Survivin、P53突变基因、PTEN基因在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因Survivin、P53突变基因和抑癌基因PTEN在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及相关性。方法：应用免疫组织化学法（SP），检测60例NSCLC组织标本和20例正常肺组织标本中的Survivin、P53突变基因、PTEN基因表迭情况。结果①在60例NSCLC组织标本中，Survivin、P53，PTEN表迭结果分别为47例（78．33%）、42例（70．00%）、27例（45．00％）。在20例正常肺组织标本中，Survivin、P53基因无表达，PTEN阳性表达18例（90%）。②Survivin、P53在NSCLC组织中的阳性表达明显高于正常肺组织（P〈0．01）。Survivin的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、是否淋巴结转移及TNM分期无相关性（P〉0．05），P53的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。PTEN在正常肺组织中的阳性表达明显高于NSCLC组织（P〈0．01）。PTEN的阳性表达与NSCLC的组织学类型及TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的分化程度、有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。③Survivin与P53在NSCLC的表达无相关性（P〉0．05），PTEN与Survivin、P53在NSCLC的表达均有显著差异（P〈0．05）。结论Survivin、P53突变基因、PTEN基因的异常表达与非小细胞肺癌的发生发展有关；三者在NSCLC的发生发展中起协同作用；P53突变基因和PTEN基因可作为诊断肺癌和评价肺癌预后的参考标志及基因治疗的新靶点。     

ALDH1作为肺癌干细胞功能标志物的研究

目的探讨乙醛脱氢酶-1(ALDH1)作为肺癌干细胞标志物在肺癌中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化法检测44例肺癌组织及癌旁组织中ALDH1的表达情况,分析ALDH1表达情况与临床病理特征、无病生存率的相关性,应用COX比例风险模型分析预后影响因素。结果肺癌组织中ALDH1阳性表达率明显高于癌旁组织(P0.05)。ALDH1表达情况与肺癌患者的年龄、性别、肿块大小、吸烟指数、组织学类型和淋巴结转移无明显相关性(P均0.05),与TNM分期与分化程度明显相关(P均0.05)。ALDH1阳性表达患者无病生存率明显低于阴性表达者(P0.05)。多因素COX比例风险模型分析显示ALDH1表达与TNM分期是影响患者预后的独立危险因素(P均0.05)。结论 ALDH1在肺癌组织中呈现高表达,表达差异与TNM分期及分化程度相关;ALDH1阳性表达患者预后较差,与TNM分期同为患者预后的独立危险因素。检测ALDH1的表达情况对判断患者的预后有重要意义。     

Livin和Survivin在胃癌组织中表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白Livin和Survivin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及二者在胃癌组织中表达的相关性。方法采用免疫组化S-P方法检测正常胃黏膜及胃癌组织中Livin和Survivin的表达情况。结果胃癌组织中Livin和Sur-vivin的表达阳性率分别为48.3%,63.8%,与正常胃黏膜中的表达阳性率比较均有显著性差异(P均<0.05);在组织分化差、淋巴结转移者、临床分期高者Livin表达率增高,与对应组比较有显著性差异(P均<0.05);在胃癌组织中Livin表达和Survivin表达呈正相关性(rs=0.530,P<0.01)。结论Livin和Survivin在胃癌组织中表达增高,提示参与胃癌的发生、发展,Livin可作为胃癌的生物学标志物,可能成为胃癌治疗的新分子靶点。     

ERK-1及相关蛋白在胃癌中的表达及相关性分析

目的探讨ERK-1、Ezrin和Survivin 3种蛋白在胃癌组织中表达情况并探讨其意义。方法采用组织芯片技术和微波EliVisionTM免疫组织化学法检测60例胃癌组织中ERK-1、Ezrin和Survivin蛋白的表达情况,并与42例正常胃黏膜组织进行比较。结果胃癌组织中ERK-1、Ezrin和Survivin蛋白表达均定位于细胞浆,阳性率分别为82%(49/60),75%(45/60)和83%(50/60),其表达均明显高于正常胃黏膜组织(P均<0.05)。ERK-1和Survivin蛋白的表达与淋巴结转移、分化程度及病理分期有关(P均<0.05),两者之间表达呈正相关(P<0.05)。Ezrin蛋白在胃癌中的表达与淋巴结转移和分化程度有关(P<0.05),Ezrin和ERK-1蛋白的表达呈正相关性(P<0.05),与Survivin蛋白的表达呈明显正相关(P<0.05)。结论 ERK-1、Ezrin和Survivin 3种蛋白在胃癌呈高表达,且与胃癌的发生、发展和转移有关。     

麦冬有效部位对支原体感染小鼠肺组织黏蛋白MUC5ac表达的影响

目的:通过实验研究麦冬有效部位对肺炎支原体(MP)感染小鼠的肺组织黏蛋白5ac(MUC5ac)表达及分泌的影响。方法:将100只BALB/c小鼠,分为正常对照组,模型组,阿奇霉素组,养阴清肺组,麦冬多糖高、中、低剂量组,麦冬皂苷高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组采用MP滴鼻法造模,连续造模3 d后,各组开始灌胃给药,每天1次,阿奇霉素组连续给药5 d,其他组连续给药6 d后,收集肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中MUC5ac的蛋白含量;采集小鼠肺组织,PCR法测定肺组织中MUC5ac mRNA的表达。结果:1)肺组织MUC5ac mRNA的表达:与正常组相比,模型组肺组织MUC5ac mRNA的表达极显著上升(P<0.01);与模型组对比,阿奇霉素的表达量降低,具有极显著性(P<0.01);麦冬多糖高、中、低剂量组,养阴清肺组及麦冬皂苷高剂量组的表达量降低,具有显著性差异(P<0.05)。2)BALF MUC5ac的含量:与正常组对比模型组含量显著增加(P<0.01),与模型组对比,阿奇霉素组、麦冬皂苷高剂量组含量显著减少(P<0.01),麦冬皂苷中剂量组和麦冬多糖高、中剂量组含量减少,具有显著性差异(P<0.05)。结论:麦冬有效部位可下调MUC5ac蛋白的表达及分泌。     

白藜芦醇对RSV感染BALB/c小鼠肺泡灌洗液TNF-α,IL-1β,IL-6表达的调控趋势

目的:研究白藜芦醇(Res)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染BALB/c小鼠肺泡灌洗液(BALF)不同时间点肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)表达的调控趋势。方法:RSV滴鼻感染BALB/c小鼠,白藜芦醇灌胃给药进行干预,并于首次滴鼻后24,72,144 h取各组小鼠支气管肺泡灌洗液,ELISA法检测其中TNF-α,IL-1β,IL-6含量变化及Res的干预效果。结果:RSV感染BALB/c小鼠24 h后,BALF中TNF-α,IL-1β,IL-6表达较正常组均明显升高(P<0.01),而Res组TNF-α(P<0.01),IL-1β(P<0.05),IL-6(P<0.01)表达较RSV组明显下调;RSV感染BALB/c小鼠72 h后,BALF中TNF-α(P<0.05),IL-1β(P<0.01),IL-6(P<0.01)表达较正常组高,但TNF-α,IL-1β,IL-6总体表达量较24 h组下降趋势明显,Res组IL-1β,IL-6表达较RSV感染组降低(P<0.05),而TNF-α表达与RSV感染组比较无显著性差异;RSV感染BALB/c小鼠144 h后,BALF中IL-1β(P<0.01),IL-6(P<0.05)表达较正常组高,而TNF-α表达较正常组无差异,Res组TNF-α,IL-1β,IL-6表达与RSV感染组比较无显著性差异。结论:白藜芦醇能显著抑制RSV感染BALB/c小鼠早期肺泡灌洗液内炎性细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-6的过度表达,且随着感染时间的延长,能使TNF-α,IL-1β,IL-6的表达维持在相对较低的水平。     

S100A4、Bcl-2、Survivin在喉癌组织中的表达及临床意义

目的探讨喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)S100A4、Bcl-2、Survivin的表达水平在喉鳞癌中的临床病理意义及相互关系。方法收集手术切除喉鳞癌组织标本40例(其中高分化15例、中分化5例、低分化20例,伴有淋巴结转移18例),均为首次手术,术前均未接受放疗、化疗及肿瘤药物治疗;另取20例声带息肉组织作对照组。所有切除手术标本置于4%甲醛液中固定后常规石蜡包埋,通过免疫组化法检测S100A4、Bcl-2、Survivin的表达并进行分析。结果声带息肉组S100A4、Bcl-2、Survivin阳性表达率分别为15%,20%和10%,高中分化组分别为75%,60%和55%,低分化组分别为95%,95%和90%,3组比较均有显著性差异(P均0.05)。有淋巴结转移者S100A4、Survivin阳性表达率显著高于无淋巴结转移者(P均0.05),Bcl-2阳性表达率与无淋巴结转移者比较无显著性差异(P0.05)。恶性肿瘤S100A4阳性表达组与阴性表达组中Survivin阳性表达率比较具有显著性差异(P0.01),等级分析表明S100A4与Survivin表达存在正相关性关系(r=0.525,P0.01)。恶性肿瘤组织S100A4阳性组与阴性组中Bcl-2的阳性表达率比较无显著性差异(P0.05),等级分析表明S100A4与Bcl-2表达无相关性(r=0.109,P0.05)。Survivin阳性表达组与阴性表达组中Bcl-2阳性表达率比较有显著性差异(2=6.580,P0.01),等级分析表明Survivin与Bcl-2表达有显著正相关性(r=0.473,P0.01)。结论 S100A4、Bcl-2、Survivin均是反映喉鳞癌进展、转移等生物学特性及预后的重要标记物,三种基因在喉癌的发生发展中有重要作用。通过对它们的联合检测可以对喉癌的早期诊断、治疗和判断预后提供理论依据。     

柴朴汤对支气管哮喘豚鼠支气管肺组织中Bcl-2表达的影响

目的:观察中药柴朴汤对哮喘豚鼠支气管肺组织中Bc1-2表达的影响.方法:40只健康豚鼠随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松组(0.001 g·kg-1),柴朴汤组(0.35 g·kg-1),每组10只.采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入激发建立哮喘模型,各组豚鼠均于激发前30 min予相应灌胃处理,隔日1次,共7次.末次激发24h后,处死各组豚鼠.检测各组豚鼠血液中嗜酸性粒细胞数及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)数,嗜酸粒细胞(EOS)数及百分比;HE染色法观察各组豚鼠支气管肺组织病理改变;免疫组化法检测支气管肺组织中Bcl-2蛋白表达,原位杂交法检测支气管肺组织中Bcl-2 mRNA的表达.结果:柴朴汤组外周血中EOS数,BALF中WBC敷、EOS数及百分比均较哮喘模型组明显降低(P＜0.05).与哮喘模型组比较,柴朴汤组支气管肺组织中Bcl-2 mRNA及蛋白的表达有显著性差异(P＜0.05).地塞米松组与柴朴汤组比较,无明显差异.结论:柴朴汤可以明显降低哮喘豚鼠外周血和支气管肺泡灌洗液中EOS,减轻支气管肺组织的炎症反应,下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平.     

鼠曲草醇提物改善慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症的实验研究

目的:研究鼠曲草醇提物对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症的影响。方法:采用气管内滴注脂多糖(LPS)加烟熏法建立COPD大鼠模型,造模后第15日开始药物干预,实验结束采用细胞计数法,计算肺泡灌洗液(BALF)细胞中巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞的比例;采用ELISA法测定BALF中IL-8和TNF-α浓度;同时采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中IL-8、TNF-α的表达水平。结果:与模型组相比,鼠曲草醇提物组明显减少大鼠BALF中白细胞、巨噬细胞和中性粒细胞百分比(P0.05),而淋巴细胞百分比无显著性差异。与模型组相比,鼠曲草醇提物组明显降低大鼠BALF中IL-8、TNF-α浓度(P0.05),同时鼠曲草醇提物组能够显著下调肺组织中IL-8、TNF-αmRNA的表达水平(P0.05)。结论:鼠曲草醇提组可降低COPD大鼠BALF中白细胞、巨噬细胞和中性粒细胞百分比,降低COPD大鼠BALF中细胞因子IL-8和TNF-α的浓度及mRNA表达水平。     

CyclinD1和Survivin在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义

目的探讨Cyclin D1和Survivin在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测118例乳腺浸润性导管癌患者的癌组织及相应30例癌旁正常乳腺组织中Cyclin D1和Survivin的表达情况,分析二者表达与乳腺浸润性导管癌患者的临床病理因素(年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级、TNM分期)、内分泌表型(ER、PR)及预后之间的关系。结果乳腺浸润性导管癌组织中Cyclin D1和Survivin阳性表达率明显高于正常乳腺组织(P均0.05)。乳腺浸润性导管癌组织中Cyclin D1和Survivin阳性表达与患者的淋巴结转移、组织学分级和TNM分期呈正相关,与其他临床病理因素和内分泌表型无关。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Cyclin D1和Survivin阳性表达越强,无瘤生存时间越短(P0.05)。结论 Cyclin D1和Survivin的过表达与乳腺浸润性导管癌生物学行为密切相关,对判断肿瘤的侵袭、转移及预后具有一定价值。     

Survivin在不同TNM分期肝细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨生存素(Survivin)在不同TNM分期肝细胞癌组织中的表达情况及意义。方法收集40例TNM分期Ⅰ~Ⅳ期肝细胞癌患者术后的癌组织及其对应的癌旁组织标本和10例因肝外伤、肝血管瘤接受手术者的正常肝组织标本,采用免疫组织化学方法检测Survivin在各期癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达情况。结果 Survivin在肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织及正常肝组织(P均0.05),且随着肿瘤分期的增加Survivin在癌组织及癌旁组织中的阳性表达率呈增高趋势(P0.05)。结论Survivin在肝细胞癌组织、癌旁组织中的表达与肿瘤的TNM分期有关,其对肝细胞癌的化学诊断具有重要意义。     

大肠癌中PTTG和Survivin蛋白的研究分析

目的检测大肠癌组织中PTTG和Survivin蛋白表达情况并探讨其意义。方法采用组织芯片技术和免疫组织化学S-P法检测55例大肠癌组织、15例正常大肠黏膜组织中PTTG和Survivin的表达情况。结果大肠癌组织中PTTG和Survivin表达定位于细胞浆,其阳性表达率分别为74%(41/55)和69%(38/55),正常大肠黏膜组织二者阳性表达率分别为13%(2/15)和7%(1/15)。两者的表达与大肠癌患者的年龄、性别等无明显相关性,但与病理分化程度、淋巴结转移和临床分期密切相关;在大肠癌组织中,PTTG蛋白的阳性表达与Survivin蛋白的阳性表达有相关性,二者呈正相关。结论 PTTG和Survivin在大肠癌组织中表达增加,提示PTTG高表达可能与肿瘤发生有关,且与肿瘤浸润、发展、转移有关,Survivin与PTTG相互协调,共同在大肠癌的发生发展中发挥重要作用。     

中药单剂炙麻黄、麻黄对哮喘大鼠气道炎症反应的影响

目的:探讨不同剂量中药单剂炙麻黄、麻黄对哮喘大鼠气道炎症反应的影响。方法:SD大鼠70只随机分为正常对照组、模型对照组、甲泼尼龙片组、炙麻黄高剂量组、炙麻黄低剂量组、麻黄高剂量组、麻黄低剂量组,各10只。采用卵蛋白(OVA)致敏并激发制备哮喘大鼠模型,在第20天根据不同组别按剂量灌胃给药,连续7天。末次激发24h后处死大鼠,行支气管肺泡灌洗并回收支气管肺泡灌洗液(BALF),计数炎症细胞数量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠支气管肺泡灌洗白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-13(IL-13)含量。结果:与模型对照组比较,炙麻黄高剂量组、炙麻黄低剂量组、麻黄高剂量组、麻黄低剂量组大鼠BALF中白细胞数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比均明显降低(P0.01),提示不同剂量炙麻黄、麻黄均能降低哮喘大鼠BALF中炎症细胞表达,且炙麻黄高剂量组的效果更明显,但差异无显著性意义(P0.05)。与模型对照组比较,炙麻黄高剂量组、炙麻黄低剂量组、麻黄高剂量组、麻黄低剂量组大鼠BALF中IL-4、IL-13含量明显降低,IFN-γ含量明显升高,差异有显著性或非常显著性意义(P0.05,P0.01),提示不同剂量炙麻黄、麻黄均能有效改善哮喘大鼠BALF中炎症因子表达,且炙麻黄高剂量组的效果更佳,但差异无显著性意义(P0.05)。结论:麻黄、炙麻黄均能有效降低哮喘大鼠BALF中炎症细胞数量,调节炎症因子的表达,炙麻黄高剂量作用更佳。     

黄芩苷联合TRAIL对人肺癌细胞株A549增殖、凋亡的影响

目的:观察黄芩苷联合TRAIL对人肺癌细胞株A549增殖、凋亡的影响。方法:采用2mg/L、4mg/L、8mg/L黄芩苷和100ng/mLTRAIL单用或联用处理肺癌细胞株A549。利用MTT法检测各组细胞增殖,倒置荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR法及Western blot法检测Survivin、X连锁凋亡抑制蛋白基因(XIAP)、死亡受体4(DR4)及死亡受体(DR5)mRNA及蛋白相对表达量。结果:相比较于对照组,黄芩苷和TRAIL单用或联用均能呈浓度依赖性抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡(P0.05),而黄芩苷和TRAIL联用比单用时细胞抑制率及凋亡率更高(P0.05)。相比较于对照组,黄芩苷组和TRAIL组A549细胞数明显降低,漂浮细胞数增多,Survivin及XIAP mRNA及蛋白表达量显著降低,DR5mRNA及蛋白表达量显著升高(P均0.05),而DR4mRNA及蛋白表达无明显差异。与黄芩苷组或TRAIL组比较,联用组A549细胞数明显降低,漂浮细胞数增多,Survivin及XIAP mRNA及蛋白表达量显著降低,DR5mRNA及蛋白表达量显著升高(P均0.05),而DR4mRNA及蛋白表达无明显差异。结论:黄芩苷联合TRAIL可协同抑制肺癌细胞株A549增殖,并促进凋亡,其作用机制可能与两者联用能增加死亡受体DR5的表达,进而抑制Survivin和XIAP蛋白表达有关。     

丹参注射液对吸烟大鼠CD11b及细胞间粘附分子-1表达的影响

目的:探讨粘附分子CD11b和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在吸烟大鼠的表达,以及中药丹参对吸烟大鼠气道炎症的影响。方法:采用瑞士法染色和免疫组化方法,计算吸烟大鼠及对照大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞的数量及膜表面CD11b的表达,计算肺气道上皮细胞ICAM-1表达的情况。结果:(1)吸烟组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞的数量较对照组明显增高(P<0.01),而与吸烟组相比,丹参组大鼠炎症细胞数量明显减少,二者有显著差异(P<0.01)。(2)各组大鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞数量和炎症细胞CD11b的表达呈明显正相关(r=0.847,P<0.01),和肺细织气道上皮细胞ICAM-1的表达明显正相关(r=0.938,P<0.01)。(3)丹参组支气管肺泡灌洗液中炎症细胞CD11b的表达和肺组织ICAM-1的表达较吸烟组明显减少(P<0.01)。结论:丹参能明显抑制支气管肺泡灌洗液中炎症细胞CD11b的表达和肺组织气道上皮细胞ICAM-1的表达,证明丹参具有阻抑细胞粘附分子的作用,进而改善吸烟引起的气道炎症。     

Livin、Survivin、Fas、FasL在胃癌中的表达及相关性研究

目的探讨Livin、Survivin、Fas、Fas L在胃癌组织中的表达情况及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测11例正常胃黏膜组织和102例胃癌组织中Livin、Survivin、Fas、Fas L的表达情况,分析各指标表达情况与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织中Livin、Survivin和Fas L的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(P均0.05),Fas的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织(P0.05)。Livin的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移密切相关(P均0.05),Survivin的表达和肿瘤分化程度明显相关(P0.05),而Fas和Fas L的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期均无明显相关性(P均0.05)。胃癌组织中Livin和Survivin的表达与Fas、Fas L表达无明显相关性(P0.05)。结论 Livin、Survivin在胃癌组织中高表达,参与抑制细胞凋亡,与胃癌发生、发展密切相关,为胃癌的治疗提供了新的途径和方向。     

穿山龙对哮喘豚鼠凋亡抑制基因BCL-2表达的影响

目的:观察穿山龙对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞(Eos)浸润及凋亡抑制基因BCL-2 mRNA及其蛋白表达的影响。方法:将健康豚鼠50只随机分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组、穿山龙+醋酸泼尼松组及穿山龙组,每组10只。采用卵清蛋白致敏激发法建立哮喘豚鼠模型,镜下观察各组肺泡灌洗液(BALF)中Eos计数的变化及肺组织中Eos浸润等病理表现;RT-PCR法测定豚鼠肺组织中BCL-2 mRNA水平;免疫组化染色法检测BCL-2蛋白的表达。结果:穿山龙各治疗组豚鼠BALF的Eos计数、肺组织匀浆中BCL-2 mRNA浓度、Eos BCL-2阳性细胞百分数均明显低于模型组,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);而穿山龙+醋酸泼尼松组与醋酸泼尼松组比较,上述结果均无显著性差异(P>0.05)。结论:穿山龙可明显减少哮喘豚鼠肺组织Eos浸润,减轻哮喘气道炎症;可通过诱导减低Eos BCL-2 mRNA的表达水平及减少BCL-2蛋白表达而促使Eos凋亡;可明显增强醋酸泼尼松治疗哮喘的作用,减少醋酸泼尼松的用药剂量。     

IL-1β基因在哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液炎细胞中的表达

目的　观察哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中炎细胞IL - 1βmRNA的表达情况 ,探讨IL - 1在哮喘发病中的作用。方法　用卵白蛋白 (OVA)致敏并激发大鼠哮喘反应 ,于激发后即刻、1h ,4h和 16h行支气管肺泡灌洗。用地高辛配基标记的cDNA探针检测BALF炎细胞IL - 1βmRNA的原位杂交水平。结果　正常大鼠BALF炎细胞极少表达IL - 1βmRNA ,过敏原激发可诱导BALF炎细胞表达IL - 1βmRNA显著增加。结论　哮喘大鼠BALF炎细胞表达IL - 1βmRNA增加 ,提示IL - 1在哮喘发病中有一定作用。     

加味六安煎对咳嗽变异性哮喘模型豚鼠白细胞介素-4、白细胞介素-13水平及气道重塑相关基因表达的影响

目的 观察加味六安煎对咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)豚鼠炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-13水平及气道重塑相关基因转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β) mRNA、基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP-9) mRNA表达的影响,探讨加味六安煎治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法 将30只雄性豚鼠随机分为正常组、CVA模型组、孟鲁司特钠组、加味六安煎低、中、高剂量组(0.74 g/mL、1.48 g/mL、2.22 g/mL),每组各5只。除正常组外,其余组腹腔注射卵蛋白、氢氧化铝致敏并吸入卵蛋白激发法复制咳嗽变异性哮喘豚鼠模型,正常对照组、模型组给予生理盐水,孟鲁司特钠组灌服孟鲁司特钠混悬液(1.2 mg/kg),加味六安煎低、中、高剂量组分别给予不同浓度加味六安煎溶液。酶联免疫法检测血清及支气管肺泡灌洗液(brocho-alveolar larage fluid,BALF)中IL-4和IL-13水平;肺组织胶原面积及胶原沉积率,RT-qPCR法检测肺组织及BALF中的TGF-βmRNA及MMP-9 mRNA的表达; Masson染色法观察并分析肺组织胶原沉积状态。结果 (1)与正常对照组相比,模型组血清及BALF中的IL-4水平均降低(P 0.05);与模型组相比,加味六安煎各剂量组(简称:各剂量组)血清中IL-4水平升高(P0.05)。(2)与正常对照组相比,模型组血清及BALF中的IL-13水平均升高(P0.05);与模型组相比,各剂量组血清及BALF中IL-13水平均降低(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组肺组织及BALF中TGF-βmRNA表达升高(P0.05);各剂量组肺组织及BALF中TGF-βmRNA表达降低(P0.05)。(4)与正常对照组相比,模型组肺组织及BALF中MMP-9 mRNA表达升高(P0.05);各剂量组肺组织及BALF中MMP-9 mRNA表达降低(P0.05)。(5)与正常对照组相比,模型组胶原面积明显增加(P0.05);与模型组相比,各剂量组胶原面积减小(P0.05)。(6)与正常对照组相比,模型组胶原沉积率明显升高(P0.05);与模型组相比,各剂量组胶原沉积率均有不同程度降低(P0.05)。结论 加味六安煎治疗CVA可能通过调节IL-4和IL-13水平,进而调整辅助型T细胞(T helper cell,Th) Th1/Th2的平衡状态,减轻气道炎症程度;通过调节TGF-βmRNA和MMP-9mRNA的表达,减轻气道胶原沉积状态,进而改善气道重塑。     

门氏定喘汤对吸烟哮喘大鼠IL-17A、IL-6、TNF-α的影响

目的:研究门氏定喘汤对吸烟哮喘大鼠IL-17A、IL-6、TNF-α的影响,为中药治疗支气管哮喘提供实验依据。方法:用OVA、Al(OH)3混悬液致敏大鼠及被动吸烟装置制作吸烟哮喘模型。A组为正常对照组,B组为哮喘吸烟模型组,C组为模型+地米组,D组每次雾化吸入激发前0.5h给予门氏定喘汤灌胃,E组每次雾化吸入激发前0.5h给予腹腔注射地米及门氏定喘汤灌胃,最后一次激发24h后将大鼠使用10%水合氯醛麻醉,收集肺泡灌洗液(BALF),使用ELISA法检测IL-17A、IL-6、TNF-α含量及灌洗液中细胞分类。结果:比较各组大鼠BALF中中性粒细胞及嗜酸性粒细胞数量,D组与C组无显著性差异,较B组有所降低;E组优于D组,有显著差异。各组大鼠IL-17A、TNF-α含量比较显示:E组、C组IL-17A、IL-6、TNT-α低于β组,E组IL-17A、TNT-α低于D组,P0.05,有显著性差异。结论:中药门氏定喘汤联合地米治疗吸烟哮喘大鼠优于地米及单纯中药,且该中药能降低吸烟哮喘大鼠IL-17A、TNF-α含量,改善气道的炎性反应。