p53和p21蛋白在恶性间皮瘤的表达

一、材料和方法１－集自１９８７年１月至１９９７年１２月间我院和广州地区多所医院的恶性间皮瘤石蜡包埋的组织标本４５例；所有病例标本重新进行组织学复诊、分型，并结合胸片，ＣＴ和手术所见进行大体分型及对其中的３６例进行随访。另外同时收集了良性间皮瘤８例，增生间皮细胞４２例作对照。２－方法：石蜡切片按常规处理，使用ＤＡＫＯ公司的免疫试剂盒及一抗，采用Ｅｎｖｉｓｉｏｎ二步法进行免疫组化染色。工作浓度ｐ５３为１∶１００；ｐ２１为１∶５０；ＤＡＢ显色。每次实验均设阳性及阴性对照，及用ＴＢＳ替代一抗的空白对照。…     

非霍奇金淋巴瘤与p53蛋白表达的关系

目的 :探讨非霍奇金淋巴瘤 (NHL)与 p5 3蛋白表达的关系。 方法 :用免疫组化S P法检测 10 2例 (低度恶性 2 3例 ,中度恶性 36例 ,高度恶性 4 3例 )NHLp5 3蛋白表达 ,根据 p5 3蛋白阳性细胞百分率将其表达水平分为 4级 :0级 (阴性 ) ,1级 (1%～ 2 5 % ) ,2级 (2 6 %～ 5 0 % ) ,3级 (>5 0 % )。结果 :低度恶性组 2 0 / 2 3(87% )p5 3表达为 0级 ,中度恶性组 31/ 36 (86 1% )表达为 1级 ,高度恶性组 33/ 4 3(76 7% )表达为 2～ 3级。 2 5例随访 7～ 6 8个月 ,p5 30～ 1级NHL完全缓解率 (CRR ,11/ 14 )高于p5 32～ 3级NHLCRR (1/ 11,P <0 0 1) ,前者生存率 (13/ 14 )高于后者 (3/ 11,P <0 0 1)。NHLp5 3蛋白表达水平与其恶性度密切相关 (P <0 0 1)。结论 :p5 3蛋白表达阳性细胞百分率是判断NHL恶性度、疗效及预后较可靠的参数。肿瘤性p5 3蛋白表达检测对中高度恶性NHL的诊断有参考价值     

胆囊腺瘤p53蛋白检测

1　材料与方法1 1　临床资料　标本为武警新疆总队医院 1992年 6月至1999年 12月间手术或腹腔镜摘除的胆囊腺瘤 32例 ,其中男性 2 0例 ,女性 12例 ,年龄 34～ 6 8岁 ,平均 5 7岁。并选出2 0例胆固醇性及炎性息肉做对照。1 2　免疫组化染色　标本经 10 %福尔马林液固定 ,石蜡包埋 ,5 μｍ厚切片 2张 ,分别做ＨＥ染色和ＡＢＣ法 ｐ5 3免疫组化染色。鼠抗人单克隆抗体ＤＯ 7,丹麦Ｄａｋｏ公司产品。按照ＡＢＣ试剂盒 (美国Ｖｅｃｔｏｒ公司 )操作程序进行 ,ＤＡＢ显色 ,苏木精复染。阴性对照以ＰＢＳ代一抗 ,阳性对照用已知ｐ5 3蛋白阳性的胃癌…     

p53基因突变及其蛋白表达与脑胶质瘤

ｐ５３基因突变是人类肿瘤中最常见的突发之一，胶质瘤约有１／３发生ｐ５３基因突变。通过对胶质瘤ｐ５３基因突变和蛋白表达的研究，提出了多形性胶质母细胞瘤的三种不同起源方式，发现ｐ５３蛋白表达在脑胶质瘤与反应性胶质增生的鉴别诊断中有一定的作用，但多数资料的研究结果提示ｐ５３蛋白表达对脑胶质瘤患者的预后判断无意义。     

骨肉瘤p53蛋白过度表达与预后的关系

目的；探讨ｐ５３蛋白过度表达与骨肉瘤临床病理，肿瘤细胞增殖活性及预后的关系。方法：用免疫组化方法检测５０例骨肉瘤标本中ｐ５３蛋白及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果５０例骨肉瘤中１６例ｐ５３蛋白阳性（３２％）；ｐ５３蛋白过度表达与骨肉瘤组织学类型，组织学分级及ＰＣＮＡ分级无关，１６例ｐ５３蛋白阳性病你中，１０例在２年内死亡（６２．５％）３４例阴性病例中，１１例在２年内死亡（３２．４％），结论；     

星形细胞肿瘤中MDM2蛋白与突变型p53蛋白的表达及其相关性研究

目的：探讨ｍｄｍ－２基因表达和ｐ５３基因突变在星形细胞肿瘤发生发展中的作用及两者的相关性。方法：采用ＳＡＢＣ免疫组化法对１２０例星形细胞肿瘤进行检测。结果：在分化不良性星形细胞瘤及多形性胶质母细胞瘤中，ＭＤＭ２蛋白的阳性率分别为３０．００％和３５．２９％，突变型ｐ５３蛋白的阳性率分别为３５．００％和４４．１２％，均明显高于高分化星形细胞瘤（４．３５％和６．５２％）；突变型ｐ５３蛋白染色阴性的星形细胞肿瘤中，ＭＤＭ２蛋白阳性率（２６．１５％）明显高于其染色阳性的肿瘤（９．３８％）。结论：ＭＤＭ２蛋白及突变型ｐ５３蛋白在星形细胞肿瘤中的表达均与该肿瘤的分化程度有关；ｍｄｍ－２基因扩增及产物ＭＤＭ２蛋白过度表达，可能是突变型ｐ５３蛋白染色阴性的星形细胞肿瘤发生的分子基础     

甲状腺肿瘤p14ARF、p53及FHIT蛋白的表达

目的探讨p14^ARF、p53及FHIT蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化S-P法检测20例甲状腺腺瘤和28例甲状腺癌组织中p14^ARF、p53及FHIT蛋白的表达。结果p14^ARF、p53及FHIT蛋白在甲状腺腺瘤和甲状腺癌中阳性率分别为90％、35．7％、15％和75％、90％、7．14％,3种蛋白在甲状腺腺瘤及甲状腺癌的表达差异均有显著性（P〈0．05）。p14^ARF、p53及FHIT蛋白的表达在甲状腺滤泡癌（FTC）与腺瘤之间,乳头状癌（PTC）与腺瘤之间差异均有显著性（P〈0．05）,p53及FHIT的表达在髓样癌（MTC）与腺瘤间差异也有显著性（P〈0．05）。p14^ARF、p53及FHIT蛋白的表达与甲状腺肿瘤的恶性进程有关,与患者年龄、性别及淋巴结转移无关。另外p14^ARF与FHIT蛋白的表达呈正相关,并且它们与p53的表达均呈负相关。结论肿瘤抑制蛋白p14^ARF和FHIT的缺失以及p53蛋白的高表达可能是甲状腺肿瘤发生的重要原因之一。联合检测p14^ARF、p53及FHIT蛋白有助于区分甲状腺腺瘤和甲状腺滤泡癌。     

野生型p53基因诱导肝癌细胞凋亡及p21(WAF1/CIP1)蛋白过表达

目的：研究野生型ｐ５３基因对人肝癌细胞系细胞凋亡的作用。方法：通过脂质体转染方法将野生型ｐ５３基因（ｗｔ－ｐ５３）导入ｐ５３缺陷的ＨＣＣ－９２０４细胞系中，并获稳定表达。结果：转染ｗｔ－ｐ５３后细胞生长缓慢，Ｇ１期细胞数量由转基因前的４８．５％增加到７８．０％，并有较多细胞逐渐死亡。电镜观察和ＤＮＡ分析证实细胞死亡方式主要是细胞凋亡。免疫组化结果显示细胞转染ｗｔ－ｐ５３后，ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１的表达显著增加。结论：提示外源性野生型ｐ５３基因可以抑制肝癌细胞生长，并诱导细胞凋亡，这可能是通过ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１途径发挥上述作用的     

p53蛋白的免疫亲和层析纯化

建立了ｐ５３单克隆抗体ｐＡｂ１８０１的免疫亲和层极法纯化ｐ５３蛋白，所纯化的ｐ５３蛋白经Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ（ＥＣＬ法）检测证明：用此法从ｐ５３阳性的ＳＷ４８０细胞中分离到ｐ５３蛋白。银染显示ｐＨ２．０甘氨酸缓冲液比ｐＨ２．８的甘氨酸缓冲液洗脱效果好，这种方法的建立将为分离肿瘤细胞中引起ｐ５３蛋白功能失活和研究肿瘤发生机制提供一种有效途径。     

肺鳞状细胞癌中p53蛋白表达及p53基因突变的检测

目的 通过检测肺鳞状细胞癌及癌旁组织中Ｐ５３蛋白积聚及相同癌组织中Ｐ５３基因的突变，探讨Ｐ５３蛋白积聚及Ｐ５３基因突变在肺鳞癌发病中的意义。方法 采用免疫组化和银染－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测１２０例肺鳞癌及癌旁肺组织中Ｐ５３蛋白的状况及相同鳞癌组织中，Ｐ５３基因５、６、７、８外，显子突变的情况。结果 Ｐ５３蛋白了性率为５２．５％，Ｐ５３基因突变率为５６．７％，突变便数在第５、６、７、８外显子的分布     

Ⅲ期鼻咽癌p53蛋白表达与生物学行为及预后的关系及其与p53基因突变、潜伏膜蛋白-1表达的相关研究

目的：探讨Ⅲ期鼻咽分化型非角化性鳞癌中P53蛋白的表达与生物学行为及预后的关系,以及P53蛋白表达与P53基因突变和潜伏膜蛋白（LMP）－1蛋白表达的关系。方法：应用免疫组织化学EnVison法和聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）检测58Ⅲ例鼻咽分化型非角化性鳞癌标本。结果：58份Ⅲ期鼻咽分化型非角化性鳞癌中,P53蛋白总阳性率为65．5％（3858）,生存期在5年以下的患者阳性率为82．1％（32／39）,5年以上患者31．6％（6／19）,两组间P53蛋白表达差异有显著性意义（P＜0．05）,P53蛋白表达在有预底侵袭组为74．4％（29／39）,无颅底侵袭组为47．4％（919）,两组间差异有显著性意义（P＜0．05）,PCR－SSCP检测15例P53蛋白阳性的病例,P53基因5－8外显子突变率为0（0／15）,LMP－1蛋白免疫组织化学总阳性率为72．4％（42／58）,与P53蛋白表达呈正相关关系（r=0.504)。结论：本组Ⅲ期鼻咽分化型非角化性鳞癌患者中P53蛋白表达与P53基因突变无相关关系。与LMP－1蛋白的表达相关,P53蛋白的表达阳性率随着患者生存期的延长而降低,有颅底侵袭组P53蛋白表达阳性率高于无颅底侵袭组。     

膀胱移行细胞癌中c-erbB-2、p53及p16 蛋白的表达

目的　探讨膀胱癌组织中p16、c erbB 2和p5 3蛋白表达与膀胱癌病理分级、临床分期和转移的关系。方法　应用免疫组化SP法对 75例膀胱癌组织中p16、p5 3及c erbB 2蛋白表达进行检测。结果　 75例膀胱癌中p16、p5 3及c erbB 2的阳性率分别为 41.3% (31 75 )、44 .0 % (33 75 )和40 0 % (30 75 ) ,p16和c erbB 2蛋白在膀胱癌中的阳性率与肿瘤病理分级和临床分期有显著意义 (P<0 0 5 ) ,p5 3和c erbB 2阳性率与肿瘤临床分期及转移有密切的关系 (P <0 .0 1)。 77.3% (5 8 75 )肿瘤有上述蛋白的阳性表达 ,其中 5 3.3% (40 75 )的肿瘤同时有多个蛋白的阳性表达。结论　肿瘤的多因素分析比单因素分析更有价值 ,癌基因c erbB 2和抑癌基因p5 3、p16蛋白的表达异常及协同作用在膀胱癌的发生发展中起重要作用     

胃癌组织17p13.3杂合性丢失及p53蛋白异常表达的研究

目的了解染色体１７ｐ１３．３丢失及ｐ５３蛋白异常表达在胃癌发生发展中的作用。方法应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法及免疫组化技术检测了５１例胃癌手术标本中１７ｐ１３．３杂合性丢失及ｐ５３蛋白异常表达。结果发现在３１例信息个体中１７ｐ１３．３杂合丢失１６例，占５１．６％（１６／３１）。ｐ５３蛋白染色阳性１９例，占３７．３％（１９／５１）。１７ｐ１３．３杂合丢失与ｐ５３蛋白表达间无显著相关。１７ｐ１３．３杂合丢失率和ｐ５３蛋白阳性率在肠型及胃型胃癌差异无显著性（Ｐ＞０．０５），与临床病理参数无显著相关。１例早期胃癌检出１７ｐ１３．３杂合丢失。结论染色体１７ｐ１３．３杂合丢失、ｐ５３蛋白异常表达是胃癌的常见改变；１７ｐ１３．３杂合丢失可出现在胃癌的早期。     

p53 protein expression in non-neoplastic lesions and benign and malignant neoplasms of soft tissue

Alterations of the p53 tumour suppressor gene, with consequent nuclear p53 protein accumulation, are among the most common genetic lesions in human neoplasms. In the present paper we show p53 immunoreactivity in 65% of malignant and 21% of intermediate malignancy soft tissue tumours, and in 48% of benign/reactive soft tissue lesions. p53 immunoreactivity of sarcomas can be interpreted as an indirect indication of a mutation of the corresponding p53 gene, suggesting that its alteration may have a role in their pathogenesis. Our data on p53 immunoreactivity in benign lesions of the soft tissues are among the first demonstrations of p53 over-expression in benign/reactive conditions. We cannot exclude mutations of the p53 gene in these cases, but it is difficult to sustain this hypothesis in reactive/pseudoneoplastic lesions. Alternatively p53 immunoreactivity in benign processes could be due to an increase in wild-type p53 as a result of different physiological mechanisms (cell type-specific p53 regulation, cell maturation, DNA repair). Our results do not indicate that immunohistochemical demonstration of p53 expression is a marker of malignancy in soft tissue tumours and therefore is of limited use in differential diagnosis. However, they suggest the need for further molecular genetic studies in order to elucidate the biological significance of the abnormal expression of p53 in benign soft tissue lesions.     

神经系统多种肿瘤中组织型谷氨酰胺转氨酶蛋白的表达

目的 了解脑肿瘤中组织型谷氨酰胺转氨酶(tTG)蛋白的表达情况,探讨其与脑肿瘤类型和恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学SP方法,检测tTG蛋白在62例星形细胞瘤、18例少突胶质细胞瘤、30例良性脑膜瘤、30例垂体腺瘤和10例正常脑组织中的表达。结果(1)脑肿瘤组织中tTG表达呈组织异质性,主要定位于血管内皮细胞、部分血管基底膜和部分肿瘤细胞胞质;(2)随着星形细胞瘤分化程度的降低,肿瘤细胞内tTG蛋白表达明显增加;(3)胶质瘤细胞内tTG蛋白表达强度明显高于良性脑膜瘤和垂体腺瘤;(4)在胶质母细胞瘤中,坏死和凋亡组织周围的肿瘤细胞tTG蛋白呈强阳性表达。结论脑肿瘤细胞内tTG蛋白表达与肿瘤的组织类型来源和恶性程度有关,可能促进星形细胞瘤恶性进展。     

p53蛋白堆积和CK-18neo在非小细胞

目的:检测非小细胞肺癌组织的p53蛋白堆积水平和细胞骨架蛋白18新抗原决定簇(cytokeratin18neo-epitope,CK-18neo)的暴露情况,探讨p53蛋白和CK-18neo在肺癌发生发展过程中的作用及其临床病理意义。方法:用免疫组化法检测62例非小细胞肺癌以及10例对照组织中p53蛋白的堆积和CK-18neo的暴露情况。用显微图象分析仪测定p53免疫组化反应的强度,并作定量分析。以凋亡指数(AI%)表示CK-18neo的阳性检出率。结果:①非小细胞肺癌组织中p53的阳性检出率为48.39%(鳞癌为51.72%,腺癌为45.45%),对照组p53的阳性率为0.00%(P＜0.01);②非小细胞肺癌组织的AI%为1.10%(鳞癌0.95%,腺癌1.24%),对照组为1.06%,各组间无显著差异;③非小细胞肺癌组织中p53(-/+)、p53(5级)和p53(PU)呈正直线相关关系(P＜0.01)。结论:本实验结果提示,突变型p53基因可能参与NSCLC的发生机制,NSCLC的发生和发展与癌细胞的过度增生和细胞凋亡减少有关。     

乙型肝炎病毒X和p53对肝癌细胞生长的影响

目的　探讨乙型肝炎病毒X(HBx)基因与p5 3在损伤情况下的相互作用及对肝癌细胞生长的影响及作用机制。方法　通过构建正义及反义野生型 (wt)p5 3 ,与HBx分别单转染或共转染含wtp5 3 ( + )、HBV( - )的人肝癌细胞株SMMU 772 1细胞 ,在吡柔比星的诱导下 ,用流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响 ,及HBx对细胞周期的影响 ,并通过检测含p5 3结合位点p2 1Waf1启动子荧光素酶活性来观察HBx是否通过p5 3影响p2 1Waf1的表达 ,以及绘制细胞生长曲线观察HBx对SMMU 772 1细胞生长的影响。结果　在吡柔比星的诱导下 ,HBx能够促进细胞凋亡 ,转染空载体组及pcDNA3HBx组细胞凋亡率分别为 5 3 2 %和 12 66%。但HBx对外源性p5 3诱导的细胞的凋亡具有抑制作用 ,转染空载体、正义pcDNA3wtp5 3及正义pcDNA3wtp5 3 +pcDNA3HBx组细胞凋亡率分别为 5 3 2 %、11 72 %、4 67%。同时处在G0 ～G1期瞬时表达及稳定转染HBx细胞数较对照组分别减少 4 79% ,10 2 5 %。而且HBx可抑制p2 1Waf1启动子荧光素酶的活性 (P <0 0 5 )及促进细胞生长。结论　细胞在DNA损伤因素的作用下 ,HBx可能通过抑制p5 3导致p2 1Waf1的表达降低 ,引起停滞在G0 ～G1期的细胞减少 ,导致肿瘤细胞仍能继续分裂增殖形成恶性生长     

星形细胞瘤中PTEN、Mdm2和p53的表达及其相关性研究

目的: 探讨不同组织病理分级的星形细胞瘤中PTEN、Mdm2和p53的表达水平, 并分析PTEN影响Mdm2、p53表达的信号转导机制。方法: 采用免疫组织化学方法检测68例星形细胞瘤标本中PTEN、Mdm2和p53的表达水平。结果:星形细胞瘤中PTEN、Mdm2、p53的表达水平分别是54.4%(37/68)、41.2%(28/68)、45.6%(31/68)。PTEN阳性标本中Mdm2的表达率(24.3%, 9/37)与PTEN阴性标本中该蛋白的表达率(61.3%, 19/31)相比差异显著, 统计学分析显示PTEN表达与Mdm2表达呈负相关(P＜0.01)。Mdm2表达和p53表达一致符合率达66.2%(45/68), 两者的表达密切相关(P＜0.05)。结论: (1)PTEN、Mdm2和p53表达与星形细胞瘤的组织病理分级相关。(2)抑癌基因PTEN可以下调癌基因Mdm2的表达水平。(3)Mdm2和p53的表达存在一致性。     

Assessment of p53 protein expression in normal, benign, and malignant oral mucosa.

Recent studies have shown the accumulation of high levels of p53 protein to be associated with malignant disease, within a range of tissues. This paper assesses p53 expression in oral mucosal disease. Biopsies were obtained from a range of oral disorders which included normal, benign, premalignant, and malignant oral tissue. In addition, oral smears were obtained from a limited number of patients with biopsy-proven oral cancer. Expression of the p53 protein was assessed using the polyclonal antibody CM1, together with a standard immunoperoxidase technique. A total of 37 oral cancers were assessed, of which 20 were found to express the p53 protein (54 per cent of cases). The p53 protein was not identified in normal, benign, or premalignant oral mucosa (54 cases). The identification of p53 within biopsies of oral mucosal lesions would appear to correlate with oral malignancy.