骨关节炎软骨中软骨细胞的过度凋亡,这可能是该药治疗骨性关节炎机制之一.     

麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织形态及p38MAPK,Caspase-3表达的影响

目的: 观察兔膝骨关节炎(KOA)软骨组织形态及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)的表达,探讨麝香乌龙丸治疗兔KOA的作用机制。 方法: 将40只成年雄性大耳白兔,随机分为正常组(A)10只,造模组30只。采用关节腔内注射1.6%木瓜蛋白酶方法建立兔KOA模型,造模成功后随机分为模型组(B)、麝香乌龙丸低、高剂量组(C,D,n=10),ig给予麝香乌龙丸0.6,1.2 g·kg^-1·d^-1,灌胃4周后处死动物切取软骨组织,观察软骨组织形态变化,免疫组化染色检测关节软骨细胞中p38MAPK,Caspase-3的表达。 结果: 麝香乌龙丸低、高剂量组均能减轻兔软骨的病理损害,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);麝香乌龙丸低、高剂量组均能降低软骨中p38MAPK及Caspase-3表达,与模型组比较具有显著差异(P<0.01)。 结论: 麝香乌龙丸能够减轻兔骨关节炎软骨病理损害;麝香乌龙丸治疗骨关节炎的机制,与其能降低p38MAPK,Caspase-3的表达,抑制软骨细胞过度凋亡有关。     

抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态及MMP-1、TIMP-1的影响

目的:观察抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)的影响,探讨抗骨增生片是否能调节关节软骨MMP-1及TIMP-1的表达而起到对软骨的保护作用.方法:30只日本大耳白兔随机分为3组:正常对照组(A),模型对照组(B),抗骨增生片组(C).用1.6%木瓜蛋白酶膝...     

骨碎补总黄酮对骨关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的研究

目的：研究中药骨碎补总黄酮对前交叉韧带切断（ACLT）兔膝骨关节炎模型软骨中基质金属蛋白酶-1、3（MMP-1、MMP-3）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法：新西兰大白兔30只,随机分为假手术组、ACLT4周组、ACLT8周组、骨碎补总黄酮4周组、骨碎补总黄酮8周组,每组6只,分别处理并给药后于实验第4、8周处死动物,对比各组大白兔股骨髁关节软骨的大体改变,行常规HE染色观察其组织学形态,用反转录—聚合酶链反应监测关节软骨中MMP-1、MMP-3及TIMP-1的表达。结果：ACLT造模4周后可见软骨退变,8周时退变进一步加重,不同造模时期软骨退变大体评分有统计学意义。假手术组MMP-1、MMP-3、TIMP-1的表达较低,ACLT组较假手术组表达增高,且随着造模时间的延长表达逐渐升高;骨碎补总黄酮组较同期ACLT组表达降低。结论：MMP-1、MMP-3、TIMP-1在骨关节炎的发病过程中起重要作用,是导致组织学退变的原因之一。中药骨碎补总黄酮对上述三项指标有抑制作用,对骨关节炎的防治有积极作用。     

川芎嗪对鼠骨关节炎关节软骨MMP-1、TIMP-1表达的影响

目的:观察关节内注射川芎嗪对鼠骨关节炎(Osteoarthritis,OA)模型关节软骨退变及软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,探讨川芎嗪对OA的修复作用。方法:50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组、丹参组和川芎嗪组5组:除空白对照组外,其余四组作左侧跟腱切除建立右膝OA模型。造模后第5周开始,川芎嗪组于右膝关节内注射盐酸川芎嗪注射液作为治疗,于第12周末处死动物,取股骨外髁软骨标本,进行HE染色,光镜下观察其病理改变,以免疫组织化学法检测关节软骨中的MMP-1、TIMP-1水平。结果:川芎嗪组关节软骨退变减缓,Mankin’s评分及软骨中MMP-1的水平非常显著低于模型组(P<0.01),TIMP-1水平较模型组显著上升(P<0.01)。结论:川芎嗪能明显降低OA软骨退变的程度,明显降低OA软骨中MMP-1的水平,增加TIMP-1的水平,具有保护和修复早期OA关节软骨的作用,可延缓OA的病理过程,有可能成为防治OA的良好药物。     

麝香乌龙丸对大鼠佐剂性关节炎软骨组织形态及MMP-3、MMP-9表达的影响

目的 观察麝香乌龙丸对大鼠佐剂性关节炎软骨组织形态及MMP-3、MMP-9表达的影响,探讨其对佐剂性关节炎软骨组织破坏作用机制.方法 从40只大鼠中随机抽取1O只作为正常组,其余30只大鼠用完全弗式佐剂(FCA)复制佐剂性关节炎模型,并将其随机分为模型组、麝香乌龙丸1g/(kg·d)组、麝香乌龙丸2g/(kg·d)组,灌胃,连续30 d.HE染色、Masson染色观察软骨组织形态学变化,免疫组化检测软骨中MMP-3、MMP-9的表达.结果 麝香乌龙丸低、高剂量组均能减轻软骨病理改变,与模型组比较具有显著差异(P＜0.01);麝香乌龙丸高剂量组优于麝香乌龙丸低剂量组治疗(P＜0.05).麝香乌龙丸低、高剂量组均能降低软骨中MMP-3.MMP-9表达,与模型组比较具有显著差异(P＜0.01);高剂量治疗优于低剂量治疗(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸能够阻止大鼠佐剂性关节炎软骨破坏,其机制与抑制MMP-3、MMP-9的高表达和胶原过度降解有关.     

不同针灸方法对KOA模型大鼠软骨损伤生物标志物MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响

摘要：目的：观察比较不同针灸方法对KOA模型大鼠MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响。方法：将体重180-200g的SPF级雄性SD大鼠50只,适应性饲养7天后随机分为正常组（N）、模型组（M）、温针组（W）、电针组（D）、手针组（S）五组,每组10只。N组不作任何处理,其余四组腹腔注射戊巴比妥钠（1%,0.04ml/g）麻醉后,1mg单碘乙酸盐（MIA）溶于50μL 9%的无菌生理盐水,右膝关节注射造模,周期14天,造模前后进行行为学Lequesne MG评分检测。N、M组不作任何干预,其余三组对鹤顶、阳陵泉穴分别进行针刺、电针、温针干预,手针组0.25*25mm针灸针,刺入约5mm平补平泻手法,200 r/min,1min,留针20 min,10 min行针1次;电针组平补平泻后接电针,疏波,1mA,2Hz,20min/次;温针组平补平泻后,将直径5mm艾柱置于针柄,20min/次;三组均隔天干预,共28天。干预前后进行行为学机械刺激回缩阈值检测,28天后戊巴比妥钠麻醉,生理盐水心脏灌注取关节软骨和关节进行Western blot、免疫组化检测。结果：行为学Lequesne MG评分检测显示,造模前各组大鼠膝关节评分差异无统计学意义（P>0.05）,造模后除N组外,其余四组评分显著高于造模前,差异有统计学意义（P<0.05）。机械刺激回缩阈值检测显示,干预前M、W、D、S组与N组相比回缩阈值均降低,其结果有统计学意义（P<0.05）。干预后D组较M组升高,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测关节软骨显示,MMP-1阳性表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）;D组较W组降低（P<0.05）,MMP-3阳性表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）,D组较S、W组降低（P<0.05）;T1MP-1阳性表达N、M、W、S组较D组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,S组较M组升高（P<0.05）。Western blot检测软骨显示,MMP-1蛋白表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）,W组较D组升高（P<0.05）;MMP-3蛋白表达M组较N组升高（P<0.05）,D、S组较M组降低（P<0.05）;T1MP-1蛋白表达D、S、W组较M组升高（P<0.05）。其余结果无统计学意义（P>0.05）。结论：电针、温针、手针三种方法可有效改善KOA模型大鼠关节软骨损伤,可能通过升高TIMP-1的表达从而降低MMP-1、MMP-3的表达,相比之下电针更有利于调节上升TIMP-1且抑制MMP-1、MMP-3的表达,手针方法次之,温针效果则略逊于前两者。     

南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响

目的观察南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响,探讨南星骨痛凝胶贴膏治疗兔膝骨关节炎可能的作用机制。方法 18只健康6月龄新西兰兔随机分成3组:空白组(A组)、模型组(B组)、骨痛膏治疗组(C组). BC组用3%木瓜蛋白酶关节腔内注射造模后C组给予南星骨痛凝胶贴膏外敷,给药4周后,用Aloka Latheta LCT-200观察兔膝骨关节影像学改变、用ELISA法检测血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1含量。结果 C组兔膝关节病变程度较B组轻,C组兔血清中IL-1、TNF-α、MMP-13含量较B组降低(P<0. 05),TIMP-1含量较B组升高(P <0. 05)。结论南星骨痛凝胶贴膏能减轻兔膝关节骨关节炎病变程度,对关节软骨有保护作用,其作用机制可能与抑制炎症因子IL-1、TNF-α及MMP-13表达,增加TIMP-1表达有关。     

麝香乌龙丸对AA大鼠软骨组织形态及OPG、RANKL表达的影响

目的 观察麝香乌龙丸对AA大鼠软骨组织形态及OPG、RANKL表达的影响,探讨麝香乌龙丸对RA软骨破坏和修复的可能作用机制.方法 建立AA大鼠模型,治疗组予麝香乌龙丸1.0 g/(kg·d)灌胃;模型组和正常组予等量生理盐水灌胃.7d后处死全部动物,取跖趾关节,HE染色观察软骨组织形态,免疫组织化学检测OPG、RANKL的表达.结果治疗组关节软骨破坏程度较模型组明显减轻;OPG在治疗组中表达高于模型组和正常组;RANKL在治疗组中较模型组低.结论 治疗组能够延缓关节软骨破坏及促进软骨修复,实验表明其机制与上调OPG、下调RANKL的表达,降低RANKL/OPG的比例有关.     

少腹逐瘀丸对子宫内膜异位症大鼠MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响

目的 探讨少腹逐瘀丸(当归、赤芍、川芎等)对患子宫内膜异位症大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、少腹逐瘀丸高剂量组、低剂量组,另设假手术组.给药30 d后,以RT-PCR法检测大鼠在位以及异位内膜组织中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达.结果 少腹逐瘀丸能显著降低子宫内膜异位症大鼠MMP-9 mRNA的表达(P＜0.01),显著升高TIMP-1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 少腹逐瘀丸可调节MMP-9/TIMP-1的平衡,这可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一.     

活血解毒汤对急性冠状动脉综合征患者血清MMP-1、MMP-9、TIMP-1的影响

目的观察活血解毒汤对急性冠状动脉综合征（ACS）患者血清MMP-1、MMP-9及TIMP-1的影响，探讨活血解毒疗法对动脉粥样硬化斑块稳定的可能机制。方法随机将62例ACS患者分为活血解毒治疗组（32例）与西药常规对照组（30例）；治疗4周后比较两组血清MMP-1、MMP-9及TIMP-1水平变化。结果两组血清MMP-1、MMP-9水平明显降低，TIMP-1明显升高，治疗组作用更明显，与对照组比较差异有统计学意义。结论活血解毒疗法可明显降低ACS患者血清MMP-1、MMP-9水平，升高TIMP-1水平，从而起到稳定动脉粥样硬化斑块的作用。     

肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响

目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用。方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化。结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2。结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用。     

枳实薤白桂枝汤对不稳定型心绞痛患者MMP-9/TIMP-1的影响

目的:探讨枳实薤白桂枝汤对血瘀、痰浊、气滞、寒凝为主的不稳定型心绞痛(UA)患者基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)水平及其基因表达的影响及其作用机制.方法:UA患者60例,按随机原则,将患者划分为对照组和治疗组,每组各30例.酶联免疫标记(ELISA)测定血清MMP-9,TIMP-1水平,实时荧光定量PCR技术进行相对定量检测MMP-9,TIMP-1基因表达,比较两组MMP-9,TIMP-1水平及其基因表达的变化.结果:两组患者症候积分较治疗前均有改善(P＜0.05),且治疗组优于对照组(P＜0.05).两组患者MMP-9,TIMP-1水平较治疗前均有改善(P＜0.05),且治疗组优于对照组(P＜0.05).两组患者MMP-9,TIMP-1 mRAN较治疗前均有改善(P＜0.05),MMP-9/TIMP-1 mRAN比较,治疗组优于对照组(P＜0.05).结论:在规范化治疗的基础上加用枳实薤白桂枝汤可进一步改善UA患者MMP-9,TIMP-1水平及其基因表达,促进粥样斑块的稳定性.     

丹参对糖尿病肾病大鼠MMP-2,TIMP-1,TGF-β1和IV-C表达的影响

目的 探讨丹参对MMP-2,TIMP-1,TGF-β1和IV-C在糖尿病大鼠肾脏中表达的调节及其与糖尿病肾脏病变的关系.方法 SD大鼠随机分成正常组、模型组、对照组和观察组,每组10只.用高糖高脂饲料刺激、加小剂量STZ诱导2型糖尿病大鼠模型,于第16周末处死大鼠,免疫组织化学的方法检测各组大鼠肾组织中MMP-2,TIMP-1,TGF-β1和IV-C的表达,RT-PCR法检测各组大鼠MMP-2,TIMP-1mRNA的表达,同时检测血糖、尿蛋白及肾功能等.结果 对照组、观察组与模型组比较,TGF-β1,TIMP-1和IV-C的表达显著减少(P<0.05),MMP-2的表达显著增高(P<0.05),MMP-2,TIMP-1mRNA的表达与组化结果一致.同时,MMP-2及IV-C表达的改变分别与尿蛋白排泄率升高有显著相关性(P<0.05).结论 肾组织中的MMP-2,TIMP-1,TGF-β1和IV-C的表达改变与糖尿病肾脏病变有关,丹参通过影响上述指标的变化对DN的治疗产生作用.     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨应力变化的影响

目的：观察针刀对膝骨关节炎（KOA）兔膝关节软骨退变、膝关节整体应力、关节软骨应力变化以及肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法：将28只兔随机分为空白组、模型组、电针组、针刀组,每组7只。除空白组均进行6周兔左后肢制动,建立兔KOA模型,电针组、针刀组均干预3周。采用苏木精-伊红（HE）法光镜下观察兔软骨病理改变,并评价软骨退变程度;运用有限元技术模拟KOA模型兔膝关节屈曲60°进行检测,观察膝关节整体应力及关节软骨最大应力变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测滑液中TNF-α、IL-1β表达水平。结果：与空白组比较,模型组Mankin评分升高(P<0.05）,膝关节整体应力、关节软骨最大应力显著降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P<0.01）;干预后,与模型组比较,电针组、针刀组Mankin评分均显著降低(P<0.05),膝关节整体应力、关节软骨最大应力均升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平均明显降低(P<0.01）;与电针组比较,针刀组Mankin评分降低(P<0.05),膝关节整体应力和关节软骨最大应力较电针组升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β水平较电针组显著降低(P<0.01）。结论：针刀干预能够调节膝关节整体应力及关节软骨的最大应力,进而恢复膝关节应力环境、抑制炎症介质释放,从而改善关节软骨退变,达到治疗KOA的目的。     

固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白的影响

目的:观察固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠肺组织基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)2、9,及基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)1、2蛋白的影响,初步探讨固本防哮饮防治哮喘气道重塑的可能作用机制。方法:用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发联合呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染的方法,建立BALB/c小鼠哮喘缓解期模型,将40只小鼠分为4组,分别为正常组、模型组、孟鲁司特钠组、固本防哮饮组,每组10只。造模成功后,采用固本防哮饮和孟鲁司特钠进行干预,干预结束后,采用Envision法免疫组织化学技术检测各组小鼠肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白分布及表达情况。结果:MMP-2、TIMP-2和TIMP-1蛋白主要分布于支气管管壁,而MMP-9蛋白分布于广泛肺组织。与正常组比较,模型组小鼠肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达水平显著升高(P0.01);与模型组比较,孟鲁司特钠组、固本防哮饮组小鼠肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达明显降低(P0.01)。结论:固本防哮饮能降低MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达,维持ECM内环境的稳定,减少黏液的分泌和胶原的沉积,从而减轻气道重塑。