红细胞花环试剂检测大鼠淋巴细胞亚群

<正> 目前,外周血淋巴细胞的检测有多种方法,各有其优缺点。为了探索一种简便易行的检测方法,本文采用了抗体致敏的红细胞花环试剂间接检测大鼠外周血淋巴细胞亚群并与间接免疫荧光法进行比较。现将结果报告如下。     

检测淋巴细胞亚群的花环试剂的试制研究

本文在我国首次报道采用醛化红细胞作载体,预先使葡萄球菌A蛋白红与细胞结合,然后通过A蛋白将抗T等单克隆抗体或异种抗小鼠Ig血清包被于红细胞表面成为花环试剂。其特异、敏感、稳定性好,效期长,使用方便,可用于T亚群的测定或抗淋巴细胞单克隆抗体的筛选检定。是实验研究和临床检验中有广泛实用价值的一种试剂。     

葡萄球菌花环试验检测抗巨噬细胞抗体

抗巨噬细胞抗体的发现和检测对进一步研究巨噬细胞(Mφ)及其在自身免疫性疾病过程中的作用具有重要意义。我们建立的葡萄球菌花环试验,是利用葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人及多种哺乳类动物的Ig GFC段结合的特点,制成能吸附特异性抗体的颗粒载体,再与Mφ形成SPA花环,用来检     

葡萄球菌花环试验检测抗巨噬细胞抗体

<正> 抗巨噬细胞抗体的发现和检测,对进一步研究巨噬细胞(Mφ)及其在自身免疫性疾病过程中的作用具有重要意义,迄今国内尚未见这方面的报道。我们建立的葡萄球菌花环试验,运用葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人和动物IgGFc段结合而成为携带特异抗体的颗粒载体,再与Mφ形成SPA花环的原理,检测抗Mφ抗体。     

用改良的混合花环试验检测淋巴细胞亚群

根据临床和实验室研究的需要,在国外资料的启示下,建立了一种改良的混合花环法,用兔抗CRBC血清可同时一次测定T、B、D、N四种淋巴亚群细胞。用纯化兔抗CRBC IgG代替兔抗CRBC血清,建立了淋巴细胞亚群综合测定法,这样不仅可同时测定T、B、D、N细胞,还可同时测定T细胞亚群中的TG细胞。实验证明,该法需血量少(0.5～1毫升),可一次同时定量计数上述五种淋巴细胞,而且与现有通用TG测定法相比,操作程序明显简化,同时所需的标志物CRBC也比牛红细胞来源方便、经济,因此更适于基层推广使用。     

多发性硬化患者淋巴细胞亚群的研究

目的 观察多发性硬化患者外周血及脑脊液中淋巴细胞亚群的水平。方法 用碱性磷酸酶抗磷酸酶法检测了56例多发性硬化（MS）活动期患者外周血和脑脊液（CSF）的淋巴细胞亚群。结果：活动期MS患者外周血CD4^ 、CD8^ 细胞较对照组减少，CD25^ 细胞、CD4^ /CD8^ 比值较对照组升高（P＜0．05）。CSF中CD4^ 、CD25^ 细胞、CD4^ ／CD8^ 比值较对照组升高，CD8^ 细胞降低（P＜0．05＜0．05），且CSF中淋巴细胞亚群均高于自身外周血中的相应细胞（P＜0．05）。经肾上腺皮质类固醇激素治疗后，随病情缓解，外周血、CSF中的淋巴细胞亚群均有不同程度的改善。结论 淋巴细胞亚群可能参与MS的发病，并与MS的缓解－复发有关。     

多发性硬化患者淋巴细胞亚群的研究

目的观察多发性硬化患者外周血及脑脊液中淋巴细胞亚群的水平. 方法用碱性磷酸酶抗磷酸酶法检测了56例多发性硬化(MS)活动期患者外周血和脑脊液(CSF)的淋巴细胞亚群.结果:活动期MS患者外周血CD4+、CD8+细胞较对照组减少,CD25+细胞、CD4+/CD8+比值较对照组升高(p<0.05).CSF中CD4+、CD25+细胞、CD4+/CD8+比值较对照组升高,CD8+细胞降低(p<0.05<0.05),且CSF中淋巴细胞亚群均高于自身外周血中的相应细胞(p<0.05).经肾上腺皮质类固醇激素治疗后,随病情缓解,外周血、CSF中的淋巴细胞亚群均有不同程度的改善. 结论淋巴细胞亚群可能参与MS的发病,并与MS的缓解-复发有关.     

淋巴细胞亚群与肿瘤免疫的初探

应用淋巴细胞单克隆抗体分离主要的淋巴细胞亚群,用间接免疫荧光法测定了癌病人外周血CD_4~+细胞的数量,显著少于正常人。分离了CD_4~+和CD_4~-细胞,分别用PHA激活及~3H-TdR掺入反映其功能变化,发现CD_4~+和CD_4~-细胞的掺入活性均比正常人显著降低。观察了正常人NK、CD_4~+、CD_8~+和B细胞对K_(562)肿瘤细胞的协同杀伤活性,以NK+CD_4~+细胞的活性最高。本文提示癌病人的CD_4~+细胞数量和功能下降,正常人CD_4~+细胞在协同杀伤肿瘤细胞中具有重要作用,说明CD_4~+细胞在肿瘤免疫中的重要意义。     

葡萄球菌免疫球蛋白花环法检测人外周血T淋巴细胞亚群的初步探讨

<正> 用抗人淋巴细胞单克隆抗体检测外周血淋巴细胞亚群的主要方法有免疫荧光法(FIA)、葡萄球菌免疫球蛋白花环法(SACIIg)、间接抗球蛋白红细胞花环法及生物素-抗生物素花环法.它们各有优缺点。本文采用的SACI-Ig花环法是根据葡萄     

Isolation of Highly Purified Lymphocyte Subsets for Functional Studies by Means of an Indirect Rosette Technique

An indirect rosette assay, utilizing ox erythrocytes (RBC) coupled with rabbit anti-mouse IgG and lymphocytes sensitized with monoclonal mouse antibodies against membrane markers, was used for purification of lymphocyte subsets that were functionally intact. Either peripheral blood mononuclear cells (PBMC) or T lymphocytes isolated by sheep RBC rosetting could be used as starting material for obtaining pure T-cell subsets (T4 or T8). The following steps of the method were evaluated: the procedure of coupling rabbit anti-mouse IgG to ox RBC via the CrCl3 method, the experimental conditions for specific rosetting, and the use of Percoll for the separation of rosettes from the non-rosetting cells. Under optimal experimental conditions the recovery of positively selected cells was 45-55% of the cells originally present in the PBMC. The purity of these cells reached a value of more than 95%, whereas the contamination of the depleted fraction was less than 3%. The functional integrity, manifesting itself as proliferation after mitogen stimulation and as regulatory influences on in vitro Ig synthesis, appeared to be unimpaired. The described technique may be applied to the purification of various cell subpopulations for functional studies, provided monoclonal antibodies against membrane antigens are available.     

HCG滴金免疫测定法试剂的研制及应用

应用自制的两种抗人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）单克隆抗体、分别包被硝酸纤维膜及制备胶体金结合物,建立了检测ＨＣＧ的滴金免疫测定法。结果表明,本法简便、快速,灵敏度高（最小抗原检测量为５０ｍＩＵ／Ｌ）,特异性好,与高浓度的ＬＨ、ＦＳＨ、ＴＳＨ均无交叉反应,临床检验２１７例样品,与ＥＬＩＳＡ法对比测定的符合率为１００％。     

恶性淋巴瘤单克隆抗体的制备和初步鉴定

采用人恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞作为免疫原免疫BALB/C小鼠, 按常规方法融合并经间接ELISA法筛选, 成功地制备了1株抗Raji细胞单克隆抗体(MAb), 命名为SZ138.用琼脂糖双扩散鉴定其为IgG1类, ELISA法测定其腹水效价为1:3.2×104.MAb流式细胞仪检测表明, 该抗体与Raji和Daudi呈阳性反应;与外周红细胞、白细胞(包括淋巴细胞和中性粒细胞)、未活化血小板、内皮细胞株ECV呈阴性反应.免疫组化SP法显示, MAb SZ138识别的抗原在胃肠道的腺体和肝脏有所表达, 而在心、脑、扁桃体、脾、脂肪组织、动脉血管壁、神经节、横纹肌、平滑肌等组织不表达或表达很低.Western blotting分析显示, MAb SZ138可特异识别还原条件下相对分子量为170kD的蛋白多肽.结果提示: MA SZ138对恶性淋巴瘤的诊断和治疗可能具有一定的临床意义.     

改良微量细胞毒试验检测外周血T、B细胞总数及T细胞亚群

本文介绍一种改良微量细胞毒试验。应用抗B细胞单克隆抗体和OKT单克隆抗体系统对86例健康成人外周血中T、B细胞总数及T细胞亚群进行了检测。本法具有简便,不需特殊仪器,在白细胞计数池内计数死活细胞,结果准确等特点,结果显示B细胞、OKT_3(总T细胞),OKT_4(辅助T细胞)和OKT_8(抑制/杀伤T细胞)占外周血淋巴细胞百分率分别为20.59±0.6％;66.42±0.8％;41.65±0.8％,27.19±0.7％。并且,观察到随年龄增加,OKT_3和OKT_4细胞降低。OKT_8细胞增加,T_4/T_8比值降低。文章还讨论了老年组OKT_4细胞显著降低的意义。     

武汉(Wu)系列抗人T细胞及其亚群单抗

本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuTl(OKTl,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CDla);WuT8(OKT2,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗TfR;WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKTkk,CD2)及WuTac(Tac,CD25)。     

抗胃癌细胞系MKN—74单克隆抗体的制备及其初步应用

以低分化胃腺癌细胞株MKN—74直接免疫BALB/c小鼠,制得3株抗胃癌表面抗原单克隆抗体,经鉴定及初步临床应用证明,它们所针对的可能是一类新的主要存在于胃瘤细胞表面的肿瘤相关抗原。     

抗人IL—2单克隆抗体的制备及其特征

用基因重组人IL—2(rIL—2)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与NS—1细胞株杂交,经3～5次克隆获得9株分泌抗IL—2单克隆抗体杂交瘤,所分泌抗体均为IgG_1。其中3B5杂交瘤诱生的腹水中抗体效价达10万倍稀释度。它既能中和用于免疫的rIL—2活性,也可中和其它来源的基因重组人rIL—2,但与天然rIL—2反应弱。rIL—2可与4C3抗体包被的Sepharose 4B组合,並能用1.5%醋酸洗脱。因此它可做为基因工程制备rIL—2的辅助试剂及用于与rIL—2相关的研究。     

EB病毒转化的人外周血淋巴细胞与SHM—D33细胞系融合制备人单克隆抗体

用EB病毒转化人外周血淋巴细胞,因克隆化不成功,分泌不稳定而失败。将转化的细胞与KR—12细胞融合,因融合率低而未成功。将转化细胞与SHM—D33细胞融合,成功地建立了3株稳定分泌人单抗的杂交瘤细胞,均产生IgMλ型抗体,30～50μg/ml上清。其中1株(86—2)已连续传代18个月,未经克隆化仍稳定分泌抗体,已适应低血清培养,抗体分泌量不变;可用裸鼠制腹水。     

免疫毒素的细胞毒性测定方法

免疫毒素是一种常见的导向药物,根据它对靶细胞杀伤的机理,可建立一些测定其细胞毒毒性的方法。本及叙述了4种测定免疫毒素细胞毒毒性的方法,~3H-亮氨酸参入法,染料排斥法,MTT法和克隆培养法。并进行了比较。