急性肺损伤时晚期糖基化终末产物受体变化的实验研究

目的 观察晚期糖基化终末产物受体(RAGE)在不同程度急性肺损伤(ALI)大鼠血浆和肺泡灌洗液(BALF)中的变化,探讨RAGE在判断ALI严重程度方面的价值.方法 30只SD大鼠随机分为3组:低剂量组、高剂量组和对照组.Western blot法检测BALF和血浆中RAGE相对含量,同时测定PaO2、肺组织湿干质量比值(W/D)、BALF蛋白含量、血浆和BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,结合病理改变评价各组肺损伤程度.结果致伤组均出现肺损伤,高剂量组损伤更明显;与对照组比较,两致伤组血浆和BALF中RAGE含量均有所上升(P﹤0.05),且高剂量组BALF中RAGE含量又高于低剂量组(P<0.05),而血浆中RAGE含量在低剂量组与高剂量组间差异无统计学意义.结论 ALI时,BALF和血浆中RAGE水平升高,BALF中RAGE水平升高的程度可反应肺损伤的程度,RAGE可作为ALI/ARDS的预警指标.     

晚期糖基化终末产物受体与肿瘤的关系

晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products,RAGE）是细胞表面分子免疫球蛋白超家族成员之一,属多配体受体,其通过与细胞表面不同配体结合发挥效应,广泛研究表明：RAGE参与糖脂代谢、细胞增殖与分化、炎症反应等生理病理过程。     

晚期糖基化终末产物受体与肿瘤的关系

晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products,RAGE）是细胞表面分子免疫球蛋白超家族成员之一,属多配体受体,其通过与细胞表面不同配体结合发挥效应,广泛研究表明：RAGE参与糖脂代谢、细胞增殖与分化、炎症反应等生理病理过程。     

晚期糖基化终末产物受体对原发性肝癌患者根治术后复发转移及死亡的预测价值

目的观察原发性肝癌患者癌组织晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product, RAGE)表达变化,探讨其预测原发性肝癌患者根治术后复发转移及死亡的价值。方法 134例原发性肝癌患者,均行肝癌根治术,术后给予辅助性肝动脉化疗栓塞治疗、分子靶向治疗或免疫治疗等。取手术切除癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学法检测RAGE阳性表达率,比较不同临床病理特征肝癌患者RAGE阳性表达率。对134例患者随访5年,记录术后复发转移及死亡情况,比较RAGE阳性表达与阴性表达者术后5年无病生存期、复发转移率及病死率。以术后5年复发转移及死亡者为预后不良组,其余为预后良好组,比较预后不良组与预后良好组一般临床资料和RAGE阳性表达率;多因素Cox回归分析原发性肝癌患者根治术后复发转移及死亡的影响因素。结果肝癌组织RAGE阳性表达率(64.9%)高于癌旁组织(15.7%)(χ²=5.678,P=0.021)。134例患者中RAGE阳性表达87例,肿瘤直径≥5 cm(79.7%)、病理分级低分化(84.6%)、有微血管侵犯(80...     

晚期糖基化终末产物和汉防己甲素对K562及K562/A02细胞增殖的影响

本研究旨在探讨晚期糖基化终末产物(AGE)对K562及K562/A02细胞增殖的影响及汉防己甲素(Tet)对AGE诱导细胞增殖的干预作用,并初步探讨其可能机制。用CCK8法观察AGE对K562及K562/A02细胞增殖及Tet对AGE诱导细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的表达,并用半定量RT-PCR检测RAGE mRNA相对表达水平。结果显示:AGE可促进K562及K562/A02细胞增殖,呈浓度依赖性,0-48 h内细胞增殖随时间延长而增强,72 h增殖仍明显高于对照组;AGE上调两种细胞RAGE mRNA及其蛋白的表达,具有浓度依赖性;Tet与AGE共作用于K562及K562/A02细胞48 h,可通过诱导细胞凋亡抑制AGE促细胞增殖的作用,且呈浓度依赖性,但Tet对AGE诱导RAGE mRNA及其蛋白表达的增加未见明显影响。结论:AGE可促进K562及K562/A02细胞增殖,其机制可能与上调细胞RGAE mRNA及其蛋白的表达有关;Tet可抑制AGE诱导的K562及K562/A02细胞增殖,其机制可能与改变AGE诱导的RGAE mRNA及其蛋白表达增加无关。     

褪黑素抑制大鼠急性肺损伤时磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶的表达

目的 探讨褪黑素(MT)对大鼠急性肺损伤(ALI)时肺脏的保护作用及可能机制.方法 将72只SD大鼠按随机数字表法均分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+MT处理组.LPS组、LPS+MT组动物经气道内滴注LPS 1 ml/kg(200 μg/200 μl)染毒.LPS+MT组给药前后30 min分别经腹腔注射10 mg/kg MT;对照组、LPS组给予1 ml/kg乙醇-生理盐水溶剂.给药后3、6和10 h处死动物取肺组织,检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;用免疫组化法检测磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(p-p38MAPK)在肺组织的表达.结果 LPS组SOD活性(U/mg)较对照组明显降低(3 h:73.78±3.62比112.69±3.26,6 h:66.07±2.31比117.85±1.96,10 h:55.13±5.26比118.27±2.16,均P<0.01),而NO(μmol/mg)与MDA(nmol/mg)含量以及p-p38MAPK表达量(A值)显著升高(NO 3 h:8.19±0.48比2.32±0.20,6 h:11.71±0.27比2.08±0.15,10 h:16.53±0.60比2.76±0.21;MDA 3 h:11.43±0.68比2.86±0.21,6 h:19.63±1.29比2.85±0.19,10 h:26.63±2.00比2.84±0.28;p-p38MAPK 3 h:0.340±0.020比0.238±0.019,6 h:0.410±0.016比0.218±0.024,10 h:0.578±0.066比0.238±0.036,均P<0.01);应用MT能显著缓解上述变化[3、6、10 h SOD(U/mg)为86.02±2.81、80.87±3.40、94.46±5.03,NO(μmol/mg)为3.80±0.28、5.32±0.22、7.24±0.52,MDA(nmol/mg)为8.18±0.84、7.84±0.78、6.43±1.06,p-p38MAPK(A值)为0.311±0.018、0.312±0.019、0.314±0.021,P<0.05或P<0.01].结论 MT对ALI时肺脏的保护作用可能与MT的抗氧化作用及抑制p-p38MAPK的过度表达有关.     

脂多糖诱导血管平滑肌细胞分泌白细胞介素-6及p38丝裂素活化蛋白激酶的调控作用

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在脂多糖(LPS)作用下血管平滑肌细胞(VSMC)分泌白细胞介素-6(IL-6)中的调节作用.方法 将体外培养的大鼠胸主动脉VSMC分为LPS刺激组、p38MAPK抑制剂SB203580干预组、SB203580对照组和溶液对照组.LPS组以终浓度100μg/L的LPS与VSMC共同孵育;干预组VSMC以p38MAPK抑制剂SB203580 10μmol/L预处理2 h,再加入终浓度100 9g/L的LPS共同孵育;对照组仅以SB203580 10 μmol/L预处理2 h;溶液组仅加入去血清培养液培养.各组于培养0、3、6、12、24 h后采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测细胞IL-6 mRNA和上清液中IL-6蛋白表达.结果 LPS刺激3 h,VSMC中IL-6 mRNA和蛋白表达即出现明显增高CmRNA(21.3±3.2)×104,蛋白(296.2±19.6)ng/L],12 h达高峰CmRNA(131.4±11.2)×104,蛋白(897.7±34.0)ng/L],24 h有所降低[mRNA(15.3±4.7)×104,蛋白(194.3±24.0)ng/L],但仍显著高于溶液组(mRNA(9.4±1.9)×104,蛋白(29.4±4.4)ng/L,均P<0.05].干预组3、6、12 h可明显抑制LPS诱导VSMC中IL-6的分泌[mRNA(15.4±3.6)×104、(43.2±6.6)X 104、(56.2±5.5)×104,蛋白(180.3±23.6)、(432.2±56.8)、(546.2±57.9)ng/L,均P<0.05].结论 LPS诱导VSMC可明显增加IL-6的mRNA和蛋白表达,p38MAPK抑制剂SB203580可显著抑制IL-6转录和蛋白合成,表明p38MAPK信号转导通路可能通过直接或间接作用参与了IL-6的分泌调节作用.     

膝骨关节炎滑液中可溶性晚期糖基化终末产物受体水平与其病变程度的相关性

背景:研究表明骨关节炎患者关节滑液内可溶性晚期糖基化终末产物受体水平可能与关节炎病变的严重程度存在负相关,但在中国报道较少。目的:观察膝关节骨关节炎患者关节滑液内可溶性晚期糖基化终末产物受体水平与其病变严重程度的关系。方法:共纳入46名膝关节骨关节炎患者及14名健康对照者,纳入的骨关节炎患者符合美国风湿病学会骨关节炎的临床诊断标准。采用Kellgren-Lawrence的标准对膝关节骨关节炎病变严重程度进行分级,使用人可溶性晚期糖基化终末产物受体水平酶联免疫吸附试剂盒在酶标仪下检测测关节滑液的可溶性晚期糖基化终末产物受体水平。结果与结论:膝关节骨关节炎患者关节滑液可溶性晚期糖基化终末产物受体水平较健康对照组显著降低(P<0.01),且与膝关节骨关节炎病变严重程度呈显著独立负相关(r=-0.587,P<0.01)。结果表明关节滑液可溶性晚期糖基化终末产物受体水平可能与膝关节骨关节炎病变的严重性和进展程度相关。     

膝骨关节炎滑液中可溶性晚期糖基化终末产物受体水平与其病变程度的相关性

背景：研究表明骨关节炎患者关节滑液内可溶性晚期糖基化终末产物受体水平可能与关节炎病变的严重程度存在负相关,但在中国报道较少。目的：观察膝关节骨关节炎患者关节滑液内可溶性晚期糖基化终末产物受体水平与其病变严重程度的关系。方法：共纳入46名膝关节骨关节炎患者及14名健康对照者,纳入的骨关节炎患者符合美国风湿病学会骨关节炎的临床诊断标准。采用Kellgren-Lawrence的标准对膝关节骨关节炎病变严重程度进行分级,使用人可溶性晚期糖基化终末产物受体水平酶联免疫吸附试剂盒在酶标仪下检测测关节滑液的可溶性晚期糖基化终末产物受体水平。结果与结论：膝关节骨关节炎患者关节滑液可溶性晚期糖基化终末产物受体水平较健康对照组显著降低（P〈0.01）,且与膝关节骨关节炎病变严重程度呈显著独立负相关（r=-0.587,P〈0.01）。结果表明关节滑液可溶性晚期糖基化终末产物受体水平可能与膝关节骨关节炎病变的严重性和进展程度相关。     

血必净注射液对复苏后大鼠细胞因子和p38丝裂素活化蛋白激酶通路的影响

目的 探讨窒息致心搏骤停(CA)心肺复苏(CPR)后大鼠心、脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)的变化及血必净注射液的影响.方法 采用呼气末夹闭气管窒息法建立大鼠CA模型后进行CPR.将50只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及小、中、大剂量血必净治疗组(血必净注射液浓度分别为5.0、7.5、15.0 ml/kg)5组.复苏24 h后处死大鼠,取心、脑组织标本,电镜下观察心、脑组织的病理改变;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测心、脑组织中TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量.结果 组织病理观察显示,心、脑细胞超微结构出现损伤性改变,以模型组最重,大剂量血必净组最轻.模型组心、脑组织中TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量较对照组明显升高(均P<0.01);血必净治疗组心、脑TNF-α、IL-1β、p38MAPK含量较模型组明显下降,其中大剂量组较小剂量组下降更明显(均P<0.05).结论 CA复苏后大鼠心、脑组织内TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量增多;血必净注射液可明显调节心、脑组织中的TNF-α、IL-1β和p38MAPK含量,而且存在明显量-效关系,从而缓解CA大鼠复苏中缺氧及再灌注后炎症因子所带来的损伤.     

血管生成素-2及可溶性糖基化终末产物受体在脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征发病中的作用

目的 本研究旨在探索血管生成素-2(Ang-2)及可溶性糖基化终末产物受体（sRAGE）表达在脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征（ARDS）发病中的作用,评估其对脓毒症相关ARDS的发生起到早期预测作用。方法 收集2021年5月至2022年1月于山西白求恩医院住院的脓毒症相关ARDS患者作为研究组,脓毒症患者作为病例对照组,同期于本院体检中心进行健康体检的成人为健康对照组。追踪随访研究组患者28 d转归情况,分为存活组9例和死亡组8例。比较各组受试者Ang-2及sRAGE表达水平及实验室指标（白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞数、中性粒细胞及淋巴细胞比值、单核细胞数及嗜酸性粒细胞数）的差异,并分析脓毒症相关ARDS发病的危险因素,以及Ang-2和sRAGE对脓毒症相关ARDS早期识别的诊断效能。结果 三组Ang-2及sRAGE表达水平比较差异均有统计学意义（分别P <0.01,P <0.05）。而且与病例对照组（3 378.06/912.67,1 343.63/334.49）及健康对照组（2 852.48/411.97,1 365.53/211.54）相比,研究组Ang-2及s...     

血浆可溶性晚期糖基化终末产物受体对急性呼吸窘迫综合征的诊断价值及预后意义

目的 探讨血浆可溶性晚期糖基化终末产物受体对急性呼吸窘迫综合征诊断的价值及预后意义.方法 本研究为前瞻性病例对照研究,将201 1年2月至2012年9月东南大学附属第二医院重症监护病房（ICU）收治的43例符合2012年急性呼吸窘迫综合征柏林定义及诊断标准患者,根据急性呼吸窘迫综合征柏林定义的患者氧合状态分为轻、中、重度三组,同时收集无肺损伤的住院患者20例作为对照组,根据28 d转归将急性呼吸窘迫综合征组分为生存组和死亡组两个亚组.入院24h内测定血常规、血气分析、血生化、C反应蛋白（CRP）,记录最高体温（T）,进行急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分、序贯器官衰竭估计（SOFA）评分;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测可溶性晚期糖基化终末产物受体水平.采用SPSS 17.0统计分析软件进行数据处理.计量资料采用方差或Mann-Whitney U检验,计数资料比较采用x2检验;绘制受试者工作特征曲线（ROC）.结果 急性呼吸窘迫综合征组患者血浆可溶性晚期糖基化终末产物受体浓度均显著高于无肺损伤组[377 （286.3 ～ 548.0）pg/ml]（P均＜0.05）,中、重度急性呼吸窘迫综合征组[分别为3188（1984～ 3042）,3273 （3170～3265） pg/ml]患者的可溶性晚期糖基化终末产物受体水平高于轻度急性呼吸窘迫综合征组[1707（1649～ 1870） pg/ml] （P ＜0.05）;死亡组可溶性晚期糖基化终末产物受体浓度[2996（2768～3319）pg/ml]明显高于生存组[2147（1965 ～ 2449） pg/ml],有统计学意义;可溶性晚期糖基化终末产物受体诊断急性呼吸窘迫综合征的ROC曲线下面积为0.912,以842 pg/ml为截断值,灵敏度为92.7％,特异度为87.8％,优于CRP.结论 血浆可溶性晚期糖基化终末产物受体水平对急性呼吸窘迫综合征诊断有一定价值,高浓度的可溶性晚期糖基化终末产物受体与急性呼吸窘迫综合征不良预后相关.     

不同剂量纳布啡对肺癌根治术患者高迁移率族蛋白B1及晚期糖基化终末产物受体表达水平的影响

目的探讨不同剂量纳布啡对肺癌根治术患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)表达水平的影响。方法采用随机、对照、双盲、前瞻性的研究,选取于2017年1月至2018年12月因肺癌在广西柳州市工人医院进行胸腔镜肺癌根治术治疗的患者160例作为研究对象。随机分为A、B、C、D、E5组,每组均32例,其中A组为舒芬太尼2. 0μg/kg,B组为盐酸纳布啡注射液剂量为0. 5 mg/kg+舒芬太尼1. 5μg/kg,C组为盐酸纳布啡注射液剂量为1. 0 mg/kg+舒芬太尼1. 0μg/kg,D组盐酸纳布啡注射液剂量为1. 5 mg/kg+舒芬太尼0. 5μg/kg,E组为盐酸纳布啡注射液剂量为2. 0 mg/kg+舒芬太尼0. 5μg/kg,对比分析各组T0、T1、T2时间点的HMGB1及RAGE含量及术后3 d不良反应情况。结果 A、B、C、D、E五组T1、T2期外周血HMGB1及RAGE含量均高于T0期,差异有统计学意义(P 0. 05)。A、B、C、D、E五组T2期外周血HMGB1及RAGE含量均低于T1期,差异有统计学意义(P 0. 05)。T0期,A、B、C、D、E五组外周HMGB1及RAGE含量对比,差异无统计学意义(P 0. 05)。T1期及T2期,D、E两组外周血HMGB1及RAGE含量低于A、B、C组,差异有统计学意义(P 0. 05)。其他组间HMGB1及RAGE含量,差异无统计学意义(P 0. 05),B、C、D、E组的不良反应发生率显著低于A组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论应用1. 5 mg/kg纳布啡联合0. 5μg/kg舒芬太尼对非小细胞肺癌根治术后镇痛,可有效降低HMGB1及RAGE的表达量,降低炎症反应程度,同时不良反应较少,为临床工作和术后镇痛提供经验及思路。     

晚期糖基化终末产物、超敏C反应蛋白在2型糖尿病及并发缺血性脑血管病中的作用

[目的]探讨晚期糖基化终末产物、超敏C反应蛋白在2型糖尿病及并发缺血性脑血管并发症中的意义。[方法]分别检测健康对照组、2型糖尿病无并发症组、合并短暂脑缺血发作组及合并脑梗死组的血清晚期糖基化终末产物、超敏C反应蛋白含量并进行相关分析。[结果]2型糖尿病组与对照组比较,血清晚期糖基化终末产物、超敏c反应蛋白均显著升高（P〈0．05）;2型糖尿病各组比较,合并脑梗死组明显高于无并发症组及合并短暂脑供血不足组（P〈0．05）;2型糖尿病组晚期糖基化终末产物、超敏c反应蛋白与血清糖化血红蛋白呈正相关（r1=0．21,P1=0．029;r2=0．18,P2=0．032）。[结论]晚期糖基化终末产物、超敏C反应蛋白在2型糖尿病及并发缺血性脑血管病中具有重要作用。     

重组腺病毒介导反义p38α基因抑制烧伤复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞凋亡的研究

目的 探讨烧伤血清复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)活化与细胞凋亡之间的关系.方法 采用原代培养的乳鼠心肌细胞,按照处理因素不同分为3组:正常对照组细胞自然生长;烧伤缺氧组细胞给予烧伤血清+缺氧刺激(含10%的40%总体表面积Ⅲ度烫伤大鼠伤后6 h血清的DMEM/F12培养液+1%O2、5%CO2和94%N2);反义阻断组在细胞转染反义p38α重组腺病毒(AD-ASp38α)后给予烧伤血清+缺氧刺激.细胞培养6 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测p38磷酸化水平;采用DNA片断和流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,烧伤缺氧组p38磷酸化水平(灰度值)明显提高(8.68±0.14比3.21±0.05,P＜0.01),细胞凋亡率明显增高[(50.367±0.451)%比(2.063±0.111)%,P＜0.01];心肌细胞转染AD-ASp38α后,p38磷酸化水平(灰度值)明显下降(5.46±0.16比8.68±0.14,P＜0.01),细胞凋亡率明显降低[(13.200±0.121)%比(50.367±0.451)%,P＜0.01].结论 烧伤血清复合缺氧条件下通过促使p38MAPK活化导致心肌细胞凋亡增多;阻断p38MAPK信号转导通路可减轻严重烧伤早期心肌细胞的损伤.     

拮抗晚期糖基化终末产物受体对烫伤延迟复苏大鼠多器官功能及死亡率的影响

目的 观察拮抗晚期糖基化终末产物受体(RAGE)对烫伤延迟复苏动物多器官功能及死亡率的影响,并探讨其作用机制.方法 选取雄性Wistar大鼠,采用重度烫伤延迟复苏模型(30%总体表面积Ⅲ度烫伤).实验分为两部分.死亡率观察:130只大鼠被随机分为假手术组(n=10)、烫伤组(n=60)及RAGE抗体治疗组(n=60),观察伤后7 d内每日动物的存活率.器官功能观察:72只大鼠被随机分为假手术组(n=24)、烫伤组(n=24)及RAGE抗体治疗组(n=24),于伤后1、3、5和7 d各活杀6只动物,取血,用全自动生化分析仪测定肝、肾和心脏器官功能指标.结果 烫伤组伤后1～7 d,大鼠血中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酐(cr)、尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平均显著高于假手术组(P<0.05或P<0.01),其中ALT、AST、Cr及BUN水平均于伤后3 d达峰值;给予RAGE抗体治疗可不同程度降低烫伤动物血中各指标水平,其中AST在伤后1～7 d显著下降,余指标在伤后1～5 d均明显改善(P<0.05或P<0.01).RAGE抗体治疗组伤后7 d内每日大鼠存活率显著高于烫伤组(P<0.05或P<0.01).结论 RAGE抗体干预能明显改善重度烫伤延迟复苏大鼠的预后,并对重要器官功能具有显著保护作用.     

缺血预处理星形胶质细胞GDNF抑制p38MAPK信号通路减轻神经元凋亡

目的研究缺血预处理星形胶质细胞分泌GDNF抑制p38MAPK信号通路发挥脑保护作用。方法原代培养神经元及星形胶质细胞,给予缺血预处理,将星形胶质细胞培养基制备成条件培养基,沉默GDNF基因的培养基作为另一种条件培养基,将神经元分为对照组、预处理组、预处理+缺血组、缺血组,应用不同条件培养基孵育神经元,流式细胞术检测神经元凋亡,Western Blot法检测神经元p38MAPK及p-p38MAPK的表达。结果预处理+缺血组和缺血组神经元凋亡率明显增高(P<0.05),加入ACM2后凋亡率较ACM1和ACM3两组均减低(P<0.05)。每组神经元的p38MAPK蛋白表达均无明显变化(P>0.05);预处理+缺血组及缺血组p-p38MAPK的蛋白表达均明显高于对照组和预处理组(P<0.05),预处理+缺血组p-p38MAPK的蛋白表达均较缺血组低(P<0.05),加入ACM2组的p-p38MAPK蛋白表达低于ACM1和ACM3两组(P<0.05)。结论缺血预处理后星形胶质细胞分泌GDNF抑制p38MAPK信号通路的激活从而减少神经元凋亡,起到脑保护作用。     

机械拉伸对γ-干扰素诱导肺泡上皮细胞人β-防御素-3表达的影响

目的 研究机械拉伸对γ-干扰素(IFN-γ)诱导肺泡上皮细胞(A549细胞)人β-防御素-3(HBD-3)表达的影响并探讨HBD-3在呼吸机相关性肺炎(VAP)发病机制中的作用.方法 体外培养A549细胞,分别给予机械拉伸(S组),10 ng/ml IFN-γ(I组)和10.ng/ml IFN-γ+机械拉伸(IS组)3种处理,未处理的细胞为对照组(C组),处理的时间为2 h、4 h和6 h.拉伸由细胞FlexerceH-4000TM拉伸系统提供,拉伸的幅度为20%,速率为30次/min.处理后实时定量逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测HBD-3 mRNA的表达;处理6 h的细胞继续培养至24 h,激光扫描共聚焦显微镜检测HBD-3的表达.采用单因素方差分析和q检验对实验数据进行统计学分析.结果 单独的机械拉伸不能使HBD-3mRNA的表达发生显著变化.10 ng/ml IFN-γ处理2 h、4 h和6 h后,HBD-3 mRNA表达量较之C组分别增加了(2.63±0.60),(8.02±1.63)和(12.21±2.35)倍.10 rig/ml IFN-γ+机械拉伸处理2 h、4 h和6 h后,HBD-3 mRNA表达量较之C组分别增加了(1.54±0.16),(4.37±0.87)和(6.99 4-1.32)倍,但均显著低于I组(P<0.01).6 h机械拉伸后,IS组HBD-3的表达显著少于I组(P<0.01),同C组差异无统计学意义.结论 机械拉伸能显著抑制IFN-γ诱导肺泡上皮细胞HBD-3表达的上调,这可能是机械通气(MV)的患者易于发生VAP的原因之一.     

p38丝裂素活化蛋白激酶/核转录因子-κB转导通路在脓毒症所致内皮细胞凝血功能障碍中的作用

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶/核转录因子-κB(p38MAPK/NF-κB)是否参与了脓毒症所致的内皮细胞凝血功能障碍.方法 选取22例脓毒症患者血浆刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),以8名健康人血浆刺激HUVEC 60 min作为阴性对照,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作为阳性对照.用酶联免疫吸附法(ELISA)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)、免疫荧光法检测p38MAPK和NF-κB的磷酸化.结果 脓毒症患者血浆TNF-α水平(ng/L)明显高于健康对照者(155.68±89.74比5.00±0.47,P<0.01).与20%的健康人血浆比较,用20%的脓毒症患者血浆刺激HUVEC后,组织因子(TF,μg/L)于180 min时达高峰(5.87±0.14比1.25±0.11,P<0.01),血管性血友病因子(vWF,μg/L)于120 min达到高峰(9.59±0.07比3.59±0.06,P<0.01)并随后下降.用20%的脓毒症患者血浆刺激HUVEC后p38MAPK和NF-κB发生活化,p38MAPK的活化早于NF-κB(2 min比5 min);加入p38MAPK特异性抑制剂SB239063后,NF-κB的磷酸化和核移位受阻.结论 p38MAPK/NF-κB转导通路在脓毒症引起的凝血功能障碍中具有一定的作用.     

p38信号通路参与呼吸机所致肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白BI(high mobility group box 1 protein,HMGB1)中的作用.方法健康sD大鼠24只随机分为3组:对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(Vt)为8mL/kg;大潮气量通气组(C组)Vt为40 mL/kg.机械通气4 h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性.采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白和p38激酶活性变化,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达.应用单因素方差分析进行不同组别间的比较.结果 通气4 h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.77±0.68)g/L、白细胞计数(106.55±28.17)×10~7 L~(-1)、肺W/D比值(7.16±1.02)、MPO活性(3.94±1.21)U/g、HMGB1蛋白(0.64±0.17)和mRNA(1.17±0.45)表达以及p38激酶活性(0.51±0.12)均明显增加(P<0.05),而B组上述各项指标的变化均无统计学意义(P>0.05).结论大潮气量机械通气可引起大鼠急性肺损伤,p38参与了机械牵张诱导肺组织HMGB1的表达.