三维培养的鼻粘膜腺体细胞中粘蛋白基因表达

粘液过量分泌是慢性呼吸道疾病的主要特征之一,慢性鼻窦炎的鼻粘液主要来源于鼻腔及鼻窦的粘膜下腺体细胞,而粘蛋白是鼻粘液的主要成分。目的:研究培养的鼻粘膜腺体细胞中粘蛋白基因的表达。方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)技术,检测粘蛋白基因MUC2,MUC5AC,MUC5B的表达。结果:三维培养在Ⅰ型胶原蛋白凝胶内的人鼻粘膜腺体细胞(HNG)中,MUC2,MUC5AC和MUC5B均有表达,在培养液中加入大肠杆菌内毒素(LPS)8小时(100ng/ml)后,MUC2,MUC5AC表达明显增强,而MUC5B表达无变化。结论:实验结果提示,体外培养的HNG细胞可以作为探讨慢性呼吸道疾病粘液过量分泌的研究模型,LPS可以促进部分粘蛋白基因的表达。     

人鼻粘膜腺体细胞的悬浮培养

目的 建立溢鼻粘膜腺体细胞的悬浮培养模型。方法 采用胶原凝胶上悬浮培养。结果 经有蛋白单克隆抗体ＡＥ１／ＡＥ３染色呈阳性反应,证明培养的脾体细胞呈上皮系细胞特征。经过２周的培养,出现分泌粘液糖蛋白的表型分化,经ＡＢ－ＰＳＡ染色染成深蓝色,证实存在粘液糖蛋白的分泌。航向电镜下可见明显的分泌颗粒,细胞膜表面生长微绒毛,细胞膜之间形成明显的紧密联接,具有典型的腺上皮特征。结论 成功地建立了人鼻粘膜腺体细     

人鼻粘膜腺体细胞的悬浮培养

目的建立人鼻粘膜腺体细胞的悬浮培养模型。方法采用胶原凝胶上悬浮培养。结果经抗角蛋白单克隆抗体ＡＥ１／ＡＥ３染色呈阳性反应,证明培养的腺体细胞呈上皮系细胞特征。经过２周的培养,出现分泌粘液糖蛋白的表型分化,经ＡＢＰＡＳ染色染成深蓝色,证实存在粘液糖蛋白的分泌。透射电镜下可见明显的分泌颗粒,细胞膜表面生长微绒毛,细胞膜之间形成明显的紧密联接,具有典型的腺上皮特征。结论成功地建立了人鼻粘膜腺体细胞的悬浮培养模型。     

人鼻粘膜腺体细胞胶原蛋白凝胶内培养模型的建立

目的建立人鼻粘膜腺体细胞的胶原蛋白凝胶内培养模型。方法采用胶原蛋白凝胶内培养。结果包埋于胶原蛋白凝胶内的腺体细胞呈三维生长，一周后可见管腔结构形成，透射电镜下可见管腔侧细胞表面布满微绒毛，细胞膜之间形成明显的紧密连接，细胞内充满分泌颗粒，具有典型的腺上皮特征。经爱先蓝ＰＡＳ染色，证明有粘液糖蛋白分泌，而经抗溶菌酶多克隆抗体免疫组化染色，９０％以上细胞呈阳性反应。结论胶原蛋白凝胶内培养的鼻粘膜腺体细胞改变了原来的分化表型，同一细胞具有粘液腺和浆液腺两种分化特征。     

人鼻粘膜腺体细胞胶原蛋白凝胶内培养模型的建立

建立人鼻粘膜腺体细胞的胶原蛋白凝胶内培养模型。方法 采用胶原蛋白凝胶内培养。结果包埋于胶的蛋白凝胶内的腺体细胞呈三维生长，一周后可见管腔结构形成，透射电镜下可见管腔侧细胞表面布满微绒毛，细胞膜之间形成明显的紧密连接，细胞内充满分泌颗闰，具有典型的腺上皮特征。