大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测

目的：定量检测转化生长因子-β1（Transfimning growth factorβ1，TGF-β1）和转化生长因子-β2（TGF-β2）在大鼠正常视网膜中的表达水平，探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法：分离取出大鼠正常视网膜，抽提RNA并逆转录，实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。 结果：大鼠视网膜RNA保持宅好未被降解，能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0．0378±0．009，TGF-β1为0．0008±0．0003．前者明显高干后者，统计学上差异有显著性（t=12．37，P〈0．001），说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主，TGF-β2和TGF-β1的比值由55．00±26．61。 结论：实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网模中以TGF-β2表达为主，提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导怍用。     

大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测(英文)

目的:定量检测转化生长因子-β1(Transforming growth factor β1,TGF-β1)和转化生长因子-β2(TGF-β2)在大鼠正常视网膜中的表达水平,探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠正常视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。结果:大鼠视网膜RNA保持完好未被降解,能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0.0378±0.009,TGF-β1为0.0008±0.0003,前者明显高于后者,统计学上差异有显著性(t=12.37,P<0.001),说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主,TGF-β2和TGF-β1的比值为55.00±26.61。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网膜中以TGF-β2表达为主,提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导作用。     

实时荧光定量PCR检测糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子β受体-1和受体-2基因表达

目的:定量检测转化生长因子β受体-1(TransformingGrowthFactor-βreceptortype1,TβR1)和转化生长因子β受体-2(TransformingGrowthFactor-βreceptortype2,TβR2)编码基因在糖尿病大鼠视网膜中不同时相点的动态表达水平,以探讨转化生长因子β及转化生长因子β受体在糖尿病视网膜病变(DR)中的作用。方法:选择健康成年SD大鼠28只,随机分为正常对照组(CON)和糖尿病组(DM)。利用链尿佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病视网膜病变模型,制备RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TβR1和TβR2在不同时相点相对于内参照基因18s的相对mRNA含量。结果:TβR1在4,12wk时相对于18s的mRNA含量分别为0.000493±0.000133和0.000608±0.000232。TβR2在4,12wk时相对于18s的mRNA含量分别为0.000166±0.000057和0.000113±0.000049。TβR1基因表达水平随着病变进展呈上升趋势,TβR2在4wk时表达量较正常增加,到12wk时表达量又减少,逐渐恢复到正常水平。结论:糖尿病大鼠视网膜中TβR1和TβR2基因表达水平变化可能影响TGF-β信号的转导过程,TGF-β及其受体介导的信号转导通路在糖尿病视网膜病变中具有重要作用。     

转化生长因子-β受体Ⅰ/Ⅱ在大鼠视网膜中基因表达的定量检测

目的:定量检测转化生长因子-(受体Ⅰ(transforming growth factor-(typeⅠreceptor,TβRⅠ)和受体Ⅱ(TβRⅡ)基因在大鼠视网膜中的表达水平,探讨TGF-(不同受体在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析视网膜中TβRⅠ和TβRⅡ的mRNA含量。结果:TβRⅠ相对于18S的mRNA含量是0.00034±0·00013,TβRⅡ相对于18S的mRNA含量是0.0001±0·00005,差异有统计学意义(P<0.01)。在大鼠视网膜中以TβRⅠ表达为主,TβRⅠ和TβRⅡ比值的平均值为3·9±1.7。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达,TβRⅠ的mRNA在视网膜中的表达明显高于TβRⅡ,提示这可能是与TβRⅠ及TβRⅡ本身结构特点和在TGF-β信号转导过程中的不同作用有关。当TβRⅠ/TβRⅡ比例改变时,可影响细胞对TGF-β的应答反应,可能是增殖性视网膜病变的发生机制之一。     

体外培养的兔睫状体色素上皮细胞表达转化生长因子-β1

目的研究体外培养条件下兔睫状体色素上皮(ciliarypigmentepithelium,CPE)细胞是否表达转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1),探讨TGFβ1在增殖性玻璃体视网膜病变中的作用。方法体外培养兔眼CPE细胞,取第3代细胞应用免疫组织化学Supervision染色方法检测TGFβ1的表达,用PBS代替第1抗体作为阴性对照。结果与正常活体组织不同,体外培养的兔CPE细胞经免疫组织化学染色,其细胞膜和细胞浆呈棕黄色阳性着色,阴性对照组未见明显棕黄色阳性着色。结论CPE细胞具有合成和表达TGFβ1潜能,为进一步研究增殖性玻璃体视网膜病变、房水形成和睫状体炎症奠定了基础。     

转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测

目的：定量检测转化生长因子-β（Transforming Growth Factor-β,TGF-β）及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法：随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和Ⅱ型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果：TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4．26×10^-7±1．45×10^-7和10．67×10^-7±7．47×10^-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1．08×10^-10±0．68×10^-10和8．23×10^-11±6．63×10^-11。TGF-βI型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0．003015±0．0036和0．000379±0．000281,TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5．33×10^-5±5．05×10^-5和1．002×10^-5±9．04×10^-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2．9±2．8,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7．5±1．4,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-βI型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βI型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-I型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高干相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中I型、Ⅱ型受体表达的降低可能导致TGF-β分泌的增加,从而导致翼状胬肉病变的发生发展,提示转化生长因子-β及其受体在翼状胬肉病变发生发展中可能起着重要的作用。     

转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测(英文)

目的:定量检测转化生长因子-β(Transforming Growth Fac-tor-β,TGF-β)及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法:随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和II型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果:TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4.26×10-7±1.45×10-7和10.67×10-7±7.47×10-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1.08×10-10±0.68×10-10和8.23×10-11±6.63×10-11。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0. 003015 ±0. 0036和0. 000379 ±0.000281, TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5.33×10-5±5.05×10-5和1.002×10-5±9.04×10-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2.9±2.8,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7.5±1.4,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-βⅠ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高于相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中Ⅰ型、Ⅱ型受体表达的降低可能导致TGF-β分泌的增加,从而导致翼状胬肉病变的发生发展,提示转化生长因子-β及其受体在翼状胬肉病变发生发展中可能起着重要的作用。     

实时荧光聚合酶链反应定量检测准分子激光原位角膜磨镶术后兔角膜转化生长因子β2的表达

目的 :定量检测转化生长因子 β2 (TGF β2 )在LASIK术后不同时段角膜中的表达水平 ,探讨TGF β2与准分子激光原位角膜磨镶术 (LASIK)术后早期伤口的愈合关系。方法 :取 2 0只新西兰白兔 ,左眼按近视 4D行LASIK术 ,右眼作对照组。分别于术后即刻、4h、4 8h、1w、2w取角膜 ,用荧光半定量PCR方法检测兔中央手术区及周边非手术区角膜TGF β2的表达。 结果 :LASIK术后不同时段术眼中央手术区与周边非手术区角膜TGF β2的mRNA水平差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,左眼手术区与右眼相应对照区角膜TGF β2的表达差异同样无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :LASIK术后反应轻微 ,组织损伤小 ,角膜TGF β2的表达与术前相比无明显变化。     

大鼠球结膜滤过泡模型中转化生长因子β1及转化生长因子β2动态表达的实验研究

目的建立大鼠球结膜滤过泡模型,观察滤过泡形成及瘢痕化过程中结膜及结膜下组织转化生长因子β1（TGF—β1）及转化生长因子β2（TGF-β2）的动态表达情况,探讨TGF-β1及TGF-β2在滤过泡瘢痕化中的作用。方法选用健康成年雄性sD大鼠64只,随机选取8只作为正常对照组,其余56只大鼠作为实验组。右眼成功建立球结膜滤过泡模型。将实验组平均随机分为7组,每组8只,术后观察滤过泡的形成情况,监测眼压波动情况;并于术后各时间点分别处死,分别采用免疫荧光组织化学及Western印迹法检测术区TGF—β1及TGF—β2的表达部位及动态表达量的变化。结果①所观察术眼在术后第1天均能形成不同程度隆起明显的滤过泡。滤过泡生存时间为7-22d,平均13d。②所观察术眼在术后眼压均明显下降,后缓慢上升。平均于术后7d时回归术前基线水平,保持至观察期结束。③免疫荧光组织化学结果显示在滤过泡结膜组织上皮层、固有层均可见到TGF-β1及TGF-β2强阳性表达。④Western印迹法结果显示TGF-β1在术后1d开始明显增高,持续增高至术后5、7d达峰值,随后逐渐降低至术后28d,但仍高于对照组,差异具有统计学意义（F=431．918,P〈0．01）。TGF-β2在术后1d开始明显增高,持续增高至术后7d达峰值,随后逐渐降低至术后28d,但仍高于对照组,差异具有统计学意义（F=674．323,P〈0．01）。结论前房引流管植入术可成功建立大鼠球结膜滤过泡模型。TGF-β1及TGF-β2参与了球结膜滤过泡的形成及瘢痕化进程。     

转化生长因子-β在视网膜母细胞瘤中的表达

转化生长因子-β(TGF-β)作为细胞生长的负调控因子,参与了许多肿瘤的发生、进展和转移[1].由于国内外对TGF-β在视网膜母细胞瘤(RB)发病机制上所起作用的研究较少.因此,我们用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)检测了TGF-β在RB中的表达,探讨其与RB病理分期、组织分型、视神经浸润深度的关系.现将结果报道如下.     

转化生长因子-β2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达

目的 观察形觉剥夺性近视（FDM）形成中视网膜转化生长因子-β2（TGF-β2）水平的变化,对FDM的发病机制做进一步的探讨.方法 出生3 d豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月建立FDM模型,左眼作为对照,视网膜检影检测双眼屈光度,A型超声测量双眼眼轴长度.免疫组织化学分析TGF-β2的表达,RT-PCR检测TGF-β2 mRNA的表达.结果 形觉剥夺使近视屈光度增加,遮盖眼与对照眼相比差异有统计学意义（P＜0.01）,遮盖眼视网膜光感受器细胞层TGF-β2蛋白表达减少（P＜0.01）,TGF-β2 mRNA的表达下调.结论 TGF-β2参与调控FDM形成.     

转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜损伤愈合的影响

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜针刺损伤愈合的影响。方法：雄性wistar大鼠20只，均取右眼制造角膜针刺创伤模型后随机分成实验组和对照组，实验组用转化生长因子β2(TGF-β2)点眼，对照组用生理盐水点眼，每日6次、至创面愈合止。计算剩余损伤面积、行组织学检查及透射电镜观察。结果：术后两组创面愈合面积比较实验组均快于对照组，且差异显著，组织学检查及电镜观察均显示两组差异。结论：TGF-β2有促进角膜损伤愈合的作用，其可能的机制为TGF-β2是胶原溶酶的主要抑制剂，可抑制基质中胶原酶的合成，降低胶原分解，促进胶原的分泌。     

转化生长因子-β与翼状胬肉

转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-beta,TGF-β)具有多种生物学作用,翼状胬肉中也有其异常表达。TGF-β在翼状胬肉发病中的作用主要表现为:①能促进翼状胬肉上皮细胞,成纤维细胞的增殖和新生血管形成。②能促进多种细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的合成。③对翼状胬肉中的炎症和免疫反应也有介导作用。     

实时荧光聚合酶链反应定量检测大鼠视网膜中 转化生长因子β1和β2的表达

转化生长因子β(TGF-β)是一种具有控制增生和分化等生物过程的自分泌或旁分泌生长因子。TGF-β及其受体、细胞内下游信号转导分子的突变在糖尿病视网膜病变的发生、发展中扮演了非常重要的角色。研究TGF-β的不同成员在视网膜中的表达，有助于深入了解它们的来源和作用机制。我们以实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测TGF-β1和TGF-β2在大鼠视网膜中的表达，为研究TGF-β在视网膜病变中的作用机制提供依据。     

转化生长因子β及其受体与白内障发生的关系

随着对晶状体上皮细胞形态学及分子水平的研究,人们发现生长因子,尤其是转化生长因子β(transforming growthfactor β,TGF-β)对白内障的发生、发展起重要作用,并有望对其治疗提供新的线索.本文拟对这一方面的研究进展作一综述.     

转化生长因子-β与葡萄膜黑色素瘤

转化生长因子-β(TGF-β)是一种具有多种生物学功能的多肽类生长因子。TGF-β在肿瘤的发生过程中起着双向调节作用,同时TGF-β对细胞的增殖与分化、细胞外基质的产生、血管的生成及机体免疫系统均起着重要作用。近年研究TGF-β的异常过表达以及信号传导通路的异常与葡萄膜黑色素瘤生长和侵袭转移能力密切相关。就TGF-β的结构、功能以及它在葡萄膜黑色素瘤发生过程中的作用进行综述。     

转化生长因子-β2诱导的上皮间质转分化对人晶状体上皮细胞基因表型的影响

目的观察转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导人晶状体上皮细胞（LECs）发生上皮问质转分化（EMT）时,其形态和基因表型所发生的变化。方法在体外培养的人LECs中,加入100pg／mL浓度的TGF-β2,诱导其发生EMT,处理0、6、24、48h后,观察其在形态上的变化,利用实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）于各时间点检测其标志性基因E-钙粘蛋白（CDHl）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（VIM）等在表达水平上所发生的变化,并与未处理的空白对照组进行比较。结果加人TGF-β2后,随着时间的推移,人LECs在形态上拉长,呈梭形;上皮细胞标志性基因如CDHl的表达水平逐渐下调,48h时相对表达量为1．10E-06,和对照组2．68E-06相比差异有统计学意义（P=0．002）;间质细胞标志性基因如VIM的表达水平逐渐上调,48h时相对表达量为1．64E-02,和对照组1．37E-02相比差异有统计学意义（P=0．006）;而α-SMA的表达水平也逐渐上升,48h时相对表达量为9．21E-03,虽和对照组8．67E-03相比差异无统计学意义（P=0．551）,但仍呈上升趋势。结论在TGF-132诱导下,人LECs发生EMT,其形态和基因表型均发生与间质细胞相符的变化。     

高原环境下兔眼球钝挫伤后NGB及TGF-β2的表达

目的 观察高原环境下,兔眼球钝挫伤后视网膜中脑红蛋白（NGB）及角膜中转化生长因子β2（TGF-β2）的表达.方法 将38只兔（76眼）随机分为对照组2只、亚高原组18只（海拔1510m）及高原组18只（海拔3840m）.后两组造成兔双眼钝挫伤模型,伤后2 h、6 h、1 d、3 d、7 d、14 d取材切片,行HE及免疫组织染色,病理学彩色图像分析仪测定灰度值,观察视网膜NGB及角膜TGF-β2含量变化.结果 视网膜中NGB在两模型组中的表达均呈现时相性,伤后7 d灰度值最小,高原组与亚高原组比较2 h、6 h、1 d及14 d差异有统计学意义（均P＜0.05）;伤后角膜中TGF-β2在两模型组中的表达也均呈现时相性,2 h到3 d灰度值逐渐减小,14 d时恢复正常水平,两模型组比较各时间点灰度值差异均有统计学意义（P＜0.05）;用Pearson相关性分析显示,视网膜NGB与角膜TGF-β2无相关性（r=-0.57,P＞0.05）.结论 高原环境下,眼球钝挫伤后视网膜NGB及角膜中TGF-β2早期表达增加,并分别呈现时相性,提示NGB和TGF-β2参与缺氧环境下视觉系统组织的损伤与修复,在高原环境眼外伤综合治疗方面有一定的应用前景.