可溶性曼氏血吸虫抗原和照射减弱疫苗对小鼠血吸虫病的免疫作用

本文比较了接种单剂肝片吸虫或曼氏血吸虫成虫可溶性提取物与照射减弱曼氏血吸虫尾蚴或童虫对小鼠曼氏血吸虫病的保护作用。并对吸虫抗原提取物与减弱尾蚴疫苗结合应用的免疫效果进行了评价。肝片吸虫成虫(Fhww)或曼氏血吸虫成虫(Smww)可溶性抗原提取物:肝片吸虫、曼氏血吸虫分别经生理盐水反复洗涤后制成匀浆,悬于Hank’s平衡盐溶液中。经超声处理后,在4℃、3000g离心30′,最后收集其可溶性部分。免疫时抗原提取物的蛋白浓度为     

一种新抗原--曼氏血吸虫卵ATP二磷酸水解酶的特征及其免疫细胞化学定位

曼氏血吸虫的成虫ATP二磷酸水解酶 (ATP Dase)可以水解核苷二磷酸与核苷三磷酸 ,该酶在哺乳动物可参与一系列的生理反应 ,如血小板凝集抑制、炎症反应和免疫应答等。Faria Pinto等研究了此酶在曼氏血吸虫虫卵中的定位 ,并分析了其抗原性。用尾蚴攻击雄性Swiss大鼠制备感染血清、虫卵匀浆 2 5 0 0 g离心上清 (HES)及可溶性虫卵抗原(SEA) ,并测定HES和SEA的二磷酸水解酶活性 ,ATP、ADP、UTP、UDP、GTP和GDP均可被水解 ,但是对不同的底物活性稍有差异。HES水解UDPGDP、ATP的能力比SEA高 30 %～ 6 0 % ,而水解ADP的能力…     

ELIEDA技术用于诊断曼氏血吸虫低度感染的评价

酶联免疫电扩散法(ELIEDA)是由免疫电扩散法(IEDA)发展而成的一种微量法。作者将ELIEDA用于诊断低度感染曼氏血吸虫的病人,并与其它的血清学方法如间接血凝试验(IHAT),免疫荧光技术(IFT),IEDA作比较。 IFT、IHAT及IEDA试验所用抗原分别为曼氏血吸虫成虫冰冻切片、碱性可溶性成虫抗原及新鲜成虫的组织匀浆经11000g离心的上清蛋白。进行IEDA时将10μl抗原和5μl未稀释血清以1.5cm间隔分别点样在乙酸纤维素膜上并电泳(Tris-甘氨酸磷酸电     

曼氏血吸虫表膜糖基磷酯酰肌醇固着抗原的选择性释放

以往的研究表明,200kDa抗原是与吡喹酮协同作用的抗体的靶抗原,通过糖基磷酯酰肌醇(GPI)固着于曼氏血吸虫的表膜上。本文通过加与不加吡喹酮及外源磷酯酶C(PIPLC)进行血吸虫体外培养,观察其表面抗原的释放情况,以验证GPI的存在对吡酮疗效的可能作用。取感染7wk雌鼠体内合抱成虫,经~(85)S-蛋氨酸标记后体外培养于10μg/ml吡喹酮及PIPLC中,以不加PIPLC培养的成虫作为对照。定期收集培养液,100000g离心后备用。用慢性感染小鼠血清,识别血吸虫糖蛋白的单克隆抗体mAb     

酶联免疫吸附试验可检出感染曼氏血吸虫小鼠的抗虫卵和成虫特异性抗体

本文应用曼氏血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(AWA)作酶联免疫吸附试验检测小鼠曼氏血吸虫感染。用250条尾蚴感染小鼠,于70～80天后收集成虫及虫卵,加PBS(pH7.2)分别匀浆。匀浆物搅拌过夜,再离心10000转/分钟,共1小时,然后用PBS透析,即得到SEA和AWA。DDY小鼠感染30或50条曼氏血吸虫尾蚴后,每两     

从曼氏血吸虫信使核糖核酸的体外转译产物中获得表面抗原前体的免疫沉淀法

作者从曼氏血吸虫的成虫和虫卵中分离出信使核糖核酸(mRNA)并在体外转译,经鉴定体外转译产物为多肽,存在于血吸虫童虫的表面。按Smithers报告的方法收集曼氏血吸虫成虫,虫卵按Doenhoff方法制备,经生理盐水洗后液氮冰冻。用机械方法由尾蚴转变而得童虫,培养于NGTG-135培养基中,置37℃C含CO_2气体中孵育18小时。用此童虫加弗氏完全佐剂重复皮下注射免疫兔获得兔抗童虫血清。人血清采自曼氏血吸虫病患者。mRNA的分离及体外转译,系将液氮冰     

不同抗原对曼氏血吸虫病酶联免疫吸附试验的适用性

本文作者在苏里南用7种不同的曼氏血吸虫抗原作酶联免疫吸附试验(ELISA)检测曼氏血吸虫病患者血清中的特异性抗体。抗原材料从感染48天的金色仓鼠体内收集成虫和虫卵,制备7种抗原:(1)成虫抗原(AWA);(2)成虫超速离心抗原(AWA-UC);(3)三氯乙酸-可溶性成虫抗原(AWA-     

曼氏血吸虫62kDa条带:一种放射致弱疫苗T细胞抗原和钙网蛋白

曼氏血吸虫成虫可溶性抗原(SAWA)的62/60kDa条带可被照射致弱尾蚴免疫的小鼠血清所识别,并可诱导T细胞应答。为证实并进一步研究上述发现,本研究用曼氏血吸虫SAWA 62/60kDa免疫的小鼠血清对曼氏血吸虫成虫cDNA表达文库进行筛选,并对纯化后的62kDa和60kDa蛋白进行氨基酸测序,以鉴定其作为疫苗免疫后T细胞抗原决定簇的性质和可能性。     

曼氏血吸虫成虫抗原的免疫接种

本文报告了有关免疫接种、提纯和保护性磷酸缓冲液生化分析方面不同指标的资料。收集的曼氏血吸虫成虫迅速用pH6.8、0.15M PBS漂洗2次,取1g虫冰冻贮存于10ml PBS中至少10天制备成虫浸出液,经冻融、过滤、4℃下10000g离心60分钟,将悬液(盐水浸出液,SE)再通过0.22μ微孔膜过滤,其蛋白浓度用Lowry's法测定。取SE样本用交联葡聚糖G-100柱层析获得纯化的成虫部分(FI)。将SE-CFA(福氏完全佐剂)、FI-CFA CE-C.parvum(短小棒状杆菌)或单纯SE、FI抗原分别接种雄性新     

同种抗原酶标记试验诊断埃及和曼氏血吸虫病

作者分别用埃及和曼氏血吸虫的尾蚴接种金色仓鼠,感染50天后解剖,收集肝与肠系膜静脉内的成虫,洗净,制成匀浆,冰冻、离心、将上清液透析、抽干,分别制成成虫抗原。与埃及血吸虫病患者、曼氏血吸虫病患者和混合感染患者血清进行酶标记试验。试验方法参照Engvall(1972)塑料管包埋抗原法进行。     

用抗原序列标签法识别编码曼氏血吸虫抗原的基因

本文描述了一种用抗原序列标签(AST)识别编码曼氏血吸虫抗原基因的方法。 经临床及粪便检查从慢性血吸虫病病人中挑选出粪检曼氏血吸虫虫卵阳性的患者,收集治疗前的血清。经ELISA分析,从中选出17名含有抗曼氏血吸虫成虫抗原或虫卵抗原的高水平IgM患者的血清,混和后用亲和层析法纯化获得抗曼氏血吸虫成虫的免疫球蛋白,用于筛选曼氏血吸虫成虫λZAP cD-     

埃及血吸虫感染的血清诊断和化学治疗对血清诊断试验的影响

作者以曼氏血吸虫、日本血吸虫、肝片吸虫和猪蛔虫的成虫以及曼氏血吸虫尾蚴作抗原进行间接红细胞凝集试验和补体结合试验,以曼氏血吸虫新鲜尾蚴作尾蚴膜反应,以感染曼氏血吸虫的小鼠肝冰冻切片为抗原作间接免疫荧光试验,以及用曼氏血吸虫成虫抗原进行琼脂双扩散试验,检查了取自利比里亚曼氏和埃及血吸虫病流行区某医院的埃及血吸虫病人血清。受检者按尿中有无埃及     

无佐剂免疫的抗曼氏血吸虫保护性抗原的分离和定性

用曼氏血吸虫波多黎各株制备可溶性成虫抗原(SWAP)、可溶性虫卵抗原(SEA)及童虫表面抗原提取物。曼氏血吸虫童虫加福氏佐剂免疫BALB/c小鼠后取脾分离脾细胞,与鼠骨髓瘤细胞P3NS-1融合。ELISA     

用纯化成虫抗原免疫牛获得对肝片吸虫感染的抵抗力

作者从肝片吸虫成虫分离到肝片吸虫/曼氏血吸虫交叉免疫抗原(称为Fh_(smⅢ(M))),并研究了这一抗原免疫小牛后的免疫应答和对肝片吸虫攻击的抵抗力。从病牛胆道中收集肝片吸虫成虫,在冰冷0.01M磷酸缓冲液及蒸馏水中反复洗涤多次,在组织捣碎器中制成匀浆,50000×g离心1小时,收集上清液,通过亲和层析柱分离得到Fh_(smⅢ(M))。感染用的肝片吸虫囊蚴在显微镜下观察活力后计数,以滤纸裹成小丸,经口给予。实验用3～4月龄小牛,均经粪便检查未     

曼氏血吸虫表膜两型转糖蛋白在日本血吸虫表膜的免疫细胞化学定位

目的： 观察曼氏血吸虫表膜两型转糖蛋白（ Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ１ 和 Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ４） 分子在日本血吸虫成虫表膜上的分布,确定日本血吸虫和曼氏血吸虫的 Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ 是否有同源性。方法： 采用超薄切片技术制备日本血吸虫超薄冷冻切片。在电镜下观察曼氏血吸虫的 Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ１ 和 Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ４ 抗体对日本血吸虫的相应抗原的免疫标记定位。结果： 免疫定位显示 Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ１ 定位于日本血吸虫成虫表膜基底部质膜及其反褶的质膜上, Ｓ Ｇ Ｔ Ｐ４ 定位于成虫表膜顶部质膜及其内陷质膜上。结论： 两型转糖蛋白分子在曼氏血吸虫和日本血吸虫表膜上的定位相同。表明此两种血吸虫两型表膜的转糖蛋白分子有很大同源性。     

IgE识别血吸虫糖脂:可能的免疫学作用

新近研究显示,曼氏血吸虫成虫糖脂提取物可被曼氏及埃及血吸虫感染者血清特异性IgG抗体识别,表明这些糖脂可能在对血吸虫的免疫应答中起着积极作用。为了解血吸虫感染者对血吸虫糖脂的抗体应答特征,以及进一步阐明针对这些糖脂的抗体在保护性免疫应答中的作用,作者检测了埃及血吸虫病人及经吡喹酮治疗后2年对再感染易感和具抵抗力的患者血清特异性抗体。     

吡噻硫酮导致曼氏血吸虫胞液内谷胱甘肽S-转移酶活力的降低

作者用吡噻硫酮(OPZ)治疗曼氏血吸虫感染鼠,并观察了谷胱甘肽S-转移酶(GST)活力以及谷胱甘肽过氧化酶(GPO)活力。每鼠腹部接种200～300条尾蚴。OPZ按200mg/kg灌服小鼠。收集雄虫((?)),经匀浆和高速离心后制备曼氏血吸虫胞液。GST活性测定参照Habig等人(1974)方法,GPO活性测定参照Paglia & Valentine(1967)方法进行。     

一种新抗原——曼氏血吸虫卵ATP二磷酸水解酶的特征及其免疫细胞化学定位[英]／Faria-Pinto P，Meirelle SMNL，Lenzi HL，et al∥Parasitology．

曼氏血吸虫的成虫ATP二磷酸水解酶(ATP-Dase)可以水解核苷二磷酸与核苷三磷酸，该酶在哺乳动物可参与一系列的生理反应，如血小板凝集抑制、炎症反应和免疫应答等。Faria-pinto等研究了此酶在曼氏血吸虫虫卵中的定位，并分析了其抗原性。     

曼氏血吸虫热休克蛋白70在感染的狒狒体内产生的早期体液免疫应答

通过药物治疗 ,螺的控制 ,健康教育和卫生措施等手段 ,人们不断努力 ,以期消灭血吸虫病。但是 ,血吸虫病仍然是传播广泛并为最重要的寄生虫病之一。针对这一公共卫生问题 ,作者研究了曼氏血吸虫感染初期宿主体内抗体的 DNA重组体蛋白质应答。本实验的观察对象为 7只未感染过曼氏血吸虫的狒狒 ,按每公斤体重感染 350条左右曼氏血吸虫尾蚴。每周收集血清和粪便 ,共1 2 wk。急性感染的狒狒以 AC- 1到 AC- 7标记 ,并筛选曼氏血吸虫成虫微粒体抗原( MAMA)。根据 MAMA快速 ELISA方法的结果 ,从感染 4 wk的血清中筛选 c DNA表达文库。感…     

基于重组酶聚合酶扩增的曼氏血吸虫核酸可视化检测技术的建立及初步评价

目的 结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和侧流层析试纸条(LFD)，建立一种快速、便捷的曼氏血吸虫核酸可视化检测方法，并初步评价其检测效能。方法 以曼氏血吸虫细胞色素c氧化酶亚基1(SmCOX1)基因为靶序列，利用Primer Primer 5软件结合手工辅助，设计特异性引物和探针并进行筛选，建立曼氏血吸虫核酸LFD-RPA检测方法。制备不同浓度(1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl、0.1 fg/μl)的曼氏血吸虫成虫基因组DNA和含有不同拷贝数浓度(10~5、10~4、10~3、10~2、10~1、10~0、10^-1拷贝/μl)的SmCox1重组质粒DNA，评价所建立方法的敏感度。以曼氏血吸虫成虫、日本血吸虫成虫、埃及血吸虫虫卵、感染曼氏血吸虫双脐螺(阳性双脐螺)和阴性双脐螺、感染日本血吸虫钉螺(阳性钉螺)和阴性钉螺、华支睾吸虫成虫、大片形吸虫成虫、卫氏并殖吸虫成虫基因组DNA为模板，评价所建立方法的特异性。将30只雌性BALB/c小鼠随机分为40尾感染组、80尾感染组和健康...